miR-155和miR-30a在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨胃癌组织和癌旁组织miR-155和miR-30a的表达差异及其临床意义.方法 收集手术切除的胃癌标本52例,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应( RT-qPCR)检测癌及癌旁组织标本miR-155和miR-30a的表达水平,分析其与临床病理的关系.结果 miR-155在胃癌组织中表达量(0.84 ±2.27)显著高于其在配对癌旁组织中的表达值(0.28 ±0.56,P＜0.05);miR-155高表达与淋巴结转移有关(P＜0.05).miR-30a在胃癌组织中表达量(3.16±8.11)显著低于其在配对癌旁组织中的表达值(15.87±35.58,P＜0.05).miR-30a的低表达与肿瘤侵犯层次、淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 miR-155和miR-30a与胃癌发生发展密切相关,可能成为胃癌的潜在诊断及治疗靶点.     

miR-597调控FOSL2抑制乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的研究

目的 探讨miR-597对乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响,及其与FOS样抗原2(Fos-related antigen 2,FOSL2)的靶向关系.方法 选取乳腺癌细胞株T-47D,SK-BR-3,MDA-MB-231,MCF7及BT-474,正常乳腺细胞株MCF10A为研究对象,分别转染miR-597(miR-59...     

叉头框蛋白A2表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在机制

目的:探究叉头框蛋白A2(FOXA2)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响和潜在的分子机制。方法:收集2019年1月至2020年12月武汉大学中南医院10例肝细胞癌患者肝癌组织和癌旁组织,其中男性7例,女性3例,平均53岁。检测人肝癌细胞系中FOXA2的表达,肝癌细胞系HepG2中表达最高用于后续实验。FOXA2过表达和阴...     

miR-301a在结肠直肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞侵袭、迁移能力的影响

目的:分析结肠直肠癌组织miR-301a的表达及其与结肠直肠癌病人临床病理特征的关系。探讨下调miR-301a表达对结肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力以及PTEN蛋白表达的影响。方法:应用实时定量PCR方法检测48对结肠直肠癌组织和癌旁组织以及5种结肠癌细胞株中miR-301a的表达。应用瞬时转染方法将miR-301a抑制剂转入结肠癌细胞株HCT116后,用细胞增殖实验(CCK-8法)、transwell侵袭实验检测细胞的增殖和侵袭力;采用transwell迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力;并用Western印迹技术检测下调miR-301a后其靶蛋白PTEN表达的变化。结果:PCR结果显示,miR-301a在有淋巴结转移的结肠直肠癌组织中表达较其对应的癌旁组织和无淋巴结转移的癌组织为高(P<0.05);5种结肠癌细胞中均有不同程度表达;transwell侵袭、迁移实验显示,miR-301a抑制剂转染后HCT116细胞侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05);增殖实验显示,下调miR-301a对结肠癌细胞抑制作用明显(P<0.05)。划痕实验表明,miR-301a抑制剂转染组细胞迁移能力明显受到抑制。Western印迹法显示,miR-301a抑制剂转染组细胞PTEN蛋白表达增加。结论:miR-301a在有淋巴结转移的结肠直肠癌组织中表达较高;下调miR-301a的表达抑制HCT116细胞的增殖、侵袭和迁移能力,且PTEN蛋白表达增加。miR-301a对结肠癌细胞生物学功能的影响可能是通过PTEN信号通路实现的。     

miR-133a对滋养层细胞系HTR8-SVneo的粘附及侵袭功能的影响

目的研究体外上调及下调miR-133a对滋养层细胞系HTR8-SVneo的粘附及侵袭功能的影响。方法将培养的HTR8-SVneo细胞根据脂质体转染因素分为对照组(转染空质粒)、上调组(转染mimics)、下调组(转染inhibitor),通过荧光定量PCR法检测各组miR-133a的表达水平,采用MTT法检测细胞粘附能力的变化,同时运用Transwell实验观察细胞侵袭能力的变化。结果与对照组比较,miR-133a上调组细胞黏附能力显著下降,miR-133a下调组细胞黏附力显著升高(P均0.05);与对照组比较,miR-133a上调组细胞侵袭力显著降低,miR-133a下调组细胞侵袭力显著升高(P均0.01)。结论 miR-133a在调控滋养层细胞粘附能力和侵袭能力方面起着重要作用。     

MicroRNA 101对乳腺癌细胞运动和迁移能力的影响

目的:探讨microRNA 101(miR-101)的表达对乳腺癌细胞增殖、运动和迁移能力的影响,并初步分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。方法:采用实时荧光定量PCR的方法检测miR-101在乳腺癌组织及乳腺癌细胞中的表达情况,再用脂质体介导转染的方法将miR-101模拟物及阴性对照转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,通过细胞增殖实验(CCK8方法 )、划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的增殖、运动、迁移能力。通过Western印迹方法分析miR-101发挥功能的可能机制。结果:与正常乳腺上皮细胞或癌旁组织相比,miR-101在乳腺癌细胞或乳腺癌组织中表达降低。体外增殖实验显示,过表达miR-101对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖无明显影响,但是能显著抑制细胞的运动和迁移能力(P<0.001)。Western印迹实验显示在外源性过表达miR-101模拟物的MDA-MB-231细胞中,EZH2的表达明显下降,而E-钙黏蛋白的表达升高。结论:miR-101的表达在乳腺癌组织和细胞中发生了下调。miR-101抑制乳腺癌细胞运动和迁移能力可能是通过靶向抑制EZH2,间接上调E-钙黏蛋白来实现。     

血清miR-30a、蛋白激酶B表达对胃肠道间质瘤术后复发风险评估价值的研究

目的：探讨血清mi R-30a、蛋白激酶B(AKT)表达对胃肠道间质瘤术后复发的价值。方法 ：收集2015年1月至2019年1月本院收治的胃肠道间质瘤患者110例,根据随访12个月将患者分为复发组（30例）和未复发组（80例）。实时荧光定量PCR法（q RT-PCR）检测患者术后3 d血清中mi R-30a的水平,酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清AKT水平。Logistic回归分析胃肠道间质瘤术后复发的影响因素,采用受试者工作曲线（ROC）分析血清mi R-30a、AKT及二者联合对胃肠道间质瘤术后复发的诊断价值。结果：与未复发组相比,复发组肿瘤直径≥5 cm、病理性核分裂像>5/50 HPF、浸润深度（黏膜层、浆膜层）、改良NIH分级中高危者比例较高（P<0.05）,血清mi R-30a相对表达水平较低（P<0.05）,AKT水平较高（P<0.05）。Logistic回归分析显示,低水平mi R-30a、高水平AKT是胃肠道间质瘤术后复发的危险因素（P<0.05）。ROC曲线结果显示,血清中mi R-30a、AKT水平诊断胃肠道间质瘤术后复发的曲线下...     

Psammaplysene A诱导的叉头转录因子O1A蛋白表达对乳腺癌细胞增殖凋亡的影响

目的 探讨Psammaplysene A(PsA)诱导叉头转录因子O1A蛋白(FOXO1A)表达对人乳腺癌细胞株MCF-7及SKBR3增殖和凋亡的影响.方法 用PsA干预2株细胞后,激光共聚焦显微镜(CSM)观察FOXO1A蛋白在细胞中表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡和周期变化;Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白家族促凋亡调节蛋白(Bim)表达.结果 FOXO 1A蛋白定位于胞核中,PsA诱导后其表达明显增加,细胞发生凋亡,生长减慢.分别用0.1 μmol/L和1.0 μmol/L的PsA干预2株细胞后,凋亡率分别为(16.3±1.4)％和(32.5±2.3)％;(13.7±1.9)％和(30.3±1.6)％;Bim蛋白增加,和阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PsA通过诱导FOXO1A蛋白表达抑制了乳腺癌细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与Bim蛋白激活有关.FOXO1A基因有望成为乳腺癌基因治疗的有效靶点.     

蓝萼乙素对三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨蓝萼乙素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231,加入不同浓度(0、2、4、8μmol/L)蓝萼乙素干预处理,采用MTT法检测细胞增殖能力;划痕实验考察细胞迁移能力;Transwell小室法考察细胞侵袭能力;Western blotting法检测细胞内p38MAPK、p-p38MAPK、FOXO3a及上皮-间质转化(EMT)相关标志物(E-cadherin、Vimentin及N-cadherin)的表达水平。结果:蓝萼乙素浓度为2、4、8μmol/L时,细胞增殖率分别为(83.2±6.90)%、(70.72±6.53)%、(45.43±7.51)%,较空白对照组[(100.00±7.84)%]降低;细胞侵袭数量分别为(300.54±24.91)、(255.44±23.59)、(208.66±36.18),较空白对照组(368.44±28.32)降低;细胞迁移距离分别为(487.11±53.00)μm、(394.93±61.91)μm、(312.88±35.42)μm,较空白对照组[(559.37±75.77)μm]降低;p-p38MAPK表达量分别为(1.38±0.11)、(1.69±0.13)、(2.23±0.19),较空白对照组(1.00±0.09)增加;FOXO3α表达量分别为(1.40±0.16)、(1.97±0.31)、(2.44±0.26),较空白对照组(1.00±0.18)增加;E-cadherin表达量分别为(1.15±0.11)、(1.77±0.22)、(1.86±0.15),较空白对照组(1.00±0.11)增加;Vimentin表达量分别为(0.86±0.04)、(0.49±0.05)、(0.54±0.04),较空白对照组(1.00±0.04)减少;N-cadherin表达量分别为(0.66±0.07)、(0.58±0.08)、(0.42±0.04),较空白对照组(1.00±0.12)减少,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论:蓝萼乙素可通过介导p38MAPK/FOXO3a信号传导有效干扰肿瘤细胞EMT进程,发挥其抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用。     

miRNA-34a靶向HDAC1对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间充质转化的影响

目的:探讨miR-34a通过靶向组蛋白去乙酰化酶1 (HDAC1)对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法:以胃癌组织及癌旁组织、体外培养的胃癌细胞系BGC-823、MKN28、AGS、SGC-7901以及人正常胃黏膜上皮细胞NGEC为研究对象。利用Lipofectamine 2000转染试剂对SGC-7901细胞进行转染,并分组为空白对照组、miR-NC组、miR-34a mimics组、miR-34a mimics+pcDNA组、miR-34a mimics+pc-HDAC1组。结果:与癌旁组织和人正常胃黏膜上皮细胞NGEC相比,胃癌组织和细胞系中miR-34a表达降低(P<0.05),HDAC1 mRNA表达升高(P<0.05)。miR-34a mimics可提高miR-34a表达、E-cadherin表达上调,细胞增殖活性、PCAN、Ki-67、MMP-2、MMP-9、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低,细胞侵袭数明显减少(P<0.05)。miR-34a靶向负调控HDAC1蛋白表达(P<0.05)。pc-HDAC1可使m...     

乳腺癌细胞外泌体miR-27a对巨噬细胞极化及肿瘤生长和转移的影响

目的 探究乳腺癌细胞外泌体miR-27a对巨噬细胞极化及肿瘤生长和转移的影响。方法 实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞中miR-27a的表达,并且检测miR-27a对巨噬细胞极化的影响,差速离心法提取乳腺上皮细胞MCF10A和乳腺癌细胞MDA-MB-231外泌体,qRT-PCR检测外泌体中miR-27a的表达,检测外泌体miR-27a对巨噬细胞极化的影响,取外泌体诱导后的巨噬细胞培养基上清与MDA-MB-231细胞共孵育后,检测MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果 miR-27a高表达于M2型巨噬细胞(P<0.05),并且miR-27a mimic显著促进CD206和MRC-2表达(P<0.05),miR-27a inhibitor抑制CD206和MRC-2表达(P<0.05),miR-27a在MDA-MB-231外泌体中显著高表达(P<0.05),MDA-MB-231外泌体可促进M2型巨噬细胞极化(P<0.05),极化后的巨噬细胞培养上清可显著诱导MD...     

miR-23a对人炎症来源牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

目的探讨miR-23a对人炎症来源牙周膜干细胞成骨分化的影响。方法分离培养正常牙周组织的牙周膜干细胞(hPDLSCs)和牙周炎来源hPDLSCs(PPDLSCs),qRT-PCR检测miR-23a的表达。下调或上调PPDLSCs中miR-23a的表达并诱导其成骨分化,采用qRT-PCR检测相关蛋白表达,茜素红染色检测各组PPDLSCs的体外成骨分化能力。结果 PPDLSCs中miR-23a的表达水平明显高于hPDLSCs(P0.05);上调miR-23a表达后,成骨分化的标志基因Runx2、ALP、OCN的mRNA水平及钙化结节数明显降低(P0.05);下调miR-23a表达后,Runx2、ALP、OCN的mRNA水平及钙化结节数升高(P0.05)。结论体外条件下miR-23a可以抑制PPDLSCs的成骨分化。     

CircDONSON靶向miR-4458对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨CircDONSON对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:qRT-PCR法检测肝癌组织中CircDONSON、miR-4458表达量;肝癌细胞Huh-7分为si-NC组、si-CircDONSON组、miR-NC组、miR-4458组、si-CircDONSON+anti-miR-NC组、si-CircDONSON+anti-miR-4458组;CCK-8法、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭情况;双荧光素酶报告实验检测miR-4458与CircDONSON靶向的关系;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果:肝癌组织中CircDONSON表达量较癌旁组织升高(4.82±0.38比1.00±0.12,P<0.05),miR-4458表达量较癌旁组织降低(0.34±0.04比1.00±0.07,P<0.05);抑制si-CircDONSON或过表达miR-4458降低肝癌细胞活力、划痕愈合率和MMP-2、MMP-9蛋白水平(P<0.05)减少,细胞克隆...     

circCRKL靶向miR-942-5p对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨circCRKL靶向miR-942-5p对骨肉瘤Saos-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：回顾性分析2018年1月至2022年12月接受新辅助化疗的41例骨肉瘤患者的临床资料。所有患者在接受此次治疗前均未接受任何抗肿瘤治疗,手术时取骨肉瘤组织和瘤旁组织。采用RT-qPCR评估骨肉瘤组织中circCRKL、miR-942-5p表达情况。分别将pcDNA、pcDNA-circCRKL、si-NC、si-circCRKL、anti-miR-NC、pcDNA-circCRKL+miR-NC、anti-miR-942-5p、pcDNA-circCRKL+miR-942-5p转染Saos-2细胞,运用集落形成、划痕愈合、CCK-8和Transwell实验评估Saos-2细胞克隆数、划痕愈合率、细胞活力以及侵袭数。circCRKL和miR-942-5p的相互作用通过双荧光素酶报告基因法确定。结果：骨肉瘤组织中circCRKL表达下调（P<0.05）,miR-942-5p表达上调（P<0.05）。过表达circCRKL后细胞克隆数、划痕愈合率、光密度（OD）值、侵袭数、miR...     

芒柄花黄素调控miR-182/FOXO3轴对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响

目的 探讨芒柄花黄素(FM)对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响,以及其作用机制。方法 用0、12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L FM处理人子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞48 h,流式细胞术检测细胞凋亡率;取生长状态良好的Ishikawa细胞,分别用25.0、50.0、100μmol/L FM处理,并命名为FM-L组、FM-M组、FM-H组,另取未处理的Ishikawa细胞作为对照组;利用细胞转染技术对处于对数生长期的Ishikawa细胞进行转染,分为miR-182 mimics组、miR-NC组、miR-182 inhibitor组、miR-NC inhibitor组、pc DNA-FOXO3组、pc DNA组,将miR-NC、miR-182mimics转染Ishikawa细胞后再用100μmol/L FM处理,记为FM+miR-NC组、FM+miR-182mimics组;Transwell测定细胞迁移及侵袭;Western Blot检测细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、叉头转录因子O亚型3(FOXO3)蛋白表达;RT-...     

miR-20b在乳腺癌的表达及对乳腺癌细胞增殖的影响

【摘要】〓目的〓观察miRNA-20b(miR-20b)在乳腺癌组织中的表达情况和对乳腺癌细胞株生长凋亡的影响。方法〓运用实时定量RT-PCR检测134例乳腺浸润性导管癌组织miR-20b的表达,并与临床病理资料和生存时间进行相关分析;瞬时转染miR-20b抑制物到乳腺癌细胞中,CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。结果〓miR-20b在乳腺癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P<0.001)。其表达与肿瘤大小、远处转移情况及Ki67表达相关(P<0.001)。miR-20b高表达组病人的无病生存期(DFS)和总生存期(OS)短于低表达组(P<0.05)。转染miR-20b抑制物后,细胞增殖减弱(P<0.05),凋亡增强(P<0.05)。结论〓乳腺癌组织中miR-20b表达与乳腺癌预后相关,可作为乳腺癌恶性程度的预测指标。     

miR-520a-3p对肾癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨miR-520a-3p在肾癌细胞系中的表达水平及其对肾癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.方法 通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测miR-520a-3p在正常肾小管上皮细胞HK2和肾癌细胞系786-O、A498、OS-RC-2及ACHN中的表达水平.选取miR-520a-3p表达水平最低的肾癌细胞系786-O...     

circCPA4靶向miR-642a-5p对胃癌AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨circCPA4靶向miR-642a-5p对胃癌AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：RT-qPCR检测胃癌组织中circCPA4和miR-642a-5p表达水平。在AGS细胞中分别转染si-circCPA4、si-NC、pcDNA、pcDNA-circ CPA4、miR-NC、miR-642a-5p模拟物、si-circCPA4+anti-miR-NC、si-circCPA4+anti-miR-642a-5p。通过划痕愈合、集落形成、CCK-8、Transwell实验分析AGS细胞划痕愈合率、克隆数、活力、侵袭数。circCPA4和miR-642a-5p的相互作用通过双荧光素酶法确定。结果：circCPA4在胃癌组织中表达上调（P<0.05）,miR-642a-5p表达下调（P<0.05）。下调circCPA4表达后细胞划痕愈合率、克隆数、吸光度（A）值、侵袭数降低（P<0.05）,miR-642a-5p表达水平升高（P<0.05）。上调circCPA4表达后细胞miR-642a-5p表达水平降低（P<0.05）。上调miR-642a-5p表...     

Wiskoot-Aldrich综合征蛋白家族成员3对乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭及伪足形成的影响

目的:观察Wiskoot-Aldrich综合征蛋白家族成员3(WASF3)对乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭及伪足形成的影响。方法:利用免疫蛋白印迹(Western blot)法检测乳腺癌细胞(BT-549、HCC-1937、BT-474、MDA-MB-231、MCF-7、T-47D)及乳腺正常细胞(MCF-10A)中WASF...     

circ＿0007841靶向miR-513a-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 ：探讨circ＿0007841靶向miR-513a-5p对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 ：RT-q PCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞HGC-27以及人胃黏膜细胞GES-1中circ＿0007841和miR-513a-5p表达。双荧光素酶报告实验确定circ＿0007841和miR-513a-5p相互作用。将HGC-27细胞分为si-NC组、si-circ＿0007841组、miR-NC组、miR-513a-5p mimic组、si-circ＿0007841+miR-513a-5p Inhibitor组。CCK-8法检测HGC-27细胞存活率;平板克隆实验检测HGC-27细胞克隆形成数;划痕愈合实验和Transwell实验检测HGC-27细胞迁移能力;Transwell实验检测HGC-27细胞侵袭能力。结果：与癌旁组织比较,胃癌组织中circ＿0007841相对水平显著升高（P<0.05）,miR-513a-5p相对水平显著降低（P<0.05）。与GES-1细胞比较,HGC-27细胞中circ＿0007841相对水平显著升高（P<0.05）,miR-...