龙葵草合剂治疗功血临床及实验研究

龙葵草合剂治疗功血临床及实验研究山东东营胜利石油管理局中心医院李明英邢建华王庆兰（２５７０３４）关键词龙葵草合剂功血临床研究实验研究龙葵草合剂是以龙葵草为主药配制的。本文采用龙葵草合剂治疗功能性子宫出血（简称功血）取得较好疗效，遂对其止血作用进行了...     

龙葵在肿瘤治疗中的运用

龙葵在肿瘤治疗中的运用谢启梅口述谢军荣整理（江西吉安地区医院吉安３４３０００）（江西吉安县北源医院吉安３４３１００）关键词龙葵，临床应用，肿瘤龙葵（ＳｏｌａｎｕｍｎｉｇｒｕｍＬｉｎｕ）在江西别名较多，如通称为野辣椒，又叫天茄子、野辣椒树子、飞天龙等。...     

基于加权基因共表达网络分析（WGCNA）探讨龙葵抗肺腺癌功能基因模块及生物标记识别研究

目的 采用加权基因共表达网络分析（WGCNA）法探讨龙葵抗肺腺癌的潜在生物靶标。方法 基于中药系统药理学技术平台（TCMSP）及文献检索,以口服利用度（OB）、类药性（DL）构建龙葵活性成分数据库,采用DRAR-CPI服务器反向模拟分子-靶蛋白对接龙葵预测成分可能的作用靶标,并结合WGCNA挖掘在美国国立生物技术信息中心（NCBI）的GEO数据库中的GSE10072数据集得到共表达基因模块,并与龙葵预测靶标匹配映射,得到龙葵潜在抗肺腺癌靶点。将预测靶标与抗肺腺癌基因分别利用生物学信息注释数据库（Metascape）进行GO生物学过程富集分析和KEGG通路富集分析,并用STRING数据库结合Cytoscape软件可视化龙葵潜在抗肺腺癌靶点蛋白相互作用网络并进行网络拓扑学分析,同时构建龙葵活性成分-抗癌靶点-通路网络,探讨龙葵抗癌作用的机制。并通过UALCAN及Kaplan Meier plotter数据库分析关键基因在肺腺癌组织中转录水平的变化,通过KM plotter分析关键基因与肺腺癌患者预后的关系。结果 共收集龙葵活性成分9个,包括皮树脂醇、谷甾醇、薯蓣皂苷元、辣茄碱、槲皮素、α-茄碱、澳洲茄碱、澳洲茄边碱、澳洲茄胺,预测成分作用靶标271个,筛选龙葵潜在抗癌靶点41个,其潜在调控通路包括癌症通路、PI3K-Akt信号通路、化学物致癌作用、癌症的中心碳代谢等通路。由蛋白互作网络分析可得关键基因为EGFR、CASP8、HPGDS、FYN,且证实高表达的EGFR和CASP8、低表达的HPGDS及FYN与肺腺癌患者不良预后紧密相关。结论 龙葵抗肺腺癌具有多成分、多靶点、多途径作用的特点,为其抗癌物质基础及作用机制的阐明提供了科学依据。     

高效液相色谱法测定龙葵中的澳洲茄胺

目的建立龙葵中澳洲茄胺的高效液相色谱（HPLC）检测方法。方法采用甲醇酸水超声提取龙葵生物碱,在回流条件下对生物碱苷进行酸性水解,得到相应的澳洲茄胺。然后进行高效液相色谱检测,色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm）,乙腈-0．05％七氟丁酸（30：70）体系为流动相,流速为1．0ml／min,检测波长为210nm。结果龙葵生物碱获得了良好的基线分离;澳洲茄胺的线性范围为102～612μg·ml-1（r=0．9999）;加样回收率超过96．0％,RSD为3．35％（n=6）。结论该方法简单快速,准确可靠,可作为龙葵药材及其制剂的质量控制方法。该方法也为龙葵质量标准的制定及进一步的药效学研究提供了可靠的数据和方法学平台。     

龙葵汤在乳腺癌化疗中的临床应用

目的：观察龙葵汤辅助乳腺癌患者化疗的临床效果。方法：将60例乳腺癌患者随机分成对照组（CAF化疗方案组）30例和治疗组（CAF方案＋龙葵汤）30例,比较两组患者化疗前后的血常规、肝功能、肾功能、胃肠道反应等指标。结果：两组患者近期疗效无统计学差异（P〉0.05）;除血常规指标无明显差异外,治疗组患者肝肾功能和胃肠道反应均较对照组有明显改善（P〈0.05）;治疗组患者生存质量亦显著优于对照组（P〈0.05）,差异具有统计学意义。结论：龙葵汤辅助化疗能显著减少乳腺癌患者化疗过程中出现的骨髓抑制等不良反应,改善患者生存质量,值得临床推广应用。     

龙葵总碱对肿瘤细胞膜钠泵及钙泵活性影响的研究

目的：观察龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na^＋，K^＋-ATPase及Ca^＋＋，Mg^＋＋-ATPase活性的影响。方法：荷瘤小鼠分为治疗组（高剂量、中剂量、低剂量）和对照组（生理盐水组、环磷酰胺组），分别测定各组肿瘤细胞膜的Na^＋，K^＋ ATPase及Ca^＋＋，Mg^＋＋ -ATPase活性。结果：龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na^＋，K^＋ -ATPase及Ca^＋＋，Mg^＋＋ -ATPase活性均有明显的抑制作用，并且其抑制作用呈量效正相关。结论：龙葵总碱这一作用可能是其抗肿瘤作用机理之一。关键词：龙葵总碱肿瘤细胞膜钠泵钙泵     

龙葵散治疗口腔溃疡的临床研究

目的：观察自拟方龙葵散治疗口腔溃疡的疗效。方法：选择口腔溃疡患者共60例随机分为两组,治疗组30例,每日3次,用龙葵散涂撒溃疡面,对照组用冰硼散涂撒。5 d后观察两组患者疼痛程度和溃疡愈合情况。结果：在治疗后第5天,治疗组较对照组疼痛感觉减轻明显（P〈0.01）;治疗组治疗后溃疡直径显著小于对照组（P〈0.01）。结论：龙葵散局部治疗口腔溃疡有良好的止痛和促愈合作用。     

龙葵中澳洲茄碱含量的动态规律

目的：通过研究龙葵不同产地、生长周期及药用部位中澳洲茄碱的动态规律,为进一步优化龙葵的采收期、药用部位及栽培提供依据。方法：采用HPLC,AgilentTC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm）;以乙腈-0.5%磷酸水溶液作为流动相,梯度洗脱;检测波长为203 nm;体积流量：0.9 mL·min-1;柱温为30 ℃。结果：龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地不同差异很大。龙葵地上部分澳洲茄碱含量的高低主要取决于所结果实的多少,以盛果期含量最高;不同成熟程度果实中澳洲茄碱含量的规律为：成熟果实＜青果＜幼果。结论：在龙葵的生长过程中,龙葵中澳洲茄碱的含量随着其生长发育进程而发生变化。根据龙葵不同生长阶段所含澳洲茄碱在各器官中的含量变化,龙葵的最佳采收期为盛果期,最佳药用部位为幼果和青果。     

龙葵总碱对肿瘤细胞膜钠泵及钙泵活性影响的研究

目的:观察龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++- ATPase活性的影响。方法:荷瘤小鼠分为治疗组（高剂量、中剂量、低剂量）和对照组（生理盐水组、环磷酰胺组）,分别测定各组肿瘤细胞膜的Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性。结果:龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性均有明显的抑制作用,并且其抑制作用呈量效正相关。结论:龙葵总碱这一作用可能是其抗肿瘤作用机理之一。     

基于多指标结合化学计量学的龙葵果质量评价研究

目的 采用多指标结合化学计量学的方法综合分析龙葵Solanumnigrum果质量及关键指标,为其质量评价提供科学依据。方法 采用HPLC法建立龙葵果特征指纹图谱及澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定方法,并测定浸出物含量,使用SAS 14.0、SIMCA14.1软件对上述指标进行聚类分析（hierarchical clustering analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）及偏最小二乘判别分析（discriminant analysis of partial least squares analysis,PLS-DA）,通过对吉林产地25批不同产区、不同采收期药材的分析,综合评价龙葵果质量及标志性成分。结果 建立的特征指纹图谱及澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定方法稳定性较好。HCA分析可将25批样品聚为2大类,分类主要与产区有关,I类药材为铁东区及梨树县的孤家子、榆树台产区;II类药材为梨树县的杏山、北夏家、泉眼沟、獾子洞产区。用3个主成分对龙葵果药材进行综合评价,结果表明I类药材综合得分及排名较高,质量较优。根据PLS-DA分析...     

龙葵甾体生物碱抗非小细胞肺癌网络药理学分析

目的 研究龙葵甾体生物碱抗非小细胞肺癌（NSCLC）的潜在作用靶点和通路，分析其抗NSCLC的可能作用机制。方法 查阅文献筛选出龙葵中具有抗NSCLC活性的甾体生物碱（SASN），通过SwissTargetPrediction，PharmMapper及GeneCards数据库分别获得SASN和NSCLC的全部靶点，利用Venny在线软件获取二者共同靶点，并运用Cytoscape软件构建“药物-成分-靶点-疾病”作用网络图，利用Metascape对共同靶点进行富集分析，进一步预测潜在通路。借助STRING数据库得到蛋白质-蛋白质相互作用网络（PPI），通过网络拓扑数据分析筛选出关键靶点，并通过蛋白免疫印迹法（Western blot）验证药物对关键靶点的影响。结果 经过筛选得到6个SASN，包括澳洲茄碱、澳洲茄边碱、澳洲茄胺、毛叶冬珊瑚碱、龙葵次碱和氮甲基澳洲茄碱，对SASN和NSCLC全部靶点取交集后得到SASN抗NSCLC的潜在作用靶点共有96个，京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析表明潜在靶点涉及的通路主要包括癌症通路、癌症蛋白聚糖通路和Forkhead box protein O （FoxO）通路等。PPI网络分析显示，蛋白激酶B1（Akt1），丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1），MAPK8，MAPK14，信号传导及转录激活蛋白3（STAT3）及原癌基因酪氨酸蛋白激酶（SRC）等15个靶点可能是SASN抗NSCLC的关键作用靶点；同时，Western blot结果显示龙葵生物碱可以显著下调Akt1，STAT3和SRC 3个关键蛋白的表达。结论 该研究预测了SASN抗NSCLC的潜在作用靶点和信号通路，获得了SASN抗NSCLC的关键作用靶点，并从15个关键靶点中选取3个关键蛋白进行了验证，验证结果与靶点预测相一致，为后续深入研究龙葵甾体生物碱抗NSCLC作用机制提供了科学的指导。     

龙葵抗肿瘤作用机制研究进展

对近年来龙葵抗肿瘤的活性成分及作用机制进行综述。大量实验研究表明龙葵碱可通过改变细胞膜的结构和功能、影响DNA和RNA的合成以及改变细胞周期分布来抑制肿瘤。龙葵糖蛋白（150×10³）可通过阻断NF-κB抗调亡通路、激活caspase级联反应、及促进NO的释放促进肿瘤细胞的调亡。     

龙葵补肾合剂治疗中晚期肝癌临床疗效观察

目的观察龙葵补肾合剂治疗中晚期肝癌的临床疗效。方法120例患者随机分成两组。治疗组60例给予口服龙葵右归饮合剂;对照组60例行肝动脉化疗栓塞（TACE）治疗。结果1/2年、1年期生存率治疗组分别为：83.33%、80%,对照组分别为：98.33%、96.67%（P〈0.01）;2年期生存率治疗组为80%,对照组为63.33%（P〈0.05）;3年期生存率治疗组为66.67%,对照组为63.33%,（P〉0.05）。3年期,生活质量改善率：治疗组为60%,对照组为23.33%（P〈0.01）;近期疗效有效率：治疗组为13.33%,对照组为43.33%（P〈0.01）;并发症和毒副作用出现率：治疗组为26.67%,对照组为88.33%（P〈0.01）。结论3年期两组病人的生存率无明显差异,但死亡高峰则明显不同,治疗组发生在0-1年期间,对照组发生在1-2年期间;治疗组近期疗效明显低于对照组,但在生活质量、并发症和毒副作用方面,治疗组疗效明显优于对照组。综合疗效评价,龙葵补肾合剂治疗中晚期肝癌具有提高生活质量,减少并发症和毒副作用的优势。     

HPLC同时测定新疆少花龙葵中绿原酸和芦丁的含量

目的：采用超声波提取,建立同时测定新疆少花龙葵中绿原酸和芦丁含量的高效液相色谱法。方法：色谱柱为安捷伦HC-C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.4%磷酸（50∶50）;检测波长为360 nm;柱温为30 ℃;流速为1.00 mL·min-1,低压梯度洗脱。结果：绿原酸和芦丁质量浓度分别在6.25~150 μg·mL-1（r=0.999 8）和6.25~150 μg·mL-1（r=0.999 9）呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.2%（RSD=1.3%,n=5）和100.9%（RSD=1.4%,n=5）。结论：该方法简便快速、重复性好、准确、可靠,适用于同时测定新少花龙葵中绿原酸和芦丁含量。     

龙葵甾体类生物碱对S180及Lewis肺癌移植瘤小鼠的影响

目的：观察龙葵甾体类生物碱对荷瘤（S180）小鼠及对Lewis肺癌移植瘤小鼠的影响，探讨部分作用机理。方法：分别采用接种S180移植性实体瘤及Lewis肺癌瘤株的方法造成两种荷瘤小鼠。注射给予药物后，观测荷瘤（S180）小鼠瘤重及抑瘤率、血清TNF-α及IL-2水平、胸腺及脾指数指标；观测Lewis肺癌移植瘤小鼠瘤重及抑瘤率、血清IL-6及IL-8水平。结果：ICR小鼠接种S180移植性实体瘤后，模型组肿瘤平均重量大于1g，血清TNF-α含量明显低于正常对照组；龙葵甾体类生物碱各组小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，瘤重明显减轻，龙葵甾体类生物碱各组均可以升高血清TNF-α、IL-2含量；C57BL／6J小鼠接种Lewis肺癌细胞后，4天皮下可见肿瘤。模型组小鼠血清IL-6和IL-8水平均明显下降，龙葵甾体类生物碱各给药组瘤重均低于模型组，并可以显著增加模型小鼠血清中IL-6和IL-8水平。结论：龙葵甾体类生物碱不仅具有抑制肿瘤增长的作用，还可以显著提高荷瘤小鼠血清TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8的水平，对肿瘤的治疗具有积极意义，这可能是其发挥抗肿瘤作用的机理之一。     

龙葵愈伤组织生长特性及次生代谢产物积累研究

目的 建立龙葵Solanumnigrum愈伤组织最优培养体系，研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累，为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法 研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响，采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比，运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量，TTC还原法测定细胞活力，邻苯二酚法测定多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性，氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，愈创木酚比色法测定过氧化物酶（peroxidase,POD）活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量，高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果 愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段，最适培养基为MS+1.43 mg/L NAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT，愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势，20 d时细胞活力达到最高峰...     

环境胁迫对龙葵形态特征及内在品质影响

目的通过研究环境胁迫对龙葵形态特征及内在品质影响,探索出影响龙葵药材质量的因素。为龙葵规范化栽培提供参考。方法采用盆栽方式,利用不同浓度硝酸钾,PEG6000及氯化钠对龙葵进行生理胁迫试验。利用物理测量法对龙葵的形态特征进行测量,采用水分测定及浸出物测定法、UV及HPLC分别对龙葵的水分、醇溶性浸出物、可溶性糖、多糖及澳洲茄碱进行测定。用SPSS16.0统计软件对龙葵形态特征进行多元方差分析。结果龙葵在不同的胁迫处理下,植株形态特征表现出显著差异,水分、醇溶性浸出物、可溶性糖、多糖及澳洲茄碱的含量差异也较大。结论适当的干旱、高盐低氮有利于龙葵的种植开发。     

龙葵果保鲜技术对澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量的影响

目的:研究龙葵果保鲜技术对其抗肿瘤成分澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量的影响。方法:采用独特的龙葵果保鲜技术保存龙葵鲜果,并采用高效液相色谱法对龙葵干果和保鲜处理的鲜果中澳洲茄碱、澳洲茄边碱进行含量测定,比较保鲜技术对其抗肿瘤有效成分含量的影响。结果:经保鲜技术处理的龙葵鲜果中澳洲茄碱和澳洲茄边碱的含量要比龙葵干果的含量高80%以上。结论:龙葵果保鲜技术可以明显提高龙葵药材中抗肿瘤有效成分的含量,值得推广使用。     

龙葵葶苈汤治疗肺癌大量恶性胸腔积液及对患者细胞免疫功能的影响

目的 观察龙葵葶苈汤内服联合顺铂（DDP）胸腔内灌注化疗治疗肺癌大量恶性胸腔积液的临床疗效及其对患者免疫功能的影响.方法 将患者44例随机分为实验组（葵葶苈汤口服＋DDP胸腔内灌注）21例和对照组（单纯DDP胸腔内灌注）23例,治疗3周后比较两种方案治疗恶性胸腔积液的临床疗效、对患者细胞免疫功能的影响及其DDP灌注化疗的毒副反应.结果 实验组客观有效率（ORR）为85.71％,对照组为43.48％;实验组治疗后CD3、CD4、及CD8阳性T细胞百分比明显升高（P＜0.05）,而对照组无明显变化（P＞0.05）;实验组胃肠道反应及血液学毒性总发生率为19.04％,对照组为60.87％.结论 龙葵葶苈汤内服联合DDP胸腔内灌注可显著提高肺癌大量恶性胸腔积液的临床疗,降低化疗不良反应发生率,提高患者机体的细胞免疫功能.     

不同产地的龙葵果中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定比较研究

目的比较不同采收期、同部位龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。方法采用高效液相色谱法测定不同产地龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。结果以吉林产的鲜龙葵果含含澳洲茄碱、澳洲茄边碱的量最高,安徽,辽宁,河北等地的龙葵干果的含量也较高。结论不同产地的龙葵果中鲜果与干果里面所含有澳洲茄碱以及澳洲茄边碱的含量存在显著性差异,应注意采时的产地和龙葵果的新鲜程度对龙葵药材质量的影响。