SphK/S1P信号通路与糖尿病肾病

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)作为糖尿病的一个重要微血管并发症,是终末期肾病的首要病因,多种因素参与其发生与发展.近年来发现高血糖可以刺激肾脏的SphK/S1P信号通路,通过MAPK、Smads、PKC、Rho家族的小GTPases的激活,从而引起系膜细胞的增殖和系膜基质(extracellular matrix,ECM))的累积,导致肾脏的纤维化,而通过对该通路的选择性干预可延缓DN的进展,为DN提供新的治疗措施.     

肾炎防衰液对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对于MCP-1表达的影响

目的:研究肾炎防衰液对糖尿病肾病大鼠的防治作用。方法:建立大鼠糖尿病肾病模型,随机分为模型组、贝那普利组和肾炎防衰液组,另设假手术组;给予贝那普利组和肾炎防衰液组分别灌胃以贝那普利混悬液(1.0 mg·kg-1·d-1)和肾炎防衰液(11.4 g·kg-1·d-1);模型组和假手术组灌以等量生理盐水。实验进入第8周后取材,检测血清肌酐、尿素氮,采用HE和Masson染色检测肾脏病理、免疫组化法检测肾组织MCP-1的表达。结果:各组大鼠血清尿素氮水平差异无统计学意义(P>0.05);模型组血清肌酐水平明显高于假手术组(P<0.05),而肾炎防衰液组较模型组为低(P<0.05);模型组肾小球硬化指数、肾小管损伤指数、肾小管间质纤维化指数以及肾组织中MCP-1表达显著高于假手术组(P<0.05);肾炎防衰液组肾小球硬化指数、肾小管损伤指数、肾小管间质纤维化指数以及MCP-1表达均较模型组为低(P<0.05)。结论:肾炎防衰液可以降低血清肌酐水平,减轻糖尿病肾病大鼠肾小球硬化及肾间质纤维化的程度,下调糖尿病肾病大鼠肾组织MCP-1的表达,延缓糖尿病肾病进展。     

SphK1/S1P信号通路在肾脏疾病中的作用

鞘氨醇-1-磷酸（sphingosine 1-phosphate,S1P）具有很高的生物学活性,它参与细胞的增殖、凋亡、代谢等多个生理过程,是治疗多种疾病的一个潜在靶点。鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase-1,SphK1)是一种广泛存在的脂类激酶,是维持体内S1P水平的关键调节酶,其在生物体内参与癌症、感染和炎症等诸多疾病的发生发展。目前已证实SphK1和S1P受体在肾脏中表达,并且多种肾脏疾病的发生发展与之相关,因此SphK1和S1P在肾脏疾病中作用受到人们越来越多的关注。本文就SphK1/S1P信号通路在肾脏疾病中的作用的研究现状进行综述,重点介绍SphK1/S1P信号通路及其在多种肾脏疾病进展中的作用。     

二氢槲皮素对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用及mTORC2/Akt信号通路的影响

目的:探讨二氢槲皮素(DHQ)对糖尿病肾病(DN)大鼠的肾脏保护作用及对mTORC2/Akt信号通路的影响。方法:用高脂高糖饲料饲养联合腹腔给予STZ方法制备DN模型。DHQ低、中、高剂量组大鼠灌胃给予DHQ,剂量依次为50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg,厄贝沙坦组灌胃给予厄贝沙坦17.5 mg/kg,对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水,持续12周,检测24 h尿蛋白,计算肾指数,对大鼠肾脏进行病理学检测并进行炎症和纤维化评分,对肾功能检测,同时检测mTORC2/Akt信号通路相关蛋白表达。结果:对照组大鼠肾小球结构正常清晰,未见炎症细胞及系膜增加;模型组大鼠见系膜增加、节段性肾小球硬化、炎性细胞浸润和间质纤维化; DHQ和厄贝沙坦干预可减轻肾小球损伤、炎性细胞浸润及间质纤维化。与对照组比较,其余各组大鼠炎症和纤维化评分、肾指数、尿蛋白、BUN、Scr、mTORC2、p-Akt和Rictor蛋白表达水平增加(P 0.05);与模型组相比,各DHQ剂量组和厄贝沙坦组大鼠炎症和纤维化评分、肾指数、尿蛋白、BUN、Scr、mTORC2、p-Akt和Rictor蛋白表达水平降低(P 0.05),且随着DHQ剂量的增加,DHQ各剂量组大鼠炎症和纤维化评分、肾指数、尿蛋白、BUN、Scr、mTORC2、p-Akt和Rictor蛋白表达水平逐渐降低,且呈剂量依赖性(P 0.05);厄贝沙坦组和DHQ高剂量组作用相似(P 0.05)。结论:DHQ可能通过调控mTORC2/Akt信号通路,有助于减轻DN大鼠模型的症状,发挥DN治疗作用。     

黄芪汤通过TLR4/NF-κB信号通路改善糖尿病肾病大鼠炎症反应的研究

目的 探讨通过建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的糖尿病肾病大鼠炎症模型,观察黄芪汤能否通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,来改善糖尿病肾病大鼠的炎症因子表达.方法 选择48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为6组,即对照组、对照组+LPS组、模型组、模型+LPS组、黄芪汤干预组、黄芪汤+LP...     

金钱草提取物对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及对肾组织Akt/GSK-3β信号通路的影响

目的:探讨金钱草提取物经Akt/GSK-3β信号通路对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用。方法:SD大鼠120只,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、金钱草提取物低、中、高剂量组,每组20只,雌雄各半。构建大鼠糖尿病肾病模型,并给予相应药物。检测大鼠血糖浓度和大鼠肾功能;制作HE切片,观察大鼠肾脏病理改变;检测大鼠肾脏Akt、GSK-3βmRNA表达水平; ELISA法检测大鼠肾脏Akt、GSK-3β蛋白水平表达。结果:正常对照组大鼠肾脏细胞结构完整,染色清晰,肾小管结构完整,模型组大鼠肾脏细胞大量坏死和肾小球出血;给予金钱草提取物和α-硫辛酸干预后,肾脏细胞结构完整,未见肾小球肥大及基底膜增厚。与正常对照组比较,模型组大鼠中期和末期血糖、24 h尿蛋白、肾脏指数、GSK-3βmRNA和蛋白表达水平均显著升高(P 0.05),肌酐清除率、Akt mRNA和蛋白表达水平显著降低(P 0.05)。给予金钱草提取物和α-硫辛酸干预后,金钱草提取物各剂量组和阳性对照组大鼠血糖、24 h尿蛋白、肾脏指数、GSK-3βmRNA和蛋白表达水平降低(P 0.05),且高剂量和中剂量组低于低剂量组,高剂量组低于中剂量组(P 0.05),阳性对照组和高剂量组差异无统计学意义(P 0.05);肌酐清除率、Akt mRNA和蛋白表达水平升高(P 0.05),且高剂量和中剂量组高于低剂量组,高剂量组高于中剂量组(P 0.05),阳性对照组和高剂量组差异无统计学意义(P 0.05)。结论:金钱草提取物对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能是通过抑制GSK-3β、促进Akt蛋白的表达水平,从而扭转糖尿病对大鼠肾脏造成的损伤。     

Smad信号通路在糖尿病肾病的作用

糖尿病肾病（DN）是糖尿病最严重和最常见的慢性并发症之一,是终末期。肾衰竭的主要原因之一,发病机制目前尚不清楚。转化生长因子-β（TGF—β）在DN发病中的作用不容忽视。Smad蛋白是目前所知TGF—β受体的胞内激酶底物,介导了TGF-8的胞内信号转导。本文就Smad信号通路在DN发病中的作用及研究进展作一综述。     

Vaspin对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的:探讨脂肪细胞因子Vaspin对2型糖尿病肾病大鼠血糖水平、肾脏组织炎症因子水平及肾功能的影响。方法:以SD大鼠为实验对象,高脂饲养联合链脲佐菌素(50 mg/kg,单次腹腔注射)构建2型糖尿病肾病大鼠模型。大鼠分为正常对照组(NC组,n=10),糖尿病肾病组(DN组,n=8),Vaspin干预组(Vaspin组,n=8)。Vaspin组按每日960 ng/kg剂量经腹腔注射Vaspin蛋白溶液,NC组和DN组注射等体积生理盐水作为对照,共干预6周。干预结束后,通过口服葡萄糖耐量试验评估大鼠糖耐量情况,留取24 h尿液、血清和肾脏组织,检测尿蛋白排泄量、血尿素氮、血肌酐,计算肾比重。采用ELISA检测各组大鼠肾脏组织中炎症因子TNF-α、IL-6、MCP-1和ICAM-1的水平。结果:与NC组相比,DN组OGTT曲线下面积、肾脏指数、尿蛋白排泄量、血尿素氮、血肌酐均升高(P0.05)。Vaspin组较DN组上述指标明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Vaspin可通过降低2型糖尿病肾病大鼠血糖水平和肾脏组织炎症因子的表达,改善肾功能。     

甜菜碱通过IGF-1R/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失的保护作用

目的探讨甜菜碱(betaine,TCJ)对2型糖尿病大鼠骨量流失的影响,并探讨可能的机制。方法30只大鼠被随机分为对照组(CON)、模型组(MOD)及甜菜碱组(TCJ),每组10只,其中对MOD组和TCJ组建立2型糖尿病模型。随后TCJ组大鼠每天接受50 mg/kg甜菜碱治疗12周,待治疗结束后通过Micro-CT检测、HE染色切片以及蛋白质印迹检测。结果治疗12周后,与MOD组相比,三点弯曲试验、Micro-CT和HE染色切片结果显示TCJ组的大鼠骨小梁数量、骨强度和骨密度得到明显改善(P<0.05)。TCJ组大鼠最大载荷和弹性模量、骨密度(bone mineral density,BMD)、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较MOD组明显改善(P<0.05)。和MOD组比较,TCJ组β-catenin表达水平明显上调,而p-IGF-1R、p-GSK-3β、p-β-catenin、IGF-1R和GSK-3β表达水平显著下调,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论甜菜碱通过IGF-1R/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失起到保护作用。     

膜肾颗粒通过抑制NF-κB信号通路保护膜性肾病大鼠肾脏

目的:探讨膜肾颗粒通过抑制NF-κB信号通路减轻膜性肾病大鼠的肾损伤和炎症反应。方法:将SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组通过注射阳离子化牛血清白蛋白(cBSA)构建MN模型,随机分为模型组、膜肾颗粒组及环孢素A组。给药4周后,检测24 h UTP、TC、BUN及Scr水平,肾组织行常规病理,蛋白免疫印迹法检测肾组织目的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组24 h UTP、TC水平显著升高(P<0.01),p-NF-κB p65、NLRP3和IL-1b表达显著升高(P<0.01),Nephrin和Podocin表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组24 h UTP、TC水平显著降低(P<0.01),p-NF-κB p65、NLRP3和IL-1b表达明显降低(P<0.01,P<0.03),Nephrin和Podocin表达显著升高(P<0.01)。结论:膜肾颗粒对膜性肾病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。     

缬沙坦对糖尿病肾病大鼠MEK/ERK/Nrf2通路及肾脏纤维化的影响

目的:探索缬沙坦对糖尿病肾病大鼠MEK/ERK/Nrf2通路及肾脏纤维化的影响.方法:复制糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型组、缬沙坦低剂量组、缬沙坦中剂量组、缬沙坦高剂量组、二甲双胍(阳性对照)组,每组12只,另取12只SD大鼠设为假手术组,分组处理后,测定大鼠血糖、血脂总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)、尿微量白蛋白...     

龙鹿胶囊通过SIRT1/eNOS信号通路对糖尿病大鼠勃起功能障碍的影响

目的 探讨龙鹿胶囊对糖尿病勃起功能障碍(DMED)大鼠勃起功能的影响及作用机制.方法 腹腔注射STZ建立糖尿病大鼠模型,建模10周后用APO筛选DMED大鼠,将实验动物分为:A、正常组;B、DMED组;C、龙鹿胶囊组;D、西地那非组,其中C组每日予以360mg/kg的龙鹿胶囊原药进行灌胃,D组予以5mg/kg西地拉非灌...     

三七总皂苷通过抑制RAGE/MAPK信号通路减轻糖尿病性骨质疏松大鼠的炎症损伤

目的 探究三七总皂苷(PNS)调控晚期糖基化终产物受体(RAGE)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对糖尿病性骨质疏松症(DOP)大鼠炎症损伤的影响。方法 将SD大鼠分成对照组、模型组、二甲双胍(MET)组(100 mg/kg)、PNS低剂量组(PNS-L组,10 mg/kg PNS)、PNS高剂量组(PNS-H组,20 mg/kg PNS)、PNS-H+空载体质粒组(20 mg/kg PNS+15μL空载体质粒)、PNS-H+RAGE过表达组(20 mg/kg PNS+15μL RAGE过表达质粒);除对照组外,其余各组大鼠通过高糖高脂饲料喂养及腹腔注射链脲佐菌素进行DOP模型构建;造模成功后各组进行相应给药处理。采用双能X线骨密度检测仪检测大鼠股骨骨密度(BMD);血糖测试仪及酶联免疫吸附法检测空腹血糖(FBG)、血清空腹胰岛素(FINS)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、碱性磷酸酶(ALP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;三点弯曲实验和苏木精-伊红染色分别检测股骨生物力学及病理形态变化;蛋白印迹法检测RAGE/MAPK通路蛋白表达。结果 ...     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的影响

目的：观察益肾胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织JAK/STAT信号通路影响,探讨益肾胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法：将Wistar大鼠制备成DN模型。随机分为4组,即正常对照组（N组）、DN模型组（DN组）、益肾胶囊治疗组（625mg·kg-1.d-1）、氯沙坦钾治疗组（30mg·kg-1.d-1）。实验周期12周。期间检测大鼠血糖和24h尿蛋白定量,通过光镜及电镜观察肾脏组织病理形态学的变化;采用免疫组化方法检测肾组织磷酸化JAK2（p-JAK2）、磷酸化STAT3（p-STAT3）表达及转化生长因子β1（TGF-β1）表达变化。结果：12周末,DN组大鼠肾组织中p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1表达显著高于同期正常对照组（P〈0.05）。益肾胶囊治疗组和氯沙坦钾治疗组肾组织中p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1表达显著低于同期DN组（P〈0.05）;24h尿蛋白定量显著低于同期DN组（P〈0.05）;病理损伤较同期DN组改善。结论：益肾胶囊可能部分通过抑制DN大鼠肾组织JAK/STAT通路调节肾组织TGF-β1表达,发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

硝苯地平对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用机制的探讨

探讨血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）在糖尿病肾病（DN）发病中的作用以及钙离子拮抗剂硝苯地平对肾脏保护作用的机制。 方法 大鼠随机分为3组：健康对照（N）组、DN组和硝苯地平治疗（T）组，每组10只。采用链脲菌素诱发DN大鼠模型，治疗组以硝苯地平控释片15 mg•kg-1•d-1干预治疗，治疗第2周和4周，检测大鼠平均动脉压（MAP）、尿蛋白量（24 h）、Scr水平；用免疫组化和Western印迹方法检测大鼠肾脏VEGF、MMP-9、TIMP-1的蛋白表达水平；RT-PCR法检测VEGF、MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达。 结果 与N组比较，DN组大鼠尿蛋白量、Scr水平和MAP均显著上升[分别为(78.87±17.62)比(6.30±1.91) mg/24 h、(203.88±18.08)比(84.98±10.09) μmol/L、(141.1±8.7)比(99.8±3.8) mm Hg， P均 < 0.05]；肾组织VEGF、MMP-9、TIMP-1 mRNA和蛋白表达增强（P < 0.05），且MMP-9/TIMP-1比值明显下降（P < 0.05）。与DN组比较，T组尿蛋白量（24 h）[（58.35±10.48） mg]、Scr水平[（165.81±15.86） μmol/L]和MAP[（102.6±4.4） mm Hg]均显著下降（P均 < 0.05）；肾组织VEGF表达下调（P < 0.05），MMP-9、TIMP-1 mRNA和其蛋白表达水平显著增高（分别P < 0.05和P < 0.01），MMP-9/TIMP-1比值显著升高（P < 0.05）。DN大鼠肾组织VEGF mRNA水平与尿蛋白量（24 h）呈正相关（r = 0.748，P < 0.05），与MMP-9/TIMP-1的比值呈负相关（r = -0.711, P < 0.05）。 结论 VEGF、MMP-9和TIMP-1可能参与了DN的发病过程，硝苯地平可能通过影响VEGF、MMP-9及TIMP-1的表达而实现对肾脏的保护作用。     

甜菜碱通过IGF-lR/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失的保护作用

目的 探讨甜菜碱（betaine,TCJ)对2型糖尿病大鼠骨量流失的影响,并探讨可能的机制。方法30只大鼠被随机分为对照组（CON)、模型组（MOD)及甜菜碱组（TCJ),每组10只,其中对MOD组和TCJ组建立2型糖尿病模型。随后TCJ组大鼠每天接受50 mg/kg甜菜碱治疗12周,待治疗结束后通过Micro-CT检测、HE染色切片以及蛋白质印迹检测。结果 治疗12周后,与MOD组相比,三点弯曲试验、Micro-CT和HE染色切片结果显示TCJ组的大鼠骨小梁数量、骨强度和骨密度得到明显改善（P<0.05)。TCJ组大鼠最大载荷和弹性模量、骨密度（bone mineral density, BMD)、TV/BV、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp较 MOD 组明显改善（P<0. 05)。和 MOD 组比较,TCJ 组 β-catenin 表达水平明显上调,而 p-IGF-lR、p-GSK-3β、p-β-catenin、IGF-1R 和GSK-3β表达水平显著下调,比较差异有统计学意义（P<0.05)。结论 甜菜碱通过IGF-lR/β-catenin信号通路介导对2型糖尿病大鼠骨流失起到保护作用。     

丹皮酚通过CXCL16/ROCK通路发挥对肾小球肾炎大鼠的保护作用

目的:观察丹皮酚(PAE)对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)大鼠肾损伤的影响,并探究其对CXC配体16(CXCL16)/Rho相关蛋白激酶(ROCK)通路的作用。方法:将SD大鼠分为假手术(Sham组)、MsPGN组、PAE组、醋酸泼尼松(PAT)组、PAE+CXCL16组,10只/组,除Sham组均采用改良血清免疫法制备MsPGN模型。造模后1周,相应大鼠腹腔注射100 mg/kg PAE溶液、5 mg/kg PAT溶液、100 mg/kg PAE溶液+40 mg/kg CXCL16溶液,Sham组及MsPGN组给予生理盐水,连续给药28 d。采用考马斯亮蓝法检测24 h尿液总蛋白量,苏木素伊红(HE)、过碘酸-雪夫(PSA)染色观察肾组织形态,TUNEL法检测肾小球细胞凋亡,ELISA试剂盒检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平和肾组织匀浆中IL-18、IL-1β、TNF-α水平,Western blot检测肾组织CXCL16、RhoA、ROCK1、ROCK2及NF-κB蛋白表达。结果:Sham组大鼠状态正常,肾小球未见明显系膜增生,形态正常;MsPGN组大鼠活动、精神等状...     

桃红四物汤对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾脏的保护及ERK1/2/HIF-1α信号通路的影响

目的 探讨桃红四物汤对膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulone?phritis,MsPGN)大鼠的治疗作用及对细胞外信号调控蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated ki?nase1/2,ERK1/2)/缺氧诱导因子1α(hypoxi...     

MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病大鼠肾脏损害中作用及厄贝沙坦干预的影响

目的：探讨MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病大鼠肾脏损害中作用及厄贝沙坦对二者的影响.方法：采用高糖高脂饮食合并链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病肾病大鼠模型.将大鼠随机分为正常对照NC 组、糖尿病肾病DN组、厄贝沙坦DI组,检测各组大鼠24 h尿量、24 h尿白蛋白定量（24 h UTP）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肾重指数（KI）;行HE染色观察各组大鼠病理学形态,免疫组化观察MCP-1、ICAM-1蛋白的表达,RT-PCR观察MCP-1 mRNA、ICAM-1mRNA的表达.结果：与NC组比较,DN组大鼠肾脏病理改变加重,24 h尿量、24 h UTP、KI、BG、Scr、BUN、肾脏组织中MCP-1mRNA和ICAM-1mRNA及蛋白水平均显著增加,差异均有统计学意义（P＆lt;0.01）;与DN组比较,DI组大鼠BG、BUN、Scr有所改善,差异无统计学意义;肾脏病理改变减轻,其余指标明显降低,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.结论：MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病肾脏损害过程中可能起重要作用;厄贝沙坦能够减轻糖尿病肾病肾组织MCP-1、ICAM-1的表达,缓解了肾脏病理损伤.     

氯沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏的炎症抑制作用

目的：观察氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的炎症抑制作用。方法：采用链脲佐菌素（streptomtoein，STZ）65mg／kg腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。试验分正常对照组、模型组、治疗组，后一组于模型成功后1周给予氯沙坦20mg／kg灌胃，共12周。分别测定3组24h尿蛋白排泄量、血肌酐、肾重／体重、血浆C反应蛋白（CRP）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；观察肾脏病理形态学变化；应用免疫组化法检测肾组织T011样受体4（TLR4）、核因子-κB（NF-κB）的蛋白表达；RT-PCR检测肾组织TLR4的核酸表达。结果：模型组与对照组相比：模型组大鼠24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾重／体重明显升高，肾小球肥大，细胞增生，PAS阳性物质沉积增多；血CRP、TNF-α含量及肾组织TLR4、NF-κB的表达明显增加。经氯沙坦治疗后大鼠血CRP、TNF-α含量下降，肾组织TLR4、NF-κB的表达亦减弱，治疗前后比较存在差异（P〈0．05）。结论：氯沙坦对糖尿病肾病具有保护作用，其作用机制还可能是通过下调NF-κB、TLR4的表达，降低血浆CRP、TNF-α含量，抑制炎症反应而减少糖尿病肾病损伤。