急性白血病细胞bcl—2和p53基因表达的研究

目的 研究bcl-2和p53基因在急性白血病（AL）细胞中的表达及其与AL分型，临床特征，疗效及预后的关系。方法 采用免疫组化方法检测54例初治AL骨髓细胞bcl-2和p53蛋白表达情况，分析其与FAB分型，临床特征，疗效及预后的关系。结果 AL骨髓细胞中bcl-2及p53基因的表达显著高于正常对照组（P＜0．05），而在急性髓系白血病（AML）与急性淋巴细胞白血病（ALL）中的表达无显著差异；在AML亚型中，bcl-2在M4及M5中的表达高于M1，M2和M3（P＜0．05）；而p53的表达在各亚型中无显著性差异（P＞0．05）。bcl-2的表达与初诊时的细胞数呈正相关（R＝0．44，P＜0．05），与疗效呈负相关（R＝－0．44，P＜0．05）。结论 bcl-2和p53基因的紊乱可能达AL的发病中起作用，还与白血病的某些特征，疗效及预后密切相关。     

眼睑基底细胞癌组织中p53基因表达的研究

目的:探讨眼睑基底细胞癌组织中p53基因的表达。方法:收取武汉大学人民医院病理科1999~2006年收集的手术切除及活检的基底细胞癌(basalcell carcinoma,BCC)标本共40例,另取癌周围组织5例作对照。基底细胞癌发病年龄20~68岁。根据细胞分化程度,将BCC分为分化型(角化型、囊样型、腺样型)和未分化型(实体型、色素型、浅表型、硬化型),其中BCC分化型22例,未分化型18例。将基底细胞癌和正常组做免疫组织化学染色,观察各组细胞内p53基因表达的变化。利用HPIAS-2000图像分析系统测定p53基因在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果:基底细胞癌组织中p53基因呈高表达,癌旁组织中p53基因呈低表达。图像分析结果显示,基底细胞癌组织与癌旁组织之间p53基因的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.01)。结论:p53基因在肿瘤的发生发展中起了重要的作用。     

Evi1基因特异性siRNA对HEL细胞生长周期的影响

目的研究Evi1基因特异性小干扰RNA(siRNA)对人红白细胞白血病(HEL)细胞增殖及生长周期的影响。方法将HEL细胞分为三组:Evi1基因siRNA组(A组)、siRNA-co对照组(B组)、细胞空白对照组(C组)。转染48 h后,台盼蓝染色实验检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果与B、C组相比,A组HEL细胞活性下降[(97.13±1.58)%、(99.20±2.27)%vs.(26.05±2.49)%],细胞周期阻滞在G0/G1期[(39.61±1.32)%、(35.77±1.31)%vs.(79.07±1.43)%],S期细胞减少[(57.74±1.08)%(、57.36±1.38)%vs.(9.51±0.75)%],凋亡率增高[(9.78±1.14)%(、8.67±1.89)%vs.(49.94±1.75)%](P均<0.05);而B组和C组间各观察指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Evi1基因特异性siRNA可抑制HEL细胞增殖,促进细胞凋亡。     

眼睑基底细胞癌组织中p21WAF1/CIP1基因表达的研究

目的:探讨眼睑基底细胞癌组织中p21WAF1/CIP1基因的表达.方法:收集武汉大学人民医院病理科1999～2006 年收集的手术切除及活检的基底细胞癌(basalcell carcinoma,BCC)标本共40例,另取癌周围组织5例作对照.基底细胞癌发病年龄20～68 岁.根据细胞分化程度,将BCC分为分化型(角化型、囊样型、腺样型)和未分化型(实体型、色素型、浅表型、硬化型),其中BCC分化型22例,未分化型18例.将基底细胞癌和正常组做免疫组织化学染色,观察各组细胞内p21WAF1/CIP1基因表达的变化.利用HPIAS-2000图像分析系统测定p21WAF1/CIP1基因在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率.结果:基底细胞癌组织中p21WAF1/CIP1基因呈低表达,癌旁组织中p21WAF1/CIP1基因呈高表达.图像分析结果显示,基底细胞癌组织与癌旁组织之间p21WAF1/CIP1基因的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P＜0.01).结论:p21WAF1/CIP1基因在肿瘤的发生发展中起了重要的作用.     

α粒子对叙利亚地鼠胚胎细胞H－ras和p53基因的影响

观察了２Ｇｙα粒子（５．３４ＭｅＶ）照射诱发叙利亚地鼠胚胎细胞转化后Ｈ－ｒａｓ和ｐ５３基因的变化．结果表明，转化细胞Ｈ－ｒａｓ基因处于激活和ｐ５３基因失活状态，以逆转录聚合酶链反应和单链构象多态性分析方法进一步分析，证明Ｈ－ｒａｓ基因发生突变和ｐ５３基因部分缺失．本实验结果提示，Ｈ－ｒａｓ基因突变与ｐ５３基因突变的偶联可能是α粒子诱发叙利亚胚胎细胞转化的重要分子机理．     

低分子量地黄多糖对p53基因表达的影响

目的：研究低分子量地黄多糖（ＬＲＰＳ）对ｐ５３基因表达的影响。方法：利用定量ＰＣＲ的方法检测ｐ５３基因表达的水平。结果：ＬＲＰＳ在最适抗肿瘤有效剂量２０和４０ｍｇ·ｋｇ＾－１条件下，Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达水平分别是１．５２和１．４８，对照组为０．４６，环磷酰胺组为１．６０，ＬＲＰＳ能使Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达明显增加。结果：ＬＲＰＳ对抗癌基因ｐ５３表达的影响是其抗肿瘤作用     

α粒子对叙利亚地鼠胚胎细胞H—ras和p53基因的影响

观察了２Ｇｙα粒子照射诱发叙利亚地鼠胚胎细胞转化后Ｈ－ｒａｓ和ｐ５３基因的变化。结果表明，转化细胞Ｈ－ｒａｓ基因处于激活和ｐ５３基因处于激活和ｐ５３基因失活状态，以逆转录聚合酶链反应和单 我象多态性分析方法进一步分析，证明了Ｈ－ｒａｓ基因发生突变和Ｐ５３基因的部分缺失。     

胆囊癌p53、p73和p21WAF1蛋白的表达

目的 探讨p53、p73和p21WAF1基因在胆囊癌中的表达.方法 应用免疫组化SP法检测48例胆囊癌、32例癌旁组织、20例正常胆囊组织p53、p73和p21WAF1蛋白的表达,分析p73和p21WAF1相互关系.结果 48例胆囊癌中,p53、p73和p21WAF1蛋白阳性表达率分别为56.2%、52.1%和43.8%,均高于癌旁组织和正常组织(P<0.01).胆囊癌中p73蛋白的表达与Nevin分期有关(P<0.05),p21WAF1蛋白的表达与淋巴结转移、Nevin分期有关(P<0.05).结论 p53、p73和p21WAF1基因在胆囊癌高表达,提示三者在胆囊癌发生发展中起重要作用.胆囊癌中p73与p21WAF1表达无相关性.     

乙醇对PC12细胞p53蛋白的影响

过量饮酒也称酗酒，在大多数国家是一个严重的社会和公共卫生问题。酗酒不但导致各种刑事犯罪、交通事故、意外伤害和自杀及家庭破裂等，而且可引起多系统、多脏器和多功能损害，对神经系统损害尤为突出。乙醇是一种亲神经物质，极易透过血脑屏障，对中枢神经系统有抑制作用。体内试验表明神经元和星形胶质细胞是乙醇作用的靶细胞。     

低分子质量地黄多糖体外对Lewis肺癌细胞p53基因表达的影响

目的研究低分子质量地黄多糖（ＬＲＰＳ）体外给药对Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞ｐ５３基因表达的影响。方法利用竞争性逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的方法检测ｐ５３基因表达的水平。结果ＬＲＰＳ在剂量０．１和０．５ｇ·Ｌ－１条件下，体外给药１２ｈ，Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞内ｐ５３基因的表达水平为０．７９０和０．７１８，对照组为０．４８３，体外给药２４ｈ，ｐ５３基因的表达水平为０．９５７和０．５９０，对照组为０．２２６。结果表明，ＬＲＰＳ能使Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞内的ｐ５３基因表达明显增加。结论ＬＲＰＳ可能通过调控ｐ５３基因的表达而影响肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡。     

低分子量地黄多糖对p53基因表达的影响

研究低分子量地黄多糖（ＬＲＰＳ）对ｐ５３基因表达的影响．方法：利用定量ＰＣＲ的方法检测ｐ５３基因表达的水平．结果：ＬＲＰＳ在最适抗肿瘤有效剂量２０和４０ｍｇ·ｋｇ－１条件下，Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达水平分别是１５２和１４８，对照组为０４６，环磷酰胺组为１６０．ＬＲＰＳ能使Ｌｅｗｉｓ肺癌组织内ｐ５３基因的表达明显增加．结论：ＬＲＰＳ对抗癌基因ｐ５３表达的影响是其抗肿瘤作用的机制之一．     

非小细胞肺癌p21WAF1表达与p53突变的关系

目的:探讨p21WAF1与p53蛋白表达在NSCLC发生发展的作用机制及其与NSCLC临床病理参数的关系。方法:采用免疫组化(S-P法)检测p21WAF1与p53蛋白在62例NSCLC和19例正常肺组织中的表达。结果:p21WAF1在NSCLC组织中阳性率(57.38%)显著低于正常肺组织(78.95%),P=0.01;p21WAF1表达与肺癌的分化及淋巴结转移有关,P<0.01。p53在NSCLC组织中阳性率(59.68%)显著低于正常肺组织(21.06%),P=0.003。p53表达与肺癌的分化、TNM分期及淋巴结转移有关,P<0.01。p21WAF1与p53在21例正常肺组织中表达呈负相关,而在NSCLC中表达无相关。结论:p21WAF1和p53在NSCLC发生发展机制中起着重要作用,并且正常肺组织p21WAF1蛋白表达大部分依赖p53蛋白,而NSCLC在相当程度上不依赖。     

p73、p63和p53基因蛋白在喉癌中的表达及意义

目的　探讨 p73、p6 3蛋白在喉鳞癌发生、发展中的作用与意义。 方法　采用免疫组化SP法检测 5 0例喉鳞癌组织中 p73、p6 3、p5 3的表达 ,另选 10例邻近肿瘤的正常粘膜及 10例邻近肿瘤的不典型增生粘膜作为对照。结果　 (1) 3种基因蛋白的表达主要定位于细胞核。 (2 ) 5 0例喉癌组织中 p73、p6 3及 p5 3的阳性表达率分别为 6 4 %、92 %和 84 %。 (3)所观察的 10例邻近正常组织中 ,p73、p5 3基因蛋白的表达率为 0 ,p6 3基因蛋白的表达率为 10 0 %。 (4 ) 10例不典型增生的组织中 ,p73、p6 3、p5 3蛋白的表达率分别为 80 %、10 0 %和 6 0 %。 (5 )在喉癌组织中 ,p6 3与临床分期呈负相关 (P <0 0 5 ) ,p73与局部淋巴结转移呈正相关 (P <0 0 1) ,p73表达与 p6 3表达之间的关系有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,无论是 p73表达还是 p6 3表达与p5 3表达之间的关系均无统计学意义。 结论　 (1)p73高表达的肿瘤组织比 p73低表达或不表达的肿瘤组织更容易发生淋巴结转移。 (2 ) p6 3高表达的肿瘤恶性度相对较低。 (3) p6 3与鳞状细胞癌的细胞分化发展关系密切。 (4 )p6 3对鳞状细胞癌具有特异性标记作用。     

P53促凋亡蛋白家族和p53的相互作用与细胞凋亡的研究进展

肿瘤的形成是原癌基因和抑癌基因遗传性变化如增加、丢失、突变，逐步积累的过程。同时，肿瘤又是遗传因素和后天因素共同作用的多因子疾病。p53是一个肿瘤抑制蛋白，它首先可通过影响编码细胞周期相关蛋白质的基因表达来调控细胞周期的G1停滞．同时它还会因为DNA的损伤增多．诱导细胞发生细胞凋亡。但p53诱导细胞凋亡的机制多年来一直不太清楚．而最近发现的ASPP(apoptosis stimulating protein of p53)蛋白家族对p53诱导细胞凋亡的机制的研究有了新的进展。本文就此作一综述。     

电化学疗法与恶性淋巴瘤细胞p53和bcl-2基因表达

凋亡基因与肿瘤的发生、生长、治疗与预后密切相关，因而成为肿瘤研究的热点。近年来研究表明，多种物理和化学因素可诱导肿瘤细胞凋亡。电化学疗法（ECT）是一种利用局部电脉冲刺激和化学抗癌药物（化疗）相结合治疗肿瘤的新方法，它是将铂金微电极插入肿瘤组织中，经过直流电的作用，强制地改变肿瘤组织的微环境，产生一系列电化学反应，     

野生型p53基因促进长春新碱诱导的细胞凋亡

为探讨VCR与p53介导的细胞凋亡的关系,将野生型p53基因导入一个内源性p53基因重组的多药耐药细胞系 KB_V200,经抗性筛选和杂交鉴定获得外源性p53基因稳定表达的转染细胞系KB_V200-p53。VCR处理细胞后,经电镜及荧光显微镜观察表明KB_V200-p53细胞呈现凋亡的典型形态学特征;而流式细胞术结果显示经600nmol·L^-1的VCR作用24h,KB_V200-p53细胞和KB_V200细胞的凋亡百分数分别为42.4%和8.4%。结果提示野生型p53基因能促进VCR诱导的细胞凋亡,肿瘤细胞对VCR的耐药性可能与细胞内p53基因失活有关。     

黄芪总苷对肝癌细胞凋亡及wtp53基因表达的影响

目的　研究黄芪总苷 (TA)对肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法　将两种人肝癌细胞株HepG2细胞和Bel 740 4细胞分别与TA(2 0 ,40和 80mg·L-1)共培养 6d ,经流式细胞术检测凋亡峰以及p5 3癌基因的表达。结果　TA(2 0 ,40和 80mg·L-1)可明显促进人肝癌HepG2细胞和Bel 740 4细胞的DNA亚G1峰 (凋亡峰 )升高 ,分别使HepG2细胞凋亡率由 4 1%增至 2 5 4%、5 7 0 %、74 6 % ;使Bel 740 4细胞凋亡率由 4 5 %增至 43 6 %、48 1%、5 0 5 %。TA(80mg·L-1)可促进人肝癌HepG2细胞野生型 p5 3(wtp5 3)的表达 ,还可促进Bel 740 4细胞的wtp5 3癌基因表达 ,并有降低突变型 p5 3(mtp5 3)表达的趋势。 结论　TA具有诱导肝癌细胞凋亡的作用 ,其机制可能与其上调肝癌细胞的wtp5 3表达有关     

眼睑基底细胞癌组织中p21^WAF1/CIP1基因表达的研究

目的：探讨眼睑基底细胞癌组织中p21^WAF1／CIPI基因的表达。方法：收集武汉大学人民医院病理科1999～2006年收集的手术切除及活检的基底细胞癌（basalcell carcinorna，BCC）标本共40例，另取癌周围组织5例作对照。基底细胞癌发病年龄20～68岁。根据细胞分化程度，将BCC分为分化型（角化型、囊样型、腺样型）和未分化型（实体型、色素型、浅表型、硬化型），其中BCC分化型22例，未分化型18例。将基底细胞癌和正常组做免疫组织化学染色，观察各组细胞内p21^WAF1／CIPI基因表达的变化。利用HPIAS-2000图像分析系统测定p21^WAF1／CIPI基因在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：基底细胞癌组织中p21w胴／c帆基因呈低表达，癌旁组织中p21^WAF1／CIPI基因呈高表达。图像分析结果显示，基底细胞癌组织与癌旁组织之间p21^WAF1／CIPI基因的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：p21^WAF1／CIPI基因在肿瘤的发生发展中起了重要的作用。     

U87胶质瘤细胞p53基因全场cDNA克隆及序列分析

目的克隆U87胶质瘤细胞p53基因编码序列,并对其序列进行分析。方法根据NCBI GenBank中p53 cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术从U87胶质瘤细胞总RNA中对p53基因编码序列进行克隆;并通过DNAMAN软件将克隆序列与NCBI GenBank中序列进行比对,分析U87细胞中p53基因编码序列特点。结果经测序验证,成功克隆了p53基因编码序列,通过序列比对发现U87细胞中p53基因72位密码子为精氨酸残基。结论成功克隆了U87细胞中p53基因编码序列,分析发现U87细胞中p53基因表达产生的是72位密码子为含精氨酸残基的p53野生型蛋白,为进一步研究U87细胞中p53基因功能特性及其与胶质瘤的相关性奠定了基础。