三七粉质量标志物研究＊

三七为常用中药材，具有散瘀、止血，消肿定痛的功效。三七粉作为三七市场应用的主要形式之一，市场逐年增大。现行标准难以评价和控制三七粉“多重功效”的质量特点。本课题组在系统辨识三七粉化学物质组及其传递规律的基础上，采用网络药理学和体内、体外模型，研究并阐明了三七粉的活血、心肌与血管保护、止血以及消肿定痛的药效物质基础；进一步结合成分的特有性分析，确定了三七粉的质量标志物；在此基础上，建立了基于质量标志物的三七粉的指纹图谱及“一测多评”的多指标含量测定方法，为建立三七粉整体质量控制方法提供了理论与实验证据。     

基于止血作用的三七粉质量标志物研究＊

目的 探索三七粉活血作用的质量标志物。方法 采集家兔血浆，采用体外凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）检测试剂盒观察三七粉主要成分对凝血系统的影响；收集家兔富含血小板血浆，以二磷酸腺苷（ADP）诱导血小板聚集，观察三七粉主要成分对血小板聚集率的影响；取家兔主动脉条，置于体外组织灌流系统中，以去氧肾上腺素诱导血管条收缩，观察三七粉主要成分对血管平滑肌收缩功能的影响。结果 以蒸馏水溶解的三七总皂苷（PNS），与水溶剂组比较，可显著延长TT、APTT、PT，降低FIB含量（P<0.05、P<0.01），降低ADP诱导的血小板聚集率（P<0.01）。以5%二甲基亚砜（DMSO）溶解的单体成分，与5%DMSO溶剂组比较，人参皂苷F₂、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rk₁、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₂，可显著延长TT（P<0.05，P<0.01）；人参皂苷F₂、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rb₁、槲皮素可延长APTT（P<0.05）；人参皂苷Re、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rb₃，可显著延长PT（P<0.05）；槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₃、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₂可显著降低血浆FIB含量（P<0.05）；人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rg₂、三七皂苷R₁、人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rd和人参皂苷Rb₁可显著降低ADP诱导的血小板聚集（P<0.05）；人参皂苷Rg₃、人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rd、三七皂苷R₁、人参皂苷Rk₁和人参皂苷Rg₂可明显扩张血管动脉条（P<0.05，P<0.01）。结论 三七粉活血作用表现在抗凝、抗血小板聚集、扩血管等方面，人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rg₃、三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg₁、槲皮素等可能为三七活血作用的物质基础，可作为三七粉活血作用的质量标志物进一步研究。     

基于质量标志物的三七粉质量标准提升研究＊

目的 基于三七粉质量标志物的研究结果，完善三七粉质量标准，为其质量标准的修订提供科学依据。方法 利用高效液相色谱技术，结合“一测多评”等分析方法，对三七粉质量标志物进行含量测定，对不同厂家三七粉及不同商品规格原料药材进行质量标志物差异分析。建立指纹图谱，采用新的相似度计算模型-等同系数法和模式识别对三七粉及原料药材进行质量一致性评价。结果 不同厂家三七粉中三七素含量存在差异，收集到的白云山和黄中药三七粉中三七素含量均高于其余厂家，提示三七素可能为白云山和黄中药三七粉的优势指标。原料药材中三七素和皂苷含量与头数不具相关性，但与季节、部位具有相关性。皂苷方面表现为冬三七＞春三七，芦头＞主根＞须根＞筋条；三七素方面表现为冬三七＞春三七，须根＞芦头＞筋条＞主根。应用等同系数法计算指纹图谱相似度实现了不同厂家三七粉的区分，进一步结合化学模式识别实现了不同规格原料药材的区分。结论 建立的含量测定及指纹图谱方法稳定可行，专属性强，对于控制三七粉质量具有显著意义。与2020年版《中国药典》相比，该文修订了三七粉含量测定项，增加了HPLC指纹图谱项，可为三七粉的质量标准提升及其原料药材的选择提供科学依据。     

基于消肿定痛功效的三七粉质量标志物研究＊

目的 探究三七粉发挥消肿定痛功效的质量标志物。方法 首先，采用小鼠醋酸扭体实验，将ICR小鼠随机分成模型对照组、阳性对照阿司匹林组（0.12 g·kg^-1）、三七粉低（1.1 g·kg^-1）、中（2.2 g·kg^-1）、高（4.4 g·kg^-1）剂量组、三七总皂苷低（0.25 g·kg^-1）、中（0.5 g·kg^-1）、高（1.0 g·kg^-1）剂量组，连续给药3天每日1次，第3天给药1 h后腹腔注射1%醋酸溶液，记录15 min内扭体次数。进一步采用LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7炎症模型，探讨三七粉中的三七总皂苷及14个代表性单体成分对细胞上清液中NO、TNF-α和IL-6的含量影响。结果 实验表明，与模型组比较，三七粉及三七总皂苷中、高剂量组均能显著减少扭体反应次数（P<0.05，P<0.01）；三七总皂苷及14个化合物均能显著降低细胞上清液中NO、TNF-α、IL-6含量（P<0.05）。结论 三七粉具有良好的抗炎、镇痛作用，其发挥消肿定痛的药效物质基础可能为三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg3、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷F2、人参皂苷Rk1、槲皮素、三七素。     

基于心血管保护作用的三七粉质量标志物研究＊

目的 探索三七粉心血管保护作用的质量标志物。方法 采用CoCl₂制备心肌细胞（H9C2）损伤模型，观察三七粉主要成分对心肌细胞成活率、LDH、MDA、SOD的影响；采用H₂O₂制备人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型，观察三七粉中主要成分对内皮细胞存活率、LDH、ACP的影响。结果 人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rg₃、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rh₁、三七素能够显著增加H9C2细胞存活率（P<0.05，P<0.01），多个成分能够减少LDH、MDA，增加SOD；三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、槲皮素、人参皂苷F₂、人参皂苷Rk₁、人参皂苷Rh₁、三七素可显著提高HUVEC细胞存活率（P<0.05，P<0.01），多个成分能够减少LDH、ACP。结论 三七粉发挥心血管保护作用的药效物质基础包括多种皂苷类成分、三七素，以及黄酮类成分槲皮素。     

基于HPLC-Q-TOF/MS法的鬼针草血清药物化学探究

目的基于HPLC-Q-TOF/MS法探讨鬼针草在大鼠体内的药效物质基础。方法采用HPLC-Q-TOF/MS技术,以及Qualitative Analysis B.07.00等软件分析,通过比较鬼针草水煎液、含药血清、空白血清指纹图谱及含药血清与空白血清的图谱差异,根据保留时间、质谱信息、精确相对分子质量以及与文献、对照品比较,初步鉴定口服鬼针草后大鼠体内入血成分。结果口服鬼针草后,从血清中共鉴定出11种移行成分,其中包括5种有机酸类、5种黄酮类及1种聚炔类。结论明确了鬼针草的效应物质基础,以期为鬼针草的进一步研究开发奠定基础。     

牵牛子的本草考证＊

通过查阅历代文献古籍，结合现代文献资料对牵牛子的名称、基原、规格等级和药效等方面进行考证。牵牛子入药常记作“黑丑、白丑”，历代本草中记载的黑丑以裂叶牵牛为主；白丑存在争议，圆叶牵牛或丁香茄儿。一般认为黑丑力速，白丑效迟。药性以苦寒为正，而辛热可能在于皮，可通过去皮、炒黄或蜜炙来降毒。     

包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响研究

目的:通过考察不同包装下三七粉和熟三七粉外观性状、水分及有效成分含量等变化情况,确定包装对三七粉和熟三七粉稳定性的影响。方法:在恒温恒湿箱中对三七粉和熟三七粉进行加速试验,于0、1、2、3、6月对三七粉和熟三七粉外观性状及含水量进行考察,同时以皂苷类成分的含量作为检测指标,利用本课题组前期建立的高效液相色谱法,对三七粉和熟三七粉中的皂苷类有效成分含量进行检测,并统计分析。结果:所有样品经6个月加速试验后观察未见霉变、虫蛀等现象,外观性状基本一致,水分含量增高但其含量仍符合《中华人民共和国药典》（2015版）规定（水分含量≤14%）。三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1含量的总和及熟三七粉中人参皂苷Rk1、Rh4含量的总和无显著减少。真空与非真空2种包装状态对饮片有效成分含量的影响较小,但对饮片的吸湿性有影响。结论:PTE/PE复合而成的食品级铝塑复合膜是较理想的包材,能保证三七粉和熟三七粉质量的稳定,真空包装可以显著降低样品的吸湿程度。     

抑郁症中医辨证分型研究进展＊

抑郁症是一种常见精神疾病，严重危害患者身心健康，中医对于本病的辨证治疗具有独特优势，抑郁症辨证分型相关研究已成为近年来研究的热点。抑郁症属于中医“郁证”的范畴，本文通过对近年来抑郁症中医辨证分型相关文献分析和归纳总结，从辨证分型标准、临床治疗和物质基础等方面详尽将抑郁症辨证分型特点、变化规律及应用现状进行综述，提出对于抑郁症辨证分型目前存在的问题及对未来的展望，旨在将抑郁症辨证分型研究规范化，为临床诊疗及科学研究抑郁症提供参考依据。     

太子参多糖-葛根淫羊藿总黄酮对小鼠脑神经蛋白质组学作用的比较＊

目的 观察太子参多糖（总多糖）、葛根淫羊藿总黄酮（总黄酮）及其复合物对小鼠脑蛋白质组学的影响，探讨其神经细胞网络调控的潜在机理。方法 给正常小鼠分别灌胃太子参多糖（400 mg·kg^-1）、葛根淫羊藿总黄酮（400 mg·kg^-1）及其二者复合物（800 mg·kg^-1），连续给药7 天，第7 天最后1次给药后1 h，处死动物，取脑。提取蛋白，利用LC/MS-MS测试蛋白表达的变化。通过DAVID数据库分析变化蛋白的功能及信号通路，STRING数据库分析变化蛋白的相互作用及其网络关系。结果 在所测试的5567个蛋白中，以上调蛋白占比较高，其中主要是线粒体的基因受到调控。总多糖、总黄酮及其复合物都上调的蛋白有8个，作用于线粒体的不同环节，提示该复合物抗抑郁作用的靶点主要在线粒体。太子参多糖的调控线粒体相关蛋白的作用揭示了其潜在的神经精神方面的药理作用。除此，还发现各有效部位调控蛋白的数量明显多于复合物，提示药物复合作用的复杂性。结论 总多糖、总黄酮及其复合物可以作用于脑神经元，并且主要以线粒体为主要靶点。该研究为相关中药调控神经精神功能活动提供了重要的蛋白线索及其实验依据。     

中药葛根的毛细管电泳指纹图谱研究

 目的采用毛细管电泳法研究并建立葛根药材的指纹图谱。方法微乳液电动毛细管色谱法。未涂层熔融石英毛细管(63.5cm×50.0cm,50.0μm),缓冲液为微乳液,电压20kV,检测波长254nm。结果以葛根素峰为参照峰,建立了广西葛根药材的微乳液电动毛细管色谱指纹图谱,确认了13个共有特征指纹峰,经加样法标识的成分是大豆苷、葛根素、大豆苷元和染料木素。评价了3个不同产地和4种不同提取方法所得葛根指纹图谱的相似度均在0.97以上。结论本方法具有较好的专属性、精密度和重现性,不仅可增强对极性相似物质的有效分离,用于葛根药材的质量控制,而且其微乳液滴还具有模拟人体生物膜(脂质体)的作用机制,适用于对体内或体外生物样品的分离分析,具有良好的应用前景。     

太子参抗心肌缺血作用机制的网络药理学研究＊

目的 利用网络药理学的研究方法,筛选太子参抗心肌缺血的活性化学成分和作用靶点,探讨太子参多成分、多靶点、多途径抗心肌缺血的分子机制。方法 采用中药系统药理学数据库（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP）和中药中医药综合数据库（Traditional Chinese Medicine Integrated Database,TCMID）,以口服生物利用度（oral bioavailability,OB ≥ 30%）和类药性（drug-likeness,DL ≥ 0.18）2个重要参数为依据,经文献整理,结合生物学功能、含量、研究热度等因素筛选太子参的活性化学成分;通过中药靶标数据库（Integrative Pharmacology-based Research Platform of Traditional Chinese Medicine,TCMIP）、中药系统药理学分析平台（TCMSP）和BATMAN-TCM数据库,预测活性成分的作用靶点,建立靶点数据集;构建“活性成分-靶点-疾病”网络和蛋白互作网络（protein protein interaction,PPI）;利用生物学信息注释数据库（Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery,DAVID）进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果 共检索出25个化合物,其中8个化合物作为活性成分;检索出858个成分作用的靶点;通过网络拓扑特征评价筛选出12个可能的潜在作用靶点;筛选出116个生物过程和34条信号通路。与太子参抗心肌缺血有关的信号通路为：HIF-1通路、PI3K-Akt通路、mTOR通路、VEGF通路等;其主要涉及的生物过程包括细胞对缺氧的反应、细胞对血管内皮生长因子刺激的反应、血管生成的积极调节、血管内皮生长因子受体信号通路的正调节。结论 太子参抗心肌缺血的分子机制与活性成分协同作用于这些潜在靶点调节这些生物过程和信号通路,发挥多成分、多靶点、多途径抗心肌缺血的生物学效应。     

制川乌炮制废水中生物碱含量的探讨＊

目的 建立HPLC同时测定制川乌炮制废水中6种毒性生物碱成分含量和UC测定总生物碱含量的方法，总结炮制废水中生物碱含量的变化规律。方法 采用HPLC同时测定6种生物碱成分；采用UV法测定总生物碱含量。结果 HPLC法和UV法在研究的线性范围内线性关系均良好，制川乌炮制废水中6种毒性生物碱成分随着炮制时间的推移有所降低。结论 建立的6种生物碱成分含量和总生物碱含量测定方法均简便、稳定、准确，可以为该废水的减毒处理提供检测手段。     

人参NAC基因家族成员的鉴定与表达分析＊

NAC基因是一类植物中特有的转录因子家族，广泛参与植物生长发育、信号转导及逆境胁迫下的调节过程。本研究鉴定出人参NAC基因家族共有197个成员。将拟南芥NAC基因与鉴定出的人参NAC基因共同构建系统发育树，可将其分为15个亚族。根据转录组分析结果，PgNAC020、PgNAC021、PgNAC022、PgNAC023在花中呈现高表达现象，可能参与花的生长发育；PgNAC075、PgNAC076在果实中高表达，可能参与人参果实成熟过程；PgNAC092、PgNAC093、PgNAC094、PgNAC095可能参与人参花的形态建成，也可能参与植物的抗寒过程。本研究为人参NAC家族基因功能研究，以及NAC调控人参的生长发育提供理论参考。