非小细胞肺癌肺静脉血中循环肿瘤细胞的检测分析

目的探讨应用流式细胞技术(FCM)检测非小细胞肺癌(NSCLC)肺静脉血中循环肿瘤细胞(CTC)的表达。方法采用FCM检测60例可手术NSCLC患者肺静脉血中CTC表达情况,同时采集15例健康志愿者及良性肿瘤患者外周血作对照。结果 60例NSCLC患者肺静脉血中发现CD45-、CK19+及CD44V6+表达的癌细胞共13例(21.7%),15例正常对照组均为阴性(P=0.041)。NSCLC患者肺静脉血CD45-、CK19+及CD44V6+细胞表达与临床分期密切相关(P=0.047),而与患者年龄、性别、组织学类型以及淋巴转移无相关性(P均>0.05)。结论NSCLC患者肺静脉血中可检测到CTC,可能与肺癌的侵袭转移有关。     

原发性肝癌患者T淋巴细胞亚群变化及其与CTCs、TTV及HBV-DNA的关系

目的探讨原发性肝癌(HCC)患者T细胞免疫功能变化及其与外周血循环肿瘤细胞(CTCs)、肿瘤总体积(TTV)及乙肝病毒(HBV-DNA)定量的关系。方法收集45例HCC患者外周血,45例正常成年人外周血作为对照组。用流式细胞学技术测定CD3~+T细胞、CD4~+T细胞及CD4~+/CD8~+比值;采用益善生物技术公司的"免疫去除结合纳米过滤法"Can Patrol TM行CTCs检测。收集患者肿瘤最大直径及乙肝病毒定量(HBV-DNA)等临床病理参数。将HCC组患者依据CD4~+/CD8~+平均值分成高、低两组,比较两组之间CTCs、TTV、HBV-DNA定量的差别。结果 HCC组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞及CD4~+/CD8~+明显低于对照组(P0.05),CD8~+T细胞值明显高于正常组(P0.05)。高CD4~+/CD8~+组CTCs总数及间质型CTCs明显低于低CD4~+/CD8~+组(P0.05),而两组上皮型CTCs及混合型CTCs无明显差异(P0.05)。CD4~+/CD8~+比值与TTV呈正相关(P0.05),与CD8~+T细胞百分比呈负相关(P0.05)。不同HBV-DNA组之间,CD4~+/CD8~+没有统计学差异(P0.05)。结论 HCC患者T细胞免疫功能明显降低。T细胞免疫功能与CTCs、TTV与有着密切关系:T细胞免疫功能越差,外周血中CTCs越多、TTV越大。     

老年宫颈癌患者外周血调节性T细胞及T细胞亚群表达及其与宫颈癌临床病理特点的关系

目的观察老年宫颈癌患者外周血调节性T细胞(Treg细胞)、T细胞亚群(CD4~+T细胞、CD8~+T细胞)及CD4~+/CD8~+水平及其与宫颈癌临床病理特点的关系。方法选择南通市港闸区宫颈癌筛查中老年宫颈癌患者90例作为宫颈癌组,宫颈正常老年女性90例作为对照组。采用流式细胞术测定外周血Treg细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞,计算CD4~+/CD8~+比值。分析Treg细胞、CD4~+、CD8~+细胞水平与宫颈癌临床病理特征的关系。结果宫颈癌外周血Treg细胞、CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+高于对照组(P0.05),CD8~+T细胞低于对照组(P0.05)。宫颈癌外周血Treg细胞、CD4~+细胞、CD8~+细胞、CD4~+/CD8~+T与宫颈癌临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P0.05),其中临床分期高、分化程度低、有淋巴结转移者外周血Treg细胞、CD4~+细胞、CD4~+/CD8~+明显高于临床分期低、分化程度高、无淋巴结转移者,CD8~+细胞明显低于临床分期低、分化程度高、无淋巴结转移者;宫颈癌外周血Treg细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞和CD4~+/CD8~+与宫颈癌年龄、宫颈癌类型、肿瘤直径、肌层浸润深度、脉管癌栓无关(P0.05)。结论老年宫颈癌患者外周血Treg细胞和T细胞亚群水平失调,外周血Treg细胞和T细胞亚群水平与宫颈癌的临床分期、分化程度和淋巴结转移有关。     

炎症性肠病患者T淋巴细胞亚群的改变及临床意义

目的探讨炎症性肠病(IBD)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化特点及临床意义.方法对临床确诊的18例溃疡性结肠炎(UC)和9例Crohn病(CD)患者,于疾病的不同时期用荧光单克隆抗体标记-流式细胞仪技术检测其外周血T淋巴细胞亚群的变化,并结合临床和病理资料进行综合分析.结果UC患者缓解期时的CD3+、CD8+和自然杀伤(NK)细胞与对照组比较无显著差异;但活动期时,其CD8+和NK细胞数明显下降(CD8+活动期23.1%±1.0%,对照组31.3%±1.2%,P＜0.05;NK活动期9.8%±1.0%,对照组15.1%±1.1%,P＜0.01),CD4+/CDs+比值上升(活动期1.8±0.1,对照组1.4±0.02,P＜0.05);活动期CD患者的CD8+细胞和CD4+/CD8+比值(43.0%±44%和0.6±0.1)变化却与UC组活动期呈相反趋势(P＜0.01).结论T淋巴细胞亚群改变在IBD的发病机制中可能起重要作用;UC和CD的细胞免疫机制不同;外周血CD4+、CD8+、NK细胞和CD4+/CD8+比值可作为检测UC病情变化和疗效考核的敏感指标.     

宫颈癌患者外周血调节性B细胞数量及血清IL-10、TGF-β表达水平

目的探讨宫颈癌患者外周血调节性B细胞数量及血清白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β的表达水平。方法选择宫颈癌患者83例,同时选择健康志愿者59例为对照组。检测两组于不同临床分期CD19~+CD5~+/CD19~+B和CD19~+CD5~+CD1d~+/CD19~+B比例及血清IL-10、TGF-β表达情况。结果宫颈癌组CD19~+CD5~+/CD19~+B和CD19~+CD5~+CD1d~+/CD19~+B比例明显高于对照组(P0. 05);血清IL-10、TGF-β表达显著高于对照组(P0. 05);宫颈癌Ⅰ、Ⅱ期组CD19~+CD5~+/CD19~+B和CD19~+CD5~+CD1d~+/CD19~+B比例显著低于Ⅲ期和Ⅳ期组(P0. 05);血清IL-10、TGF-β表达显著高于Ⅲ、Ⅳ期组(P0. 05)。结论外周血调节性B细胞及血清IL-10和TGF-β可能与宫颈癌进展相关。     

CD4~+ CD25~(high) CD127~(low/-)调节性T细胞在多发性骨髓瘤患者外周血的表达

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血CD4+CD25highCD127low/-调节性T(Tregs)细胞表达水平及临床意义。方法采用流式细胞术(FCM)检测30例MM患者和20例健康对照者外周静脉血CD4+CD25highCD127low/-Tregs细胞水平。结果 1 MM组CD4+CD25high CD127low/-Tregs细胞表达明显高于正常对照组(P<0.05)。2MM组不同国际分期系统(ISS)分期CD4+CD25highCD127low/-Treg细胞水平均高于正常对照组,随着疾病进展,Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。3MM组化疗后外周血CD4+CD25highCD127low/-Tregs细胞水平较化疗前显著下降(P<0.05)。结论 MM患者外周血CD4+CD25highCD127low/-Treg细胞比例明显升高,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制;进展期Tregs的变化为MM患者及时进行临床干预提供实验依据。     

肺肿瘤患者围手术期CD28及T细胞亚群检测的临床意义

目的:检测肺肿瘤患者手术前后外周血CD28和T淋巴细胞亚群的表达变化并探讨其意义。方法:采用流式细胞术检测63例肺肿瘤患者手术前后外周血CD28及T淋巴细胞亚群的表达,并与健康对照组及肺良性肿瘤组作比较。结果:肺肿瘤组术前外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+CD28+水平明显低于健康对照组和肺良性肿瘤组,而CD8+水平明显升高。肺肿瘤组CD8+表达水平随着临床分期的进展而有显著升高,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和CD8+CD28+水平随着临床分期的进展而有显著降低。不同病理分型的肺肿瘤患者之间外周血CD28及T细胞亚群水平无明显差异。肺肿瘤患者术后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和CD8+CD28+表达显著升高;CD8+的表达明显降低,但仍未恢复至健康水平。结论:肺肿瘤患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和CD8+CD28+表达水平低下,从而影响B7-CD28共刺激通路,使T细胞不能有效的清除肿瘤,提示肺肿瘤患者机体免疫功能低下,施行手术切除肿瘤有助于改善患者的细胞免疫功能。     

CD28/CTLA-4:B7在特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞中的表达及意义

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4(CD152)、B7-1(CD80)及B7-2(CD86)的表达及意义。方法:采用免疫荧光标记和流式细胞术检测41例ITP患者和40例健康对照者外周血CD3+CD28+细胞、CD3+CD152+细胞、CD80+CD19+细胞和CD86+CD19+细胞分别占淋巴细胞的比例及血小板表面相关抗体水平,进行2组对比、分析。结果:与正常对照组相比,急性ITP患者外周血CD3+CD28+细胞和CD3+CD152+细胞差异无统计学意义(P0.05),CD80+CD19+细胞增多(P0.05),CD86+CD19+细胞显著增多(P0.01),慢性ITP患者CD86+CD19+细胞增多(P0.05);急性ITP患者外周血CD86+CD19+细胞较慢性ITP患者增多(P0.05);与正常对照组相比,急性ITP患者PAIg's、PAIgG和PAIgM水平显著增高,慢性ITP患者PAIgG水平增高;CD80、CD86表达与PAIgG水平之间存在显著的相关性(均P0.01)。结论:ITP患者外周血B淋巴细胞上CD86和CD80表达均异常,可能与其发病相关。     

胃癌及结直肠癌患者外周血CD45RA~+和CD45RO~+T细胞变化特征

目的研究胃癌及结直肠癌患者外周血CD45RA+和CD45RO+T细胞变化特征。方法选择50例胃肠道肿瘤患者,其中胃癌24例,结直肠癌26例,均有病理诊断和TNM分期;选择26例健康人作为对照组;应用流式细胞仪检测外周血CD45RA+T细胞和CD45RO+T细胞。结果胃肠道肿瘤患者CD45RA+T细胞和CD45RO+T细胞的总体检测结果与健康对照组比较无明显差异;但经过TNM分期后,Ⅲ、Ⅳ期胃癌及结直肠癌患者的CD45RA+T细胞百分率升高,CD45RO+T细胞百分率降低,与健康人及Ⅰ、Ⅱ期病人比较具有显著性差异;胃癌患者与结直肠癌患者比较,检测结果无显著差异。结论 TNM分期较晚的患者外周血CD45RA+T细胞百分率升高,CD45RO+T细胞百分率降低。纯真性T细胞活化功能减低或向记忆性T细胞方向转化减少,不利于肿瘤细胞的清除,这种变化特征是导致肿瘤细胞发生浸润与转移的影响因素之一。     

腹主动脉瘤患者外周血CD19~+CD24~(hi)CD38~(hi)B细胞功能变化

目的观察腹主动脉瘤(AAA)患者外周血CD4 T细胞比例及干扰素(IFN)-γ分泌情况,以及CD19+CD24hiCD38hiB调节性B细胞(Breg)比例及功能的变化情况。方法采用流式细胞术测定40例AAA患者及同期入院进行健康体检者外周血CD4 T细胞、IFN-γ+CD4 T细胞和CD19+CD24hiCD38hiB细胞比例;采用CFSE染色方法检测CD19+CD24hiCD38hiB细胞对CD4 T细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术测定CD19+CD24hiCD38hiB细胞与CD4 T细胞共孵育后对CD4 T细胞分泌IFN-γ的影响。结果 AAA患者外周血CD4 T细胞比例显著升高(P0.05)。与健康对照相比,AAA患者外周血IFN-γ+CD4 T细胞比例亦升高(P0.01);AAA患者与HC外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞比例比较,差异不具有统计学意义(P0.05);健康对照外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞可显著抑制CD4 T细胞增殖和IFN-γ分泌能力,而AAA患者外周血CD19+CD24hi CD38hiB细胞不具有此功能。结论 AAA患者外周血CD19+CD24hiCD38hiB细胞功能的丧失,致使外周血CD4 T细胞比例升高和IFN-γ分泌的能力增强,最终导致AAA的发生和发展。     

A research about B lymphocyte subsets marked by CD19 and CD27 in peripheral blood of patients with chronic primary immune thrombocytopenia

目的 研究慢性原发性免疫性血小板减少症( pITP)患者外周血CD+19CD+27细胞、CD+19CD-27细胞以及B细胞激活因子(BAFF)的表达.方法 30例慢性pITP患者作为病例组,对照组为15例健康献血员.流式细胞仪测定其外周血CD+19CD+27细胞及CD+19CD-27细胞的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定其外周血BAFF浓度.随访12例患者给予地塞米松治疗,8例患者给予长春新碱治疗,2周后测定上述指标.结果 与对照组相比,pITP患者组外周血CD+19CD-27细胞比例、BAFF浓度增高且差异均有统计学意义(P＜0.05).8例患者经长春新碱治疗后,CD+19CD+27细胞及CD+19CD-27细胞表达明显降低且差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 pITP患者外周血存在B细胞亚群紊乱,以CD+19CD-27细胞表达升高为特征;短期内地塞米松对pITP患者外周血CD+19CD-27细胞的表达无明显影响,长春新碱则能显著抑制pITP患者外周血CD+19CD+27细胞及CD+19CD-27细胞的表达.     

乳腺癌外周血细胞角蛋白19 mRNA的检测及临床价值

目的应用荧光定量RT-PCR检测乳腺癌外周血中的表达情况,并评价其表达的临床意义。方法用荧光定量RT-PCR方法检测49例乳腺癌患者外周血CK19mRNA表达。结果49例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性28例,阳性率57.1%,统计结果显示乳腺癌患者外周血CK19mRNA的表达阳性率在患者不同年龄、病理类别、临床分期、ER、PR状态的各组差异无显著性(P>0.05),在淋巴结转移状态间有显著差异。结论CK19mRNA可作为RT-PCR法检测乳腺癌患者外周血微转移的分子标志物,有助于早期预测乳腺癌发生血道微转移,指导临床治疗。     

乳腺癌患者荷瘤状态T淋巴细胞亚群检测及其临床意义

目的检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞总数及T淋巴细胞亚群中的CD4+T细胞、CD8~+T细胞、CD45RA~+T细胞、CD45RO~+T细胞的百分率以评价患者的免疫状态。方法试验组选择女性原发性乳腺肿瘤患者40例,其中Ⅰ期乳腺癌23例,Ⅱ+Ⅲ期乳腺癌17例;以女性健康体检者30例为对照组。应用流式细胞仪,采用三色荧光免疫标记技术分别检测各组外周血T淋巴细胞亚群的数量,统计分析各组检测结果的差异性。结果试验组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞百分率明显低于对照组(P0.05),Ⅱ+Ⅲ期患者明显低于Ⅰ期患者(P0.05)。与对照组比较,试验组CD45RA~+T细胞明显减少,而CD45RO~+T细胞明显增多(P0.05);与Ⅰ期乳腺癌患者比较,Ⅱ+Ⅲ期乳腺癌患者CD45RA~+T细胞明显减少,而CD45RO~+T细胞明显增多,差异有统计学意义(P0.05)。结论 T细胞亚群检测是评价肿瘤患者细胞免疫功能的重要指标,具有重要的临床应用价值。乳腺癌患者免疫功能与肿瘤恶变的发生、发展及临床分期有一定相关性,随着病情的进展,机体免疫功能呈现下降趋势。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD5+B细胞亚群的意义

目的通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD5+B细胞亚群水平,以探讨CD5+B细胞亚群在SLE疾病活动中的作用.方法利用双色流式细胞分析法对44例SLE患者和19名正常人群外周血CD5+CD19+,CD5-CD19+细胞亚群进行检测,同时检测患者抗dsDNA抗体,C3和C4水平.结果活动期系统性红斑狼疮患者CD5+B细胞水平较正常人群明显升高(P＜0.01);静止期系统性红斑狼疮患者CD5+B细胞较正常人群明显下降(P＜0.05),系统性红斑狼疮患者CD5+B细胞水平与疾病活动指数明显正相关(P＜0.01).结论研究证实,活动期系统性红斑狼疮患者外周血CD5+B细胞水平明显升高,与SLE疾病活动有着一定的关系.     

慢性阻塞性肺疾病病人外周血T淋巴细胞的检测及意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者体内各类T淋巴细胞的亚群,了解COPD患者的细胞免疫功能状态。方法采用免疫荧光双标记法和流式细胞仪检测COPD患者外周血中的T淋巴细胞及其亚群。结果与健康对照组相比较,急性期COPD组患者CD3+T细胞及CD4+T细胞亚群下降,CD8+T亚群细胞升高,导致CD4+/CD8+比值下降并倒置;CD4+CD45RA+亚群、CD4+CD45RA+/CD4+CD45RO+比值下降,CD4+CD45RO+亚群上升;CD8+CD45RA+亚群、CD8+CD45RO+亚群和CD8+CD45RA+/CD8+CD45RO+比值均有所上升;自身免疫性疾病有关的CD4+CD28+亚群下降。结论 COPD患者体内存在细胞免疫功能的紊乱。     

原发性肝癌患者外周血CD4+T、CD8+T、Tc17、Th17和Treg淋巴细胞的变化及其意义

目的 了解原发性肝癌(PLC)患者外周血CD4+T、CD8+T、Tc17、Th17和Treg淋巴细胞的变化.方法 2018年6月～2019年12月我院诊治的PLC患者83例(巴塞罗那临床肝癌分期A期25例,B期23例,C期18例,D期17例)和健康人35例,采用流式细胞技术检测外周血CD4+T、CD8+T及Tc17(C...     

乳腺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋ Treg细胞及Th1/Th2类细胞因子水平测定及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血CD4＋CD2＋5调节性T细胞（CD4＋CD2＋5Treg）水平变化在肿瘤发生、发展中的作用及机制。方法流式细胞术检测45例健康人（对照组）、44例乳腺良性增生患者（增生组）、61例乳腺癌患者（乳腺癌组）外周血CD4＋CD2＋5Treg水平,ELISA法检测三组Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α和Th2类细胞因子IL-6水平;分析CD4＋CD2＋5Treg与肿瘤临床病理特征及细胞因子的关系。结果乳腺癌组TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞水平显著高于0~Ⅱ期患者、对照组和增生组,且术后水平显著低于术前（P均〈0.05）;乳腺癌组TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者血清IL-2、IFN-γ、TNF-α水平明显低于0~Ⅱ期患者、对照组和增生组,IL-6水平则反之（P均〈0.05）;乳腺癌组外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞水平与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平呈负相关（r=-0.579、-0.607、-0.691）,与IL-6呈正相关（r=0.804）,P均〈0.05。结论外周血CD4＋CD2＋5Treg细胞水平与乳腺癌发生、发展有关,可能机制为通过调节Th1/Th2细胞因子平衡参与机体免疫应答。     

乳腺癌患者外周血CD40、CD40L的表达及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血CD40、CD40L的表达及其与患者病理分期的关系。方法选择30例乳腺癌患者（乳腺癌组）、30例健康体检者（对照组）,采用流式细胞术检测两组外周血B、T淋巴细胞表面的CD40、CD40L表达水平,并分析其与乳腺癌病理分期的关系。结果乳腺癌组CD40[（9.26±2.12）%]、CD40L[（7.48±1.36）%]表达水平均高于对照组[（7.33±1.64）%、（6.25±1.19）%]（P均〈0.01）,且乳腺癌患者CD40、CD40L表达水平均与其病理分期呈正相关（rCD40=0.88、rCD40L=0.71,P均〈0.01）。结论乳腺癌患者外周血B、T淋巴细胞表面的CD40、CD40L水平可作为判断乳腺病变程度、肿瘤转移的指标。     

原发性胆汁性肝硬化T淋巴细胞亚群分析

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的T淋巴细胞亚群及共刺激信号表达的特点及临床意义.方法 以未经治疗的98例PBC患者为研究组,性别、年龄匹配的健康人30名作为对照组.以流式细胞仪技术检测外周血淋巴细胞亚群以及T淋巴细胞表面的共刺激信号CD28.结果 PBC与对照组T细胞亚群差异有统计学意义:PBC组CD4+T淋巴细胞升高,CD8+T淋巴细胞下降,CD4+/CD8+比值上升(P<0.05);CD4+CD28-T细胞和CD8+CD28-T细胞明显增加(P<0.05).结论 PBC存在免疫调节功能的异常,其中CD28的表达明显减少;CD8+CD28-的细胞群可能在PBC中有一定的免疫调节作用.     

CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞在类风湿关节炎患者外周血中的表达及意义

目的 检测调节性T淋巴细胞新旧标志在活动性类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达,探讨用CD127代替FOXP3对调节性T淋巴细胞进行研究的可能性.方法 选取活动性RA患者32例,其中未经缓解病情抗风湿药(DMARDs)治疗者20例,经DMARDs治疗效果不佳者12例,以25例原发性干燥综合征(pSS)患者和24名健康人作为对照,采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low/-及CD4*CD25+FOXP3+T淋巴细胞的比例,同时检测外周血C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、免疫球蛋白、补体等水平并进行相关性分析.结果 RA患者CD4+CD25highT淋巴细胞百分率与健康对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).其CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞与CD+CD25+CD127low/-T淋巴细胞的百分率均低于健康对照组(P<0.05),但CD4+D25+FOXP3+、CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞在RA患者与pSS患者中的表达差异无统计学意义(P>0.05);这三群细胞的表达水平在RA未经治疗组和治疗效果不佳组之间差异均无统计学意义(P>0.05). RA患者CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞与CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞之间呈明显正相关(r=0.698,P=0.001),但这两群细胞与患者的CRP、ESR等水平及抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)均无相关性(P>0.05).结论 活动性RA患者外周血中,CD4+CD25+CD127low/-T淋巴细胞的百分率降低,并且与CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞呈显著正相关性,提示CD127可能被作为Treg细胞中FOXP3的替代标记.