hnRNP H与子宫内膜癌化疗敏感性的相关性

目的探讨敲低核不均一核糖核蛋白H(hnRNP H)对子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞紫杉醇化疗敏感性的影响。方法利用hnRNP H siRNA转染子宫内膜癌细胞Ishikawa,敲低目的基因表达,通过实时PCR和Western印迹检测(对照组、阴性对照组、siRNA组)hnRNP H mRNA、蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测紫杉醇对Ishikawa细胞存活率的影响,流式细胞仪检测对照组、紫杉醇组、siRNA组及紫杉醇+siRNA组各组细胞凋亡率的变化,Western印迹检测对照组、紫杉醇组、siRNA组及紫杉醇+siRNA组各组细胞凋亡蛋白(Caspase 3/9 Bcl-2、Bax)的表达变化。结果 Real-time PCR和Western印迹检测证实hnRNP H siRNA可有效降低hnRNP H在mRNA及蛋白水平表达。紫杉醇对细胞存活率的影响呈时间及剂量依赖性,流式细胞仪检测:对照组凋亡率3.07%,应用紫杉醇组凋亡率29.16%、沉默hnRNP H组凋亡率34.72%、应用紫杉醇+沉默hnRNP H组凋亡率45.03%;Western印迹检测凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、Bax在紫杉醇+siRNA组表达显著升高,与对照组、紫杉醇组、siRNA组相比有统计学差异(P<0.05),Bcl-2在紫杉醇+siRNA组表达显著下调,与对照组、紫杉醇组、siRNA组相比较差异显著(P<0.05)。结论应用siRNA沉默子宫内膜癌Ishikawa细胞中hnRNP H的表达,使Ishikawa对紫杉醇化疗敏感性明显增加,促使肿瘤细胞凋亡。HnRNP H可作为子宫内膜癌基因治疗新靶点。     

敲低hnRNP H基因对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和细胞周期的影响及意义

目的探讨不均一核糖体蛋白H(hnRNP H)siRNA敲低hnRNP H基因表达及其对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和周期的影响。方法将hnRNP H基因的小干扰RNA(siRNA)转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞株,细胞分对照组、阴性对照、siRNA组,通过实时定量PCR和Western印迹检测hnRNP H mRNA和蛋白水平,以确定siRNA转染效率。通过MTT实验检测各组细胞增殖情况;Western印迹检测三组细胞增殖蛋白PCNA核增殖抗原和细胞周期cyclin D1、CDK4的蛋白水平。结果敲低子宫内膜癌Ishikawa细胞hnRNP H基因的表达能有效抑制肿瘤细胞的生长,使增殖蛋白PCNA下降,下调细胞周期蛋白cyclin-D1、CDK4的表达。结论敲低hnRNP H基因可能是子宫内膜癌基因治疗靶点。     

LOX基因对人绒癌Bewo细胞侵袭转移的影响及意义

目的探讨采用赖氨酰氧化酶(LOX)小干扰RNA(siRNA)敲低LOX基因表达对人绒癌Bewo细胞侵袭转移的影响。方法将LOX基因的siRNA转染至人绒癌Bewo细胞株,细胞分对照组、阴性对照组、siRNA组,利用实时定量PCR、Western印迹方法检测,确定siRNA沉默效率(LOX mRNA、蛋白表达)、上皮间质转化(EMT)相关蛋白神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-7表达情况,Transwell检测细胞迁移能力的改变。结果对照组N-cadherin,MMP-2及MMP-7表达显著高于siRNA组(P<0.05)。结论沉默LOX基因能抑制绒癌Bewo细胞上皮间质转化,有效抑制人绒癌细胞转移和侵袭。敲低LOX基因可能是人绒毛膜癌基因治疗靶点。     

Six1对甲状腺癌细胞侵袭迁移的影响

目的探讨Six1对甲状腺癌细胞侵袭迁移的影响。方法甲状腺癌BCPAP细胞转染Six1小干扰RNA(Six1 siRNA)和小干扰RNA阴性对照(siRNA control),采用细胞划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭,Western印迹检测Six1、神经钙黏素(N-cadherin)、上皮钙黏附素(E-cadherin)蛋白表达。结果转染siRNA control后的BCPAP细胞迁移率、侵袭细胞数目及细胞中Six1、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达水平与没有转染的BCPAP细胞相比无变化。转染Six1 siRNA后的BCPAP细胞迁移率、侵袭细胞数目及细胞中Six1、N-cadherin蛋白表达水平与没有转染的BCPAP细胞相比明显降低,而E-cadherin蛋白水平明显升高。结论敲低Six1可能通过影响E-cadherin、N-cadherin表达抑制甲状腺癌细胞侵袭迁移。     

小干扰RNA沉默甲胎蛋白基因对HepG2细胞迁移及侵袭的影响

目的研究甲胎蛋白(AFP)对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法应用合成的靶向沉默AFP小干扰RNA(siRNA)转染肝癌HepG2细胞,分为空白对照、阴性对照组及AFP siRNA组,各组细胞干预48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和ELISA法检测细胞转染后的沉默效率,Transwell小室实验检测沉默AFP基因后HepG2细胞的侵袭、迁移能力,用Western blotting法观察沉默AFP基因的表达对上皮-间质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、Vimentin和E-cadherin)、AKT和p-AKT蛋白表达的影响。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果转染沉默后,与空白对照组相比,AFP siRNA组中AFP mRNA的相对表达量明显降低(P 0.01),抑制率达86.440%,同时AFP siR NA组细胞上清液中AFP蛋白表达水平同样明显降低(P 0.01)。与空白对照组相比,AFP siRNA组的迁移细胞数和侵袭细胞数显著下降,差异具有统计学意义(P值均0.01)。沉默HepG2细胞中AFP基因的表达后,与空白对照组比较,AFP siRNA组EMT相关蛋白E-cadherin蛋白的表达水平升高(P 0.01),而N-cadherin及Vimentin表达水平均明显降低(P值均0.05),且PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT的表达水平明显降低(P 0.01)。结论沉默AFP可抑制肝癌细胞转移,基于HepG2细胞株的机制研究可能与阻断PI3K/Akt通路抑制EMT相关。     

沉默MMP-13对皮肤基底细胞癌细胞侵袭、迁移及Wnt信号通路的影响

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-13表达量降低对皮肤基底细胞癌(BCC)细胞侵袭、迁移能力及对Wnt信号通路的影响。方法以人BCC A431细胞为研究对象,转染MMP-13 siRNA载体,实验分3组,对照组:未做任何处理的细胞;MMP-13组:细胞转染空载体pL ightS with-MMP13-NC;MMP13-siRNA组:细胞转染重组质粒pL ightS with-MMP13-siRNA。Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western印迹检测细胞中MMP-13、β-链蛋白(catenin)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)表达量。结果 MMP-13 siRNA组MMP-13蛋白表达量、细胞迁移、侵袭β-catenin、CyclinD1蛋白表达量均显著低于对照组及MMP-13组,E-cadherin蛋白含量显著高于对照组和MMP-13组(均P0.05)。结论沉默MMP-13的表达量可以降低BCC A431细胞的侵袭、迁移能力,其作用机制可能是通过抑制经典Wnt信号通路发挥作用的。     

miRNA-21调控胃癌细胞增殖及侵袭的机制

目的探讨靶向沉默miRNA-21表达对胃癌细胞增殖及侵袭的影响和机制。方法将人胃癌SGC-7901细胞分为正常对照组、转染siRNA Control的阴性对照组和转染siRNA miRNA-21基因的沉默组,按照Invitrogen公司的脂质体Lipofectamine~(TM)2000方法进行转染,48 h后,CCK8实验检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞侵袭能力;Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Notch1、Hes1蛋白表达。结果转染siRNA miRNA-21后能显著降低miRNA-21的表达(P<0.01);与正常对照组及转染阴性组比较,沉默组细胞存活率、细胞侵袭数显著降低,MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes1蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论靶向沉默miRNA-21表达能显著降低胃癌细胞的增殖及侵袭能力,其机制与抑制Notch1信号通路有关。     

转移相关基因1在老年子宫内膜癌中的表达及对侵袭转移的影响

目的探讨转移相关基因(MTA) 1在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞侵袭转移的影响。方法选择子宫内膜癌组织标本75例和正常子宫内膜标本75例,人子宫内膜癌HEC-1-C细胞分为siRNA MTA1组、阴性对照组和空白对照组。采用免疫组织化学法测定组织中MTA1蛋白的表达,采用RT-PCR测定组织和细胞中MTA1 mRNA的表达,采用Western印迹检测细胞中MTA1蛋白的表达,采用Transwell实验测定细胞的侵袭能力,采用划痕损伤实验测定细胞的迁移能力。结果子宫内膜癌组MTA1蛋白阳性率显著高于对照组(P<0. 05),MTA1 mRNA表达量明显高于对照组(P<0. 05)。siR-NA MTA1组HEC-1-C细胞中MTA1蛋白和mRNA表达均显著低于阴性对照组和空白对照组(P <0. 05)。siRNA MTA1组HEC-1-C细胞的穿膜细胞比例显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0. 05),HEC-1-C细胞迁移率显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0. 05)。结论子宫内膜癌组织中MTA1水平升高,沉默MTA1基因后子宫内膜癌细胞中MTA1水平下降,细胞的侵袭和迁移能力下降。     

siRNA介导COX-2基因沉默对大肠癌LoVo细胞侵袭及上皮间质转化的影响

目的探讨靶向沉默环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达对大肠癌LoVo细胞侵袭能力及上皮间质转化的影响。方法在体外COX-2 siRNA转染大肠癌LoVo细胞,RT-PCR及免疫印迹法验证转染后COX-2 mRNA及蛋白表达,Transwell小室法检测细胞侵袭能力的改变;免疫印迹法检测EMT标志物(E-cadherin、Vimentin、Fibronectin)、ERK/MAPK和PI3K/Akt通路相关蛋白(Akt、p-Akt、p-GSK-3β、ERK、p-ERK)及MMP-9表达的变化情况。结果 COX-2 siRNA转染大肠癌LoVo细胞后,COX-2 mRNA及蛋白表达下调,同时细胞侵袭能力降低;上皮标记物E-cadherin表达上调,同时间叶标记物Vimentin和Fibronectin表达下调;细胞总的ERK、Akt蛋白表达水平无明显改变,而p-ERK、p-Akt表达降低,同时,Akt下游效应蛋白p-GSK-3β表达也下调; MMP-9表达下调。结论 COX-2 siRNA转染有效抑制了大肠癌LoVo细胞COX-2表达,并可能通过阻滞细胞ERK/MAPK和PI3K/Akt通路,进而抑制EMT,下调MMP-9表达,降低细胞侵袭能力。     

Sox4在女性肺癌细胞上皮-间质转化中的作用及其机制

目的探讨Sox4在女性肺癌细胞上皮-间质转化(EMT)中的作用及其机制。方法 76例行肺癌根治术的女性肺癌组织标本为观察组,49例癌旁肺组织标本为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)和Western印迹法检测Sox4的表达水平;采用RNA干扰技术下调Sox4表达,利用脂质体2000向肺癌细胞系XWLC-05转染Sox4-si RNA,同时以未转染XWLC-05为对照,采用q PCR和Western印迹方法检测两组Sox4表达水平及内镜下黏膜切除术(EMR)上皮标记β-catenin、E-cadherin,间质标记Fibronectin、vimentin、N-cadherin的表达情况,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氯唑溴盐(MTT)、Transwell及细胞划痕实验检测转染组与未转染组细胞增殖、侵袭、迁移能力。结果观察组Sox4 m RNA水平及蛋白水平表达均明显高于对照组(P<0.05);转染组Sox4 m RNA水平及蛋白水平表达均明显低于未转染组(P<0.05);q PCR结果显示,转染组β-catenin、E-cadherin水平明显高于未转染组(P<0.05),转染组Fibronectin、vimentin、N-cadherin水平明显低于未转染组(P<0.05),Western印迹结果与q PCR检测结果相一致;MTT实验结果显示,转染Sox4-si RNA细胞后,XWLC-05细胞增殖能力与未转染组无明显差异(P>0.05),Transwell实验结果显示,转染Sox4-si RNA细胞后,XWLC-05细胞侵袭、迁移能力较未转染组明显降低。结论 Sox4可能是通过下调β-catenin、E-cadherin表达及上调Fibronectin、vimentin、N-cadherin表达促进EMT发生,诱导人肺癌细胞发生侵袭转移。     

LMO4基因沉默对Snail诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮—间质转化的影响研究

目的探讨LMO4基因沉默对Snail诱导的非小细胞肺癌A549细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,取对数生长期细胞进行实验,根据转染慢病毒分为sh-NC组(转染sh-NC慢病毒)、sh-LMO4组(转染sh-LMO4慢病毒)、Snail组(转染Snail慢病毒)和Snail+sh-LMO4组(转染Snail慢病毒和sh-LMO4慢病毒)。采用实时定量RT-PCR检测sh-NC组和sh-LMO4组LMO4 mRNA相对表达量,采用Western Bloting法检测sh-NC组和sh-LMO4组LMO4蛋白相对表达量及4组N-cadherin、Vimentin、E-cadherin蛋白相对表达量,采用Transwell实验检测4组细胞侵袭个数,采用细胞划痕实验检测4组细胞迁移距离。结果 sh-LMO4组LMO4 mRNA相对表达量和LMO4蛋白相对表达量均低于sh-NC组(P0.05)。Snail组侵袭细胞个数多于sh-NC组,sh-LMO4组侵袭细胞个数少于sh-NC组,Snail+sh-LMO4组侵袭细胞个数少于Snail组、多于sh-LMO4组(P0.05)。培养24 h后Snail组细胞迁移距离长于sh-NC组,sh-LMO4组细胞迁移距离短于sh-NC组,而Snail+sh-LMO4组细胞迁移距离短于Snail组、长于sh-LMO4组(P0.05)。Snail组N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量高于sh-NC组,E-cadherin蛋白相对表达量低于sh-NC组(P0.05);sh-LMO4组N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量低于sh-NC组,E-cadherin蛋白相对表达量高于sh-NC组(P0.05);Snail+sh-LMO4组N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量低于Snail组,E-cadherin蛋白相对表达量高于Snail组(P0.05);Snail+sh-LMO4组N-cadherin和Vimentin蛋白相对表达量高于sh-LMO4组,E-cadherin蛋白相对表达量低于sh-LMO4组(P0.05)。结论 LMO4基因沉默可逆转Snail诱导的非小细胞肺癌A549细胞EMT。     

胃癌成纤维细胞中HAS2对胃癌细胞转移的影响

目的探讨胃癌成纤维细胞中透明质酸合成酶(HAS2)对胃癌细胞转移的影响。方法从手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中分别分离及培养胃成纤维细胞(CAFs)及正常成纤维细胞(NFs)。蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫荧光染色检测CAFs与NFs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及HAS2的表达。利用siRNA下调CAFs中HAS2的表达,Western blot及免疫荧光染色检测CAFs中HAS2的表达,细胞迁移(Transwell)及划痕闭合实验检测胃癌细胞SGC7901的侵袭及迁移能力,Western blot检测SGC7901细胞上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin、vimentin及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。结果α-SMA与HAS2在CAFs中高表达,vimentin在CAFs与NFs中均表达,而E-cadherin在CAFs与NFs中不表达。与si-NC组相比,si-HAS2组CAFs中HAS2表达降低,SGC7901细胞的侵袭及迁移能力降低,SGC7901细胞中上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin表达升高,而Vimentin及N-cadherin表达降低。结论下调胃癌CAFs中HAS2的表达,可抑制胃癌细胞的侵袭、迁移及上皮-间质转化。     

叉头框蛋白E1对肝癌细胞侵袭及迁移能力的影响

目的研究叉头框蛋白(FOX)E1对肝癌细胞侵袭及迁移能力的影响。方法分别用qRT-PCR和Western印迹法测定肝癌细胞SMCC7721、Hep G2、HCCLM3和正常肝细胞HL7702中FOXE1 mRNA和蛋白水平。在HCCLM3细胞中转染FOXE1真核表达载体和对照空载体记为FOXE1组和Vector组,以不做处理的HCCLM3细胞为WT组。细胞划痕实验测定细胞迁移,Transwell小室测定细胞侵袭,Western印迹测定细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、上皮钙黏附素(E-cadherin)蛋白水平。结果肝癌细胞SMCC7721、Hep G2、HCCLM3中FOXE1 mRNA和蛋白水平均明显低于正常肝细胞HL7702(P0.05)。HCCLM3细胞中FOXE1 mRNA和蛋白水平显著低于SMCC7721、Hep G2(P0.05)。Vector组细胞侵袭、迁移及细胞中MMP-2、N-cadherin、Vimentin、E-cadherin蛋白与WT组相比差异无统计学意义(P0.05)。FOXE1组细胞侵袭、迁移及细胞中MMP-2、N-cadherin、Vimentin水平均明显低于WT组,而E-cadherin水平明显高于WT组,差异有统计学意义(P0.05)。结论FOXE1在肝癌细胞中低表达,FOXE1降低肝癌细胞侵袭和迁移能力,下调细胞中MMP-2、N-cadherin、Vimentin水平,促进细胞中E-cadherin表达。     

SEPT9基因在人肝细胞癌侵袭转移中的作用

目的研究SEPT9基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响。方法通过westernblot法筛选SEPT9蛋白高表达肝癌细胞系,慢病毒转染沉默后检测细胞SEPT9蛋白表达量,通过EdU染色检测sh-SEPT9对肝癌细胞增殖的影响;Transwell和划痕实验检测沉默SEPT9表达后肝癌细胞的侵袭能力和迁移能力;westernblot分析沉默SEPT9表达对肝癌细胞HIF-1α、Ki67、PCNA、MMP-9、VEGF、Vimentin, N-cadherin、E-cadherin蛋白表达影响。结果 westernblot显示SEPT9蛋白在肝癌HepG2细胞存在高表达,慢病毒转然能够获得稳定遗传的HepG2-SEPT9-shRNA细胞系,sh-SEPT9转然后,EdU染色显示HepG2细胞增殖受到明显抑制(P0.05),细胞的侵袭能力和迁移能力显著降低(P0.05);HepG2细胞Ki67、PCNA、Vimentin、N-cadherin、HIF-1α、MMP-9及VEGF表达量明显降低,E-cadherin的蛋白水平明显上升(P0.05)。结论 SEPT9基因通过增强肝癌HepG2细胞的EMT机制,促进肝癌HepG2细胞的侵袭转移。     

胃腺癌扭转基因和黏附素的表达及相关性

目的观察胃腺癌扭曲基因(Twist)、上皮型黏附素(E-cadherin)和神经型黏附素(N-cadherin)的表达及相关性。方法行根治手术治疗的61例胃腺癌患者作为观察组,留取术后的蜡块组织,22例距肿瘤边缘>5 cm的正常胃黏膜组织作为对照组,应用免疫组化方法检测两组中Twist、E-cadherin和N-cadherin的表达。结果观察组肿瘤组织中Twist阳性表达40例,在肿瘤与间质交界处的部分间质中可观察到Twist的表达。观察组中21例阴性表达(阳性细胞≤10%),在11例肿瘤与间质交界处的部分间质中可观察到Twist的表达。观察组肿瘤组织中Twist和N-cadherin表达的阳性率明显高于对照组,E-cadherin表达的阳性率明显低于对照组(均P<0.05),观察组肿瘤组织中Twist、E-cadherin和N-cadherin的表达与肿瘤的淋巴道转移和脉管累犯密切相关,Twist和E-cadherin的表达与肿瘤的最大径和浸润深度相关,E-cadherin的表达与肿瘤最大径相关(均P<0.05)。相关分析显示观察组中Twist和E-cadherin呈负相关,Twist和N-cadherin呈正相关(均P<0.05)。结论胃腺癌中Twist、E-cadherin和N-cadherin异常表达可以促进肿瘤的形成和进展,Twist在调节上皮间质转化的过程中对E-cadherin和N-cadherin调节的转移有明显作用。     

沉默CXCR4基因对食管鳞癌EC-9706细胞中MMP-9基因表达的影响

目的:探讨在食管鳞癌EC-9706细胞中沉默CXCR4基因对MMP-9基因表达的影响,为阐明CXCR4基因在食管鳞癌侵袭转移中的作用提供实验依据.方法:化学合成2条靶向CXCR4基因的siRNA1和siRNA2,同时设立荧光标记阴性对照和空白对照.脂质体法转染入EC-9706细胞,荧光显微镜下观察转染效率.转染48h后,半定量RT-PCR检测各组细胞CXCR4和MMP-9基因mRNA表达的变化,Western blot检测各组细胞CXCR4和MMP-9基因蛋白表达的变化,侵袭小室检测各组细胞穿膜细胞数的变化,MTT检测各组细胞的A值.结果:与阴性对照和空白对照相比,转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞CXCR4mRNA和蛋白的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);同时与阴性对照和空白对照相比,转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞MMP-9mRNA和蛋白的表达同样明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);转染CXCR4siRNA1和siRNA2组细胞穿膜细胞数与阴性对照和空白对照相比明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);MTT结果显示转染CXCR4siRNA1和siR...     

miR-325-3p靶向CLDN1调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移

目的 探讨微小核糖核酸-325-3p(miR-325-3p)靶向紧密连接蛋白1(CLDN1)调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移的作用。方法 将对数生长期的人肝癌细胞株SMMC-7721分为四组：阴性对照组、上调组、下调组和正常组。荧光显微镜观察各组细胞转染效率;细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖活性;侵袭小室(Transwell)实验检测各组细胞侵袭和迁移活性;实时-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-325-3p、CLDN1、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫印迹法(WB)检测各组CLDN1、ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达及p-ERK1/2水平;双荧光素酶报告基因检测验证miR-325-3p对CLDN1的作用。结果 阴性对照组、上调组和下调组细胞转染效率分别为(91.38±16.21)%、(92.17±15.93)%...     

桂皮醛通过TGF-beta信号通路调控结直肠癌细胞侵袭和转移研究

目的研究桂皮醛通过转化生长因子-β(TGF-β)信号通路调控结直肠癌细胞侵袭和转移的机制。方法用不同浓度桂皮醛处理人结肠癌SW480细胞,观察SW480细胞增殖活性、细胞凋亡、侵袭、转移能力及凋亡、上皮间质转化(EMT)、TGF-β/Smad3信号途径关键蛋白表达情况;用10 ng/m L的TGF-β1处理诱导SW480细胞EMT,并用80 mg/L的桂皮醇进行干预,观察SW480细胞中EMT、TGF-β/Smad3信号途径关键蛋白表达。结果桂皮醛处理后SW480细胞Bcl-2/Bax比率、细胞侵袭率、划痕愈合率、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、TGF-β、Smad3、Snail蛋白表达降低,细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达升高,差异有统计学意义(P 0. 05);桂皮醛干预后能够缓解TGF-β1处理后诱导的Vimentin、N-cadherin、MMP-9、Smad3、Snail蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论桂皮醛可能通过抑制人结肠癌细胞系SW480中TGF-beta/Smad3信号途径来抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,并抑制EMT,降低其侵袭转移能力。     

七氟烷对人脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响及相关机制

目的探讨七氟烷对人脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响及相关机制。方法接种对数生长期的人脑胶质瘤细胞U251于培养皿中,细胞传代后分为对照组及七氟烷组。对照组通入含5%CO_2及95%的空气,七氟烷组通入5%CO2及92.5%的空气和2.5%七氟烷,气流量为2 L/min,处理4 h。Transwell侵袭实验检测两组细胞侵袭能力的变化,细胞划痕修复实验检测细胞迁移能力,Western印迹检测两组细胞上皮间充质转化(EMT)相关分子[包括E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin、snail及紧密连接蛋白(Zo)-1]、肿瘤干细胞相关分子(包括CD133)及侵袭相关分子[包括基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9]表达的变化。结果七氟烷组穿透基底膜细胞数显著低于对照组(P<0.05)。七氟烷组细胞24 h后划痕修复面积差显著低于对照组(P<0.05)。七氟烷组相比对照组细胞E-cadherin及Zo-1表达显著上调,N-cadherin、snail、CD133、MMP-2及MMP-9表达显著下调(P<0.01)。结论七氟烷可显著抑制人脑胶质瘤细胞的侵袭迁移能力,相关机制可能与其对细胞干性、EMT及MMP的抑制作用有关。