雷帕霉素增强Ishikawa细胞化疗敏感性实验研究

目的:研究雷帕霉素(RA)单独或联合阿霉素、顺铂及紫杉醇对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响,为临床应用RA治疗子宫内膜癌提供理论依据。方法:应用10μmol/L RA与各1/2的半数抑制浓度(IC50)量的阿霉素、顺铂及紫杉醇联合,细胞克隆形成法和流式法检测细胞存活率和凋亡率;RT-PCR法检测RA、阿霉素、顺铂及紫杉醇对细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达影响;Western blot法检测10μmol/L RA作用6,12,24h后细胞Bcl-2蛋白表达水平。结果:RA联合化疗可显著提高各组化疗药的作用效果,降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,与单纯化疗组相比有统计学差异(P<0.05);RA可显著降低宫颈癌细胞mTOR基因mRNA水平,抑制Bcl-2蛋白表达。结论:RA通过抑制mTOR通路,降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达,提高化疗药物对子宫内膜癌细胞的杀伤作用。     

雷帕霉素与顺铂对Hep-2细胞的联合作用

目的 探讨联合应用顺铂和mTOR抑制剂雷帕霉素对喉癌Hep-2细胞的作用.方法 采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷帕霉素和顺铂单独或联合应用对喉癌Hep-2细胞的抑制率,计算IC50值,探讨联合用药的效果;采用流式细胞术和Hoeehst33258免疫荧光检测药物单独或联合使用对喉癌Hep-2细胞凋亡的影响.结果 雷帕霉素的IC50值为11.03nmol/L,顺铂的IC50值为8.81 μmol/L.雷帕霉素可以拮抗Hep-2细胞增殖,使细胞停滞在G1期.联合使用雷帕霉素和顺铂进行化疗的协同治疗指数q>1.15(金氏公式),显示具有协同治疗作用;流式细胞术和免疫荧光检测显示联合使用雷帕霉素和顺铂可以明显增强对Hep-2细胞的凋亡水平.结论 联合应用雷帕霉素和顺铂可以明显提高对喉癌Hep-2细胞的杀伤效果,二者具有明显的协同作用.     

雷帕霉素对食管癌EC1细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响

目的:探讨雷帕霉素对人食管癌EC1细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长、凋亡的影响.方法:采用低、中、高浓度的雷帕霉素(100、150、200 nmol/L)分别作用于EC1细胞24、48、72 h,同时设溶剂对照组和空白对照组,用免疫细胞化学及原位杂交法检测EC1细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达,MTT法检测EC1细胞的增殖情况,TUNEL法检测各组作用24 h后细胞凋亡情况.结果:雷帕霉素作用24、48与72 h,5组细胞mTOR蛋白与mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=29.273、34.328、41.571,P均<0.001;mTOR mRNA:F=34.969、53.614、36.943,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=566.732、51.768和186.022,P均<0.001);雷帕霉素低、中、高浓度组EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且其表达随雷帕霉素浓度的增加及作用时间的延长而减弱(P<0.05).雷帕霉素低、中、高浓度组细胞生长抑制率均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加和作用时间的延长而升高(P<0.05).作用24 h,5组细胞凋亡指数(AI)差异有统计学意义(F=524.563,P<0.001),雷帕霉素低、中、高浓度组AI均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加而增高(P<0.05).结论:雷帕霉素可能通过抑制EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达从而抑制EC1细胞的增殖,促进细胞凋亡.     

雷帕霉素在顺铂诱导HeLa细胞凋亡中的协同作用

目的评价雷帕霉素联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的协同作用。方法HeLa细胞经雷帕霉素和（或）顺铂处理后,以MTT法检测细胞的增殖情况。以流式细胞仪检测细胞凋亡。Westernblot检测p-4E-BP1和p-S6K1的表达情况。结果雷帕霉素联合顺铂抑制HeLa细胞的增殖,且随时间延长抑制作用越显著,与单独用药组相比差异有显著性。雷帕霉素可增强顺铂诱导的HeLa细胞凋亡。经雷帕霉素作用后的HeLa细胞表达p-4E-BP1和p-S6K1较对照组下降,两者联用明显下降。结论雷帕霉素和顺铂联用在抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡上具有协同作用。这预示着雷帕霉素和顺铂联用可能是一种合理的靶向治疗宫颈癌的方法。     

PI-103对人卵巢癌细胞株SKOV3／DDP顺铂化疗效果的影响

目的：探讨磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）双抑制剂PI-103对卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响。方法：将PI-103、顺铂及两者联合分别作用于SKOV3/DDP细胞,采用CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测药物单独或联合作用对细胞凋亡的影响;应用Western blot检测蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、核糖体蛋白（rpS6）、磷酸化rpS6（p-rpS6）以及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax蛋白表达变化。结果：PI-103能够抑制SKOV3/DDP细胞增殖,且呈浓度、时间依赖性;联合用药可以明显增加对细胞生长抑制和凋亡作用。 PI-103能下调Akt和rpS6的磷酸化水平,促DDP上调Bax和下调Bcl-2的表达。结论：PI-103抑制PI3 K/Akt/mTOR信号传导通路,促DDP上调促凋亡蛋白及下调抗凋亡蛋白的表达,从而抑制癌细胞生长,诱导其凋亡,增加卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP细胞对DDP的化疗效果。     

雷帕霉素和顺铂对Hep-2细胞DNA切除修复交叉互补基因1表达的协同作用

 【目的】 探讨mTOR抑制剂雷帕霉素和顺铂对喉癌Hep-2细胞协同作用的机制。【方法】 Hep-2细胞在雷帕霉素单药浓度为5、20 μmol/L;顺铂单药浓度为3、12 μmol/L;联合用药浓度为雷帕霉素5 μmol/L联合顺铂3 μmol/L中分别培养,检测Hep-2细胞AKT, mTOR, S6K和ERCC1(DNA切除修复交叉互补基因1)蛋白分别在3,6,12,24,48 h的表达情况。【结果】 雷帕霉素单药干预Hep-2细胞12 h后,p-mTOR、S6K及ERCC-1表达表达下调,与对照组比较显著性,AKT蛋白表达在48 h增加,与对照组比较差异有统计学意义;顺铂单药干预Hep-2细胞时,ERCC-1表达12 h后增加,与对照组比较差异有统计学意义,p-mTOR、AKT和S6K蛋白表达差异无统计学意义;联合用药时,AKT蛋白表达在48 h增加,与对照组比较差异有统计学意义,p-mTOR、S6K、在12 h后表达下降,与对照组比较差异有统计学意义,ERCC-1的表达与对照组比较没有差异有统计学意义。【结论】 雷帕霉素和顺铂联合应用时,呈协同作用,这可能与雷帕霉素能诱导肿瘤细胞凋亡及影响ERCC-1的表达有关。     

雷帕霉素靶蛋白RNA干扰联合雷帕霉素对人食管癌移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素蛋白基因表达的影响

目的:探讨RNA干扰技术联合雷帕霉素对人食管癌裸鼠移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的影响.方法:①构建裸鼠食管癌ECI细胞移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,将荷瘤小鼠随机分为雷帕霉素治疗组[(腹腔注射雷帕霉素,50ug/(kg·次)]、mTOR小分子干扰RNA(siRNA)治疗组[腹腔注射mTOR siRNA,3ug/次]和联合治疗组(先腹腔注射mTOR siRNA,第2天腹腔注射雷帕霉素),另设空白对照组(腹腔注射PBS代替药物)和顺铂治疗组[腹腔注射常规化疗药顺铂,1 mg/(kg·次)];每组各5只.连续治疗2周,治疗结束取瘤组织,分析治疗前后移植瘤体积的变化.②采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达.结果:①单用雷帕霉素(F=185.00,P<0.001)或mTOR siRNA(F=199.01,P<0.001)均能降低裸鼠移植瘤体积;雷帕霉素和mTOR siRNA有交互作用(F=30.30,P<0.001),2者联合应用后,裸鼠移植瘤体积有更大幅度的下降.顺铂治疗后,裸鼠移植瘤体积与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.426,P:0.682).②单用雷帕霉素(F=395.76,F=550.04,P均<0.001)或mTOR siRNA(F=367.58,F=573.39.P均<0.001)均能降低裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达;雷帕霉素和mTOR siRNA有交互作用(F=11.68,P=0.004:F=10.23,P=0.006),2者联合应用后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达有更大幅度的下降.顺铂治疗后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白(7.15±0.56)及mRNA(6.88±0.59)的表达与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.622,P=0.551;t=0.572,P=0.583).结论:应用RNA干扰技术沉默mTOR基因及应用雷帕霉素治疗均可有效抑制肿瘤的生长,下调裸鼠食管癌移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达,且2者联合效果最佳.     

紫杉醇与mTOR抑制剂雷帕霉素联合抑制非小细胞肺癌增殖

目的研究紫杉醇对非小细胞肺癌A549细胞mTOR信号通路的影响,以及紫杉醇与mTOR抑制剂雷帕霉素的联合作用。方法在紫杉醇和／或雷帕霉素处理细胞后,采用流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡;免疫印迹技术分析信号分子表达与磷酸化;采用细胞计数法检测细胞增殖。结果（5×10^-6）g/L紫杉醇作用24h可诱导（31．26±2．52）％细胞发生凋亡;但随紫杉醇浓度增加,细胞凋亡率下降而G2／M期阻滞效应增加。紫杉醇对mTOR分子的表达无影响,但与其结合的raptor和rictor,以及抗凋亡分子survivin表达随浓度增加而增加,mTOR下游分子S6K1磷酸化也被上调。雷帕霉素与紫杉醇同时或在紫杉醇作用后加入培养体系可增强其对肿瘤增殖的抑制作用,并促进紫杉醇诱导细胞凋亡。结论紫杉醇对A549细胞mTOR信号通路的活化有上调作用,mTOR抑制剂与雷帕霉素可协同抑制非小细胞肺癌增殖。     

Smac小分子compound3调节顺铂诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究

目的探讨Smac小分子compound 3调节顺铂对卵巢癌细胞SKOV3凋亡及生长抑制作用。方法噻唑蓝法检测Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组对卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制率、存活率的影响;并绘制生长曲线。Annexin V/PI双标流式细胞术检测Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组对SKOV3凋亡率的影响。Western印迹检测Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组对SKOV3的X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosisprotein,XIAP)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达影响。结果 Smac小分子compound 3单独应用组、顺铂单独应用组及二者联合应用组12、24、48 h SKOV3生长受到抑制,且呈时间依赖性。二者联合应用组与顺铂单独应用组比较生长抑制率明显升高。二者联合应用组的凋亡率高于顺铂单独应用组及Smac小分子compound 3单独应用组。Smac小分子compound 3单独应用组及二者联合应用组SKOV3的XIAP表达降低,二者联合应用组的caspase-3的激活片段表达明显高于其他两组。结论 Smac小分子compound 3能够调节顺铂对SKOV3生长抑制作用,促进顺铂对卵巢癌细胞SKOV3凋亡作用。Smac小分子compound 3通过影响XIAP的表达来实现其促凋亡及生长抑制作用。     

雷帕霉素对mTOR基因诱导的NIH3T3成纤维细胞增殖的影响

目的探讨雷帕霉素对mTOR基因诱导的NI H3T3成纤维细胞增殖的影响。方法以mTOR基因转染小鼠NI H3T3成纤维细胞,以雷帕霉素干预,用MTT法检测细胞增殖情况,用RT-PCR和Western blot方法测定细胞p70S6KmRNA与蛋白的表达。结果 MTT法检测转染mTOR基因后细胞增殖能力增强,雷帕霉素可抑制其增殖;RT-PCR与Western blot检测转染后细胞p70S6K的mRNA与蛋白表达水平明显增加,雷帕霉素可抑制p70S6KmRNA与蛋白表达水平。结论雷帕霉素可能通过抑制mTOR/p70S6K信号通路抑制成纤维细胞增殖。     

雷帕霉素抑制人神经母细胞瘤细胞株生长及诱导凋亡的机制研究

目的研究雷帕霉素对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y的生长抑制和诱导凋亡作用,以及对靶向信号通路磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（P13K／AkCmTOR）的影响。方敞用不同浓度的雷帕霉素（10、15、20μmol／L）处理SH-SY5Y细胞（雷帕霉素干预组）,以加入相同体积二甲基亚砜（DMSO）的SH-SY5Y细胞作为阴性对照组,设立空白对照组。CCK．8法测定细胞生长率;采用流式细胞仪检测细胞周期,通过AnnexinV-FITC／PI双染法检测细胞凋亡率;Westernblotting检测easpase-3剪切体及P13K／Akt/mTOR信号通路上下游分子PDKp85、Akt、mTOR、4E-BPl表达及其磷酸化水平的变化。结果与阴性对照组和空白对照组比较,雷帕霉素干预组细胞生长率显著降低（P〈0．05或P〈0．01）;G。／G,期细胞百分比显著增高（P〈0．05）;细胞凋亡率显著升高（P〈0．01）。Westernblotting检测结果显示：与阴性对照组和空白对照组比较,雷帕霉素干预组easpase-3剪切体表达水平较高;P13K／Akt/mTOR信号通路上下游分子的活性均被抑制,P13Kp85、Akt、mTOR、4E-BP1的磷酸化水平均明显降低。结论雷帕霉素对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y具有抑制生长和诱导凋亡的作用,其机制可能与抑制P13K／Akt/mTOR信号通路有关。     

雷帕霉素对人肺癌细胞株增殖抑制的研究

目的：探讨雷帕霉素对人肺癌细胞株的生长影响及磷酸化核糖体蛋白S6激酶（P-S6K1）的表达在雷帕霉素抑制肺癌细胞增长中的意义。方法：用不同浓度（0、0.1、1.0、10.0、100.0 nmol/L）的雷帕霉素处理人肺癌细胞株,药物敏感试验判断雷帕霉素的敏感株和不敏感株,MTT法检测其对人肺癌细胞增殖的影响。Western blotting观察人肺癌细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路上下游蛋白分子及其磷酸化蛋白的表达,比较P-S6K1在用药前后的表达。结果：4个浓度（0.1、1.0、10.0、100.0 nmol/L）的雷帕霉素持续作用72 h,除H1299细胞株外,对HLAMP、A549和PAa细胞株的抑制率相应增加（P〈0.05）,100.0 nmol/L时的抑制率达到最大（P〈0.05）,A值的变化与抑制率一致。位于mTOR上下游的AKT、S6K1、4E-BP1、eIF4E蛋白在所有细胞株中均有表达,P-S6K1在敏感株中呈高表达,在不敏感株中未检测到。在HLAMP和A549中P-S6K1用药后6、12、18和24 h较用药前有所降低。结论：雷帕霉素能抑制人肺癌细胞生长,P-S6K1在一定程度上可代表肺癌细胞株对雷帕霉素的敏感性。     

Rapamycin Sensitizes Glucocorticoid Resistant Acute Lymphoblastic Leukemia CEM-C1 Cells to Dexamethasone Induced Apoptosis through both mTOR Suppression and Up-Regulation and Activation of Glucocorticoid Receptor*

Objective To explore the role of glucocorticoid (GC) receptor (GR) in rapamycin’s reversion of GC resistance in humanGC-resistant T-acute lymphoblastic leukemia (ALL) CEM-C1 cells. Methods CEM-C1 cells were cultured in vitro and treated with rapamycin at different concentrations with or without 1 μmol/L dexamethasone (Dex). 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) test was performed to assess cell proliferation. The cell cycle and cell apoptosis were analyzed by flow cytometry. The expression of GRα mRNA was determined by real-time quantitative RT-PCR. The expression of GR, p-70S6K, Mcl-1, and Bim proteins was detected by Western blot. Results When incubated with rapamycin at different concentrations, CEM-C1 cells showed significant growth inhibition in a time- and concentration-dependent manner. The growth inhibition was synergistically increased when CEM-C1 cells were treated with rapamycin plus 1 μmol/L Dex. CEM-C1 cells treated with rapamycin alone showed no apparent apoptosis, and were arrested at G0/G1 phase. After the treatment with Dex plus rapamycin, CEM-C1 cells demonstrated apparent apoptosis and increased the cell cycle arrested at G0/G1 phase. Rapamycin combined with Dex up-regulated GRα, phosphorylated GR(p-GR), and pro-apoptotic protein Bim-EL in CEM-C1 cells, but inhibited the expression of p-p70S6K, a downstream target protein ofmTOR (mammalian target of rapamycin). Conclusion After the treatment with rapamycin plus Dex, Dex resistant CEM-C1 cells induce growth inhibition and apoptosis. The underlying mechanism may involve inhibition of the mTOR signaling pathway and also be associated with up-regulation of GR expression and activation of GC-GR signaling pathway.     

EFFECTS OF RAPAMYCIN ON INTRACELLULAR CHOLESTEROL HOMEOSTASIS OF GLOMERULAR MESANGIAL CELL IN THE PRESENCE OF INTERLEUKIN-1β

Objective To investigate the effects of rapamycin on cholesterol homeostasis of glomerular mesangial cells and the underlying mechanisms.
Methods Intracellular cholesterol accumulation was measured by Oil Red O staining and high performance liquid chromatography. The effects of rapamycin on interleukin-1β（1L-1β）-induced mRNA and protein changes of low-density lipoprotein receptor （LDLR） and ATP-binding cassette transporter Al （ABCAl） were assayed by quantitative real-time PCR and Western blot. Transient expressions of 3 types of mammalian target of rapamycin （mTOR）, including mTOR-WT （wild type）, mTOR-RR （rapamycin resistant, with kinase activity）, and mTOR-RR-KD （rapamycin resistant, without kinase activity）, were obtained by plasmid transfection.
Results Rapamycin had no significant influence on intracellular cholesterol concentration trader normal condition, but it significantly decreased the intracellular cholesterol concentration in the presence of IL-1β. Rapamycin dose-dependently suppressed the increased expression of LDLR induced by IL-1β and up-regulated the suppressed expression of ABCAl caused by IL-1β Transient expression of 3 types of mTOR all reduced ABCAl mRNA expression significantly, which all could be overroded by rapamycin.
Conclusions Rapamycin may contribute to the maintaining of glomerular mesangial cell intracellular cholesterol homeostasis under inflammatory state by both reducing cholesterol uptake and increasing cholesterol effiux. And the effect may be not completely mediiated by mTOR.     

雷帕霉素靶蛋白信号通路的组成及对树突状细胞功能的调节

雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是一种进化保守的丝氨酸／苏氨酸激酶,在细胞对生长因子,氨基酸及能量变化等外界信息反应的过程中起到重要作用。树突状细胞（DCs）是专职抗原递呈细胞,可以启动特异性免疫应答。近年来,mTOR对DCs分化、功能调节的研究逐渐增多。有些研究认为,mTOR对DCs的作用是激活性或促进性的．但在另外一些研究中,这种作用是抑制性的。所以,本文对近年来关于mTOR通路对DCs的调节作用作一综述。     

n-6／n-3多不饱和脂肪酸对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的影响

目的探讨n-6／n-3多不饱和脂肪酸（PUFAs）对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammMiantargetofrapamycin,mTOR）、血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）表达的影响。方法用不同比例的n-6／n-3PUFAs处理细胞,MTr法检测细胞增殖能力变化;RT—PCR检测细胞mTOR、VEGF的mRNA表达情况。结果单纯n-6PUFAs和10：1n-6／n-3PUFAs能够明显促进Ishikawa细胞增殖,mTOR、VEGF的mRNA表达增加（P〈0．05）;单纯n-3PUFAs和1：1n-6／n-3PUFAs则显著抑制细胞增殖,同时使VEGF的mRNA表达下降（P〈0．05）;mTOR与VEGFmRNA的表达呈正相关（r=0．94,P〈0．05）。结论n-6／n-3PUFAs可能通过影响mTOR信号调节VEGF表达,从而对Ishikawa细胞增殖产生影响。     

雷帕霉素对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表达的调控作用

目的:研究雷帕霉素对柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的心肌细胞哺乳类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)和真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor-4 E, eIF-4E)表达的调控,探讨mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎(viral myocarditis,VM)的作用.方法:CVB3感染原代培养的SD大鼠心肌细胞建立病毒性心肌炎的细胞模型.根据细胞毒力实验筛选10 nmol/L的雷帕霉素干预CVB3感染的心肌细胞,采用RT-PCR和Western免疫印迹方法检测mTOR和eIF-4E mRNA表达及蛋白质水平.结果:CVB3诱导心肌细胞变性,雷帕霉素可减轻其变性;CVB3使大鼠心肌细胞的mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达上调,与对照组比较,有统计学差异(P<0.05),雷帕霉素可使CVB3感染的心肌细胞mTOR和eIF-4E mRNA和蛋白表达明显下调,与CVB3组比较,有统计学差异(P<0.05).结论:雷帕霉素能明显抑制CVB3感染的大鼠心肌细胞mTOR和eIF-4E表述,提示mTOR/eIF-4E信号传导在病毒性心肌炎中可能起重要作用.     

雷帕霉素通过抑制mTOR信号延长成年雌性大鼠卵巢的寿命

目的探讨雷帕霉素对成年雌性大鼠卵泡发育及卵巢寿命的影响,并研究mTOR信号在其中的作用。方法将16只8周龄雌性SD大鼠随机分为对照组和雷帕霉素干预组,观察两组大鼠动情周期的变化;10周后取大鼠卵巢,组织切片经苏木精-伊红染色,计数不同发育阶段的各级卵泡数;用蛋白免疫印迹（Western-blot）检测卵巢中mTOR和其磷酸化的靶分子S6K的蛋白表达水平。结果雷帕霉素干预组大鼠健康卵泡数（225.0±16.2）显著多于对照组（178.4±5.3）,差异有统计学意义（P〈0.05）。其中原始卵泡数（132.5±13.7）是对照组（59.6±5.2）的2倍多,而窦状卵泡和闭锁卵泡数则明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。雷帕霉素干预组mTOR和P-P70S6K蛋白表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论雷帕霉素可能通过抑制mTOR信号,从而抑制原始卵泡向发育卵泡转化,保存原始卵泡储备,由此使卵巢的寿命延长。