人体结直肠癌Ki－ras基因点突变检测

采用ＰＣＲ和寡核苷酸探针杂交技术检测了３５例结直肠癌和５例息肉活检组织ｋｉ—ｒａｓ基因第１２位密码子的点突变。发现１０例结直肠癌具有点突变，其中ＧＧＴ→ＧＴＴ（Ｇｌｙ→Ｖａｌ）突变３例，ＧＧＴ→ＧＡＴ（Ｇｌｙ→Ａｓｐ）突变７例；１例息肉有突变（ＧＧＴ→ＧＴＴ）。     

胆红素脑病NMDA受体的过度活化机制

目的：探讨Ｎ－甲基－Ｄ天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体水平胆红素脑病发生机制与防治措施。方法制作胆红素脑病动物模型基础上,在体脑内微透析提取兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）神经递质,ＨＰＬＣ检测天冬氨酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）、甘氨酸（Ｇｌ６）,并给予模型动物ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＧＡＰＡ干预,电镜检测脑组织超微结构,荧光检测脑组织ＡＴＰ与细胞内Ｃａ＾２＋含量。结果胆红素毒性脑组织ＡＴＰ含量显著降低,细胞外Ｇｌｙ与     

结核分支杆菌耐利福平基因rpoB变异机理及其检测的研究

目的 研究耐利福平株结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因变异及其ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测方法。方法 ＰＣＲ法扩增ｒｐｏＢ基因,纯化克隆,大量质粒制备,经ＡＢＩ３７７系统直接测序。结果 １７例多耐药结核菌,１４侏检测出ｒｐｏＢ基因变异。４９６（Ａｒｇ）,５０７（Ｇｌｙ→Ａｓｐ）,５７９（Ａｌａ→Ｇｌｙ）和５８３（Ｐｒｏ→Ｌｅｕ）密码子变异未风报道。全部为点突变,主要是错义突变。在５１１－５３３密码子区域变异只占６６     

人肝癌裸鼠移植瘤株p53基因突变及测序研究

目的 研究从厦门同安肝癌高发区所建的裸鼠移植瘤（ＨＨＣ，ＨＨＣ１５）是否存在ｐ５３基因突变。方法 从两移瘤提取的总ＤＮＡ用分子生物学方法检测并测序，如ＰＣＲ方法扩增ｐ５３基因部分第７外显子，地高辛标记ＤＮＡ探针斑点杂交法，ＤＮＡ限制性酶切片段长度多态分析和激光荧光ＤＮＡ测序等。结果 ＨＨＣ４细胞ＤＮＡ有ｐ５３基因第２５０密码子（Ｃ→Ａ）的突变；ＨＨＣ１５有ｐ５３基因第２４９密码子（Ｇ→Ｔ）的突变。     

变性梯度凝胶电泳和单链构象多态性分析检测肺癌p53基因8号外显子突变

目的：检测ｐ５３基因８号外显子突变。方法：分别采用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）和单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ），对３５例肺癌病人手术切除组织的ｐ５３基因８号外显子（Ｅｘｏｎ８）进行突变检测。结果：采用ＤＧＧＥ检测的突变率为２０％，而ＳＳＣＰ检测的突变率为１１％。ｐ５３基因Ｅｘｏｎ８的总突变率为２３％。结论：ＤＧＧＥ检测ｐ５３基因突变的敏感性高于ＳＳＣＰ。     

胃粘膜肠化生组织中p53、APC、K-ras基因突变的研究

目的：探讨ｐ５３,ＡＰＣ及Ｋ－ｒａｓ基因突变在不同类型肠化生癌变中的作用。方法;用ＰＣＲ－ＳＳＣ冢ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术检测了４７例肠化生组织中ｐ５３基因５－８外显子及ＡＰＣ基因１５－６外显子,Ｋ－ｒａｓ基因第１２位点估变。结果：４７例肠化生组织中ｐ５３突变１４例,占２９．８％,ＡＰＣ及Ｋ－ｒａｓ基因突变各３例,分别占６．８％。肠化生中Ⅰ,Ⅱ型肠化３３例,Ⅲ型肠化１４例,Ⅲ型肠化中ｐ５３突变率为５７     

健康成年人胆固醇脂转运蛋白基因外显子15 D442∶G突变的检测

应用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性技术检测９７位健康成年人胆固醇脂转运蛋白基因外显子１５Ｄ４４２∶Ｇ突变。首先扩增包含人胆固醇脂转运蛋白基因第１５０６位碱基的特异片段，产物经限制性内切酶ＭｓｐⅠ消化后，用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果９７位健康成年人中发现３例杂合子基因突变，突变率约３．０９％。该方法简便、敏感、可靠     

Crouzon综合征FGFR2基因第9外显子突变的研究

目的：研究Ｃｒｏｕｚｏｎ综合征的病因。方法：应用聚合酶链反应－－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术结合ＰＣＲ产物直接测序方法对６例Ｃｒｏｕｚｏｎ综合征家系（２１名患者，１５名正常人）的成纤维细胞生长因子受体２（ＦＧＥＲ２）基因第９外显子进行了分析。结果：ＳＳＣＰ检测发现５种异常泳动变位，ＤＮＡ直接测序证实为种突变类型，Ｔｙｒ３４０Ｈｉｓ，Ｃｙｓ ３４２Ｔｒｐ，Ｃｙｓ ３４２ Ｔｙｒ及３４４Ａｌａ     

酮替芬对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨酮替芬对大鼠急性前脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ四动脉结扎法略加改良制作动物模型。记录ＥＥＧ,检测脑水分、脑组织内ＣＫ、ＭＤＡ、ＳＯＤ、Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶。结果酮替芬可以促进模型鼠ＥＥＧ的恢复,减轻脑水肿,使脑组织ＣＫ释放和ＭＤＡ含量减少,提高 ＳＯＤ、Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的活性。结论 酮替     

胰腺癌组织中K—ras基因点突变的研究

应用Ｔａｑ酶直接测序技术对９例胰腺癌标本及１例恶性胰岛细胞瘤标本进行了Ｋ－ｒａｓ基因１２位点突变的检测。结果显示：９例胰腺癌中含Ｋ－ｒａｓ基因突变者５例。表现出２突变类型，即ＣＣＡ→ＣＧＡ型４例；ＣＣＡ→ＣＡＡ型１例。相应氨基酸改变分别为：甘氨酸→丙氨酸；甘氨酸→缬氨酸。分析了在突变率及突变内容上与国外学者不同的原因，探讨了检测Ｋ－ｒａｓ基因１２位点突变的意义。