铁调素在创伤性脑损伤大鼠皮质中的表达特性

目的研究铁调素在创伤性脑损伤大鼠皮质中的表达特性。方法建立大鼠左侧控制性皮质撞击(controlled cortical impact,CCI)模型,采用去铁胺干预,研究创伤性脑损伤早期(72 h内)大鼠皮质内铁调素的变化情况、铁浓度与铁调素表达的关系及铁调素与神经元的共定位情况。通过实时定量逆转录聚合酶链反应评估铁调素mRNA转录情况,通过酶联免疫吸附测定评估铁调素浓度变化情况,通过铁浓度检测试剂盒评估非血红素总铁含量,通过蛋白质印迹法评估BMPs/Smad1/5/8信号通路激活情况。通过免疫荧光评估铁调素在脑组织细胞中的信号强度,并进行铁调素与神经元和星形胶质细胞的共定位分析。结果与Sham组相比,CCI 6 h组大鼠脑皮质中的铁含量、铁调素mRNA相对表达量、铁调素浓度及pSmad1/5/8/Smad1/5/8比值均无明显变化(均P> 0.05)。CCI 24 h组和CCI 72 h组大鼠脑皮质中的铁含量、铁调素mRNA相对表达量、铁调素浓度及pSmad1/5/8/Smad1/5/8比值均显著高于Sham组(均P <0.01);CCI 72 h+去铁胺组大鼠脑皮质中的铁含量、铁调素mRNA相对表达量、铁调素浓度及pSmad1/5/8/Smad1/5/8比值均显著低于CCI 72 h组(均P <0.05)。相较于Sham组,CCI 72 h组大鼠脑皮质DAPI阳性细胞核减少,脑细胞内的荧光强度显著增强(P <0.0001)。共定位分析显示神经元与铁调素信号共标现象增多,而未见明显的星形胶质细胞与铁调素共标现象。结论创伤性脑损伤后脑组织非血红素总铁水平显著升高,并可能通过BMPs/Smad1/5/8信号通路引起脑组织铁调素表达上调。神经元中铁调素水平升高而星形胶质细胞内未见明显铁调素水平变化,说明创伤性脑损伤后铁调素对所作用的脑细胞具有选择性。     

喉鳞癌组织中Caspase-3蛋白与Survivin蛋白的表达水平及相关性

目的探讨喉鳞癌组织中Caspase-3蛋白与Survivin蛋白的表达水平及相关性。方法采用免疫组织化学法测定喉鳞癌组织及正常喉黏膜组织中Survivin蛋白与Caspase-3蛋白表达水平,并分析其相关性。结果正常喉黏膜组织中Survivin蛋白检测阳性率为10.0%(8/80),明显低于喉鳞癌组织[42.5%(34/80)],Survivin蛋白表达与年龄、性别、病变部位无关(P>0.05),而与TNM分期、淋巴结转移、病理分级相关(P<0.05)。正常喉黏膜组织中Caspase-3蛋白阳性表达率[86.7%(26/30)]明显高于喉鳞癌组织[30.0%(24/80)],差异具有显著性(P<0.05),Caspase-3蛋白表达与年龄、性别、病变部位、病理分级、有无淋巴结转移、TNM分期无关(P>0.05)。Survivin蛋白与Caspase-3蛋白表达呈负相关。结论 Survivin蛋白不但参与原位癌的发生进展,还可能参与癌细胞转移。Survivin蛋白高表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。Survivin蛋白可能通过抑制Caspase-3蛋白的表达抑制细胞凋亡,可能为肿瘤形成的分子机制之一。     

TACE对肝癌细胞凋亡与NK细胞受体表达的影响

目的通过研究经导管动脉化疗栓塞(TACE)对肝癌细胞凋亡与自然杀伤(NK)细胞受体表达的变化,分析探讨TACE治疗中晚期原发性肝癌的临床价值。方法取经临床病理证实的原发性中晚期肝癌患者102例,运用采用TDT缺口末端标记TUNEL法和免疫组织化学SP法研究TACE治疗前后肝癌组织中肝癌细胞凋亡与NK细胞受体表达水平。结果 1、TACE治疗后凋亡指数(AI)升高,而增殖指数(PCNALI)降低(P0.05),差异具有统计学意义;2、TACE治疗后NK细胞活化性受体NKG2D、NKp44、NKp30增多,颜色较深(P0.05),差异具有统计学意义;活化性受体NKp46未见明显变化(P0.05),差异无统计学意义;NK细胞抑制性受体CD158b、CD159a降低(P0.05),差异具有统计学意义。结论 TACE治疗效果可能与诱导肝癌细胞凋亡及NK细胞活化性受体及抑制性受体变化相关联。     

吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡及STAT3蛋白的影响

目的探讨吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡及STAT3蛋白表达的影响。方法 MTT法测定吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制作用,PI单染流式细胞术检测人食管癌Eca-109细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测人食管癌Eca-109细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测STAT3蛋白的表达情况。结果不同浓度吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的抑制率均明显高于正常对照组(P<0.05),且随着药物浓度的增加,抑制率越高;吉西他滨0.20 mg/L组、0.40 mg/L组及0.80 mg/L组G0/G1期人食管癌Eca-109细胞百分数逐渐下降(P<0.05),G2/M期细胞百分数无变化(P>0.05),而S期细胞百分数逐渐增加(P<0.05)。吉西他滨0.20 mg/L组、0.40 mg/L组、0.80 mg/L组细胞凋亡率均明显高于正常对照组(P<0.05),且上述三组的STAT3蛋白表达均低于正常对照组(P<0.05),呈剂量依赖性。结论吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞具有增殖抑制作用,阻滞细胞于S期,明显促进细胞凋亡,下调STAT3蛋白的表达。     

可见光对RPE细胞自噬及凋亡的影响

目的:研究光诱导下的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)自噬的影响并探讨RPE细胞光损伤中自噬与凋亡之间关系.方法:体外培养ARPE-19,随机分为对照组、模型组、甲基腺嘌呤(3MA)组、Rapamycin组.倒置显微镜观察各组ARPE-19细胞形态结构;CCK8法结合流式细胞仪检测(Annexin V/PI双染色法...     

γδT细胞对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞的杀伤作用及其机制研究

目的探讨γδT细胞对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)细胞的杀伤作用及其机制。方法通过乳酸脱氢酶释放法检测来自健康志愿者的γδT细胞对DLBCL细胞的杀伤作用。杀伤封闭实验检测封闭穿孔素-颗粒酶途径、FasL途径和封闭程序性死亡蛋白配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)抑制作用后γδT细胞杀伤能力的变化。流式细胞术检测γδT细胞表面CD107a(脱颗粒相关分子标记)的表达情况和DLBCL细胞表面配体分子的表达情况。Confocal实验检测γδT细胞裂解性颗粒极化情况。结果γδT细胞对DLBCL细胞SU-DHL-4、Farage的杀伤效率存在一定的差异,γδT细胞对Farage细胞没有杀伤作用,而对SU-DHL-4细胞有较强的杀伤作用。采用丝裂霉素A预处理封闭γδT细胞穿孔素-颗粒酶途径后,γδT细胞对SU-DHL-4细胞的细胞毒作用显著降低(P <0.01);而采用FasL中和抗体封闭Fas-FasL途径后,γδT细胞对SU-DHL-4细胞的细胞毒作用无显著变化(P> 0.05)。SU-DHL-4、Farage在引起γδT细胞脱颗粒过程中无显著差异,而在引起裂解性极化方面存在显著差异(P <0.05)。SU-DHL-4细胞可引起γδT细胞裂解性颗粒极化,而Farage细胞无法引起γδT细胞裂解性颗粒极化,二者比较差异具有统计学意义(P <0.01)。Farage细胞高表达的PD-L1可抑制γδT细胞杀伤作用和裂解性颗粒极化。封闭Farage细胞表面PD-L1后,γδT细胞对Farage细胞的杀伤作用显著增强(P <0.01)。同时,封闭Farage细胞表面PD-L1后,γδT细胞裂解性颗粒的极化能力显著增强(P <0.01)。结论γδT细胞对DLBCL细胞的杀伤作用主要依赖于裂解性颗粒极化,而PD-L1抑制γδT细胞的杀伤作用主要通过抑制裂解性颗粒极化而实现。     

沉默CD44表达对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响

目的：探讨CD44基因沉默对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响。方法：设计及合成CD44 siRNA,转染人鼻咽癌SUNE-1 5-8F细胞,Real-time qPCR及Western blot评价转染效果,流式细胞仪分析各组细胞周期和凋亡情况。结果：CD44 siRNA显著下调了人鼻咽癌SUNE-1 5-8F细胞中CD44 mRNA与蛋白表达(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示siRNA组细胞中G0/G1期细胞比例明显升高,S期细胞比例显著下降,细胞凋亡率明显增加(均P<0.05)。结论：CD44 siRNA干扰载体可高效抑制鼻咽癌SUNE-1 5-8F细胞CD44的表达,诱导细胞阻滞在G0/G1期,促进细胞凋亡。     

血管内皮生长因子及细胞间黏附分子-1在糖尿病大鼠内耳的表达及其临床意义

目的探讨糖尿病大鼠内耳中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达水平及其临床意义。方法将48只Wistar大鼠随机分为对照组和糖尿病组,每组各24只。对照组大鼠普通饲养;糖尿病组大鼠高脂、高糖饲养,并腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg,当空腹血糖>16.65 mmol/L时显示造模成功,分别于0、4、8、12周时取出实验大鼠耳蜗进行免疫组化观察。结果 0、4、8、12周,糖尿病组大鼠血管壁厚度均显著大于对照组(P<0.05),两组大鼠VEGF和ICAM-1表达水平差异均具有显著性(P<0.05);VEGF和ICAM-1表达水平呈正相关(r=0.931,P<0.01)。结论糖尿病大鼠内耳血管壁增厚;VEGF和ICAM-1在糖尿病大鼠内耳的表达增强,两者表达水平呈正相关。     

肺癌术后胸腔冲洗液细胞检测与EGFR表达的研究

目的研究非小细胞肺癌细胞EGFR表达、肿瘤类型与胸腔灌洗液肿瘤细胞存在的关系。方法通过留取非小细胞肺癌患者术中及术后胸腔灌洗液进行细胞学检测,同时将术后肺部肿瘤进行免疫组化分析,检测其CK、EGFR、P63表达情况,系统分析胸腔灌洗液阳性与肿瘤分子表达及肿瘤类型的关系。结果阳性组患者肿瘤大小位于3～7cm发生率、纵膈淋巴结阳性发生率以及EGFR表达发生率高于阴性组,差异具有统计学意义(P 0.05);阳性组患者肿瘤小于3 cm以及大于7 cm,发生率低于阴性组,差异无统计学意义(P 0.05)。两组患者肿瘤位置、肿瘤类型、手术方式、手术范围以及CK、P53表达差异无统计学意义(P 0.05)。结论肿瘤的大小以及EGFR的高表达,与PLC阳性关系密切,可能是早期胸膜腔微转移的预测指标。     

矽肺模型大鼠肺组织及血清中瓜氨酸化组蛋白H3等的表达及其意义

目的 探讨矽肺模型大鼠肺组织及血清中瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)等的表达及其意义.方法雄性Wistar-Kyoto大鼠30只,随机分为矽肺组和对照组,每组15只大鼠.矽肺组大鼠气管内一次性注入50 g/L的SiO2混悬液1 mL建立矽肺大鼠模型,对照组大鼠气管内一次性注入等体积的生理盐水.两组大鼠均常规饲养,第28...     

脑损伤病人的病情观察及护理

目的分析脑损伤患者的病情并探讨有效的护理方法。方法分析并总结我院在2011年1月~2013年1月期间治疗的70例脑损伤患者的病情,并将其分为两组。对照组患者在治疗过程中经常规护理,实验组则进行针对性护理,进而比较患者的病情好转情况。结果实验组患者的病情好转率高于对照组,差异显著,具有统计学意义(P0.05)。结论脑损伤患者的病情较严重,死亡率较高,因此充分了解患者的病情对疾病的治疗起到关键作用,同时有效的护理方法可提高患者的病情好转情况。     

Periostin在糖尿病大鼠心肌组织中表达的改变及意义

目的观察糖尿病心肌病(Diabetic cardiomyopathy,DCM)大鼠模型的心肌组织中periostin的表达量是否增加及其变化的意义。方法应用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射法构建糖尿病心肌病大鼠模型,以正常Wistar大鼠作为正常对照组,比较模型组和对照组之间periostin、TGFβ1、Ⅰ型胶原的蛋白量的表达水平。结果 DCM组与正常对照组相比,periostin的蛋白表达明显增加,同时反映心肌纤维化的TGFβ1、Ⅰ型胶原的蛋白质表达亦明显增高。结论 periostin可能在糖尿病心肌病的心脏重构、心肌间质纤维化的发展过程中发挥重要作用。     

宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞检测的临床意义

目的探讨宫颈癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞检测的临床意义。方法选取2015年2月—2016年10月我院收治的48例宫颈癌患者与同期健康检查的48名健康女性分为宫颈癌组与健康对照组。对两组分别使用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞及NK细胞水平,并作对比。结果健康对照组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+细胞水平较宫颈癌组II、III、IV期明显更高,CD8+细胞水平明显更低(P0.05);宫颈癌组II、III、IV期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+细胞水平呈阶梯性下降,CD8+呈阶梯性上升,III、IV期的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+细胞水平较II期明显更低,CD8+细胞水平明显更高(P0.05)。结论宫颈癌患者的免疫功能的下降,造成肿瘤细胞的发生与发展;采用流式细胞仪对外周T淋巴细胞与NK细胞进行检测可有效监测宫颈癌患者免疫功能,从而对宫颈癌患者的临床治疗提供有利的数据参考。     

隐丹参酮对肝癌细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨隐丹参酮(CPT)对HepG2细胞凋亡的影响及其机制。方法 采用MTT试验检测终浓度为0、1、5、10、20、40、100μmol/L的CPT对HepG2细胞活性的影响,并计算出CPT对HepG2细胞的半数致死浓度(IC₅₀)。将HepG2细胞分为A～D组,分别使用终浓度0、1、5、10μmol/L的CPT培养48 h,分别通过划痕实验、JC-1染色和流式细胞术检测各组HepG2细胞的迁移能力、线粒体膜电位以及细胞凋亡率。将HepG2细胞分为E～H组,分别使用含有0μmol/L CPT+20μmol/L Spautin-1、1μmol/L CPT+20μmol/L Spautin-1、5μmol/L CPT+20μmol/L Spautin-1、10μmol/L CPT+20μmol/L Spautin-1的培养液培养。采用MTT实验检测E～H组处理48 h时的细胞活性,Western blot方法检测A、D、H组处理48 h时HepG2细胞中LC3B-Ⅱ蛋白的表达情况,JC-1染色检测A、D、E、H组处理48 h时的细胞线粒体膜电位,流式细胞术检测A、...     

3种金属全冠修复对犬牙龈细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的检测钴铬合金、银钯合金及纯钛金属全冠修复后犬牙龈细胞中Bcl-2和Bax基因m RNA的表达,探讨3种材料全冠修复对细胞凋亡的影响。方法选取5只成年雄性实验犬,将每只犬的牙弓分为4个区,以每区的尖牙为实验对象,分别行钴铬合金(A组)、银钯合金(B组)及纯钛(C组)金属全冠修复,第4区为空白对照(D组);分别于修复后1、2、3个月采集尖牙牙龈组织,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测牙龈细胞中Bcl-2、Bax基因m RNA的表达并计算Bcl-2/Bax的比率。结果修复后3个月,A组Bcl-2/Bax的比率高于D组,差异有统计学意义(P0.05);修复后2、3个月,B组Bcl-2/Bax的比率低于D组,差异有统计学意义(P0.05);修复后1、2、3个月,C组Bcl-2/Bax的比率与D组相比,差异均无统计学意义(P0.05)。结论钴铬合金抑制牙龈细胞凋亡,银钯合金促进牙龈细胞凋亡,而纯钛对牙龈细胞的凋亡无明显影响。