解聚素和金属蛋白酶19在早孕绒毛中的表达及其与自然流产的相关性研究

目的通过对解聚素和金属蛋白酶19（ADAM19）在早孕自然流产和正常早孕绒毛中表达的研究,探讨其在妊娠过程中的作用及其与流产的关系。方法早期妊娠和难免流产的绒毛组织各30例,应用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶法,检测ADAM19的表达。结果在正常妊娠的绒毛中,ADAM19主要表达在细胞膜上,在细胞滋养细胞、细胞滋养层细胞柱中均有较强的表达,表达强度均强于合体滋养细胞;在流产组绒毛中,ADAM19在细胞滋养细胞、细胞滋养层细胞柱中的表达均明显低于正常绒毛组,二者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论ADAM19在妊娠早期滋养细胞的侵入中有重要的作用,早期流产的发生与绒毛中ADAM19水平下降有关。     

VEGF在不同类型子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在不同类型子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测18例正常孕妇（对照组），36例子痫前期患者（子痫前期组，其中轻度子痫前期患者18例，重度子痫前期患者18例）胎盘组织中VEGF的表达强度。结果VEGF主要表达于胎盘绒毛滋养细胞；重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞VEGF表达强度明显低于对照组及轻度子痫前期患者（P＜0．05），而轻度子痫前期患者与对照组比较，无显著性差异（P＞0．05）。结论VEGF在胎盘中主要由绒毛滋养细胞分泌，子痫前期患者VEGF分泌减少，尤其是重度子痫前期的患者,这可能是引起局部胎盘绒毛及血管痛变的原因。     

解整合素-金属蛋白酶12在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的：探讨子痫前期患者胎盘组织中解整合素-金属蛋白酶12(a disintegrin and metalloproteinase 12,ADAM12)蛋白和mRNA表达水平变化及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测31例子痫前期患者（子痫前期组包括子痫前期重度16例、子痫前期轻度15例）和20例正常足月孕妇（对照组）胎盘组织中ADAM12的蛋白表达水平。采用杂交组化方法检测各组孕妇胎盘组织中ADAM12-S和ADAM12-L的mRNA表达水平。结果：子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12蛋白表达水平为0.56±0.14,对照组的为0.39±0.14,两者相比,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异没有统计学意义（P>0.05）。子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12-S mRNA水平为0.52±0.09,对照组为0.40±0.15,两者相比,差异有统计学意义（P<0.01）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12-L mRNA水平为0.51±0.09,对照组为0.42±0.18,两者相比,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异没有统计学意义（P>0.05）。结论：ADAM12蛋白和mRNA水平在胎盘组织中的表达增高可能在子痫前期的发病过程中起重要作用。     

TGF-β1／Smad信号转导通路在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中TGF—β1／Smad的表达,探求TGF—β1／Smad信号转导通路在子痫前期发病中的作用。方法采用免疫组织化学法检测40例子痫前期（轻、重度）和正常孕妇15例正常妊娠妇女胎盘中TGF-β1以及Smad3、Smad4、Smad7的分布和表达,采用TUNEL法检测三组胎盘滋养细胞凋亡的情况。结果TGF-β以及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7在正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞中均有表达,以滋养细胞表达为主。TGF-β1以及Smad3、Smad4在正常妊娠组、子痫前期轻度组和重度组的表达强度及范围均呈逐渐升高趋势,Smad7在正常妊娠组、子痫前期轻度和重度组表达强度及范围依次呈逐渐下降趋势。正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞均存在凋亡,以滋养细胞凋亡为主。重度子痫前期组胎盘滋养细胞凋亡（1．02）％显著高于子痫前期轻度组（0．73）％,子痫前期轻度组显著高于正常妊娠组（0．38）％,P〈0．05。滋养细胞TGF—β1的表达与滋养细胞凋亡具有相关性（r=0．96,P〈0．05）。结论子痫前期患者胎盘组织中的TGF—β1可能是通过Smad信号转导蛋白抑制滋养细胞浸润,诱导细胞凋亡。     

细胞外钙受体在妊娠期高血压疾病胎盘组织中的表达及意义

目的 探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中细胞外钙受体(CASR)mRNA及蛋白表达水平变化及其意义.方法 采用免疫组化方法和免疫荧光及RT-PCR技术分别检测妊娠期高血压疾病患者65例(妊娠期高血压组22例,子痈前期轻度组24例,重度组19例)及健康足月孕妇30例(对照组)胎盘组织中CASR的定位、mRNA及蛋白表达水平.结果 (1)CASR主要位于胎盘细胞滋养细胞、绒毛滋养细胞及血管内皮细胞上.(2)妊娠期高血压组患者胎盘组织中CASR的mRNA表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(g=7.07,P=0.0004).子痫前期轻度组和子痫前期重度组,两组比较,差异也有统计学意义(q=20.96,P＜0.0001).(3)CASR的蛋白在妊娠期高血压组患者胎盘组织中表达水平为59.0532±8.039,对照组为54.8585±4.3035,两组比较,差异无显著性(q=0.08,P=0.7759).而子痫前期轻度组、子痫前期重度组两组比较,差异有统计学意义(q=16.18,P＜0.0001).结论 妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中CASR的mRNA表达激活及CASR的蛋白异常表达,导致妊娠期高血压疾病的发病和胎盘病理改变的发生发展.     

生长分化因子15在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义

目的探讨生长分化因子-15（GDF-15）在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法选择2009年12月至2010年10月在青岛市市立医院住院分娩的子痫前期孕妇140例,其中早发型轻度子痫前期孕妇35例（早发轻度组）,晚发型轻度子痫前期孕妇35例（晚发轻度组）,早发型重度子痫前期孕妇35例（早发重度组）,晚发型重度子痫前期孕妇35例（晚发重度组）;另选同期健康孕妇35例为对照组。采用RT—PCR检测胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA的表达量;采用免疫组化方法检测胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白的表达。结果RT—PCR显示子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化显示GDF-15表达于胎盘滋养细胞的细胞浆和细胞外基质中,并在各组胎盘滋养细胞中均表达。子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白表达水平均高于对照组组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GDF-15在子痫前期胎盘滋养细胞中表达升高,GDF-15的表达水平变化可能与子痫前期发病有关。     

KiSS-1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1是否是子痫前期的发病机制。方法采用免疫组化SP法检测25例正常足月妊娠妇女(正常妊娠组)与40例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期15例、重度子痫前期25例)胎盘组织中KiSS-1的表达。结果KiSS-1主要位于胎盘绒毛小叶的合体滋养细胞。子痫前期组胎盘组织中KiSS-1的平均光密度为(0.137±0.010),其中轻度子痫前期为(0.132±0.004),重度子痫前期为(0.140±0.012);均明显高于正常妊娠组的(0.124±0.010),P值分别为P<0.01、P<0.05(P=0.019)、P<0.01。结论胎盘组织中KiSS-1的表达水平随病情程度的加重而增高,可能与子痫前期的发病有关。     

FAS蛋白在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的检测子痫前期胎盘的FAS蛋白表达水平,探讨子痫前期的发病机制。方法采用免疫组织化学方法结合病理图像分析技术,定量分析10例正常妊娠组、17例轻度子痫前期组和13例重度子痫前期组胎盘FAS蛋白表达。结果 FAS蛋白主要表达与胎盘绒毛滋养细胞的胞膜及胞浆内。与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘FAS蛋白表达显著增加,轻度、重度子痫前期组比较,有显著性差异。结沦子痫前期患者胎盘滋养层细胞FAS蛋白表达增加可能是子痫前期的发病机制之一,从而为临床治疗子痫前期提供新的方向。     

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。 方法 采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产（正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例）胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组（P<0.05）;重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）;3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组（P<0.05）,中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）。结论 子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

子痫前期患者胎盘组织中尾加压素Ⅱ及一氧化氮的表达及意义

目的研究尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）及一氧化氮在子痫前期患者胎盘组织的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法检测45例子痫前期患者（轻度22例,重度23例）及20例正常晚期妊娠孕妇胎盘组织中UIImRNA的表达情况;同时用硝酸还原酶法检测子痫前期组孕妇与正常组孕妇胎盘组织中NO浓度。结果重度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.85±0.40）明显高于正常妊娠组（0.38±0.30）（P〈0.05）;轻度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.64±0.31）,与正常妊娠组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。轻、重度子痫前期患者胎盘组织NO浓度分别为114.42±6.52 u/mg、79.22±3.31 u/mg,均显著低于正常妊娠组241.36±13.24u/mg（P〈0.05）。结论子痫前期胎盘组织中尾加压素Ⅱ水平升高,NO浓度下降,可能在子痫前期的发病中起一定作用。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中抵抗素的表达

目的检测抵抗素（Resistin）在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达,探讨抵抗素在妊娠期高血压疾病发病机制中的作用。方法选取妊娠期高血压疾病患者40例,包括妊娠期高血压患者20例,子痫前期患者20例,选取无高血压、糖尿病等并发症的孕妇20例作为对照组。并记录每个患者新生儿出生体重。应用免疫组化SP两步法检测抵抗素在其胎盘组织中的表达情况,对免疫组化切片采用Tanaka等级评分法进行评分。应用studengt t检验,分别对子痫前期组与对照组,妊娠期高血压组与对照组免疫组化评分结果进行比较;并采用双变量相关法,估计胎盘抵抗素的表达与新生儿出生体重的相关性,以P〈0.05为差异有显著性。结果本研究发现抵抗素表达于胎盘绒毛滋养细胞的细胞浆中;对免疫组化切片应用Tanaka等级评分法进行评分,经studengt t检验发现子痫前期组抵抗素在胎盘组织中的表达低于对照组,P〈0.05,差异有显著性;妊娠期高血压组与对照组差异无显著性,P〉0.05。抵抗素在胎盘组织中的表达与新生儿出生体重正相关（r=0.883,P〈0.05）。结论抵抗素可能参与了子痫前期的发病机制,推测其表达下降是由胎盘功能减退引起的,这可能是疾病发展过程中的一个结果而不是原因;抵抗素可能参与了子痫前期胎儿生长受限的发生,其具体机制将有待于进一步研究。     

松驰素受体LGR7在人妊娠绒毛及胎盘组织中表达的研究

目的探讨松驰素受体LGR7在妊娠过程中的作用。方法应用免疫组织化学（免疫组化）链霉素抗生物素一过氧化物酶法和RT—PCR技术，对56例妊娠绒毛和胎盘组织中的LGR7检测。结果在早期妊娠的绒毛中，LGR7免疫反应呈现强阳性。主要分布于绒毛滋养层细胞的细胞膜上，在细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞及滋养层细胞柱中都有较强的信号，并可见细胞滋养细胞的阳性反应明显强于合体滋养细胞；中、晚期妊娠的胎盘组织中LGR7呈现为强阳性或阳性，主要定位于合体滋养细胞的细胞膜上及毛细血管内皮细胞。免疫组化结果中，早期妊娠绒毛LGR7的强阳性率为90％，明显高于中晚期胎盘中的76．5％和73．7％，中、晚期妊娠分别与早期妊娠比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；但中期妊娠及晚期妊娠相比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；早期妊娠的绒毛中LGR7mRNA的表达量为0．967±0．019，明显高于中晚期妊娠胎盘中的0．522±0．071和0．482±0．094，中、晚期妊娠分别与早期妊娠比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；中期妊娠及晚期妊娠比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论LGR7可能是与妊娠早期滋养细胞侵袭有关的重要的因子，在妊娠的中晚期参与妊娠的维持。     

E-钙粘蛋白在胎盘组织中的表达与子痫前期的关系

目的检测E-钙粘蛋白（E-cadherin,E-cad）在正常妊娠和子痫前期妊娠胎盘中的表达情况,探讨E-cad表达水平与子痫前期的关系。方法取临床标本,14例子痫前期患者（子痫前期组）与10例正常妊娠妇女（正常妊娠组）的胎盘组织,用免疫组织化学方法检测胎盘中E-cad的表达。结果子痫前期组孕妇胎盘中,E-cad表达水平明显高于正常妊娠组,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论胎盘滋养细胞中E-cad表达的水平与子痫前期的发生密切相关。     

胰岛素样生长因子Ⅱ及基质金属蛋白酶9表达与子痫前期发病的关系

目的检测胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）与基质金属蛋白酶9（MMP-9）在血清及胎盘中的表达,探讨二者的关系及其在子痫前期发病中的作用。方法（1）用酶联免疫吸附法（ELISA）检测30例子痫前期患者（子痫前期组,其中轻度子痫前期20例、重度子痫前期10例）及15例正常晚期妊娠孕妇（对照组）的血清中IGF-Ⅱ及MMP-9的水平。（2）用免疫组化方法检测两组孕妇胎盘组织中IGF-Ⅱ及MMP-9的表达,用计算机图像分析系统进行定量分析比较。结果（1）子痫前期组血清IGF-Ⅱ及MMP-9水平均明显低于对照组（P〈0.01,P〈0.01）。（2）IGF-Ⅱ及MMP-9在子痫前期组胎盘中的表达量均显著低于对照组（P〈0.01,P〈0.01）。（3）子痫前期组患者血清及胎盘组织中IGF-Ⅱ水平分别与相应部位的MMP-9水平呈正相关（r=0.379,P〈0.05;r=0.442,P〈0.05）。结论孕妇血清及胎盘组织中IGF-Ⅱ、MMP-9水平变化与子痫前期发病及病情发展有关。     

子痫前期中IGF—Ⅰ、Ⅱ水平与FGR的相关性研究

目的探讨子痫前期中胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ（IGF—Ⅰ、Ⅱ）水平与新生儿出生体重的相关性。方法选择正常晚期孕妇（对照组）32例,轻度子痫前期孕妇20例、重度子痫前期孕妇20例（研究组）,分别于分娩前抽取孕妇静脉血,分娩时留取新生儿脐静脉血和羊水,同时记录新生儿出生体重,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）,检测血清及羊水中IGF—Ⅰ、Ⅱ水平,并对检测结果进行分析。结果（1）子痫前期孕妇血及羊水中IGF—Ⅰ、Ⅱ水平与新生儿体重呈正相关。（2）新生儿脐血中IGF—Ⅰ水平与新生儿体重呈正相关,IGF—Ⅱ水平与新生儿体重呈负相关。（3）正常对照组32例均为正常出生体重新生儿,子痫前期孕妇中胎儿生长受限（FGR）总发病率为27．5％,其中轻、重度子痫前期孕妇,FGR发病率分别为5％和50％（P〈0．01）,差异有统计学意义。结论子痫前期状态下IGF—Ⅰ、Ⅱ水平变化与FGR密切相关,重度子痫前期孕妇中FGR发病率较高。     

AS、VEGF在胎儿生长受限患者脐血及胎盘部位的表达及意义

目的通过检测脐血与胎盘部位血管生长抑素（angiostatin,AS）、血管内皮生长因子（vascular endotrelial growtr factor,VEGF）的表达,探讨其与胎儿生长受限（fetal growth restriction,FGR）发病的关系。方法取80例产妇（正常妊娠组50例,FGR组30例）分娩后采脐血和胎盘绒毛组织,检测AS、VEGF在脐血中的水平及其在胎盘部位的表达。结果①脐血中：在FGR组AS平均水平显著高于对照组（P〈0.05）;VEGF平均水平显著低于对照组（P〈0.05）。②胎盘中：在FGR组绒毛滋养细胞AS的表达强度较正常对照组显著增强（P〈0.05）,而VEGF的表达降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论血管生长抑素（AS）与血管内皮生长因子（VEGF）浓度的变化可能在胎儿生长受限（FGR）的发病中起重要作用。     

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和整合素β 3

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和整合素β3（Integrin β3）在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达,并探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系及两者的相关性。方法采用免疫组织化学染色（SP法）分别检测In-tegrinβ3、MMP-9在10例妊娠期高血压疾病患者及10例正常妊娠者胎盘组织中的表达。结果妊娠期高血压疾病组胎盘Integrinβ3表达明显高于正常妊娠组（P〈0.01）。妊娠期高血压疾病组胎盘MMP-9表达明显低于正常妊娠组（P〈0.01）,且随病情的加重MMP-9的表达有下降趋势,有统计学意义（P〈0.05）。结论本研究显示：与正常妊娠组比较妊娠期高血压疾病患者胎盘组织integrinβ3表达明显增加、MMP-9的表达明显减少,且随病情加重有减少趋势。表明integrinβ3、MMP-9可能参与妊娠期高血压疾病的发生和发展。