甲状腺肿瘤组织中雌激素受体β1和β2的表达及其意义

采用RT-PCR检测10例甲状腺乳头状腺癌(PTC)和10例癌旁正常甲状腺组织雌激素受体(ER)β1、ERβ2以及ERα的表达,同时用免疫组织化学方法检测107例甲状腺癌、56例甲状腺腺瘤和10例正常甲状腺组织中ERβ1和ERβ2表达,并结合甲状腺癌ERα表达及其它主要临床病理参数进行分析.结果显示,ERα mRNA在PTC组织的表达明显高于癌旁正常组织,ERβ2 mRNA在PTC组织的表达明显低于癌旁正常组织(P＜0.05);正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中3种ER的表达差异均有统计学意义( P＜0.05);ERβ1和ERβ2在甲状腺癌中的表达与其组织类型有关;甲状腺组织中ERβ1和ERβ2的表达与ERα呈低、中度负相关(ERβ1:r=-0.206,P=0.042;ERβ2:r=-0.545,P＜0.01);ERβ2的表达还与淋巴结转移以及TNM分期有关.提示ERβ2的表达缺失可能导致甲状腺滤泡上皮细胞的增生和癌变以及肿瘤的演进,并且有一定的预后评估价值.     

胃癌雌激素受体α、β与孕激素受体mRNA的表达及意义

目的观察胃癌雌激素受体（ER）α、β及孕激素受体（PR）mRNA的表达,并探讨其意义。方法采用sybrgreen荧光定量PCR法检测30例胃癌组织ERα、B及PR的mRNA表达,观察不同病理预后因素与其表达的关系。结果胃癌组织中ERa、B及PRmRNA表达水平分别为1．948±2．905、1．477±1．367、5．520±8．430,以PRmRNA为最高。低分化腺癌及分化程度低的胃癌组织ERβmRNA表达高（P均〈0．05）。ERdmRNA、PRmRNA与病理类型及分化程度无相关关系。结论ERβmRNA的表达差异与胃癌的病理类型和分化程度有关。     

HER-2、PTEN蛋白及ERα在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的检测子宫内膜癌组织中HER-2、PTEN蛋白及雌激素受体亚型(ERα)表达并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测60例子宫内膜癌、32例正常子宫内膜组织中HER-2、PTEN蛋白及ERα的表达。结果在正常的子宫内膜HER-2蛋白为低表达,子宫内膜癌中HER-2的表达率明显增高(P0.05),而且HER-2的表达与肿瘤组织学分级、病理学分期以及肿瘤浸润子宫肌层深度显著相关(P0.05),其表达与组织学类型、有无淋巴结转移无关(P0.05)。子宫内膜癌组织中PTEN缺失率高于正常子宫内膜组织(P0.05)。PTEN表达在G1级肿瘤高于G2、G3级(P0.05),PTEN蛋白缺失率与肿瘤组织类型有关(P0.05),与肌层浸润、淋巴结转移及病理分期无明显关系(P0.05)。HER-2与PTEN的表达呈呈明显负相关。ERα在子宫内膜癌表达低于正常子宫内膜,且随着病理分期表达显著降低(P0.05)。结论 PTEN表达缺失与临床病理参数无关,蛋白表达缺失常发生细胞分化较差的子宫内膜癌。PTEN蛋白表达缺失与HER-2表达水平有关。     

甲状腺功能减退大鼠脑海马组织T3核受体基因表达

目的了解甲状腺功能减退(简称甲减)大鼠海马组织T3核受体(T3NR)α、β亚型mRNA的特异性变化,探讨甲状腺激素对脑发育及功能调控的分子机制。方法采用丙基硫氧嘧啶(PTU)腹腔注射诱发甲减动物模型,运用RT-PCR检测技术测定实验性甲减大鼠脑海马组织T3NRα1mRNA、T3NRβ1mRNA的表达水平。结果甲减大鼠海马组织T3NRα1mRNA、T3NRβ1mRNA的表达水平明显下调,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论甲减时脑组织T3NRα、β亚型mRNA的表达水平下调,T3NR的合成减少,导致甲状腺激素的生物效应的降低,可能是甲减性脑损害发生的重要病理机制之一。     

雌激素受体亚型ERα、ERβ在乳腺癌中的表达

目的研究雌激素受体亚型ERα、ERβ在不同乳腺组织中的表达及其在浸润性乳腺癌中与肿瘤病理参数和生物学标志物之间的关系。方法选取70例乳腺癌(其中8例原位癌、44例浸润性导管癌、18例浸润性小叶癌)、15例乳腺增生、15例正常乳腺组织石蜡标本,用免疫组织化学法检测ERα、ERβ、C-erbB-2的表达情况。结果 (1)乳腺癌组织中的ERα阳性表达率明显高于正常乳腺及乳腺增生组织;晚期乳腺癌患者ERα阳性表达率明显低于早期患者;C-erbB-2阳性患者的ERα阳性表达率明显减低。(2)乳腺癌组织中的ERβ阳性表达率明显低于正常乳腺及乳腺增生组织;在浸润性乳腺癌中淋巴结转移阳性者、C-erbB-2表达阳性者的ERβ阳性表达率明显高于对照组患者。结论 ERα在乳腺癌的发生发展中可能起到促进作用,ERα的阳性表达与一些预后良好因素相关。ERβ可能对维持乳腺组织的正常生理功能起着重要作用,其与某些预后不良因素可能相关。     

雌激素受体α和β及孕激素受体在胃癌中的表达及意义

运用Picture^TM-PV6000免疫组化技术检测48例胃癌及癌旁组织中雌激素受体α（ERα）和β（ERβ）、孕激素受体（PR）的表达。结果发现ERα和PR阳性染色只在细胞核内，在癌组织中表达阳性率分别为33．3％和29．2％。而癌旁组织均无表达，P〈0．001，ERβ主要表达在细胞核内。在癌组织和癌旁组织表达阳性率分别为70．8％和72．9％，P〈0．05。PR表达与ERα有高度相关性（P〈0．01）。而与ERβ无相关性。ERα和ERβ、PR三者共同表达阳性率18．75％，明显高于ERα、PR共表达（2．08％）或ERβ、PR共表达（6．25％），P〈0．01。Borrmann分型Ⅲ＋Ⅳ型（浸润型癌）者ERα阳性率（42．4％）显著高于BorrmannⅠ＋Ⅱ型（局限型癌）者（13．3％）。P〈0．05；有淋巴和远处转移者阳性率显著高于无转移者（P〈0．05）IERα和孕激素受体在印戒细胞癌、黏液腺癌、低分化腺癌等分化低的胃癌中表达较高，在中、高分化胃癌中表达较低。但无显著差异，与年龄、性别、肿瘤大小、部位和浸润深度无明显相关性。认为ERα、ERβ及PR在胃癌中均有表达，ERβ占优势IERα在胃癌中表达高于癌旁组织。并与胃癌Borrmann分型、淋巴和远处转移相关。ERα、ERβ及PR阳性胃癌是性激素依赖性肿瘤，可行内分泌治疗，并应针对ERα和ERβ的不同表达选择药物。     

雌激素通过受体介导的通路影响大鼠心脏心钠素表达

目的研究雌激素对卵巢切除大鼠心脏雌激素受体(ER)α和β的调控及对血压、心率、心肌细胞心钠素(ANP)基因表达、合成和释放的影响。方法成年雌性Wistar大鼠随机分成5组假手术组,卵巢切除组和卵巢切除不同剂量17β-雌二醇组(80、800、8000ng·g-1·d-1)。测量大鼠收缩期血压(SBP)、心率;采用半定量RT-PCR和Western印迹方法,探讨不同剂量的17β-雌二醇对卵巢切除大鼠心脏ERα和ERβmRNA、ER蛋白质的表达调控及对ANPmRNA表达的影响;放射免疫方法测定血浆和心房组织ANP含量。结果超生理剂量的17β-雌二醇能降低卵巢切除大鼠SBP,减慢心率;成年雌性大鼠心脏ERαmRNA高于ERβmRNA的表达水平,而心房ERαmRNA表达又明显超过心室;卵巢切除减少心房ERαmRNA和蛋白质的表达,下调ANPmRNA,使心房组织和血浆ANP含量明显降低[(121±19)ng/mg组织vs(184±12)ng/mg组织,(196±21)ng/Lvs(288±36)ng/L,P<0.01];生理剂量17β-雌二醇能逆转上述改变。随剂量增加,17β-雌二醇的这种作用在一定程度上呈剂量依赖性关系。但卵巢切除和17β-雌二醇替代并不影响心脏ERβmRNA、心室ERαmRNA表达。结论超生理剂量雌激素可降低卵巢切除大鼠SBP,心率;ERα的高水平表达说明ERα是雌激素对心脏调控的优势受体;雌激素对心脏作用的主要靶部位是心房;雌激素促进心房肌细胞ANPmRNA的表达、合成和释放,通过受体依赖的ANP介导的通路发挥作用。     

胰腺癌中ERα变异体的表达

目的检测胰腺癌中雌激素受体α(ERα)不同变异体ERC4、ERD3、ERD5mRNA的表达。方法采用免疫组化和RT-PCR检测技术,对50例胰腺癌和20例乳腺癌患者ERα的表达以及变异体ERC4、ERD3、ERD5mRNA的表达进行检测。结果胰腺癌ERα蛋白的阳性率为32％。ERD3mRNA在ER阳性胰腺癌表达低于阴性病例;ERC4mRNA在ER阴性胰腺癌表达明显低于阳性病例(P<0.05);ERD5mRNA在ER阳性胰腺癌表达低于阴性病例。结论ERα变异体的检出说明它们在胰腺癌发生过程中起一定的作用。在胰腺癌的发生过程中,ERα变异体mRNA的表达失控。     

雌激素受体基因在乙菧酚诱发的大鼠催乳素瘤中的表达

目的 研究雌激素受体（ER）α、ERβ和断裂的雌激素受体产物－1（TERP－1）在乙Di酚（DES）诱发的大鼠催乳素瘤中的表达。方法 雌性Wistar大鼠摘卵巢后皮下植入含DES20mg的硅胶管,以空白硅胶管作对照。8周后处死动物,用放免法测定大鼠血清催乳素,观察大鼠垂体组织学改变,并用免疫组化方法检测催乳素染色阳性细胞,用逆转录－聚合酶链反应分析垂体组织中ERα、ERβ和TERP－1 mRNA的转录水平。结果 实验组大鼠血清催乳素水平、垂体重量和垂体组织催乳素阳性细胞均明显高于对照组（P＜0.001),ERα、ERβ和TERP－1 mRNA在两组大鼠垂体组织中均有转录,其中ERα和TERP－1 mRNA在实验组中的转录水平比在对照组高（P＜0.001和P＜0.05)。结论 雌激素可以通过雌激素受体直接影响垂体催乳素细胞。正常的雌激素受体与异常的雌激素受体的共同存在提示雌激素调节作用的异质性,它们之间的朴素关系及与垂体肿瘤发生的关系,有待进一步阐明。     

雌激素受体α的突变mRNA在乳腺癌肿瘤组织及癌旁正常组织中的表达

为检测正常乳腺组织及乳腺癌组织中野生型雌激素受体α不同mRNA突变体ERC_4、ERD_3、ERD_5mRNA的表达,采用巢式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测技术,对18例乳腺癌患者正常乳腺组织及乳腺癌组织中野生型雌激素受体α不同mRNA突变体进行检测。结果:在ER阳性/PR阳性组中,ERC_4mRNA在肿瘤组织中的表达比正常组织中明显增高;在肿瘤组织中,ERD_3mRNA的表达比相邻的正常组织中的表达有降低的倾向,但仅在ER阳性组中有统计学显著性差异;乳腺癌组织中ERD5mRNA的表达比相应的正常乳腺组织显著升高;在乳腺癌的发生过程中,ERα突变体mRNA的表达失控。     

胰腺癌中ERα变异体的表达

目的检测胰腺癌中雌激素受体α(ERα)不同变异体ERC4、ERD3、ERD5 mRNA的表达.方法采用免疫组化和RT-PCR检测技术,对50例胰腺癌和20例乳腺癌患者ERα的表达以及变异体ERC4、ERD3、ERD5 mRNA的表达进行检测.结果胰腺癌ERα蛋白的阳性率为32%.ERD3 mRNA在ER阳性胰腺癌表达低于阴性病例;ERC4 mRNA在ER阴性胰腺癌表达明显低于阳性病例(P < 0.05);ERD5 mRNA在ER阳性胰腺癌表达低于阴性病例.结论 ERα变异体的检出说明它们在胰腺癌发生过程中起一定的作用.在胰腺癌的发生过程中,ERα变异体mRNA的表达失控.     

肝纤维化过程中去甲肾上腺素各受体亚型表达的动态变化

目的 研究肝纤维化过程中去甲肾上腺素各受体亚型表达的动态变化.方法 胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,HE,Masson染色观察肝脏病理形态学变化;免疫组织化学法检测肝星状细胞活化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;Western blot和实时荧光定量PCR检测α-肾上腺素受体(AR)、β1-AR、β2-AR蛋白和mRNA的表达水平.对数据进行单因素方差分析,LSD检验及相关分析.结果 HE及Masson三色染色显示:随着造模时间延长肝纤维化程度逐渐加重.α-SMA免疫组织化学染色显示:随着肝纤维化的发展,大鼠肝组织中α-SMA阳性细胞明显增多,造模1、2、3,4周时分别为10.58%±1.75%,24.14%±2.02%、29.74%±2.59%,34.28%±2.01%,而假手术组为4.12%±1.51%,P＜0.01.Western blot检测结果显示,造模1～4周大鼠肝组织α-AR、β1-AR,β2-AR蛋白表达量均明显升高(P＜0.05).实时荧光定量PCR结果证实,随着肝纤维化的发展,α-AR、β1-AR、β2-AR mRNA表达水平均逐渐上升(P＜0.01).α-SMA与α-AR、β1-AR、β2-AR蛋白表达水平的相关分析显示,α-SMA与α-AR、β1-AR及β2-AR呈正相关,r值分别为0.564,0.753和0.606.结论 胆总管结扎法成功建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型,在肝纤维化形成过程中肝星状细胞表达α-SMA增加.随着肝纤维化的进展,α-AR、β1-AR、β2-AR蛋白及mRNA水平明显增加,且与α-SMA呈正相关.     

钠葡萄糖转运子1和表皮生长因子受体2 mRNA在结直肠癌中表达的相关性

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中钠葡萄糖转运子(SGLT)-1和表皮生长因子受体(HER)-2 mRNA的表达及其临床病理意义及二者的相关性。方法应用real-time PCR法检测35例CRC组织及10例切缘无瘤黏膜组织中SGLT-1和HER-2 mRNA的表达情况,并观察其表达差别。结果 SGLT-1和HER-2 mRNA在CRC中的表达明显高于切缘无瘤黏膜。CRC患者中SGLT-1 mRNA的表达与性别、年龄、组织分型、分化程度以及淋巴结转移无关(P>0.05);HER-2 mRNA在有淋巴结转移组中的表达量明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。SGLT-1和HER-2 mRNA表达呈正相关(r=0.416,P=0.016)。结论 CRC中SGLT-1、HER-2 mRNA的表达增高可能与CRC的早期发生、发展有关,并可能存在协同作用。     

雌激素受体在肝细胞癌中的表达及意义

临床发现原发性肝癌的发病有明显性别差异 ,(男∶女为 6～ 1 1∶ 1 ) ,雄激素受体 ( AR)的表达随着肝癌的形成、发展而增加[1] ,AR阳性的肝癌较阴性者有较高的复发率 [2 ]。但关于雌激素受体 ( ER)在肝癌组织中表达的研究较少。我们对 49例肝细胞癌( HCC)患者癌组织的 ER表达情     

雌激素对老年雌鼠阴道NOS及雌激素受体的影响

目的 研究雌激素对老年雌性大鼠阴道组织一氧化氮合酶(NOS)活性及雌激素受体(ER)亚型的影响,探讨雌激素作用于女性性功能的可能机制.方法 SD雌性大鼠分三组:青年组(3月龄)、老年组(20月龄)、苯甲酸雌二醇治疗组,比色法检测阴道组织NOS的活性,免疫组化法检测ER α和β的表达.结果 老年大鼠阴道NOS活性下降,而阴道上皮细胞ERα、平滑肌细胞ERα和ERβ表达增加,雌激素治疗能逆转这些变化.大鼠血清雌二醇浓度与阴道组织NOS活性呈正相关,两者均与阴道上皮细胞ERα、平滑肌细胞ERα和ERβ呈负相关,而与大鼠阴道上皮细胞ERβ、基质纤维细胞ERα和ERβ无相关性.结论 雌激素可以通过调节阴道NOS维持女性性功能,这一过程与阴道上皮细胞ERα、平滑肌细胞ERα和ERβ密切相关.     

心力衰竭患者外周血淋巴细胞α/δ环磷酸腺苷反应元件结合蛋白基因表达水平

目的 探讨慢性心力衰竭(心衰)患者环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)α或δ亚型基因表达及其他β受体信号转导相关基因表达水平的变化。方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法定量检测了正常人与心衰患者外周血淋巴细胞α环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(α-CREB)、δ环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(δ-CREB)、诱导性腺苷酸环化酶早期阻遏物(ICER)、β受体激酶1(β-ARK1)、β受体激酶2(B-ARK2)、β阻抑蛋白1(β—arrestinl)六种基因的信使核糖核酸(mRNA)水平。结果 核转录因子CREB的不同亚型出现不同变化,心衰时α—CREB表达水平升高(P<0.01),δ-CREB表达水平下降(P<0.05),CREB的调节蛋白ICER表达水平升高(P<0.01);受体脱偶联的关键调控蛋白β-ARK1、β-ARK2、β-arrestinl的基因表达水平在心衰患者中明显升高(P<0.01)。结论 β受体相关基因的异常表达可能是心衰β受体脱敏的重要的分子生物学机制。     

乳腺癌组织中HER-2、ER和PR的表达及意义

应用免疫组化MaxVision二步法检测98例乳腺癌和26例癌旁正常的乳腺组织中的雌激素受体(ER)、催乳素(PR)和甾体激素受体和人类表皮生长因子受体(HER-2).结果 HER-2、ER和PR在乳腺癌中阳性表达率分别为20.4%、53.1%、50.0%,癌旁乳腺组织分别为0、42.3%和100.0%,两组织中HER-2和PR阳性表达率相比,P均＜0.05.乳腺癌组织中HER-2、ER和PR的表达分别与组织学分级有关,同时PR的表达还与肿瘤大小、患者年龄有关(P均＜0.05).乳腺癌中HER-2的表达与ER呈负相关(r=-0.234,P＜0.05),ER和PR呈显著正相关(r=0.695,P＜0.01).认为HER-2、ER和PR与乳腺肿瘤的发生和发展密切相关,可用来指导临床用药和判断预后.     

雌激素通过其受体α上调LRP16 mRNA表达并促进MCF-7细胞增殖

目的 探讨雌激素对人乳腺癌MCF-7细胞LRP16 mRNA表达的调控作用以及过表达LRP16对MCF一7细胞生长特性的影响。方法 (1)用Northem印迹方法检测17β-雌二醇(17β-E2)对LRP16m RNA表达水平的作用；(2)构建LRP16启动子(-2．6kb)调控的荧光素酶报告子(pG13-S0)，并与各种核受体包括雌激素受体α和β(ERα和ERβ)、糖皮质激素受体α(GRα)、雄激素受体(AR)和过氧化物酶体增殖物激活的受体γ和α(PPARγ和PPARα)表达载体共转染COS-7细胞，测定荧光素酶活性；(3)将LRP16表达载体转染MCF-7细胞，测定过表达LRP16对细胞的生长特性和细胞周期的影响，并用Western印迹方法测定周期素E、p53和p21^WAF1/CIP1蛋白的变化。结果 (1)17β-E2使MCF-7细胞的LRP16 mRNA表达水平增加5～8倍，增加幅度未显示出β-E2培养时间和剂量的依赖性；(2)pGL3-S0与ERα或AR共转染细胞的相对荧光素酶活性较单独转染pGL3-S0细胞(对照组)分别升高11和7．8倍；(3)LRP16过表达促进MCF-7细胞的生长且伴有周期素E显著升高，S期细胞的数量较对照组增加约10％。结论 (1)雌激素通过激活ERα增加MCF-7细胞LRP16 mRNA的表达；(2)过表达LRP16可能通过上调周期素E促进MCF-7细胞生长。     

雌激素对同型半胱氨酸水平和心肌雌激素受体的影响

目的雌激素对大鼠血浆高同型半胱氨酸(Hcy)水平和心肌雌激素受体(ER)mRNA表达水平的影响.方法蛋氨酸饮食喂养去势雌性Wistar大鼠构建高Hcy血症动物模型,造模同时给予皮下注射雌激素干预的为预防组,造模后再给予皮下注射雌激素干预的为治疗组.高压液相色谱法测定血浆Hcy水平,逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)半定量检测心肌ER mRNA表达水平.结果高蛋氨酸饮食喂养90 d后,造模组大鼠Hcy水平明显高于对照组(P＜0.05),2组ERα和ERβ基因转录水平差异无统计学意义.预防组血浆Hcy水平低于造模组,心肌ERα mRNA水平高于造模组;预防组和治疗组心肌ERβ mRNA水平和造模组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论预防应用雌激素可以降低血浆Hcy水平,升高心肌ERα mRNA水平,但对其心肌ERβmRNA水平未见影响.     

肝硬化患者外周血单核细胞内毒素受体表达与慢性炎症反应关系的临床意义

背景:内毒素受体在内毒素、细胞因子等介导的炎性信号转导过程中具有重要作用。目的:了解肝硬化患者外周血单核细胞(PBMC)内毒素受体的表达变化与慢性炎症反应关系的临床意义。方法:应用荧光素标记的抗人Toll样受体(TLR)4/抗人CD14单抗,以流式细胞术检测40例肝硬化患者和15名健康志愿者PBMC内毒素受体TLR4和CD14蛋白的表达;以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内毒素受体TLR4 mRNA、CD14 mRNA和信号转导分子MyD88 mRNA的表达;以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;以偶氮基质显色法测定血浆内毒素水平。结果:肝硬化患者PBMC内毒素受体TLR4和CD14蛋白的表达水平显著高于对照组(P<0.05),但不同Child-Pugh分级组间差异无统计学意义;与对照组相比,PBMC内毒素受体TLR4 mRNA、CD14 mRNA和信号转导分子MyD88 mRNA的表达水平也有增高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);肝硬化患者血清细胞因子IL-1β、IL-10和TNF-α水平,以及血浆内毒素水平均较对照组显著升高(P<0.05),且高内毒素水平患者内毒素受体的表达显著高于低内毒素水平患者(P<0.05),细胞因子水平也较低内毒素水平者增高。结论:肝硬化患者PBMC内毒素受体的表达明显上调,与患者的慢性炎症反应状态一致。