基于心血管保护作用的三七粉质量标志物研究＊

目的 探索三七粉心血管保护作用的质量标志物。方法 采用CoCl₂制备心肌细胞（H9C2）损伤模型，观察三七粉主要成分对心肌细胞成活率、LDH、MDA、SOD的影响；采用H₂O₂制备人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型，观察三七粉中主要成分对内皮细胞存活率、LDH、ACP的影响。结果 人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rh₁、三七素能够显著增加H9C2细胞存活率（P<0.05，P<0.01），多个成分能够减少LDH、MDA，增加SOD；三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rh₁、三七素可显著提高HUVEC细胞存活率（P<0.05，P<0.01），多个成分能够减少LDH、ACP。结论 三七粉发挥心血管保护作用的药效物质基础包括多种皂苷类成分、三七素，以及黄酮类成分槲皮素。     

三七粉质量标志物研究＊

三七为常用中药材，具有散瘀、止血，消肿定痛的功效。三七粉作为三七市场应用的主要形式之一，市场逐年增大。现行标准难以评价和控制三七粉“多重功效”的质量特点。本课题组在系统辨识三七粉化学物质组及其传递规律的基础上，采用网络药理学和体内、体外模型，研究并阐明了三七粉的活血、心肌与血管保护、止血以及消肿定痛的药效物质基础；进一步结合成分的特有性分析，确定了三七粉的质量标志物；在此基础上，建立了基于质量标志物的三七粉的指纹图谱及“一测多评”的多指标含量测定方法，为建立三七粉整体质量控制方法提供了理论与实验证据。     

基于质量标志物的三七粉质量标准提升研究＊

目的 基于三七粉质量标志物的研究结果，完善三七粉质量标准，为其质量标准的修订提供科学依据。方法 利用高效液相色谱技术，结合“一测多评”等分析方法，对三七粉质量标志物进行含量测定，对不同厂家三七粉及不同商品规格原料药材进行质量标志物差异分析。建立指纹图谱，采用新的相似度计算模型-等同系数法和模式识别对三七粉及原料药材进行质量一致性评价。结果 不同厂家三七粉中三七素含量存在差异，收集到的白云山和黄中药三七粉中三七素含量均高于其余厂家，提示三七素可能为白云山和黄中药三七粉的优势指标。原料药材中三七素和皂苷含量与头数不具相关性，但与季节、部位具有相关性。皂苷方面表现为冬三七＞春三七，芦头＞主根＞须根＞筋条；三七素方面表现为冬三七＞春三七，须根＞芦头＞筋条＞主根。应用等同系数法计算指纹图谱相似度实现了不同厂家三七粉的区分，进一步结合化学模式识别实现了不同规格原料药材的区分。结论 建立的含量测定及指纹图谱方法稳定可行，专属性强，对于控制三七粉质量具有显著意义。与2020年版《中国药典》相比，该文修订了三七粉含量测定项，增加了HPLC指纹图谱项，可为三七粉的质量标准提升及其原料药材的选择提供科学依据。     

基于消肿定痛功效的三七粉质量标志物研究＊

目的 探究三七粉发挥消肿定痛功效的质量标志物。方法 首先，采用小鼠醋酸扭体实验，将ICR小鼠随机分成模型对照组、阳性对照阿司匹林组（0.12 g·kg^-1）、三七粉低（1.1 g·kg^-1）、中（2.2 g·kg^-1）、高（4.4 g·kg^-1）剂量组、三七总皂苷低（0.25 g·kg^-1）、中（0.5 g·kg^-1）、高（1.0 g·kg^-1）剂量组，连续给药3天每日1次，第3天给药1 h后腹腔注射1%醋酸溶液，记录15 min内扭体次数。进一步采用LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7炎症模型，探讨三七粉中的三七总皂苷及14个代表性单体成分对细胞上清液中NO、TNF-α和IL-6的含量影响。结果 实验表明，与模型组比较，三七粉及三七总皂苷中、高剂量组均能显著减少扭体反应次数（P<0.05，P<0.01）；三七总皂苷及14个化合物均能显著降低细胞上清液中NO、TNF-α、IL-6含量（P<0.05）。结论 三七粉具有良好的抗炎、镇痛作用，其发挥消肿定痛的药效物质基础可能为三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷F2、人参皂苷Rk1、槲皮素、三七素。     

三七粉血清药物化学研究＊

目的 采用超高效色谱-电喷雾/四级杆飞行时间串联质谱联用（UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS）技术对三七粉中主要化学成分和血中移行成分进行准确快速鉴定。方法 采用Waters Xevo G2 Q-Tof高分辨质谱、Waters Acquity UPLC液相色谱系统、Waters Acquity UPLC? BEH C₁₈色谱柱（2.1×100 mm， 1.7 μm），以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，采用电喷雾（ESI）离子源，在正、负离子模式下采集数据，通过与对照品的保留时间及质谱信息对比，并结合文献报道及质谱数据库中相同成分或同类成分的精确分子质量、质谱裂解规律进行匹配，对三七粉中化学成分和血中移行成分进行快速准确识别。结果 三七粉中共鉴定得到54个化学成分，包括原人参二醇皂苷类36个，原人参三醇皂苷类14个，黄酮类1个，糖类1个，氨基酸类1个和酯类化合物1个。在给药大鼠血浆中共鉴定得到18个三七粉相关的外源性化合物，包括14个吸收原型药物成分和4个代谢物。结论 利用建立的定性分析方法快速准确地识别三七粉中主要化学成分和血中移行成分。明确了三七粉体外化学成分组-体内血行成分组的药效物质基础传递-转化过程，为三七粉的质量标志物确定与质量控制提供依据，也为其深入分子作用机制研究奠定基础。     

三七的研究进展及其质量标志物预测分析

三七是我国常用的大宗中药材,其中化学成分类型丰富,包括三萜皂苷、黄酮、氨基酸、多糖、挥发油等类成分,传统认为三萜皂苷类成分为其主要药效成分.从化学成分和药理作用等几个方面对三七的研究现状进行综述,在此基础上,根据中药质量标志物(qualitymarker,Q-Marker)理论,探究人参属药用植物亲缘关系,结合三七生源...     

超细三七粉质量标准研究

目的：建立超细三七粉饮片质量评价方法。方法：采用HPLC法测定超细三七粉中单体皂苷R1、Rg1、Rb1的含量结果：样品在线性范围内有良好的线性关系．三七皂苷R1的平均回收率为100．02％．RSD为2．20%；人参皂苷Rg1的平均回收率为99．25%．RSD)为2．39%；人参皂苷Rb1的平均回收率为98．49％．RSD为2．31％(n=5)结论：HPLC、梯度洗脱法能将多种皂苷很好地分离检测．提高了时效．减少了误差．结果表明该方法准确可靠．重现性好．结果稳定。     

三七叶抗抑郁作用研究概况

抑郁症的发病率越来越高,中药治疗有着不可取代的优势,越来越多的学者开始致力于研究中药的抗抑郁作用。随着对三七叶越来越深入的研究,人们发现三七叶里的三七叶总皂苷、槲皮素、人参皂苷Rg1、Rb1、Rb3等在小鼠"行为绝望"模型和慢性应激导致的大鼠抑郁模型中,均表现出抗抑郁活性。对其抗抑郁作用的研究已成为近几年的新热点。深入研究三七叶抗抑郁作用的机理和药效学基础,对揭示抑郁症的发病机制,开发新的抗抑郁药物具有参考价值。     

三七总皂苷调节能量代谢干预心肌细胞肥大的效应机制研究＊

目的 探讨三七总皂苷（Panax notoginsenosides，PNS）调节能量代谢干预心肌细胞肥大的效应和机制。方法 采用异丙肾上腺素（Isoprenaline，ISO）诱导原代心肌细胞肥大模型，探讨PNS干预心肌细胞肥大的效应及能量代谢相关机制。将新生乳鼠心脏进行心肌细胞分离培养，随机分为正常组、ISO模型组、PNS低剂量组及PNS高剂量组。正常组和ISO模型组给予生理盐水；PNS低、高剂量组分别给予50 μg/mL及200 μg/mL PNS；孵育30 min后，ISO模型组和PNS低、高剂量组给予10 μmol/L ISO，正常组给予等体积生理盐水。培养72 h后，测定各组心肌细胞横截面积，ATP含量及脑钠肽（Brain natriuretic peptide，BNP）、过氧化物酶体增殖物激活受体-δ（peroxisome proliferators-activated receptors-δ，PPAR-δ）、长链酰基辅酶A脱氢酶（Long chain acyl-CoA dehydrogenase,LCAD）、中链酰基辅酶A脱氢酶（Medium chain acyl-COA dehydrogenase,MCAD）等基因表达水平、PPAR-δ蛋白表达及miRNA-199a表达水平。结果 与正常组比较，ISO模型组心肌细胞横截面积显著增大，ATP水平显著降低，miRNA-199a表达及BNP mRNA表达水平显著上调，PPAR-δ、LCAD、MCAD mRNA表达水平显著下调，PPAR-δ蛋白水平显著下调；与ISO模型组比较，PNS低、高剂量组心肌细胞横截面积显著减小，ATP水平显著升高，miRNA-199a表达及BNP mRNA表达水平显著下调，LCAD、MCAD mRNA表达水平显著上调，PPAR-δ蛋白水平显著上调。结论 PNS具有显著直接抑制心肌细胞肥大的效应；PNS干预MiR-199a/PPAR-δ调控、改善心肌能量代谢可能是其抑制心肌细胞肥大的作用机制之一。     

三七皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用的研究

目的：研究三七皂苷对阿霉素所致心肌损伤的保护作用及其对阿霉素抗肿瘤活性的影响。方法：15 mg·kg^-1腹腔注射阿霉素造成小鼠急性心肌损伤模型,观察不同剂量三七皂苷(25,50,100 mg·kg^-1)干预对动物血清心肌酶谱指标及心肌组织中抗氧化酶活力的影响；采用大鼠心肌细胞H₉C₂,考察不同质量浓度三七皂苷(625～100 mg·L^-1)减轻阿霉素心肌细胞毒性的作用；以MTT法测定三七皂苷对阿霉素抑制肿瘤细胞生长作用的影响。结果：阿霉素显著升高小鼠血清心肌酶指标,降低心肌组织抗氧化酶活力,不同剂量三七皂苷均能减轻心肌损伤、抑制心肌组织抗氧化酶活力的下降。阿霉素抑制离体培养心肌细胞的活力,三七皂苷能提高细胞存活率,但并不拮抗阿霉素对肿瘤细胞生长的抑制作用。结论：三七皂苷在体内和体外均显示减轻阿霉素心脏毒性的作用,同时并不影响后者抑制肿瘤细胞生长的作用。     

三七生长年限对5个皂苷及其抗血栓作用的影响

目的 通过比较分析不同生长年限对三七质量、皂苷含量及抗血栓作用的影响,为确定三七药材适宜的采收年限提供数据支持。方法 建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定三七中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd、人参皂苷Re、三七皂苷R₁ 5个主要皂苷,比较1—6年不同生长年限的三七有效成分的积累情况。同时,利用斑马鱼血栓模型比较1、2、3年生三七的抗血栓作用。结果 1—3年生三七质量、5个皂苷含量均随生长年限的增加逐渐累积,其中人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb₁的含量均较高,随年限变化最显著;而4—6年生三七中质量、皂苷含量受批次个体等影响较大,皂苷含量波动较大,与3年生三七相比差异无统计学意义。1—3年生三七抗血栓作用比较中发现,在相同剂量下,生长年限越长,疗效越好;在相同生长年限下,剂量越大,疗效越好。结论 综合品质、产量、种植成本及活性等因素,结合目前产地种植三七的实际情况,3年生三七整体品质较高且趋于稳定,可为三七标准化采收提供依据。     

基于偏最小二乘判别分析建立熟三七粉的质量评价方法

目的 建立熟三七粉的HPLC特征图谱,并对其8种稀有皂苷的含量进行测定,结合偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）和聚类分析,为熟三七粉质量的科学评价提供方法。方法 采用Agilent Zorbax SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈（A）-水（B）为流动相洗脱梯度：0~10 min,19%~33% A;10~30 min,33%~38% A;30~45 min,38%~50% A;45~60 min,50%~60% A,体积流量1.0 mL/min,检测波长203 nm,柱温40℃,进样量10 μL,建立熟三七粉的HPLC特征图谱,并对其人参皂苷20（S）-Rh₁、20（R）-Rh₁、Rk₃、Rh₄、20（S）-Rg₃、20（R）-Rg₃、Rk₁和Rg₅共8种指标性成分定量测定方法进行方法学考察,对63批熟三七粉进行含量测定。结果 建立了熟三七粉的HPLC特征图谱,共标定19个共有峰。同时测定8种稀有皂苷成分含量,色谱峰达到了较好的分离,且线性关系良好,8种皂苷线性回归方程的相关系数分别为0.999 9、0.999 5、0.999 4、0.999 3、0.999 1、0.999 3、0.999 1、0.999 3;平均加样回收率为95%~105%;RSD值均低于2%。63批样品按色泽分为棕红色与淡黄色2组,棕红色组质量明显优于淡黄色组。结论 熟三七粉的质量优劣与色泽有关,该方法灵敏、准确、重现性好,可为熟三七粉的质量评价提供参考。     

人参、西洋参及三七参指纹图谱鉴别

目的 :对人参、西洋参和三七参进行指纹图谱研究。方法 :PolarisC₁₈-A ,乙腈-水梯度脱 ,流速 1.5ml·min^-1,检测波长 203nm。结果和结论 :3种参的皂苷类成分均得到很好分离 ,该法可有效鉴别人参、西洋参和三七参。     

三七总皂苷离子敏感型鼻用原位凝胶的制备

目的 制备离子敏感型三七总皂苷(PNS)鼻用原位凝胶.方法 以去乙酰结冷胶为材料,采用旋转黏度计测定溶液-凝胶相转变特性筛选处方;采用HPLC法测定PNS中人参皂苷Rg1,并以不同动物模型对制剂进行安全性评价.结果 离子敏感型原位凝胶的黏度随着去乙酰结冷胶质量分数的增加而上升,加入模拟鼻液后形成具有一定强度的凝胶.该制剂的pH值为6.0～6.5,人参皂苷Rg1在0.2～50 μg/mL线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为101.72%,RSD为1.74%.本制剂能延长药物与鼻黏膜的接触时间.结论 该制剂制备工艺简便,性质稳定,安全无明显刺激性,在PNS鼻腔给药方面表现出良好的发展潜力.     

三七总皂苷对大脑基底核损伤动物模型大脑神经元突触素的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对大脑基底核损伤动物模型突触素(SYP)损害的保护作用。方法:以D-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸(IBA)定位注射损毁双侧大脑Meynert基底核建立老年性痴呆(AD)大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片突触素SYP免疫反应活性。结果:PNS能明显减轻由D-半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑突触素SYP免疫反应活性水平。结论:PNS对AD动物模型大脑神经元突触素SYP的损害具有保护作用。