隐球菌性脑膜炎患者外周血中TLR4的表达以及血清中TNF-α,IL-10的水平研究

目的探讨Toll样受体4（TLR4）在隐球菌性脑膜炎患者外周血中的表达,以及研究血清中TNF—α,IL-10的变化情况。方法收集25例隐球菌性脑膜炎患者和25例健康体检者全血,采用荧光定量PCR（FQ—PCR）检测TLR2,TLR4的mRNA表达。ELISA法检测血清中TNF—α,IL-10的表达。结果隐球菌性脑膜炎患：者TLR4 mRNA的表达显著低于对照组（0．35±0．18）（P〈0．05）,TLR2均无显著变化（0．87±0．23）（P〉0．05）。血清中的IL-10显著升高（4．25±1．30）pg／ml（P〈0．05）,TNF—α的变化不显著（1．49±0．87）pg／ml（P〉0．05）。结论隐球菌性脑膜炎患者TLR4 mRNA表达显著下降,可能在隐球菌性脑膜炎的发病过程中起一定的作用。     

Toll样受体2在原发免疫性血小板减少症中的作用研究

本研究通过检测原发免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血淋巴细胞中TLR2的表达,同时评价体外活化TLR2对炎症因子分泌的影响,旨在探讨TLR2在ITP发病机制中的作用.39例ITP患者及21例正常对照者纳入本研究.应用实时定量PCR及流式细胞术检测外周血单个核细胞（PBMNC）中TLR2的表达.采用pam3CSK4体外刺激活化PBMNC,48 h后检测细胞培养上清中IL-6及TNF-α的浓度.结果显示,活动期ITP患者PBMNC中TLR2 mRNA的表达显著高于正常对照（3.561±0.741 vs 1.750±0.314） （P ＜0.05）,而缓解组（2.333±0.448）和正常对照之间TLR2 mRNA差异无统计学意义（P＞0.05）.流式细胞术分析显示,TLR2在正常对照及ITP患者T、B细胞表面不表达,但表达于所有单核细胞表面.进一步体外实验发现,TLR2活化能诱导ITP患者PBMNC中IL-6（1644±634.0 vs 4111±525.2 pg/ml）及TNF-α （75.37±22.31 vs 326.0±109.9 pg/ml）的表达（P均＜0.05）,但仅对正常对照PBMNC中IL-6（2119±636.9 vs4671±315.9 pg/ml） （P＜ 0.05）的分泌有促进作用.结论：TLR2mRNA在ITP患者PBMNC中高表达,这些高表达的TLR2可能通过促进炎症因子的分泌加快ITP疾病进程.     

Toll样受体4在强直性脊柱炎患者外周血白细胞中的表达及临床意义初探

目的：探讨Toll样受体4（Toll-likereceptor 4,TLR4）在不同人群外周血白细胞的差异表达及其在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,As）中的意义。方法：应用流式细胞术检测60例AS患者及40例健康对照外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞TLR4的表达。结果：TLR4在外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞均有表达,以单核细胞表达为主;HLA-B27阳性和阴性AS患者外周血3种细胞TLR4的阳性表达率均明显高于对照组（P〈0．001）,但两者之间并无显著差异。结论：TLR4主要表达于外周血单核细胞,但AS患者外周血3种细胞表达均上调,这种上调与HLA-B27阳性与否无关,提示TLR4信号通路的异常与AS的发病相关。     

Toll受体及下游基因和T细胞亚群在新生儿感染性疾病中的变化及相关性

目的分析Toll受体及下游基因和T细胞亚群在新生儿感染性疾病中的变化及关系。方法选取2017年10月至2018年7月于该院诊治的108例新生儿感染患儿(感染组)和30例健康新生儿(健康对照组)作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和流式细胞仪检测并比较入组时两组外周血单个核细胞Toll受体基因(TLR2、TLR9)及下游基因(MyD88、TRAF6)的mRNA及其编码蛋白表达情况,同时检测并比较两组外周血中T淋巴细胞亚群分布情况(CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞和CD4~+/CD8~+);分析患儿TLR2/TLR9mRNA和MyD88/TRAF6mRNA及编码蛋白的相关性,并比较以上mRNA和编码蛋白在新生儿不同感染中的差异。结果与健康对照组比较,感染组TLR2、TLR9、MyD88和TRAF6mRNA及其编码蛋白均显著升高;感染组CD3~+T淋巴细胞明显升高,而CD4~+和CD8~+T淋巴细胞及CD4~+/CD8~+比值则明显下降,以上差异均有统计学意义(P 0.05)。经Spearman分析得知,TLR2mRNA与TLR9mRNA、TLR2mRNA与TRAF6mRNA之间无明显相关性(r=0.430、0.418,P=0.214、0.229);TLR2mRNA与MyD88mRNA、TLR9mRNA与TRAF6mRNA均呈明显正相关(r=0.858、0.915,P=0.037、0.000)。不同类型感染性疾病患儿TLR2、TLR9、MyD88及TRAF6mRNA比较差异有统计学意义(P0.05),且感染性肺炎和坏死性小肠结肠炎最高;不同病原菌感染性疾病患儿TLR2、TLR9、MyD88及TRAF6mRNA比较差异有统计学意义(P0.05),且以细菌性感染最高。结论 TLR2和TLR9在新生儿感染中高表达,尤以细菌性感染、感染性肺炎和坏死性小肠结肠炎中最为明显,且与下游靶基因MyD88及TRAF6明显相关,有望成为辅助新生儿感染诊疗的有效指标,有一定推广价值。     

肥胖患者外周血单个核细胞Toll样受体4表达及活性研究

目的研究肥胖患者外周血单个核细胞（PBMCs）Toll样受体4（11LR4）表达及活性。方法收集16例肥胖患者和16例正常对照者的PBMCs,蛋白印迹法检测PBMCsTLR4及IKBct蛋白表达,实时荧光定量PCR检测PBMCsTLR4及白细胞介素6（IL-6）mRNA表达,并测定空腹血糖、空腹胰岛素、血游离脂肪酸（FFA）、IL-6及肿瘤坏死因子仪（TNF-a）。结果与正常对照组比较,肥胖组血FFA、IL-6、TNF-a及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）明显增高[FFA：（879±64）、（458±48）umoL／L,t=24．613、P=0．000;IL-6：（2．20±0．35）、（1．264-0．25）ng／L,t=14．993、P=0．000;TNF—a（1．964-0．32）、（1．384-0．24）ng／L,t=9．128、P=0．000;HOMA．IR：1．84-0．2、0．44-0．1,t=32．254、P=0．000];肥胖组PBMCsTLR4mRNA及蛋白表达显著升高（TLR4mRNA：3．13±0．21与0．99±0．03,f=54．758,P〈0．05;TLR4蛋白：7．04±0．42与2．53±0．17,t：77．450,P〈0．05）;肥胖组PBMCsIKBet蛋白表达显著降低（2．52±0．16与4．00±0．30,t=23．284,P〈0．05）,IL-6mRNA表达显著升高（2．55±0．15与1．03±O．11,t=53．981,P〈0．05）。结论肥胖患者PBMCsTLR4表达及活性显著增加,可能在肥胖患者胰岛素抵抗的发生、发展中具有重要作用。     

结核病感染期间中性粒细胞CD64、TLR2和 TLR4表达变化及其对免疫反应的影响

目的探究结核病感染期间中性粒细胞CD64、TLR2和TLR4表达变化分析其对免疫反应造成的影响。方法筛取2016年10月至2018年3月来该院呼吸内科就诊的患者,按患者是否患有结核病分为对照组(n=38)和观察组(n=36),分别检测感染结核分枝杆菌前后其外周血中中性粒细胞和Toll样受体(TLRs)的表达水平,检测中性粒细胞吞噬作用变化。结果两组感染后CD64表达水平均明显高于感染前且观察组均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);对照组感染后CD32表达水平明显提升,差异有统计学意义(P0.05);对照组感染前TLRs表达水平均明显低于观察组,差异有统计学意义(P0.05),感染后两组TLRs表达量均明显下降,差异有统计学意义(P0.05);两组感染前后中性粒细胞吞噬作用百分比均明显变化,差异有统计学意义(P0.05),感染前对照组吞噬作用百分比明显高于观察组,差异有统计学意义(P0.05)。结论结核病感染期间,患者外周血中性粒细胞CD64、TLR2和TLR4表达水平均明显升高,且中性粒细胞吞噬功能下降明显。     

机械通气对大鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体4表达的影响

目的 探讨机械通气对大鼠肺泡巨噬细胞（AM）表面Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法 清洁级成年雄性SD大鼠18只，随机分为自主呼吸组（R组，n=6）、小潮气量（VT）机械通气组（M组，n=6）和大VT机械通气组（N组，n=6）。腹腔注射质量分数为20％的乌拉坦8mg／kg麻醉大鼠，行气管插管。机械通气呼吸机参数设定：M组：VT为6ml／kg，N组VT为40ml／kg，吸：呼为1：1，呼气末正压（PEEP）为0，吸入氧浓度（FiO2）为0．21。调整呼吸频率和潮气末二氧化碳分压（PETCO2）维持在35～45mmHg（1mmHg=0．133kPa）。实验3h结束，放血处死大鼠。监测实验开始及实验1、2和3h时动脉血气分析；并测定大鼠肺组织病理形态学积分、湿／干重（W／D）比值及支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞计数（WBC）和肺蛋白通透性系数。用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定AM表面的TLR4mRNA表达，用免疫组化法测定AM表面的TLR4蛋白表达。结果 N组实验1h时存在过度通气，pH升高、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）降低（P均〈0．05），其他指标都在正常范围内。与R组比较，N组肺组织病理形态学积分、W／D比值，BALF中WBC和肺蛋白透性系数以及TLR4蛋白表达和TLR4mRNA表达均显著升高（P均〈0．01）；M组改变差异均无显著性（P均〉0．05）。结论 大VT机械通气导致大鼠肺损伤，并使AM表面TLR4表达明显上调。小VT机械通气可避免上述改变的发生。     

慢阻肺急性加重患者外周血单核细胞CD64，TLR2及TLR4水平表达与预后的关系研究

目的　研究慢阻肺急性加重（AECOPD）患者外周血单核细胞CD64和Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)与预后的关系。方法　将南京医科大学附属江苏盛泽医院2017.06~2020.06间收治的96例慢阻肺急性加重（AECOPD）患者纳为研究对象,同时将30例稳定期COPD患者纳为稳定组,30例健康志愿者纳为对照组。采集三组外周静脉血,检测单核细胞亚群CD64,TLR2和TLR4的表达水平,分析其与炎症标志物降钙素原（PCT）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞计数（WBC）及肺功能间的相关性,随访6个月,统计AECOPD组中再次急性复发的患者,绘制受试者特征工作曲线（ROC）,分析外周血单核细胞亚群CD64表达,TLR2和TLR4在AECOPD急性复发中的预测价值。结果　COPD组以及AECOPD组外周血CD64水平（32.69±6.43,39.69±7.79 vs 26.74±5.14）,TLR2水平（169.79±29.07,181.15±22.44 vs 140.03±28.74）以及TLR4水平（186.25±34.15,200.58±33.47 vs 153.65±35.14）均高于对照组,差异均有统计学意义（F=51.774,26.957,2.488,均P<0.05）,AECOPD组外周血CD64,TLR2以及TLR4水平均高于COPD组,差异具有统计学意义（t=4.466,2.249,2.037,均P<0.05）;随访6个月,96例AECOPD患者中共20例患者因再次急性复发入院,再次复发者首次入院时外周血TLR2（249.66±40.52 vs 163.21±35.64）、TLR4（253.66±36.85 vs 186.69±45.21）及CD64（53.69±13.58 vs 35.41±14.47）水平均高于无复发者,差异均有统计学意义（t=9.379,6.105,5.089,均P=0.000）。相关性分析提示,AECOPD患者外周血CD64与其吸烟史,IL-6,PCT水平呈正相关（r=0.36,0.33,0.31,均P<0.05）,与FEV1/FVC呈负相关（r=-0.45, P<0.05）。TLR2与其PCT水平呈正相关（r=0.34, P<0.05）,与FEV1/FVC呈负相关（r=-0.35, P<0.05）,TLR4与其他临床指标无相关性（r=0.07,0.11,0.13,0.13,-0.17,-0.23,-0.26,0.29, 均P >0.05）。绘制ROC曲线发现,血清CD64,TLR2及TLR4在预测AECOPD患者再次急性复发中均具有良好的应用效能,各指标单独应用时以TLR2应用效能最高,其AUC=0.805,95%CI(0.679~0.931),三指标联合应用的预测效能最高,AUC=0.833,95%CI(0.703~0.964)。结论　AECOPD患者外周血CD64,TLR2及TLR4水平均较COPD者明显升高,且其在预测患者半年内再次急性复发中具有良好的效能。     

JAK/STAT通路对烫伤脓毒症大鼠Toll样受体基因表达的调节作用

目的：探讨Janus激酶／信号转导和转录激活子（JAK／STAT）通路在烫伤脓毒症大鼠Toll样受体2（TLR2）基因表达调控中的意义。方法：Wistar大鼠38只随机分为正常对照组（n=6)、烫伤后金黄色葡萄球菌（金葡菌）感染组（n=12)、AG490拮抗组（n=20)和雷帕霉素（Rapamycin,RPM)拮抗组（n=10), 检测动物肝、肾、肺组织中TLR2和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）基因表达的改变。结果：烫伤合并金葡菌攻击后0．5h和2h，动物肝、肾、肺组织中TLR2 mRNA表达显著增高（P＜0．05或P＜0．01）。RPM干预可有效抑制动脉肝、肾组织TLR2 mRNA表达，但对肺脏TLR2 mRNA表达无明显影响；而AG490拮抗组动物各组织中TLR2 mRNA表达与未干预组相比均无明显差异。烫伤合并金葡菌感染后2h大鼠肝、肺、肾组织TNF－α基因表达均显著升高（P均＜0．01）。给予RPM可明显抑制各组织中TNF－α mRNA表达（P＜0．05或P＜0．01），AG490拮抗组大鼠肝、肾组织中TNF－α表达亦均显著低于未拮抗组（P均＜0．01）。结论：烫伤后金葡菌感染可促进体内TLR2基因表达，STAT可能直接或通过其诱生的炎症介质参与了对TLR2 mRNA表达的调控。     

大剂量地塞米松对免疫性血小板减少性紫癜患者浆细胞样树突状细胞功能及Toll样受体9 mRNA表达的影响

本研究探讨大剂量地塞米松对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDC)功能及Toll样受体9(TLR9)表达的影响。15例初诊的ITP患者给予地塞米松40 mg/d,连用4 d,采用免疫磁珠分离法体外分离15例正常对照及13例治疗有效患者治疗前后外周血中pDC;用CpG-ODN 2216刺激外周血pDC并与之共培养24 h,采用ELISA方法检测上清中IFN-α、IL-6、TNF-α的含量;用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测pDC的TLR9 mRNA表达量。结果表明,①治疗前pDC产生IFN-α、IL-6、TNF-α水平〔(960.83±164.65)pg/ml,(156.15±39.89)pg/ml,(137.31±35.44)pg/ml)〕明显高于正常对照组〔(616.67±105.98)pg/ml,(89.13±21.48)pg/ml,(88.53±25.81)pg/ml,P<0.05〕;治疗后pDC产生IFN-α、IL-6、TNF-α水平分别降至(678.46±128.88)pg/ml,(97.77±26.31)pg/ml,(103.08±26.42)pg/ml,与治疗前比较差异有统计学意(P<0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);②治疗前pDC的TLR9 mRNA的表达水平高于正常对照组(P<0.05);治疗后pDC的TLR9 mRNA的表达水平低于治疗前(P<0.05),与正常对照组比较差异无统计学显著性(P>0.05)。结论:pDC分泌的细胞因子及其表达的TLR9在ITP发病中起重要作用;地塞米松可能通过下调TLR9的表达,抑制pDC分泌细胞因子的功能,而对ITP起到治疗作用。     

炎症因子在小鼠肾缺血再灌注损伤相关的肺损伤中的表达

目的观察炎症因子在肾缺血再灌注损伤小鼠全身和肺组织局部表达的变化,探讨炎症反应在肾缺血再灌注损伤相关的急性肺损伤中的作用。方法选取8～10周龄雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为假手术组（Sham组n=10）、缺血再灌注组（I/R组n=10）和双肾切除组（BNx组n=10）。分别于术后6、24h留取小鼠肾和肺组织及血浆标本,观察肾和肺组织学改变,计算肺组织中中性粒细胞浸润数,称肺湿干重,计算肺湿干重比（W/D）;ELISA法检测小鼠血清和肺冲洗液中的IL-6、IL-1β、TNF-α的浓度,实时定量PCR检测小鼠肺组织IL-6、IL-1β、TNF-α基因表达,免疫组化检测肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白的表达。结果 I/R组和BNx组小鼠术后24h时的BUN和Scr均显著高于Sham组（P均〈0.05）,I/R组和BNx组小鼠术后24h出现肺组织炎症细胞浸润、肺泡周围毛细血管出血和肺间质水肿,两组肺组织中性粒细胞计数均高于Sham组（P〈0.05）。术后6h时I/R组和BNx组小鼠血清IL-6、IL-1β和TNF-α浓度与Sham组相比显著升高（分别为606.32±59.07和300.22±169.73vs121.52±9.12pg/ml;443.93±91.98和959.47±184.46vs21.71±2.47pg/ml,119.67±21.66和132.33±62.64vs30.21±2.46pg/ml,P均〈0.05）;I/R组和BNx组小鼠肺组织冲洗液中IL-6、IL-1β和TNF-α的水平与Sham组比较显著升高（109.74±15.91和70.00±2.42vs37.69±7.96pg/mg,117.02±27.46和215.35±18.49vs42.10±5.20pg/mg,512.31±71.95和988.25±133.55vs52.76±12.82pg/mg,P〈0.05）;术后6h肺组织IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达较Sham组显著升高（P均〈0.05）;免疫组化显示了相似的结果。结论肾缺血再灌注损伤可以介导急性肺损伤,全身和肺组织局部的炎症因子表达明显升高可能参与了肾缺血再灌注损伤相关的肺损伤。     

阿托伐他汀对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞Toll样受体4及其下游信号转导通路的影响

背景：研究表明Toll样受体4参与了动脉粥样硬化的发生和发展,目前Toll样受体4与MyD88依赖性或MyD88非依赖性信号转导通路在动脉粥样硬化发生和发展中的机制尚不明确。目的：观察阿托伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞Toll样受体4及其下游信号转导通路主要元件MyD88、TRAF-6、TRAM及TRIF表达的影响,分析阿托伐他汀防治动脉粥样硬化的机制。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞,用脂多糖刺激并加入阿托伐他汀干预24h,收集细胞,用荧光定量PCR方法测定TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM及TRIFmRNA表达;用Westernblotting法测定TLR4、MyD88及TRAF-6蛋白表达。结果与结论：用脂多糖刺激人脐静脉内皮细胞后,引起TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM和TRIF的高表达（P〈0.01）,用阿托伐他汀干预后可显著抑制TLR4、MyD88及TRAF-6的表达（P〈0.01）。提示阿托伐他汀可阻断Toll样受体4高表达,同时阻断Toll样受体4胞内信号转导的MyD88依赖性途径,这可能是阿托伐他汀抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

抑郁症患者血清细胞因子、C-反应蛋白的水平变化及临床意义

目的探讨血清细胞因子白介素（IL）-6、IL-1B、肿瘤坏死因子（TNF）-a及C-反应蛋白（CRP）水平在抑郁症患者中的变化，以期对抑郁症的诊断有所帮助。方法分抑郁症组与同期健康体检者（对照组），采用酶联免疫吸附法fEuSA）测定其血清IL-6、IL—1B、TNF—a水平，散射速率比浊法测定血清CRP水平。结果抑郁症患者血清IL-6（9．03±5．38）pg／ml、TNF—a（14．11±7．48）pg／ml及CRP（6．73±5．80）mg／L水平均明显高于对照组．差异均有统计学意义（t分别=3．12、2．45、2．88，P均〈0．05）；抑郁症患者血清IL-6与TNF—a水平具有相关性（r=-0．48，P〈0．05）。结论血清细胞因子IL-6、TNF—a及CRP水平升高可能与抑郁症发病有关。     

重症急性胰腺炎患者血浆TNF-α、IL-6浓度与外周血单核细胞TLR4表达的变化及临床意义

【目的】探讨重症急性胰腺炎（SAP）早期机体免疫功能指标的变化及其临床意义。【方法】选择2007～2009年本院急诊及住院临床诊断明确的SAP患者32例（SAP组）,轻症胰腺炎（MAP）48例（MAP组）,同时以健康自愿者35例作为对照（NC组）。采用ELISA法测定受试者血浆肿瘤坏死因子一α（TNF-α）和白介素一6（IL-6）浓度,流式细胞法检测外周血单核细胞上TLR4的表达。患者检测时间均为发病后12h内。【结果】SAP组TLR4阳性表达百分比为（67．23±10．71）％,MAP组及NC组分别为（48．38±8．55）％和（30．75士5．25）％;TLR4荧光强度（MFI）,分别为（78．30±8．96）％、（42．98士5．12）％、（27．20±5．75）％;血浆TNF_a分别为（38．79±6．65）pg／mL、（29．15士5．62）pg／mL和（21．38±5．60）pg／mL,IL一6浓度分别为（19．85±4．78）pg／mL、（14．55±3．91）pg／mL、（10．25士4．59）pg／mL,SAP组与MAP组及NC组比较差异均有显著性（均P〈0．01）。SAP组TLR4表达荧光强度与血浆中TNF-α、IL一6浓度呈明显正相关（r=0．997和0．995,P〈0．05）。【结论】sAP患者外周血单核细胞TLR4的阳性高表达与血浆TNF-α及IL一6明显增高呈正相关,提示MAP早期发病与先天性免疫系统的激活及炎症介质的释放密切相关,检测上述指标对重症胰腺炎的判定具有潜在临床价值。     

白细胞介素-25与支气管哮喘小鼠发病的关系

目的探讨IL-25与支气管哮喘发病的关系。方法将30只健康雌性Balb/c小鼠随机分为3组：分别为卵白蛋白（OVA）致敏并激发的哮喘模型组（A组）,OVA）致敏、激发并予糖皮质激素治疗组（B组）及正常对照组（C组）,每组10只。于末次激发后24h后各组小鼠摘眼球取血,ELISA法检测其血清IL-25、IFN-γ及IL-4水平。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,行嗜酸性粒细胞（EOS）计数,HE染色观察各组肺组织病理改变。RT-PCR法检测各组肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达。结果 1、B组多数小鼠未见明显行为学异常反应,肺组织病理损害较A组明显减轻,BALF中EOS计数（126.2±10.8）×103/L亦显著低于A组（324.7±13.6）×103/L（P〈0.01）。2、A组小鼠血清IL-25、IL-4水平[（80.66±3.06）pg/ml,（124.7±4.13）pg/m]均高于C组[（46.25±1.90）pg/ml,（32.73±2.20）pg/ml],IFN-γ水平[（45.25±5.34）pg/ml]低于C组[（80.56±2.49）pg/ml]其差异均有统计学意义（P〈0.01）。3、A组小鼠肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达均高于C组（P〈0.01）,B组小鼠肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达均低于A组（P〈0.01）。A组小鼠肺组织IL-25mRNA表达量与BALF中EOS计数呈正相关（r=0.901,P〈0.01）。结论 IL-25参与了哮喘小鼠的发病,在哮喘的发病中起促炎作用,其促进哮喘发病的作用可以被激素抑制。     

血液透析联合血液灌流对中、大分子毒素清除与瘙痒症状疗效的观察

目的观察血液透析联合血液灌流对尿毒症毒素的清除与治疗的效果。方法选择维持性血液透析(MHD)患者40例,随机分为血液透析(HD)组和血液透析联合血液灌流(HD+HP)组,每组20例,分别对2组患者观察期治疗前后血晚期糖基化终末产物(AGEs)、同型半胱氨酸(Hcy)、甲状旁腺素(PTH)、β2-微球蛋白(β2-MG)进行测定,临床观察2组治疗对尿毒症合并顽固性瘙痒的疗效并分析测定指标的变化与合并症的变化的相关性。结果 HD+HP组治疗12周后血AGEs、Hcy、PTH、β2-MG指标较HD组治疗12周后低,P<0.05(依次为0.024,0.002,0.042,0.001),HD+HP组血AGEs、Hcy、PTH、β2-MG指标治疗后较治疗前均有下降,AGEs由759.22±227.80AU×10-3/mg降至351.17±266.58AU×10-3/mg,Hcy由26.17±7.15umol/L降至14.03±4.67umol/L,PTH由304.03±284.28pg/ml降至134.23±105.30pg/ml,β2-MG由19.51±5.70mg/L降至15.22±4.29mg/L,P<0.05(依次为0.001,0.000,0.005,0.023),HD组除血Hcy降低[由26.17±7.15 umol/L降至14.03±4.67umol/L(P=0.081)]外其余3项指标(血AGEs、PTH、β2-MG)治疗后均较治疗前升高,AGEs由615.56±369.06AU×10-3/mg升高至704.62±551.97AU×10-3/mg,PTH由285.30±248.94pg/ml升高至345.73±397.45pg/ml,β2-MG由19.07±4.25mg/L升高至19.45±4.68mg/L,但P>0.05(依次为0.867,0.054,0.727)。血PTH、β2-MG降低与皮肤瘙痒症状缓解情况之间的r=0~1,P<0.05(依次为0.045,0.037)。结论血液透析联合血液灌流能有效清除维持性血液透析患者血AGEs、Hcy、PTH、β2-MG等中大分子物质;并能有效缓解MHD患者顽固性瘙痒合并症,这与其对PTH和β2-MG的有效清除有关。     

过敏性紫癜患儿外周血单核细胞TLR2、TLR4、TLR6及与Treg相关细胞因子的表达

背景：Toll样受体介导的信号通路转导及调节性T细胞异常活化在过敏性紫癜发病中的作用不清楚。目的：研究Toll样受体TLR2、TLR4、TLR6在过敏性紫癜患儿外周血单核细胞的表达及调节性T细胞（Treg）的免疫应答,探讨TLR及Treg活化在敏性紫癜发病机制中的作用。方法：选择处于过敏性紫癜急性期的患儿42例为观察对象,另选取15名门诊健康查体儿童为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单核细胞的TLR2、TLR4、TLR6的蛋白表达量;应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞TLR信号途径分子MyD88 mRNA的基因相对表达量;ELISA法测Treg细胞分泌的转化生长因子β、白细胞介素10的血浆水平;两组间比较采用独立样本t或t’检验,相关性分析采用Pearson相关检验。结果与结论：过敏性紫癜患儿外周血单核细胞的TLR2、TLR4、TLR6蛋白的表达及MyD88 mRNA基因的相对表达量均显著高于对照组（P〈0.01）;过敏性紫癜患儿血浆中转化生长因子β、白细胞介素10均高于对照组（P〈0.05）;过敏性紫癜患儿TLR2、TLR4、TLR6的蛋白表达量与Myd88 mRNA的基因相对表达量呈正相关（P〈0.01）,与血浆白细胞介素10、转化生长因子β水平无明显相关（P〉0.05）。提示TLR2、TLR4、TLR6活化后可能通过MyD88依赖的途径参与敏性紫癜的发病,而过敏性紫癜急性期Treg代偿性活化可能为机体的保护性免疫应答。     

CRRT在肾移植术后巨细胞病毒性肺炎治疗中的应用

目的探讨连续肾脏替代治疗（CRRT）在治疗肾移植术后巨细胞病毒（CMV）肺炎的疗效。方法2003年1月至2007年12月期间,肾移植术后CMV肺炎30例,分为CRRT组（n=15）和对照组（n=15）,对照组给予常规治疗,CRRT组在常规治疗基础上加用CRRT治疗,采用BM25连续血液净化系统,AN69膜血滤器进行前稀释连续静脉-静脉血液滤过（CVVH）。检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）水平,比较两组呼吸机使用时间、住院时间和病死率。结果发病时（0d）两组血清TNF-α、IL-8水平较发病前显著升高（均P〈0.01）,对照组在治疗7d后TNF-α、IL-8水平继续升高,14d后开始下降,而CRRT组TNF-α、IL-8水平较对照组显著降低（均P〈0.05）。CRRT组呼吸机使用时间（7.2±2.5）d明显较对照组（9.8±3.0）d缩短（P〈0.01）,住院时间（21.2±5.3）d也明显较对照组（26.1±5.5）d缩短（P〈0.01）;CRRT组和对照组分别有3例（3/15）和5例（5/15）患者死亡,病死率比较无统计学差异（P〉0.05）。结论CRRT在治疗肾移植术后CMV肺炎时可有效清除炎症介质,提高救治CMV肺炎的疗效。     

布洛芬对人离体中性白细胞MyD88-p38MAPK通路的影响

目的：研究布洛芬对脂多糖（LPS）介导人中性白细胞MyD88-p38MAPK通路的影响。方法取正常健康人外周静脉血20 mL。用密度梯度法分离中性白细胞和用免疫磁珠纯化纯化中性白细胞。用Nucleofection转染系统转染MyD88 siRNA基因。用5μmol/L、10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L布洛芬和LPS 1μg/mL刺激上述细胞。用Western Blot检测 MyD88和p38MAPK磷酸化水平。结果布洛芬呈剂量依赖性抑制LPS介导的正常人中性白细胞和MyD88基因沉默中性白细胞产生氧自由基。正常人中性白细胞和MyD88基因沉默中性白细胞,浓度为50μmol/L和100μmol/L时,可明显抑制ROS的产生达到50.0%±2.4%和42.5%±4.7%,40.0%±3.7%和30.0%±4.6%,与单纯LPS刺激相比P＜0.01。同时在正常和MyD88基因沉默细胞,50μmol/L布洛芬可明显抑制LPS介导的MyD88和p38MAPK的表达。结论布洛芬通过下调MyD88-p38MAPK通路抑制人中性白细胞细胞内氧自由基的产生。