促红细胞生成素对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用研究

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用及机制。方法将30只雄性SD大鼠随机均分成假手术组、模型组和EPO组,每组10只。EPO组在术前1h给予腹腔注射促红细胞生成素(1 000U/kg),假手术组和模型组则给予等体积生理盐水腹腔注射。EPO组和模型组夹闭左侧肾蒂45min,去除右肾,再灌注24h构建大鼠肾脏IRI模型;假手术组操作同上,但不夹闭左侧肾蒂。恢复肾脏血流灌注24h后收集大鼠肾脏和血清。采用酶联接免疫吸附剂检测血肌酐(SCr),尿素氮(BUN)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、干扰素(inteferon gamma,IFN-γ)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factors-α,TNF-α)以及抗炎细胞因子白介素10(IL-10)和转化细胞生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的表达;逆转录聚合酶链反应检测肾脏IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-10和TGF-β的mRNA水平;免疫蛋白印记法检测促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)、磷酸化促红细胞生成素受体(pEPOR)、酪氨酸激酶-2(JAK2)、信号转导及转录激活子3(STAT3)、磷酸化酪氨酸激酶-2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活子3(p-STAT3)表达水平;过雪夫染色检测肾组织病理形态。结果与假手术组相比,模型组p-EPOR、p-JAK2、p-STAT3、SCr、BUN、IL-6、TNF-α、IFN-γ表达水平以及肾组织病理改变均明显增加,而IL-10和TGF-β表达明显减少以及EPOR、JAK2和STAT3表达无差异;与模型组相比,EPO组p-EPOR、p-JAK2、p-STAT3、IL-10和TGF-β表达增加,而SCr、BUN、IL-6、TNF-α、IFN-γ表达水平以及肾组织病理改变明显减少,而EPOR、JAK2和STAT3表达依然无差异。结论 EPO预处理可通过抑制炎症减轻肾脏IRI,其作用机制与进一步促进EPOR/JAK2/STAT3信号途径活化相关。     

辣椒素减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤的作用

目的探讨辣椒素减轻大鼠肾缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的作用及其机制。方法成年健康清洁雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为四组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)、辣椒素组(CAP组)和辣椒素+辣椒平组(CPZ组),每组10只。S组仅分离双侧肾蒂不结扎,IR组、CAP组和CPZ组通过动脉夹夹闭双侧肾蒂45 min,再灌注24 h的方法建立肾缺血-再灌注模型。S组与IR组在同时点注射等容量生理盐水,CAP组和CPZ组大鼠于缺血前30 min经腹腔注射辣椒素30 mg/kg。CPZ组大鼠于缺血前45 min经腹腔注射辣椒平20 mg/kg。于再灌注24 h后取血标本检测大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)浓度。采用Western blot法检测Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导子及转录激活子3(STAT3)、磷酸化Janus蛋白酪氨酸激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导子及转录激活子3(P-STAT3)和caspase-3的蛋白含量。取肾组织观察组织病理学改变,检测凋亡率(AI)。结果与S组比较,IR组、CAP组和CPZ组血清Cr、BUN、IL-6、TNF-α、IL-10浓度、P-JAK2/JAK2、P-STAT3/STAT3和caspase-3蛋白含量明显升高(P0.05),肾小管上皮细胞出现不同程度的肿胀,空泡变性,刷状缘脱落,部分肾小管管腔扩张,肾小管损伤评分和AI明显升高(P0.05);与IR组和CPZ组比较,CAP组血清Cr、BUN、IL-6、TNF-α浓度、P-JAK2/JAK2、P-STAT3/STAT3和caspase-3含量明显降低(P0.05),肾小管损伤减轻,肾小管损伤评分和AI明显降低(P0.05),IL-10浓度明显升高(P0.05)。结论辣椒素可减轻缺血-再灌注引起的大鼠肾组织损伤,其机制可能与抑制IL-6/JAK2/STAT3通路,抑制炎症反应,减少细胞凋亡和组织损伤有关。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的影响

目的：观察益肾胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织JAK/STAT信号通路影响,探讨益肾胶囊对DN大鼠肾脏保护作用的可能机制。方法：将Wistar大鼠制备成DN模型。随机分为4组,即正常对照组（N组）、DN模型组（DN组）、益肾胶囊治疗组（625mg·kg-1.d-1）、氯沙坦钾治疗组（30mg·kg-1.d-1）。实验周期12周。期间检测大鼠血糖和24h尿蛋白定量,通过光镜及电镜观察肾脏组织病理形态学的变化;采用免疫组化方法检测肾组织磷酸化JAK2（p-JAK2）、磷酸化STAT3（p-STAT3）表达及转化生长因子β1（TGF-β1）表达变化。结果：12周末,DN组大鼠肾组织中p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1表达显著高于同期正常对照组（P〈0.05）。益肾胶囊治疗组和氯沙坦钾治疗组肾组织中p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1表达显著低于同期DN组（P〈0.05）;24h尿蛋白定量显著低于同期DN组（P〈0.05）;病理损伤较同期DN组改善。结论：益肾胶囊可能部分通过抑制DN大鼠肾组织JAK/STAT通路调节肾组织TGF-β1表达,发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路及α-SMA、FN的影响

目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠24h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、JAK/STAT及α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)的影响及其机制。方法:SD大鼠55只,随机留取10只为正常对照组(N)。利用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DN大鼠模型。造模成功大鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病模型组(DN)、益肾胶囊治疗组(DN+Y)、氯沙坦钾治疗组(DN+L)、氯沙坦钾+益肾胶囊治疗组(DN+L+Y),每组10只,连续灌胃12周。于实验的12周检测24h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测血糖、BUN、Scr;取大鼠肾组织做组织病理学观察;免疫组化法检测肾组织磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、α-SMA、FN的表达。结果:实验12周末,与DN组比较,益肾胶囊治疗组24h尿蛋白定量、BUN、Scr明显降低(P<0.05),肾组织形态学改变较轻,p-JAK2、p-STAT3、α-SMA、FN的表达显著降低(P<0.05)。氯沙坦钾联合益肾胶囊治疗组与氯沙坦钾治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的活化,下调α-SMA、FN的表达,延缓了糖尿病肾病的进展;益肾胶囊联合氯沙坦钾可更好地保护肾脏功能,提示二者联合使用有协同作用。     

罗格列酮对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的研究罗格列酮对肾缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制。方法将60只大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注损伤组、罗格列酮10 mg/kg组、罗格列酮20 mg/kg组、罗格列酮40 mg/kg组和罗格列酮80 mg/kg组,每组各10只。利用血管夹夹闭大鼠双侧肾蒂构建肾缺血再灌注损伤模型。ELISA检测大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达量;Western blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和p-PPAR-γ表达水平;RT-PCR检测肾脏IL-8、TNF-α和IL-6信使核酸序列(mRNA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;TBA法检测丙二醛(MDA)的含量;过碘酸雪夫氏(PAS)染色检测肾组织病理形态。结果与假手术组相比,缺血再灌注损伤组肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6、p-PPAR-γ以及MDA表达水平均明显增加,而CAT、GPX和SOD活性明显降低以及PPAR-γ表达差异无统计学意义;与缺血再灌注损伤组相比,罗格列酮预处理可明显减少肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6以及MDA表达水平,但可明显增加CAT、GPX和SOD活性以及p-PPAR-γ表达水平,但对PPAR-γ表达水平无影响。结论罗格列酮预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护,其作用机制与激活PPAR-γ抑制氧化应激和炎症相关。     

右美托咪定通过抑制JAK2/STAT3通路改善脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的研究右美托咪定对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠JAK2/STAT3通路的作用。方法雄性昆明小鼠36只,随机均分为三组:正常组(C组)、模型组(L组)和右美托咪定预处理组(D组)。取小鼠右肺下叶,称量并计算湿/干比重(W/D),对右肺上叶进行苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理学改变,BCA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,用ELISA试剂盒检测BALF上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及髓过氧化物酶(MPO)水平;qRT-PCR定量分析肺组织中TNF-α、IL-6mRNA水平;Western blot方法检测肺组织中p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3蛋白的含量。结果与L组比较,C组、D组肺损伤评分明显降低、小鼠肺W/D、BALF中蛋白含量明显减少,BALF中TNF-α、IL-6及MPO浓度明显降低,肺组织TNF-α和IL-6mRNA表达明显减少,p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3相对量明显减少(P0.05)。结论右美托咪定可能通过抑制JAK2/STAT3通路减轻LPS诱导的小鼠ALI。     

缺血后处理对小鼠肠缺血再灌注致肾损伤时Nrf2蛋白表达的影响

目的 评价缺血后处理对小鼠肠缺血再灌注致肾损伤时核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达的影响.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠36只,9～12周,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理+缺血再灌注组(IPO组).采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min恢复灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型,IPO组于缺血45 min时再灌注30s,缺血30s,重复3次后恢复灌注.于再灌注2h时采集颈动脉血样,然后处死小鼠,取肾组织,测定血清BUN、Cr和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平,检测肾组织Nrf2和HO-1蛋白表达、MDA含量、SOD活性、TNF-α、IL-6和IL-10的含量.显微镜下观察肾组织病理学结果,并行病理学损伤评分.结果 与S组比较,I/R组血清BUN、Cr和NAGL浓度升高,肾脏组织Nrf2及HO-1蛋白表达上调,MDA含量升高,SOD活性降低,肾脏组织病理学损伤评分升高(P＜0.05);与I/R组比较,IPO组血清BUN、Cr和NAGL浓度降低,肾脏组织Nrf2及HO-1蛋白表达上调,MDA含量降低,SOD活性升高,肾脏组织病理学损伤评分降低(P＜0.05).各组肾脏组织TNF-α、IL-6和IL-10含量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 缺血后处理可减轻小鼠肠缺血再灌注致肾损伤,其机制可能与促进Nrf2蛋白表达,从而上调HO-1蛋白表达有关.     

PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在α7nAChR激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在α7亚基烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠60只,体重290～ 320 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=15):缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)、缺血后处理组(IPOC组)和α7nAChR激动剂后处理组(PNU组).4组采用结扎左冠状动脉前降支30 min时进行再灌注的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型.IPC组进行缺血预处理,缺血5min再灌注5min,共3个循环,IPOC组再灌注前进行缺血后处理,再灌注10 s缺血10s,共3个循环.PNU组再灌注前即刻腹腔注射特异性α7nAChR激动剂PNU282987 2.4 mg/kg.再灌注60 min时取5只大鼠,取心肌组织,测定Akt mRNA、STAT3 mRNA、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化STAT3( p-STAT3)的表达水平.再灌注180 min时取10只大鼠,取心肌组织,测定心肌梗死面积.结果 与I/R组比较,IPC组心肌组织STAT3 mRNA和p-Akt表达上调,IPOC组心肌组织p-Akt和p-STAT3表达上调,PNU组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05),IPC组、IPOC组和PNU组心肌梗死面积缩小(P＜0.05).结论 α7nAChR激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与PI3K/Akt和JAK/STAT两条信号转导通路无关.     

Nrf2/TGF－β通路在肾小管间质纤维化中的作用及机制

目的探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)/转化生长因子-β(TGF-β)通路在失神经支配肾脏缺血再灌注损伤(IRI)导致的肾小管间质纤维化(TIF)中的作用及机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(均n=12):假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(IR组)、失神经假手术组(RDN组)和失神经肾脏缺血再灌注组(DIR组)。分别于造模后1 d或7 d取材, 利用苏木精伊红(HE)染色法观察肾脏病理学改变、马松染色法观察TIF程度及免疫组化观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达, 检测血尿素氮、肌酐和中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、白细胞介素-4、10、13(IL-4、IL-10、IL-13)水平, 蛋白印迹法检测Nrf2、TGF-β和磷酸化母亲DPP同源物3(果蝇)(Smad3)蛋白表达。结果与Sham组比较, 再灌注1 d组(IR-1)和DIR-1组肾脏病理损伤、血清尿素氮、肌酐和NGAL水平、肾组织MDA、IL-4、IL-10和IL-13水平升高而SOD活性降低, Nrf2、转化生长因子(TGF)-β...     

静脉注射含饱和氢气生理盐水减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 研究静脉注射含饱和氢气生理盐水对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 健康、雄性的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只.假手术组(SO组)小鼠仅接受中线开腹、双侧肾蒂游离及关腹操作;缺血再灌注组(IR组)小鼠用无损伤动脉夹同时钳夹双侧肾蒂,阻断45 min,制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水,5 ml/kg;实验组小鼠制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射含饱和氢气生理盐水,5 ml/kg.各组小鼠于肾脏再灌注6 h时检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr);检测肾组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;观察肾脏组织形态学变化并检测肾小管上皮细胞的凋亡情况;观察肾组织中巨噬细胞的浸润情况;检测各组小鼠肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-17 mRNA的水平.结果 实验组血清BUN和Scr水平明显低于IR组(P<0.05).实验组肾组织病理改变较IR组明显减轻,其肾小管损伤评分明显低于IR组(P<0.01),肾小管上皮细胞凋亡明显轻于IR组(P<0.05).实验组肾组织内MDA含量低于IR组(P<0.05).实验组小鼠肾组织内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润较IR组减少(P<0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17mRNA的水平均低于IR组(P<0.05).结论 静脉注射含饱和氢气生理盐水能够在一定程度上减轻肾脏IR损伤,其机制可能与抑制肾脏IR后炎症反应有关.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及作用机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和EGCG(低,中,高)剂量组,每组10只。利用血管夹夹闭大鼠双侧肾蒂45 min,构建大鼠肾缺血再灌注损伤模型。恢复肾脏血流灌注24 h后,处死大鼠,收集血清。利用ELISA法检测血清肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)、干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子(tumor meerosis factor-α,TNF-α)和白介素6(interleukin-6,IL-6)表达水平;取肾脏标本PAS染色法观察肾组织病理形态;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(Cata-lase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性;硫代巴比妥酸法检测丙二醛(malonaldehyde,MDA)的含量;免疫蛋白印记(Western blotting)法检测p53、Wnt、p21和β-catenin表达水平;实时定量PSCR(RTPSCR)检测肾脏IFN-γ、TNF-α和IL-6含量。结果与假手术组相比,模型组SCr、BUN、IFN-γ、TNF-α、IL-6、MDA、p53、Wnt、p21、β-catenin、IFN-γ、TNF-α和IL-6表达水平以及肾组织病理改变均明显增高,而CAT,GPx和SOD活性明显降低。与模型组相比,EGCG高剂量组SCr、BUN、IFN-γ、TNF-α、IL-6、MDA、p53、Wnt、p21、β-catenin、IFN-γ、TNF-α和IL-6表达水平以及肾组织病理改变均明显降低,而CAT,GPX和SOD活性明显增高。结论 EGCG预处理可通过抑制炎症和氧化应激而减轻肾脏缺血再灌注损伤,其作用机制与抑制Wnt/β-catenin/p53信号通路激活相关。     

缺血后处理减轻肾缺血再灌注损伤后肾小管间质的纤维化

目的 观察缺血后处理可以减轻大鼠肾缺血再灌注损伤(IPI)后肾小管间质纤维化的作用及其机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,摘除右肾后对左肾行缺血后处理,即10s再灌注,10 s缺血,6次循环后再灌注12周.实验动物分为缺血再灌注损伤组(IRI),缺血后处理组(IPO)和假手术组(Sham),全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),Masson特殊染色法观察小管间质纤维化程度;Western blotin法测定α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF-β)和磷酸化Smad2蛋白表达(p-Smad2);免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和TGF-β1的分布.结果 IRI组和IPO组较Sham组出现了明显肾间质纤维化,但是IPO组肾间质纤维化与IRI组比较有所减轻;α-SMA、TGF-β1和p-Smad2的水平明显减低,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肾脏缺血再灌注损伤可以引起小管间质纤维化.缺血后处理可以影响此病理改变,其保护机制可能为缺血后处理抑制TGF-β1和p-Smad2信号通路激活.     

红景天苷通过JAK2/STAT3通路抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡

目的观察红景天苷对退变髓核细胞凋亡和炎症反应的影响,并探究其与JAK2/STAT3信号通路的关系。方法通过氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)培养建立退变髓核细胞模型,退变细胞分别予浓度为10μg/mL、30μg/mL和50μg/mL的红景天苷培养液。后续实验选择30μg/mL浓度进行,分为Control组、OGD组、红景天苷组、AG490(JAK2/STAT3信号通路抑制剂)组和红景天苷联合AG490干预组。RT-PCR法检测髓核细胞蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原(Col2a1)表达水平;Western blot检测红景天苷对髓核细胞p-JAK2和p-STAT3蛋白水平的影响;ELISA检测上清液中炎症相关因子TNF-α、IL-1β和IL-6的表达水平,流式细胞术检测髓核细胞的凋亡。结果与Control组相比,OGD组Aggrecan和Col2a1 mRNA表达明显降低,炎症相关因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平明显上调。与OGD组相比,红景天苷组显著抑制细胞凋亡以及炎症相关因子TNF-α、IL-1β和IL-6的释放,同时,我们发现,AG490组和红景天苷联合AG490干预组上述指标均明显降低,其中红景天苷联合AG490干预组各检测指标较AG490组略低。红景天苷联合AG490干预明显改善髓核细胞的凋亡和炎症反应,并抑制JAK2和STAT3的磷酸化水平。结论红景天苷可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路的活化而减轻退变髓核细胞炎症因子的产生和细胞凋亡。     

丙泊酚对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨丙泊酚预处理对急性肾缺血再灌注损伤(acute renal ischemia reperfusion injury ,ARIRI)的保护作用及其机制.方法 采用完全随机研究设计(randomized controlled trial,RCT),健康近交系清洁级的雄性SD大鼠63只,随机分为3组:假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、丙泊酚预处理组(C组),每组21只SD大鼠.采用切除右侧肾,用无损伤微动脉夹夹闭左侧肾蒂60分钟后解除阻断,建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型.用24号套管针股静脉穿刺置管,实验过程中各组使用微量注射泵注入不同注射液.分别于手术前15分钟、再灌注后2小时、24小时留取血和肾组织标本同时处死大鼠,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及观察这三个时点肾组织的病理学改变.结果 丙泊酚预处理组各个时点的肾组织病理学变化均轻于缺血再灌注组.缺血再灌注组中血清BUN、Cr、MDA和TNF-α水平增加均高于丙泊酚预处理组(p＜0.05),丙泊酚预处理组血清SOD、IL-6水平均高于缺血再灌注组(p＜0.05).结论 丙泊酚预处理组血清BUN、Cr、MDA、TNF-α、SOD、IL-6水平与缺血再灌注组均有统计学差异.结果 表明丙泊酚能减少氧自由基释放,抑制和减少炎症反应,在急性肾缺血再灌注损伤能起到保护肾脏的作用.     

蛇床子素预处理对肾脏缺血再灌注损伤炎症因子表达的影响

目的:探讨肾脏缺血再灌注损伤时致炎症因子TNF-α、IL-8、IL-6的表达及蛇床子素对其的保护作用及机制。方法:建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型。我们随机将30只大鼠分为3组,假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IRI)、蛇床子素干预组(Osthole),收集各组血液和肾脏标本,分析肾功能和组织学变化。采用RT-PCR和ELISA分析肾组织和血液TNF-α、IL-8、IL-6的表达。结果:与IR组相比,Osthole预处理组显著改善了肾功能和肾脏组织学变化,以及由IR损伤导致的TNF-α、IL-8、IL-6的表达(P<0.05)。结论:蛇床子可以通过抑制炎症保护肾脏缺血再灌注损伤,蛇床子素可能是一种防治缺血再灌注损伤的新的治疗措施。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注时小胶质细胞极化及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的探讨亚低温对大鼠脑缺血再灌注时小胶质细胞极化及酪氨酸激酶2/信号传导及转录活化因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠45只, 8周龄, 体质量260～280 g, 采用随机数字表法分为3组(n=15):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)和亚低温组(H组)。I/R组和H组采用大脑中动脉闭塞法制备脑缺血再灌注损伤模型, 阻断2 h后恢复灌注, 期间维持直肠温度36～37 ℃;H组于再灌注即刻用75%酒精行体表降温3 h, 维持直肠温度32～33 ℃。于再灌注24 h时行改良神经功能缺损评分(mNSS评分), 随后麻醉下处死大鼠取脑, TTC染色观察脑梗死体积, 采用Western blot法检测M1型标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2型标记物精氨酸酶1 (Arg-1)、磷酸化JAK2(p-JAK2)及磷酸化STAT3(p-STAT3)表达, 采用q-PCR法检测iNOS mRNA和Arg-1 mRNA表达, 采用ELISA法检测IL-6和IL-10含量。结果与S组相比, 其余2组mNSS评分和脑梗死体积升高, 大脑缺血半暗带iNOS和...     

外源性硫化氢抑制TLR2和TLR4表达并减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的观察外源性硫化氢(H₂S)供体硫氢化钠(NaHS)能否抑制Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达、减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)。 方法24只6~8周龄雄性SD大鼠随机分为3组：假手术(Sham)组、肾脏缺血再灌注(I/R)组、NaHS+I/R组。采用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min后再灌注24 h的方法诱导肾IRI。夹闭左肾动脉前，NaHS+I/R组给予NaHS(300 nmol/min)连续输注10 min，Sham组和I/R组则给予等体积生理盐水。分别留取各组腹主动脉血及肾组织标本。Western印迹法检测肾组织TLR2、TLR4蛋白的表达；免疫组织化学法检测肾组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达；比色法检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。HE染色观察肾脏组织学改变；TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。 结果与Sham组比较，I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均增加(P<0.05)，BUN、Scr亦明显升高(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较高(P<0.05)，肾组织凋亡细胞增加(P<0.05)。与I/R组比较，NaHS+I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均减少(P<0.05)，BUN、Scr亦明显下降(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较低(P<0.05)，肾组织凋亡细胞减少(P<0.05)。 结论外源性H₂S可以抑制TLR2、TLR4途径，减少炎症因子释放及细胞凋亡，减轻大鼠肾脏IRI。     

由IL-10/JAK2/STAT3通路探讨养血柔筋方对兔膝骨关节炎软骨损伤的研究

目的 由白细胞介素(IL)-10/Janus激酶(JAK2)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路探讨养血柔筋方对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)软骨损伤的影响及机制。方法 将新西兰雄兔分为空白组、KOA模型组、养血柔筋方组(50 mg/kg)、塞来昔布组(24 mg/kg)、JAK2激活剂组(50 mg/kg养血柔筋方+0.11 mg/kg AG490),每组6只。通过木瓜蛋白酶诱导KOA兔模型，造模成功后给予相应治疗。运用HE染色观察软骨组织病理变化，Mankin评分进行定量评分；透射电镜观察软骨组织的超微结构；ELISA测量血清IL-1β、IL-6含量；免疫组织化学检测软骨组织基质金属蛋白酶13(MMP13)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、Ⅱ型胶原蛋白(COl-Ⅱ)蛋白表达；Western Blot检测软骨组织IL-10/JAK2/STAT3通路蛋白表达。结果 与空白组比较，KOA模型组中软骨组织病变严重，Mankin评分、IL-1β和IL-6含量、MMP13、p-JAK2和p-STAT3蛋白...     

臭氧氧化预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤致细胞凋亡的影响

目的 观察臭氧氧化预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤导致的细胞凋亡的影响.方法 分为3组进行实验:(1)假手术组:切除大鼠右肾,缝合腹壁;(2)缺血再灌注组:切除大鼠右肾后,夹闭左肾动、静脉45 min,然后开放;(3)臭氧氧化预处理组:手术步骤与缺血再灌注组相同,在术前15d开始经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5～5.5 ml(臭氧浓度为50 mg/L,1 mg·kg-1 ·d-1),应用至术前1d.全自动生化分析仪检测3组大鼠血清尿素氮和肌酐,比色法测定血清脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD).免疫组织化学法检测大鼠肾细胞胞浆细胞色素C(CytC)的表达,蛋白质印迹法检测CytC的含量.逆转录聚合酶链反应法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6 (IL-6) mRNA的表达.结果 缺血再灌注和臭氧氧化预处理组血清尿素氮、肌酐和MDA均高于假手术组,而缺血再灌注组的尿素氮、肌酐和MDA又高于臭氧氧化预处理组.缺血再灌注组血清SOD低于假手术组和臭氧氧化预处理组(P＜0.05).臭氧氧化预处理组的肾组织病理学改变较缺血再灌注组轻.假手术组、缺血再灌注组和臭氧氧化预处理组的CytC表达灰度值分别为101.50±18.02、181.00±20.85和156.71±16.82,两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).臭氧氧化预处理组肾细胞胞浆和线粒体中CytC含量较缺血再灌注组有所下降(P＜0.05).结论 臭氧氧化预处理可以减轻肾脏脂质过氧化反应,减少炎症因子的合成,抑制CytC的释放,减轻肾缺血再灌注损伤.