内皮素对肝硬化大鼠Kupffer细胞血小板活化因子生成水平的影响

目的 探讨肝硬化时Kupffer细胞与血小板活化因子(PAF)生成的关系及内皮素-1(ET-1)在其中的作用.方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组与CCl4诱导的肝硬化模型组,每组15只.分离、培养Kupffer细胞,培养24h后,分别用0、1、10、100和1 000nmol/L ET-1刺激,测定Kupffer细胞产生和释放的PAF水平.通过RT-PCR、受体饱和结合试验分析Kupffer细胞PAF、ET-1受体(ETA、ETB)和内皮素前体原(ppET-1)mRNA表达情况.结果 肝硬化大鼠Kupffer细胞合成与释放PAF明显增加,分别为对照组的1.48倍(1.02±0.06pg/g DNA vs 0.69±0.07pg/g DNA,P＜0.01)和2.15倍(1.42±0.14pg/g DNA vs 0.66±0.04pg/g DNA,P＜0.01).ET-1刺激增强了Kupffer细胞生成与释放PAF的效应,并呈剂量依赖性,在肝硬化组尤为明显.肝硬化组Kupffer细胞PAF及ETB受体mRNA水平及受体密度明显增加,而受体亲和力无变化,无ETA受体和ppET-1 mRNA表达.结论 Kupffer细胞是肝硬化时PAF生成的一个重要来源,ET-1通过表达增加的ETB受体进一步促进Kupffer细胞生成并释放PAF,提示Kupffer细胞参与了肝硬化门脉高压的形成.     

血小板活化因子受体在闭合性颅脑损伤中的表达

 目的 研究闭合性脑损伤后PAF-R在脑组织中的表达部位、时序性特点.方法 采用免疫组化SP法检测脑损伤后不同时间SD大鼠脑组织PAF-R的表达情况.结果 脑损伤后,PAF-R表达在1～2 h开始减少,1 2～24 h达最低值,7 d时仍低于正常.顶叶皮层、胼胝体阳性细胞面积、阳性细胞计数与对照组比较差别有统计学意义(P＜0.01).结论 PAF-R参与了闭合性颅脑损伤的病理过程.     

肝硬化形成过程中血小板活性因子及其受体在门脉高压形成中的意义

目的　了解血小板活性因子 (PAF)及其受体在肝硬化门脉高压形成中的作用。方法　采用CCl4腹腔注射 8周 (2次 /周 )诱导大鼠肝硬化 ,利用ELISA、RT PCR及受体饱和结合实验检测PAF水平及其受体表达。结果　与对照组相比 ,肝硬化时肝内PAF、肝脏输出PAF及血清内PAF分别增高了 4 4 0 %、87 7%和 5 4 5 % (P <0 0 1,P <0 0 5 ,P <0 0 5 )。肝硬化大鼠肝内PAF受体mRNA表达及PAF结合高于对照组近 3倍 ,门脉压高于正常大鼠 2 31倍 (P <0 0 1)。结论　肝硬化时PAF系统上调节肝血流动力学和代谢异常是门脉高压形成的重要因素 ,肝内PAF释放入循环系统的增加是影响系统血流动力学异常改变的关键因子。     

牙周病并发冠心病患者血小板活化因子表达水平及意义

目的 探讨牙周病并发冠心病患者血小板活化因子(PAF)的表达水平及意义.方法 将台州市立医院自2019年12月至2020年8月收治的22例牙周病并发冠心病患者纳入CP组,20例单纯冠心病患者纳入C组,34例单纯牙周病患者纳入P组;另将同期20例健康体检者纳入H组.采集4组研究对象的唾液和龈沟液,比较PAF表达水平,以及...     

血小板活化因子与大鼠肝脏病变的关系及银杏制剂的治疗作用

目的探讨血小板活化因子（PAF）与实验大鼠肝脏病变的关系及银杏制剂的治疗作用。方法将实验用Wistar大鼠60只,随机分成正常对照组（12只）、肝纤维化模型组（16只）、银杏制剂低剂量治疗组（16只）及银杏制剂高剂量治疗组（16只）4组。除正常对照组外,余3组应用CCl4皮下注射造模,2次/w,共12 w。正常对照组及模型组每日用生理盐水灌胃,而治疗组则每日用银杏制剂灌胃。12 w后,将全部大鼠处死,留取血清、肝组织,测定肝功能（ALT、ALB）、血清PAF及各种肝纤维化指标（HA、PⅢP、C-Ⅳ、LN）,同时行组织病理学检查,并行胶原纤维增生程度半定量分析。结果模型组与正常对照组比较,除白蛋白降低外,血清PAF、ALT及各种肝纤维化指标均升高;各治疗组与模型组间比较,除白蛋白升高外,余各项指标均下降,同时肝脏炎症及肝纤维化程度减轻,上述指标差异均有统计学意义。结论 PAF与肝脏损伤及肝脏纤维化的发生有明显关系,PAF拮抗剂——银杏制剂有明显抑制和逆转肝纤维化的作用。     

脑缺血再灌注神经细胞血小板活化因子受体蛋白特性研究

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后血小板活化因子(PAF)受体特性的变化。方法建立一侧大脑中动脉线栓闭塞再通模型，超速离心制备缺血脑皮质神经细胞突触膜和微粒体。采用放射配基结合实验，检测脑缺血再灌注后PAF受体的平衡解离常数(Kd)和最大结合数量(Bmax)。结果Scatchard作图分析显示，各组样本均存在3个特异性PAF结合位点，其中2个位于微粒体，另1个在突触膜上。单纯缺血90min时，突触膜位点Kd和Bmax明显减小；再灌注1d后，微粒体上2个位点的Kd、Bmax明显下降，至7d均未恢复到假手术组水平。结论缺血再灌注可诱导脑皮质神经细胞PAF受体下调，胞内受体下调晚发于突触膜受体。     

内毒素血症时肝组织内血小板活化因子及其受体的变化与肝损伤的关系

目的　研究内毒素血症时肝组织、肝细胞、枯否氏 (Kupffer)细胞血小板活化因子 (PAF)与PAF受体的变化及其与肝组织损伤的关系。方法　实验分在体和离体两部分。在体实验设 3组 :对照组 (Ⅰ组 )、内毒素血症组 (Ⅱ组 )、内毒素血症并苦银杏内酯B(GinkgolideB)预处理组 (Ⅲ组 )。Ⅰ组及Ⅱ、Ⅲ组动物分别于内毒素处理后 1、3、5、8小时等时相点活杀取材 ,测定组织PAF、丙二醛 (MDA)、三磷酸腺苷 (ATP)含量以及肝组织PAF受体的特征。离体实验设对照组和内毒素血症组 ,二组动物分别于内毒素处理后 1、3、5、8小时等时相点行肝脏原位灌流分离肝细胞、肝枯否氏细胞 ,测定胞内及培养上清液中的PAF含量 ,同时测定不同细胞表面PAF受体的特征。结果　内毒素血症时 ,肝组织PAF、MDA含量均明显增加 ,ATP的水平显著降低。内毒素血症时 ,肝组织、肝细胞、枯否氏细胞PAF受体的亲和力变化均不明显 ,但于 8小时时相点 ,肝组织、枯否氏细胞PAF受体结合位点有较明显的增加 ,最大结合力分别 =(19.93± 2 .34)fmol/mg .p、(2 .15±0 .2 7)fmol/mg .p。用PAF受体拮抗剂GinkgolideB预处理后 ,肝组织中PAF的水平未受明显影响 ,MDA含量显著降低 ,ATP水平有较明显的改善。结论　内毒素血症时 ,PAF可能通过其相应的胞膜受体直接参与     

血小板活化因子拮抗剂(TAPONIN)对大鼠急性低压缺氧的保护作用

为了观察血小板活化因子(PAF)在急性低压缺氧中的作用,本文选用了天然PAF拮抗剂Taponin进行缺氧干预实验.结果发现,用0.5g/kg剂量灌胃给药8次,对急性低压缺氧引起的大鼠心肌、肝功能和内皮细胞损害有较好保护作用,血液中的CPK、LDH、α-HBD、AST、ALT、γ-GT以及ET含量均未见明显升高,和对照组相比,差异无显著性(P>0.05).结果提示,对急性低压缺氧引起的机体损害,可能有着广阔的预防和治疗前景.     

WEB2170对血小板活化因子所致肝损伤的保护作用

目的研究血小板活化因子（PAF）对肝脏的损伤作用及其拮抗剂WEB2170的预防保护作用。方法体内实验,45只Wistar大鼠随机均分为对照组、PAF损伤组和WEB2170预处理组,测定血清天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、乳酸脱氢酶（LDH）和肝组织丙二醛（MDA）水平,组化染色积分光密度法测定线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）活性,观察肝组织形态学改变。体外实验,应用DPH探针测定培养肝细胞膜流动性的变化,观察用PAF刺激培养的Kupffer细胞产生肿瘤坏死因子（TNF）和MDA的情况。结果体内实验：PAF可致大鼠血清AST、ALT、LDH及组织MDA升高（P〈0．05～0．01）,SDH酶染色积分光密度值（Dλ）降低,WEB2170预处理可减轻上述改变（P〈0．05～0．01）;体外实验,PAF可使肝细胞膜流动性降低（P〈0．01）,而WEB2170（50ng／ml）可减轻PAF所导致膜的流动性降低（P〈0．05）;PAF可刺激Kupffer细胞产生TNF、MDA（P〈0．01）,呈剂量依赖性,可被WEB2170显著抑制（P〈0．01）。结论PAF对肝脏有损害作用,其拮抗剂WEB2170对PAF所致肝脏损害有一定的保护作用。     

检测急性脑梗死患者血小板活化因子的临床意义

 目的 探讨血小板活化因子(platelet activating factor,PAF)与脑梗死的关系,以及以PAF为靶点的药物对脑梗死的治疗意义.方法 用双抗夹心ELISA法检测血浆PAF浓度;检测急性脑梗死患者经红花黄色素(safflower yellow,SY)治疗后的神经功能、PAF、血液流变学的变化.结果 急性期脑梗死患者血浆PAF值明显高于健康对照组,且与梗死体积成正比;经SY治疗后急性脑梗死患者神经功能和血液流变学明显改善,血浆PAF值下降.结论 急性脑梗死患者可出现PAF浓度增加,活性增强;针对PAF的药物可明显改善其神经功能和血液流变学.     

库普弗细胞在肝再生调控中的作用机制

目的探讨库普弗细胞(KC)在肝部分切除(PH)后再生调控中的作用及机制。方法制备KC条件培养液(KCCM),用MTT法观察其对大鼠原代肝细胞增殖的作用;建立小鼠PH模型,测定KC灭活对肝再生率的影响;应用免疫组化方法检测KC灭活后再生肝中TNF-α、TGF-α和TGF-β1的表达特点。结果KCCM能明显促进原代肝细胞增殖(A=0·746±0·06),与对照组(A=0·536±0·06)相比有显著性差异(P<0·01);KC灭活伴PH后6天肝再生率为95·10%±4·52%,而单纯PH后6天肝再生率为74·50%±1·90%(P<0·01);免疫组化结果显示,小鼠PH后6h,再生肝细胞TNF-α、TGF-α和TGF-β1表达迅速升高,前两者可持续4~5天,而后者在第3天即转为阴性,但在KC灭活伴PH后第6天,3种因子的表达仍然较强,超过单纯PH组。结论在肝再生过程中,KC和其他间质细胞分泌的TNF-α和TGF-α因受到KC分泌的TGF-β1等因子的拮抗而不能充分发挥促肝再生作用;当KC活性被抑制时,TNF-α和TGF-α的活性不再受到拮抗,进而能够增强肝再生能力和加速再生过程。     

超顺磁性氧化铁MR成像评估大鼠非酒精性脂肪肝炎枯否细胞功能的初步研究

目的 初步探讨超顺磁性氧化铁(SPIO)作为MRI对比剂评估大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)枯否细胞(KC)功能的可行性.方法 20只雄性SD大鼠按完全随机法分为实验组和对照组,每组10只,实验组喂养高脂饲料,对照组喂养普通饲料.8周后对所有大鼠行肝脏MRI及SPIO增强扫描,计算肝脏组织平均信号强度下降百分比(PSIL)和SPIO增强前后肝脾对比信号强度比值(RSIR),测定血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)值,并取肝脏标本行HE和普鲁士蓝染色分析病理表现.采用两组独立样本均数t检验比较2组不同序列SPIO增强后PSIL和RSIR值的差异.结果 实验组1只大鼠因麻醉过深死亡,其余9只血清TC及TG值分别为(6.58±1.25)和(1.53±0.23)mmoL/L,较对照组[分别为(1.64±0.22)和(0.55±0.14)mmol/L]均明显升高(t值分别为11.716和11.588,P值均＜0.01).SPIO增强扫描后两组肝实质信号强度在各序列明显下降,在PDWI及T_1WI上实验组PSIL分别为(34.78±4.51)%和(60.38±3.49)%,较实验组[分别为(64.96±2.42)%和(81.08±1.66)%]小,差异有统计学意义(t值分别为-18.451和-16.240,P值均＜0.01).PDWI、T_2WI、T_2~*WI和T_1WI序列实验组RSIR分别为1.002±0.141、5.000±0.516、20.004±1.490和2.601±0.077,均较对照组(0.400±0.102、1.500±0.115、0.503±0.105和-0.300±0.058)大(t值分别为10.745、19.800、39.168和92.785,P值均＜0.01).实验组肝脏组织中普鲁士蓝染色阳性颗粒积分(2.33±0.50)分较对照组(4分)明显减少(t=-10.000,P＜0.01).结论 高脂饮食诱导的SD大鼠NASH模型接近人类发病情况且容易建立,临床应用型1.5 T MR通过SPIO增强肝脏扫描可评估KC的功能,提示NASH的发病机制与KC功能的下降有关.     

库普弗细胞清道夫受体、CD14表达变化及其与内毒素性肝损伤的关系

目的　从细胞受体水平探讨内毒素性肝损伤过程中肝内库普弗细胞 (KC)由防御性逐步转化为效应性的机制。　方法　经尾静脉注射不同剂量内毒素 (LPS)复制轻、中、重度内毒素血症小鼠模型。肝内KC表面清道夫受体 (SR)、CD14表达测定采用免疫组化法 ,并进行计算机图像分析。　结果　注射LPS后 1h ,高剂量组肝内KC表面SR表达明显减少 ,至 3h ,低剂量和中剂量组KC表面SR表达也开始明显减少 ,并随观察时间延长 ,3组KC表面SR表达均进行性减少 ,3组间SR的吸光度差异有显著性意义。 3组肝内KC表面CD14表达在注射LPS后 1h均明显增多 ,并随时间延长而更加明显 ,但 3组间CD14的吸光度无统计学意义。相关分析显示 ,各剂量组肝内SR与CD14表达变化呈显著负相关。血浆丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、总胆红素 (TB)和肝组织内丙二醛 (MDA)水平变化分别与SR表达下调呈显著负相关 ,与CD14表达上调呈显著正相关。肝组织结构改变及动物死亡率也与肝内KC表面SR、CD14表达变化呈明显的平行关系。　结论　内毒素致肝损伤过程中 ,肝内KC表面SR表达下调、CD14表达上调可能是KC防御功能减弱、致炎作用增强的重要机制。