溶血对己糖激酶法测定血糖浓度的实验探讨

目的探讨溶血标本对己糖激酶法测定血糖浓度干扰的可接受性。方法实验标本取血糖浓度分别为3.0～5.0mmo/l、5.0～6.1mmol/l、〉7.5mmol/l的标本各40份,每份分为4管,Hb=0g/l的管为正常对照,另3管人为溶血,使其血红蛋白浓度分别为0.5g/l、1.0g/l、1.5g/l。结果Hb=0.5g/l,Hb=1.0g/l时与未溶血组比较无显著性（P〉0.05）。当Hb〉1.5g/l时,葡萄糖测定结果与未溶血组比较结果有所下降,且血糖浓度越高溶血标本对己糖激酶的负干扰程度越严重,差异有显著性（P〈0.05）。结论不同试剂、不同仪器情况下溶血标本对己糖激酶的负干扰程度不同;有些特殊患者临床标本来之不易,为了方便临床,各实验室应确定溶血标本对己糖激酶法测定葡糖浓度的可接受性。     

溶血样本对酶类生化检验的影响及其探讨

目的 探讨血液标本溶血对酶类生化检验结果的影响.方法 收集海南省人民医院的60份体检正常人的标本,分别配制成轻度溶血(Hb浓度＜1.0g/L)、中度溶血(1.0g/L＜Hb浓度＜5.0g/L)、重度溶血(Hb浓度＞5.0g/L)三种不同程度的血清.采用OLYMPUS AU-5400全自动生化分析仪分别测定溶血前后血清酶活性的变化.结果 在Hb＜1.0g/L的溶血程度下,与正常对照比较,谷氨酰转肽酶(γ-GGT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性轻微升高,差异无统计学意义(P＞0.05).谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)和磷酸肌酸激酶(CK)活性升高差异有统计学意义(P＜0.01);在1.0g/L＜Hb＜5.0g/L的溶血程度下,除γ-GGT外,其余测定酶活性升高差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);在Hb＞5.0g/L的溶血程度下,AST、ALT、ALP、LDH、CK、CK-MB、γ-GGT和羟丁酸脱氢酶(HBDH)活性均明显升高(P＜0.05).结论 溶血可导致多项酶类指标测定结果的明显改变,且随溶血程度的增加,测定结果所受影响加剧,因此用于酶类生化测定的血液样品应严防溶血.     

高胆红素对血糖测定结果影响的分析

目的:研究胆红素对葡萄糖氧化酶法测定血糖的干扰情况,寻求高胆红素血清中血糖的测定方法。方法:分别用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法对不同浓度胆红素患者血清中的血糖进行测定,比较两种方法的测定结果;对高胆红素血清,在进行去胆红素处理前后,分别用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法对其血糖浓度进行测定,比较测定结果。结果:胆红素浓度在0μmol/L~240μmol/L之间时,葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法测得的血糖浓度差别不大;当胆红素浓度>240μmol/L时,两法测定结果差异有显著性(t=3.58,P<0.01);对高胆红素血清,己糖激酶法在去胆红素处理前后所测血糖浓度差别不大(t=1.41,P>0.05),而葡萄糖氧化酶法在去胆红素处理前后所测血糖浓度差异有显著性(t=4.23,P<0.01)。结论:对高胆红素患者血清中血糖浓度的测定,要进行去胆红素处理,或者选用特异性高的己糖激酶法进行测定。     

血液标本放置时间对血糖浓度的影响

目的 探讨血液标本放置时间与血糖浓度的变化。方法 使用USA-RA-1000全自动生化分析仪。采用上海科华生产的己糖激酶法血糖试剂盒。结果 对60例血糖含量在7．00～19．23mmol／L之间的血液标本即时测定血糖浓度，血液标本放置2小时、3小时再分别测定其血糖浓度。结果 表明血液标本随放置时间的延长血糖浓度明显下降。结论 血糖检测应在采血后60分钟内进行测定，如来不及检测应及时分离血清(血浆)4℃保存，当天完成检测工作。     

高糖环境下脂联素对人肾小管上皮细胞增殖及细胞间黏附分子1表达的影响

目的 探讨脂联素(ADPN)对体外高糖培养的人肾小管上皮细胞增殖及细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,揭示脂联素对高糖环境中的肾小管上皮细胞可能的保护作用机制.方法 ①将人肾小管上皮细胞用5.5 mmol/L葡萄糖(正常对照组)、30.0 mmol/L葡萄糖(高糖组)、5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇(甘露醇组)、30.0 mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml ADPN(脂联素组)分别培养24 h,48 h,96 h后,运用MTT法测定细胞增殖.②将人肾小管上皮细胞用5.5 mmol/L葡萄糖(正常对照组)、30.0 mmol/L葡萄糖(高糖组)、30.0 mmol/L葡萄糖+不同浓度ADPN(ADPN终浓度分别为2.5,5.0,7.5,10.0,15.0和20.0 μg/ml,脂联素组)分别培养48 h后,运用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液中ICAM-1的含量.结果 ①高糖组细胞增殖被抑制,加入低浓度脂联素(2.5 μg/ml)后促进了细胞增殖;②ICAM-1在高糖组表达较高,加入中等以上浓度脂联素(ADPN浓度为10.0,15.0,20.0 μg/ml)ICAM-1的表达减少.结论结果 提示脂联素可能通过减少ICAM-1的表达而起到保护肾脏的作用.     

溶血标本对心肌酶测定值的影响

目的：探讨溶血对心肌酶测定值的影响。方法：随机选取34例我院儿保门诊的健康儿童无溶血标本（Hb=0g/L）心肌酶测定值与玻璃棒搅动诱导溶血血清在Hb分别为1.5g/L、3.0g/L和6.0g/L溶血程度的心肌酶测定值对比分析。结果：在血清Hb=1.5g/L时的溶血程度下天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、a-羟丁酸脱氢酶（a-HBDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）显著升高（p〈0.01,）,并随着溶血程度加重（Hb=3.0 g/L、6.0 g/L时）测定值组间亦明显升高（p〈0.01）。结论：不同程度的溶血对心肌酶谱5项检测均有明显影响,且溶血程度越重其影响越大。溶血标本,不适宜测定心肌酶。     

探讨标本溶血对酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎表面抗原的影响

目的:探讨标本溶血对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的影响。方法:对血红蛋白(Hb)为142g/L的病人抗凝血液进行溶血处理,稀释成10个不同Hb浓度,分为二组:0.055g/L、0.111g/L、0.221g/L、0.443g/L、0.59g/L为第一组,0.71g/L、0.887g/L、2.130g/L、3.550g/L、7.10g/L为第二组。测定各种不同Hb浓度所对应的光密度(OD)值。结果:在第一组中,Hb均小于0.71g/L,HBsAgS/CO<1,结果均为阴性,在第二组中,Hb均大于0.71g/L,HBSAgS/CO>1,结果均为阳性,第二组与第一组比较有显著的统计学意义。结论:在标本溶血时,只有当溶血达到一定程度,才能导致ELISA检测HBsAg的假阳性。     

即时检验血糖监测仪的应用评价

目的 对即时检验（BOCT）血糖仪测定结果进行评价及探讨其影响因素。方法 用强生SureStepPlus血糖监测仪检测全血葡萄糖浓度,与氧电极法和己糖激酶法测定的血浆葡萄糖结果进行比较,并分析了该仪器的精密度、准确度、线性范围和一些影响因素。结果 该仪器测定全血葡萄糖的线性范围可达18．5mmol／L,同一台仪器测定高、低值的全血标本,其批内精密度分别为3．4％、6．9％,27台同一型号仪器其精密度分别为6．3％、7．5％。血糖仪法（Y）与氧电极法（C）的回归方程为y=1．172x-0．205（r=0．985）;己糖激酶法（X）的回归方程为y=1．177x-0．2960（r=0．982）。测定温度在20-25℃及压积在33％～50％时,血糖结果与常规方法结果较接近,机外反应2分钟内测定结果稳定。结论 血糖仪适用于糖尿病患者的随访监测及疗效观察,其测定结果不能作为诊断糖尿病的依据,并且要严格控制测定条件。     

溶血对血清葡萄糖测定干扰的量化及其校正

一般认为标本轻度溶血不干扰己糖激酶 (ＨＫ)法测定血清葡萄糖[1] ,而我们工作中却常发现 ,轻度溶血也能导致血清葡萄糖测定结果偏低 ,且其程度随溶血程度增加而增加 ,借助ＥＸＣＥＬ2 0 0 0对该变化分析发现 ,两者存在线性关系。利用日立 70 6 0生化仪的血清信息功能 ,在测定血糖的同时测出标本的血红蛋白(Ｈｂ)指数 ,可对因溶血造成的血糖偏低作一校正 ,校正后结果与理论值基本相符 ,具体报告如下。1　材料与方法1.1　材料　日立 70 6 0生化分析仪 (ＨＫ)葡萄糖试剂盒 (上海复旦张江生物医药有限公司 )。1.2　方法　选取一ＥＤＴＡ Ｋ2 抗…     

肝硬化患者胰高糖素负荷的血c—AMP及血糖反应性观察

目的观察肝硬化患者对胰高糖素负荷后的血c-AMP及血糖反应能力.方法38例肝硬化患者按Child-Pugh肝功能分级,分为A级(10例),B级(14例),C级(14例)三个亚组.11例健康者为对照组.清晨空腹静卧,套管针肘静脉穿刺并固定15min后采集基础血c-AMP和血糖标本,即刻以每公斤体重2.5μg胰高糖素快速静脉注射(30s内),分别于注射后5,15,30及45min采集血c-AMP和血糖标本.以放射免疫法测定血浆c-AMP浓度.以葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度.结果肝硬化各组与对照组比较,基础血浆c-AMP浓度均显著高于对照组,而基础血糖无显著差异.胰高糖素负荷后5min血浆c-AMP浓度即明显增高,于10～15min达高峰,多数达峰时间在10min;血糖于5min开始升高,15～30min达高峰,多数达峰时间在30min,肝硬化各组的血c-AMP及血糖反应曲线均低于对照组,且肝硬化严重程度愈重,血c-AMP及血糖反应曲线愈低,峰值血浆c-AMP及峰值血糖浓度,肝硬化总体(122.08±84.39pmol/ml,5.71±0.75mmol/LA级(148.07±85.08pmol/ml,6.25±0.48mmol/L)、B级(120.47±173.34pmol/ml,5.84±0.60mmol/L)及C级(83.04±50.96pmol/ml,5.11±0.67mmol/L)均显著低于对照组(219.47±173.34pmol/ml,7.28±0.89mmol/L),且随肝硬化严重程度增加而显著降低.结论肝硬化患者对胰高糖负荷的血c-AMP及血糖反应能力减弱,且随肝硬化严重程度增加而减弱.     

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的　采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法　取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果　对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x 1.815。结论　该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb Alc可作为糖尿病控制的指标     

头孢曲松钠对血糖测定影响的研究

目的 观察头孢曲松钠对HK法和GOD法测定血清葡萄糖的影响.方法 在患者输注头孢曲松钠前后分别空腹采取静脉血,采用GOD和葡萄糖己糖激酶法分别测定血中葡萄糖;比较输注头孢曲松钠前后两组的血糖水平是否有差异.结果 患者在输注头孢曲松钠后,HK法测量的GLU(5.57±0.58)比输注前GLU(4.92±0.46)明显增高.结论 临床使用头孢曲松钠时采血会影响HK法测定GLU的结果,使结果偏高.     

己糖激酶法与酶电极法测定葡萄糖的方法学比较

目的评价己糖激酶法与酶电极法测葡萄糖的可靠性、相关性及临床意义。方法在日立7600生化分析仪用己糖激酶法与在Nova CCX血气分析仪用酶电极法进行精密度实验、线性范围实验及方法比较实验。结果 1精密度实验:己糖激酶法:4.5 mmol/L浓度的质控品,批内CV=0.92%,批间CV2.33%;15.80mmol/L浓度的质控品,批内CV=1.03%,批间CV=2.40%。酶电极法:4.5mmol/L浓度的质控品,批内CV=0.95%,批间CV2.53%;15.80mmol/L浓度的质控品,批内CV=1.26%,批间CV=2.88%。2线性范围实验:己糖激酶法线性范围为1~50mmol/L,酶电极法线性范围为1~40mmol/L。3方法比较实验:回归方程Y=0.4530+0.8940X,r=0.9946,两种方法相关性良好。结论己糖激酶法具有精密度好,线性范围宽,系统误差小等优点,而酶电极法精密度和线性范围与己糖激酶法相比稍差,但两种方法相关性好,已能满足临床常规使用。     

枸杞多糖对高糖诱导衰老小鼠角膜上皮细胞增殖的影响

目的：观察不同剂量枸杞多糖(LBP)对高糖诱导的衰老小鼠角膜上皮(MCE)细胞增殖的影响。方法：采用含有不同浓度葡萄糖(5.5 mmol/L、12.5 mmol/L、25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L)的杜氏改良Eagle培养基(DMEM)孵育MCE细胞48 h,用MTT检测不同葡萄糖浓度对MCE细胞增殖的影响。建立高糖损伤模型，用不同浓度(50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml和400μg/ml)的LBP处理葡萄糖损伤的MCE细胞48 h,观察MCE细胞增殖情况。结果：在用25 mmol/L的葡萄糖浓度处理MCE细胞，细胞增殖最强(P<0.01),葡萄糖浓度为200 mmol/L时，MCE细胞增殖力最低(P<0.01)。在所建立的高糖损伤模型(葡萄糖200 mmol/L)中LBP 200μg/ml促进MCE细胞增殖作用最强(P<0.05)。结论：一定浓度的葡萄糖可抑制MCE细胞增殖，LBP可保护高糖损伤的MCE细胞，促进其增殖。     

Sysmex CS-5100与CA-7000全自动血凝仪抗脂血和溶血干扰能力的初步比较

目的比较Sysmex CS-5100和CA-7000全自动血凝仪抗脂血和溶血干扰的能力。方法以两血凝仪分别测定双水平质控品PT、APTT、Fbg、TT的批内和天间不精密度(CV%)。混合血浆中分别加入终浓度(0~5.0%)甘油三酯(TG)脂肪乳剂和0~32g/L血红蛋白(Hb)溶液,以两台血凝仪测定PT、APTT、Fbg、TT,计算相对偏差(%),偏差以5.0%(PT和APTT)和6.67%(TT和Fbg)为标准。结果 CS-5100和CA-7000 4项测定的批内CV%为0.77%~1.31%,天间CV%为2.00%~3.31%。TG 0~5.0%范围内,两仪器的PT偏差均<5.0%;CA-7000在Hb 16g/L时PT偏差>5.0%(6.32%),CS-5100在Hb(0~32)g/L范围内PT偏差均<5.0%。CA-7000和CS-5100分别在TG 1.0%和2.0%、Hb 1g/L和2g/L时APTT偏差>5.0%(6.90%和7.66%、-8.74%和-7.69%)。CA-7000和CS-5100分别在TG 1.0%和3.0%、Hb1g/L时TT偏差>6.67%(7.37%和7.25%、8.38%和6.45%)。CA-7000在TG 3.0%时Fbg偏差>6.67%(-7.89%),CS-5100在TG 0~5.0%、两仪器在Hb 0~32g/L时Fbg偏差均<6.67%。各浓度TG和Hb时CA-7000的APTT、TT和Fbg测定偏差均大于CS-5100。结论Sysmex CS-5100抗脂血和溶血干扰的能力比CA-7000更强。     

脂联素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 观察脂联素对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨脂联素在糖尿病肾病中可能的保护作用.方法 体外培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为7组:对照组、高糖A组、高糖B组(培养液葡萄糖浓度分别为5.6 mmol/L、15 mmol/L、30 mmol/L);脂联素A、B、C、D组(各组培养液葡萄糖浓度均为30 mmol/L+脂联素,脂联素浓度依次为2.5 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml、20 μg/ml),作用24 h,RT-PCR法测定各组细胞VEGF mRNA表达水平;ELISA法测定各组上清液中VEGF蛋白的含量.结果 与对照组相比,高糖A组、高糖B组大鼠肾小球系膜细胞VEGF mRNA及VEGF蛋白表达升高(P＜0.05);脂联素各组大鼠肾小球系膜细胞VEGF mRNA及VEGF蛋白表达低于高糖B组(P＜0.05).结论 高糖可刺激大鼠肾系膜细胞VEGF表达增高,脂联素可抑制高糖环境下系膜细胞对VEGF的表达.     

快速血糖仪和血糖试条系统准确度检验

目的参照中华人民共和国国家标准（GB/T 19634-2005）检测快速血糖仪和血糖试条系统测定静脉全血葡萄糖准确度,为临床应用快速血糖仪提供参考。方法抽取196例患者静脉血用快速血糖仪、全自动生化分析仪进行全血、血浆葡萄糖测定。结果在196例样本中,分别有32例静脉血浆葡萄糖浓度≤4.2mmol/L,176例〉4.2mmol/L,与快速血糖仪测定静脉全血葡萄糖浓度进行比对。在≤4.2mmol/L浓度区间有1例样本偏差〉0.83mmol/L,在〉4.2mmol/L浓度区间有8例样本偏差超过±20%。196例样本在两个浓度区间均有95%以上的样本偏差符合国家标准允许的范围。结论长沙三诺EA-11型快速血糖尿酸仪及血糖试条系统的准确度符合中华人民共和国国家标准。     

辛伐他汀与阿托伐他汀对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞p27蛋白表达的影响

目的探讨辛伐他汀和阿托伐他汀对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞p27表达的影响。方法将体外培养大鼠肾小球系膜细胞分为正常对照组(葡萄糖浓度5.6mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度30mmol/L)、高糖辛伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,辛伐他汀浓度10μmol/L)、高糖阿托伐他汀组(葡萄糖浓度30mmol/L,阿托伐他汀浓度10μmol/L)。每组设置6个复孔,于24、48、72、120h收集细胞,Western blotting法测定大鼠肾小球系膜细胞p27蛋白的表达,逆转录PCR测定p27mRNA的表达。结果高糖组p27蛋白浓度及mRNA水平均较正常对照组升高(P<0.05);高糖辛伐他汀组及高糖阿托伐他汀组p27蛋白浓度及mRNA水平均较高糖组降低(P<0.05)。结论他汀类药物通过调节肾小球系膜细胞p27的表达,可发挥非依赖降脂的肾脏保护作用。     

高度稀释的葡萄糖溶液提高含亚砷酸盐培养基中大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取

目的：高度稀释的顺势疗法药物对活体系统的作用一直被质疑。因此,本研究检测依据顺势医学理论而高度稀释的葡萄糖溶液对暴露于亚砷酸盐的大肠埃希氏杆菌的作用。方法：大肠埃希氏杆菌在Luria-Bertani培养基中培养至对数期后分组。分别加入1%或3%的葡萄糖溶液、葡萄糖30C（在70%乙醇中稀释1060倍）、1mmol/L或2mmol/L的亚砷酸钠、1mmol/L或2mmol/L的亚砷酸钠加葡萄糖30C、1mmol/L或2mmol/L的亚砷酸钠加乙醇30C（安慰剂）。分析用药后45min及90min大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取、己糖激酶及葡糖激酶活性、细胞膜电位、细胞内三磷酸腺苷含量以及葡萄糖通透酶基因的表达情况,并测定细胞内及细胞外（培养基内）亚砷酸盐的浓度。结果：暴露于亚砷酸盐的大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取量增加,己糖激酶及葡糖激酶活性、细胞内三磷酸腺苷含量及细胞膜电位降低,葡萄糖通透酶基因的表达增加。在加入1%或3%葡萄糖或高度稀释的葡萄糖30C的培养基内,大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取量进一步增加,而在加入乙醇30C（安慰剂）的培养基内,大肠埃希氏杆菌的葡萄糖摄取量没有明显增加。结论：本研究的结果证实了高度稀释的葡萄糖溶液对于真正的葡萄糖溶液的模仿作用。这种顺势疗法理论下高度稀释的葡萄糖溶液能够调节大肠埃希氏杆菌己糖激酶和葡糖激酶的表达以及葡萄糖通透酶基因的表达,证实了顺势疗法中高度稀释的药物的有效性。     

电化学发光免疫法与放射免疫法测定血清铁蛋白的评价

目的:评价电化学发光免疫分析法(ECLIA)和放射免疫分析法(RIA)在测定血清铁蛋白(SF)中的应用。方法:用ECLIA、RIA分别对中浓度SF的标本进行回收试验和抗干扰试验(干扰物为血红蛋白),对低、高浓度SF的标本进行重复试验。结果:平均回收率ECLIA为95.6%、RIA为93.5%,两种方法比较,差异无显著性(P>0.05);变异系数(CV)ECLIA为3.0%、4.3%,RIA为8.5%、9.3%,两种方法比较,差异均有显著性(P<0.05);抗血红蛋白(Hb)干扰能力,当血清中Hb浓度在1.0g/L~6.0g/L时,随Hb含量的增加,两种方法测定SF时的干扰都逐渐增加(正干扰),血清中Hb浓度≥4.0g/L用ECLIA测定SF和血清中Hb浓度>2.0g/L用RIA测定SF时,其结果的偏差系数(CB)都>5.0%。结论:两种方法测定SF准确性、精密度均符合要求,且ECLIA优于RIA;标本严重溶血时,两种方法的测定结果均偏高。