房颤患者心房肌If电流mRNA表达的变化

目的研究着重观察了心房颤动(房颤)患者If电流mRNA表达的变化,从分子水平探讨房颤发生的机制,为寻求房颤更有效的防治方法进行必要的理论准备.方法共入选患者26例.均为因冠状动脉粥样硬化性心脏(冠心病)、风湿性心脏瓣膜病(风心病)或先天性心脏病行开胸心脏手术的患者.研究分为两组窦性心律组15例,男9例,女6例.平均(62.73±-7.21)岁;持续房颤组11例,男7例,女4例.平均年龄(63.27+6.37)岁.术中取右心耳50mg.采用逆转录聚合酶链反应的方法测定两组患者起搏电流离子通道mRNA表达的变化.结果持续房颤患者左心房内径明显较窦性心律患者大[(51.18±9.12)mm与(34.27+4.00)mm,P＜0.01];其他临床特征匹配.房颤患者If基因表达明显增加(0.30±±0.03与0.34±0.05,P＜0.05).结论If活动增加,自律性增加,容易引起异位心律及快速心律失常.病理状态下If通道的作用是近年来的研究热点.有文献报道,非起搏细胞同样存在If.本研究中发现,无论窦性心律患者还是持续房颤患者,其心房中都有If的表达,证明If存在于心房肌组织中.持续房颤患者IfmRNA表达明显高于窦性心律患者,提示此电流可能参与房颤的发生某种机制.心房的异常自律性被认为参与房颤的启动,If过表达可能通过增加心房肌细胞的异常自律性启动房颤的发生.已有研究表明,临床房性异位兴奋与IfmRNA表达增高相关.研制能够特异性抑制此电流活动的药物可能在房颤的治疗中有价值.     

糖尿病大鼠心肌LPL mRNA表达的变化

目的 探讨糖尿病大鼠心肌细胞LPL mRNA表达的变化规律。方法 采用逆转录聚合酶链式反应的方法。结果 糖尿病大鼠心细胞LPL mRNA表达是增高的。结论 脂代谢紊乱可能是糖尿病心肌结构和功能损伤的重要原因。     

Skp2 mRNA及蛋白在大肠腺瘤组织中的表达

目的:研究细胞S期激酶相关蛋白2(S-phasekinase-asociated protein 2,Skp2)在大肠腺瘤组织中的表达.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测20例管状腺瘤、15例绒毛状腺瘤、18例混合性腺瘤和20例正常黏膜组织中SKq2的表达情况.结果:绒毛状腺瘤和混合性腺瘤Skp2 mRNA的表达水平显著高于正常对照组(0.71±0.34,0.63±0.20vs0.34±0.20,P＜0.01),而管状腺瘤Skp2 mRNA的相对含量与正常对照组无显著差异,绒毛状腺瘤和混合性腺瘤Skp2 mRNA的相对含量与管状腺瘤组亦有显著差异(0.71±0.34,0.63±0.20 vs0.43±0.22,P＜0.05);但是绒毛状腺瘤和混合性腺瘤间无显著差异.大肠管状腺瘤、绒毛状腺瘤、混合性腺瘤及正常组Skp2蛋白表达阳性率分别为15%(3/20)、46.7%(7/15)、27.8%(5/18)和5.0%(1/20),各组间有显著差异(P＜0.05).结论:从基因及蛋白水平证明,skp2的阳性表达与大肠腺瘤的组织学类型有关,可能对大肠腺瘤的发生发展起促进作用.     

主动脉阻断前后心肌组织HSP72 mRNA的表达变化及意义

14例非发绀型先心脏病患者主动脉阻断(ACC)前后切取右心房心肌,采用RT-PCR测定心肌细胞HSP72 mRNA的相对表达水平.分别于转流前、主动脉开放后30 min和术后24 h测定血清心肌酶AST、LDH、CK和CK-MB的水平.结果 本组患者ACC后HSP72的基因表达水平为0.708±0.106,较ACC前的0.611±0.165增高;CPB期间患者血清心肌酶明显升高(P均＜0.05).认为缺血缺氧可上调心肌细胞HSP72 mRNA的表达,这可能是心肌对缺血缺氧的一种内源性保护机制.     

糖尿病大鼠心肌GluT_4mRNA的表达水平

目的　探讨ＧｌｕＴ４ ｍＲＮＡ的表达水平与糖尿病心肌病的相关性。方法采用逆转录聚合酶链式反应的方法对链脲佐菌素 （ＳＴＺ）诱导的糖尿病大鼠心肌 ＧｌｕＴ４ ｍＲＮＡ的表达水平进行检测并与正常对照组大鼠对比。结果糖尿病大鼠心肌 ＧｌｕＴ４ ｍＲＮＡ的表 达水平明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。结论在发生糖尿病的同时,大鼠心肌细胞ＧｌｕＴ４ ｍＲＮＡ的表达受抑制,含量降低,导致心肌的能量代谢紊乱,引起糖尿病心肌病。     

COPD模型大鼠肺组织TGF-β1 mRNA的表达及意义

目的探讨转化生长因子良（TGF-β1）在长期吸烟所致慢性阻塞性肺疾病（COPD）病理变化中的作用。方法将大鼠随机分为对照组和模型组,分别分为1-6月组,每组6只。建立大鼠吸烟COPD模型。光镜下观察吸烟对大鼠肺组织结构的影响,RT-PCR方法检测TGF-β1mRNA在肺组织中的表达。结果随吸烟时间延长,肺泡腔不规则扩大,肺泡间隔破裂,有的肺泡融合成肺大泡,以吸烟6月组最为明显,肺组织结构表明COPD模型建立成功。RT-PCR结果表明,TGF-β1mRNA在正常肺组织中呈微弱表达,随吸烟时间的延长,TGF-β1mRNA表达增多,5月组表达最多。结论长期吸烟可引起气道壁炎细胞浸润及肺组织形态学变化,导致COPD发生。TGF-β1,表达随吸烟月份增加逐渐增多,肺组织结构破坏与TGF-β1表达有相关性,表明TGF-β1在COPD的发生和发展过程中起重要作用。     

心房颤动中钙耦联蛋白表达的实验研究

采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)方法研究起搏房颤 (AF)模型心房肌钙耦联蛋白———L型钙通道α1c亚基和肌浆网Ca2 + ATP酶的基因表达情况以及药物的干预作用。选择成年杂种犬 15条 ,随机分为起搏组 (P组 )、起搏及口服维拉帕米组 (PV组 )和对照组 (C组 )。采用心房猝发刺激诱发AF。其中P组和PV组的犬在诱发AF后置入起搏脉冲发生器作心房快速 ( 4 0 0次 /分 )起搏 7天。PV组的犬于起搏第 2天起给予维拉帕米缓释剂 12 0mg/天口服。第 7天再次诱发AF后将动物处死 ,于左、右心房和房间隔部位取材进行RT PCR扩增。结果 :心房快速起搏 7天后 ,阵发性AF和持续性AF的发生率明显增加。而加用维拉帕米后AF的发生率和起搏前没有差异。以 β actin为内参照的RT -PCR结果显示起搏组心房肌的L型钙通道α1c亚基和肌浆网Ca2 + ATP酶的mRNA水平明显降低(和C组相比分别降低 4 3 %和 4 0 %,P <0 .0 1)。而PV组第 7天心房肌L型钙通道α1c亚基和Ca2 + ATP酶的mRNA水平和C组相比则没有显著差异 (P >0 .0 5 )。心房不同部位之间的mRNA水平没有差异。结论 :心房起搏AF模型中心房肌细胞钙耦联蛋白L型钙通道α1c亚基和肌浆网Ca2 + ATP酶的基因表达明显下调 ;钙通道阻断剂维拉帕米可预防心房电重构和心房肌钙耦联蛋白的下调。     

p14ARF、ARF-BP1及c-myc mRNA在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨肝细胞癌组织中p14ARF、ARF-BP1 及c-myc的mRNA表达及其与临床参数关系.方法:采用半定量逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,对52例HCC组织及其中45例相应癌旁组织p14ARF、ARF-BP1及c-myc的mRNA表达丰度进行检测并分析他们之间的关系及其与临床参数的关系.结果:在52例HCC组织中p14ARF、ARF-BP1c-myc的mRNA各表达77.0%、77.0%和75.0%,与45例相应癌旁组织(11.1%、20.O%、53.3%)比较,呈高表达.p14ARF、ARF-BP1 mRNA的表达与肿瘤大小有关(t=2.169,2.087,均P＜0.05);而c-myc mRNA表达与肿瘤大小无关.p14ARF、ARF-BP1及c-myc的mRNA表达在性别、年龄、AFP、临床病理分级、浸润转移、HBV、包膜等无统计学差异.p14ARF与ARF-BP1、p14ARF与c-myc及ARF-BP1与c-myc的mRNA表达两两成正相关(r=0.565,0.436,0.584,均P＜0.01).结论:p14ARF、ARF-BP1、c-myc过度表达可能是HCC发生的早期指标;ARF-BP1过度表达可能是影响HCC发生、发展的关键,干预ARF-BP1可能是治疗HCC的新途径.     

风湿性心脏病心房颤动心房肌缝隙连接蛋白40和43 mRNA表达水平的变化

目的测定风湿性心脏瓣膜病(风心病)心房颤动(Af)心房肌缝隙连接蛋白(Connexin)40(Cx40)和Connexin43(Cx43)mRNA表达水平的变化。方法11例风心病患者[Af8例,窦性心律3例;男4例,女7例;平均年龄(50.8±13.7)岁;平均Af时间(5.6±6.5)年]的右心耳心肌1小块,提取所有标本的总RNA,等量转移至尼龙膜上,用PCR合成的特异cDNA探针,标记上放射性同位素(α32PdCTP)后与尼龙膜杂交,然后将杂交膜与X光胶片行放射自显影,在灰度扫描仪下得到每例标本mRNA水平的灰度值,为了进一步矫正转膜时可能的定量不统一,将同1块杂交膜先后与Cx40探针、Cx43探针和内参照βactin杂交,以Cx40/βactin和Cx43/βactin的百分比作为统计变量进行分析。结果在Af与窦性心律标本中,Cx40和Cx43的mRNA表达量未发生明显改变(P>0.05)。结论在风心病Af患者中,未发现缝隙连接蛋白Cx40和Cx43的mRNA表达量明显改变。     

氯通道CIC-1、CIC-2在人心房肌的表达及与心房颤动的关系

目的研究氯通道CIC-1和CIC-2基因在人心房组织的表达及与心房颤动（AF）的关系。方法将71例风湿性心瓣膜病接受换瓣手术患者分为三组，窦性心律（SR）组31例，阵发性房颤（PAF）组7例，慢性房颤（CAF）组33例，于术中获取右心耳组织，应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测心房组织CIC-1和CIC-2的mR—NA相对含量。结果（1）CIC—1、CIC-2基因在人心房组织有表达。②与SR组比较，PAF组CIC-1的mRNA表达增加但无统计学意义（1．05±0．22vs1．01±0．13，P〉0．05），CAF组的表达明显增加（1．25±0．18vs1．01±0．13，P〈0．001），CAF组较PAF组亦明显增加（P〈0．01）。CIC-1的mRNA表达水平与左房内径、AF持续时间呈正相关[（r=0．344，P=0．003）（r=0．405，P〈0．001）]。③与SR组比较，PAF组CIC-2的mRNA表达无增加（1．03±0．14vs1．04±0．15，P〉0．05），CAF组的表达明显增加（1．26±0．13vs1．04±0．15，P〈0．001），CAF组较PAF组亦明显增加（P〈0．01）。CIC-2的mRNA表达与左房内径、AF持续时间呈正相关[（r=0．441，P〈0．001）（r=0．331，P=0．0C15）]。结论AF患者CIC-1、CIC-2的mRNA表达水平的增加可能是心房肌电重构的分子基础。     

人食管癌组织中β1-整合素mRNA的表达及其意义

目的研究β1-整合素(β1-integrin)在人食管癌组织中的表达及其与食管癌的临床病理关系.方法采用RT-PCR方法检测30例人食管癌组织及癌旁正常食管组织中β1-integrin的表达.结果食管癌组织及癌旁正常食管组织中都有不同程度β1-integrin的表达,并且前者明显高于后者(1.205±0.379 vs 0.470±0.166,P=0.003);伴有淋巴结转移者食管癌组织β1-integrin表达量明显高于无转移者(1.534±0.229 vs 0.998±0.160,P=0.023).随食管癌分期增高,β1-integrin mRNA表达量也不断增高.结论β1-integrin可能在食管癌细胞的恶性生物学行为中具有重要的作用.     

房颤病人心房肌浆网钙调控基因mRNA表达变化的研究

心房颤动 (房颤 )的发生机制十分复杂 ,我们主要研究房颤病人心房肌肌浆网钙调控基因Ｃａ2 ＡＴＰ酶 (ＳＥＲＣＡ)、尼兰丁受体 (ＲｙＲ)及三磷酸肌醇受体 (ＩＰ3Ｒ)ｍＲＮＡ表达的变化 ,探讨房颤时心肌细胞内Ｃａ2 超负荷的原因。1.对象与方法 :38例风湿性心脏病二尖瓣狭窄病人均为 1999年 9月至 2 0 0 0年 6月住院接受开胸换瓣手术病人 ,男 16例 ,女 2 2例 ,年龄 2 7～ 70岁 ,平均 46 2岁。共分 3组 :Ａ组 13例 ,为窦性心律者 ;Ｂ组 8例 ,阵发性房颤 2例 ,持续性房颤 <6个月者 6例 ;Ｃ组 17例为房颤持续时间 >6个月者。术前常规行心…     

人食管癌组织中β1-整合素mRNA的表达及其意义

目的:研究β_1-整合素(β_1-integrin)在人食管癌组织中的表达及其与食管癌的临床病理关系.方法:采用RT-PCR方法检测30例人食管癌组织及癌旁正常食管组织中β_1-integrin的表达.结果:食管癌组织及癌旁正常食管组织中都有不同程度β_1-integrin的表达,并且前者明显高于后者(1.205±0.379 vs 0.470±0.166,P=0.003);伴有淋巴结转移者食管癌组织β_1-integrin表达量明显高于无转移者(1.534±0.229 vs 0.998±0.160,P=0.023).随食管癌分期增高,β_1-integrin mRNA表达量也不断增高.结论:β_1-integrin可能在食管癌细胞的恶性生物学行为中具有重要的作用.     

胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测60例胃腺癌组织及其癌旁正常组织中NPRL2 mRNA的表达。结果 NPRL2 mRNA在胃癌及癌旁正常组织中均有表达,但胃癌组织中NPRL2 mRNA的表达显著降低(IOD比值为1.099±0.285),与癌旁正常组织(IOD比值为1.582±0.305)相比P<0.05。NPRL2 mRNA的表达与肿瘤分化程度、有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度、临床分期及患者的年龄、性别无显著相关(P均>0.05)。NPRL2 mRNA在不同分化程度、不同临床分期、有无淋巴结转移及不同年龄、性别患者的胃癌组织中的表达无显著差异(P均>0.05)。结论胃癌组织中NPRL2mRNA表达降低,其在胃癌的发生、发展过程中可能发挥重要作用。     

房颤心房肌离子通道重构的研究

离子通道重构是参与房颤发生和维持的重要因素,对于房颤时心房离子通道改变的深入研究可能有助于解释房颤电重构的机制.文中概括介绍了不同类型离子通道在房颤中的变化及参与房颤电重构的机制,以期在一定程度上阐明离子通道功能变化在房颤发生、发展过程中的作用.     

联麦氧钒对糖尿病大鼠心肌脂蛋白脂酶mRNA表达的影响

目的　探讨糖尿病大鼠应用联麦氧钒 (BMOV)心肌脂蛋白脂酶 m RNA表达的变化规律。方法　采用逆转录聚合酶链式反应的方法。观察 BMOV治疗前后糖尿病大鼠心肌细胞脂蛋白脂酶 m RNA水平的变化。结果　糖尿病大鼠心肌脂蛋白脂酶 m RNA是升高的 ,经 BMOV治疗后心肌细胞脂蛋白脂酶 m RNA表达可降低 ,基本恢复到正常对照水平。结论　 BMOV可恢复糖尿病大鼠心肌细胞升高的脂蛋白脂酶 m RNA表达 ,调整脂代谢 ,改善心肌细胞能量物质的供给及利用。     

氯通道ClC-1、ClC-2在人心房肌的表达及与心房颤动的关系

目的研究氯通道ClC-1和ClC-2基因在人心房组织的表达及与心房颤动(AF)的关系。方法将71例风湿性心瓣膜病接受换瓣手术患者分为三组,窦性心律(SR)组31例,阵发性房颤(PAF)组7例,慢性房颤(CAF)组33例,于术中获取右心耳组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心房组织ClC-1和ClC-2的mR-NA相对含量。结果①ClC-1、ClC-2基因在人心房组织有表达。②与SR组比较,PAF组ClC-1的mRNA表达增加但无统计学意义(1.05±0.22vs1.01±0.13,P>0.05),CAF组的表达明显增加(1.25±0.18vs1.01±0.13,P<0.001),CAF组较PAF组亦明显增加(P<0.01)。ClC-1的mRNA表达水平与左房内径、AF持续时间呈正相关[(r=0.344,P=0.003)(r=0.405,P<0.001)]。③与SR组比较,PAF组ClC-2的mRNA表达无增加(1.03±0.14vs1.04±0.15,P>0.05),CAF组的表达明显增加(1.26±0.13vs1.04±0.15,P<0.001),CAF组较PAF组亦明显增加(P<0.01)。ClC-2的mRNA表达与左房内径、AF持续时间呈正相关[(r=0.441,P<0.001)(r=0.331,P=0.005)]。结论AF患者ClC-1、ClC-2的mRNA表达水平的增加可能是心房肌电重构的分子基础。     

风湿性瓣膜病心房颤动患者心房肌HCN2基因mRNA及蛋白的表达

目的研究风湿性心脏瓣膜病(简称风心病)心房颤动(简称房颤)患者心房肌超极化激活环化核苷酸门控通道-2(HCN2)基因mRNA及蛋白表达的变化。方法选取风心病二尖瓣狭窄患者38例,根据是否合并房颤将其分为两组,房颤组(n=21),窦性心律组(n=17),术中取右心耳组织,应用逆转录聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹法分别检测心房肌HCN2基因mRNA及蛋白的表达水平,并分析其与左右房内径的关系。结果与窦性心律组比较,房颤组心房肌HCN2 mRNA表达增加[(0.613±0.179)vs(0.439±0.158),P0.01],其蛋白表达亦增加[(0.431±0.195)vs(0.225±0.121),P0.01],但其表达与左右房内径无相关关系。结论风心病房颤患者心房肌HCN2基因表达上调。     

心房颤动患者心房肌组织CYP11B2的mRNA表达及研究

目的　探讨心房颤动患者心房肌组织醛固酮合成酶 (CYP11B2 )的mRNA表达情况。方法　 38例因心脏疾患住院接受开胸手术的患者 ,男 18例 ,女 2 0例 ,年龄 18～ 77岁 ,平均 (5 1.92± 14 .0 0 )岁。按有无心房颤动病史分为 3组 :窦性心律组 (SR组 ) ,11例 ;阵发性心房颤动组 (pAF组 ,心房颤动持续时间 <6个月 ) ,13例 ;慢性心房颤动组 (cAF组 ,心房颤动持续时间 >6个月 ,14例。半定量聚合酶链式反应技术测定CYP11B2mRNA在心房肌组织中的表达情况。结果　与SR组和 pAF组相比 ,cAF组患者左心房直径明显增大 (分别增大 78.8%和 37.5 % ,P <0 .0 1) ,CYP11B2mRNA表达水平明显升高 (分别升高 81%和 11.8% ,P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,并与左心房直径变化显著正相关 (P <0 .0 0 1,r =0 .82 7)。cAF组左心室射血分数明显低于SR组 (P <0 .0 5 )。结论　组织醛固酮增加可能参与了心房颤动发生的介导 ,该作用很可能通过促进心房结构重构来实现。     

NTCP在去迷走神经大鼠肝细胞中的表达及临床意义

目的：本实验拟通过建立去迷走神经肝支大鼠模型,观察Na＋/牛磺胆酸盐同向转运多肽（NTCP）在大鼠肝细胞中的表达变化,探讨迷走神经对肝细胞功能及状态的影响.方法：大鼠随机分为两组：A组：迷走神经肝支切断组 B组：假手术组每组20只.通过HE染色法光学显微镜下观察切断迷走神经肝支后的肝脏病理形态学改变,通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法在mRNA水平上检测NTCP表达及Western blotting法检测NTCP蛋白水平,来分析迷走神经对NTCP的改变,从而确定迷走神经对肝细胞功能及状态的影响.实验结果采用SPSS软件包分析.结果：去迷走神经组中,肝脏组织NTCP mRNA随着术后时间其表达明显下降,半定量提示Pst5d时与B组相比即有明显差异（P＜0.05）,至Pst9d时更加明显,仅微弱表达.Western Blotting 结果显示,A组Pst1d～9d,肝组织NTCP蛋白表达水平明显下降,以去迷走神经肝支后第9天最低,蛋白条带隐约可见,并且不是很完整.差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：去迷走神经状态对肝脏功能变化有一定影响,在去迷走神经肝支状态下,肝细胞功能下降,NTCP表达及蛋白水平减少,影响胆盐因子转运及表达.