糖尿病大鼠下丘脑神经肽Y mRNA及蛋白表达研究

目的 研究糖尿病大鼠下丘脑神经肽Y（NPY）mRNA及蛋白表达情况,以探讨NPY在糖尿病中的病理生理作用。方法 建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型,设立3周、24周糖尿病组〔其中分为非胰岛素（Ins)治疗组和Ins治疗组以及正常对照组〕。用原位杂交和免疫组化检测下丘脑NPY的mRNA及蛋白表达情况。结果 糖尿病大鼠下丘脑弓状核NPY的mRNA和蛋白表达均增加,室旁核及室周NPY的蛋白含量增加,且3周组较24周组增加更明显。给予Ins治疗后上述区域NPY的mRNA和蛋白表达均下降。结论 在糖尿病大鼠下丘脑的NPY mRNA和蛋白表达均增高,NPY的增加在糖尿病的多饮多食中起着重要作用。Ins缺乏可有是造成下丘脑NPY增多的重要因素。     

归脾汤对沉默LncRNA MALAT1大鼠下丘脑胰岛素信号通路的影响

目的 探讨沉默肺腺癌转移相关转录本(MALAT)1配合应用归脾汤对胰岛素信号通路中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB)和糖原合成酶激酶(GSK)-3β表达的影响及对胰岛素抵抗的改善情况。方法 长期给予高脂饲料，后期注射链脲佐菌素(STZ)建立并筛选出糖尿病脑病(DE)大鼠模型；除对照组外，将筛选出的DE模型大鼠随机分为模型组、沉默LncRNA MALAT1配合归脾汤治疗(M归脾汤)组、归脾汤组、西药组。以氧化酶法测其血糖水平，以酶联免疫吸附试验(ELISA)测其胰岛素水平，计算胰岛素敏感指数，以实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法测其下丘脑中GSK-3β mRNA的相对表达；应用Western印迹测下丘脑中PI3K、PKB和GSK-3β蛋白的相对表达。结果 与模型组比较，归脾汤组和西药组胰岛素水平显著升高，M归脾汤组和西药组胰岛素敏感指数(ISI)显著升高(P<0.05),归脾汤组中GSK-3β mRNA和蛋白的相对表达显著降低(P<0.05),归脾汤组中PI3K蛋白的相对表达显著提高(P<0.05)。与归脾汤组比较，M归脾汤组GSK-3β mRNA...     

高饱合脂肪酸饮食下调大鼠肝脏和脂肪胰岛素信号通路的基因表达

目的检测高饱和脂肪酸饮食诱导胰岛素抵抗大鼠肝脏和脂肪胰岛素信号表达改变,探讨高脂肪酸饮食诱导胰岛素抵抗的发病机制。方法将大鼠分为普通饲料对照组(N组)和饱和脂肪酸组(S组);酶免法测定血中胰岛素水平,IGTT实验确定胰岛素抵抗形成,计算胰岛素抵抗指数(IRS)实时PCR检测肝脏和脂肪组织IRS-1,PI3K,Akt,GLUT4基因表达改变。结果相同条件喂养,饱和脂肪酸饮食和普通饲料对大鼠体重和空腹血糖无明显差异;饱和脂肪酸组大鼠血浆胰岛素水平上升,IRS和葡萄糖曲线下面积高于对照组(P<0.05);饱和脂肪酸组大鼠肝脏组织和腹部脂肪组织IRS-1,PI3K,Akt,GLUT4基因表达较对照组明显下降(P<0.05)。结论高饱和脂肪酸饮食引起大鼠血糖正常,胰岛素含量上升,但是肝脏和脂肪胰岛素信号通路基因表达下调,是高饱和脂肪酸饮食诱导大鼠胰岛素抵抗的重要发病机制。     

己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏核因子-κB信号通路及胰岛素抵抗的干预作用

目的观察己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏核因子-kB（NF—kB）信号通路及胰岛素受体底物（IRS）-1、IRS-2和葡萄糖转运子2（GLUT2）表达的影响。方法24只SD大鼠高脂饮食饲养4周后，随机分为模型组和干预组，于实验第24周处死，并设普通饮食饲养大鼠6只作对照组。电泳迁移率分析检测肝脏NF—kB活性，Westernblot检测肿瘤坏死因子（TNF）α和KB抑制蛋白α（IkBα）表达，逆转录聚合酶链反应检测肝脏IRS—1、IRS12和GLUT2mRNA表达。结果与对照组相比，模型组肝脏NF-kB和TNFα显著增加，IkBα显著降低，伴IRS-2表达显著增加；与模型组相比，干预组NF—kB和TNFα显著降低，IkBα有所增高，而IRS-2表达显著减少；肝脏IRS—1和GLUT2表达在3组之间差异均无统计学意义。结论己酮可可碱可能通过影响肝脏NF—kB信号通路和增加肝细胞IRS-2表达，从而有助于改善非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏胰岛素抵抗。     

IRS1/PI3K/Akt信号通路在Ang(1～7)调节非酒精性脂肪性肝炎中的作用

目的探讨胰岛素受体底物(IRS)1/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝/苏氨酸激酶(Akt)信号通路在血管紧张素(Ang)(1～7)体外调节非酒精性脂肪性肝炎中的作用机制。方法诱导L02肝细胞脂肪变;Ang(1～7)及Ang(1～7)+MAS拮抗剂(A779)干预脂肪变L02肝细胞,并设立AngⅡ干预;培养24 h后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、葡萄糖转运蛋白(GLUT)4、胆固醇、谷丙转氨酶(ALT)含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测IRS1基因及活性及PI3K、Akt磷酸化表达水平。结果 Ang(1～7)组中总胆固醇、ALT含量降低,GLUT4含量升高,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);且IRS1基因及活性增强,磷酸化PI3K、Akt表达水平升高,TNF-α表达量下降。AngⅡ组总胆固醇、ALT含量升高,GLUT4含量降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);且IRS1基因及活性降低,磷酸化PI3K、Akt表达水平降低,TNF-α表达量升高。Ang(1～7)组的保护作用能被A779抑制。结论 Ang(1～7)可以通过IRS1/PI3K/Akt信号通路抑制TNF-α活性,增加GLUT4含量,发挥改善非酒精性脂肪性肝炎胰岛素抵抗的作用。     

糖尿病脑病大鼠脑PET/CT显像、胰岛素样生长因子受体及葡萄糖转运蛋白4的表达

目的观察糖尿病脑病大鼠脑PET/CT显像、胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)及葡萄糖转运蛋白(GLUT)4的表达。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型,Morris水迷宫试验筛选糖尿病脑病大鼠模型,正常对照组,糖尿病组(排除脑病),糖尿病脑病组各随机选取8只,进行脑部PET/CT显像、免疫组化法检测脑组织IGF-1R及GLUT4表达。结果与正常对照组及糖尿病组比较,糖尿病脑病组大鼠标准摄取值(SUV)显著降低(P<0.01);IGF-1R表达显著增高而GLUT4显著下降(P<0.01)。结论糖尿病脑病大鼠脑组织IGF-1R异常高表达,扰乱了脑部糖代谢的相关通路。     

已酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏核因子-κB信号通路及胰岛素抵抗的干预作用

目的观察己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏核因子-κB(NF-κB)信号通路及胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2和葡萄糖转运子2(GLUT2)表达的影响。方法24只SD大鼠高脂饮食饲养4周后,随机分为模型组和干预组,于实验第24周处死,并设普通饮食饲养大鼠6只作对照组。电泳迁移率分析检测肝脏NF-κB活性,Western blot检测肿瘤坏死因子(TNF)α和κB抑制蛋白α(1κBα)表达,逆转录聚合酶链反应检测肝脏IRS-1、IRS-2和GLUT2 mRNA表达。结果与对照组相比,模型组肝脏NF-κB和TNFα显著增加,IκBα显著降低,伴IRS-2表达显著增加；与模型组相比,干预组NF-κB和TNFα显著降低,IκBα有所增高,而IRS-2表达显著减少；肝脏IRS- 1和GLUT2表达在3组之间差异均无统计学意义。结论己酮可可碱可能通过影响肝脏NF-κB信号通路和增加肝细胞IRS 2表达,从而有助于改善非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏胰岛素抵抗。     

血管紧张素（1-7）对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响及机制研究

目的探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对DM大鼠IR的影响及可能机制。方法随机选取Wistar大鼠10只为正常对照组(NC),另取24只予高脂饮食喂养联合STZ注射构建DM模型,造模成功的20只大鼠随机分为糖尿病组(DM)、Ang-(1-7)组[Ang-(1-7)300μg/(kg.d)皮下注射],每组各10只。干预8周后检测FPG、FIns及血管紧张素II(Ang II)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及敏感指数(HOMA-ISI),观察肝脏病理改变,检测肝脏炎症通路及Ins信号转导通路相关因子的mRNA及蛋白表达。结果与NC组比较,DM、Ang-(1-7)组体重、FIns、HOMA-ISI、IRS-2 mRNA、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)mRNA和蛋白、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(Akt-2)mRNA和蛋白表达降低(P0.05),FPG、Ang II、HOMA-IR、肝脏指数、IκB激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白、核因子κB(NF-κB)mRNA和蛋白、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、糖原合成酶激酶3α(GSK-3α)mRNA和蛋白表达升高(P0.05)。与DM组比较,Ang-(1-7)组FPG、Ang II、HOMA-IR、肝脏指数、IKKβmRNA和蛋白、NF-κB mRNA和蛋白、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、GSK-3αmRNA和蛋白表达降低,FIns、HOMA-ISI、IRS-2 mRNA、PI3K m RNA和蛋白、Akt-2 mRNA和蛋白表达升高(P0.05)。结论 Ang-(1-7)可能通过抑制肝脏IKKβ/NF-κB炎症通路及上调IRS-2/PI3K/Akt-2胰岛素信号通路,改善IR。     

扶正化瘀方对胰岛素样生长因子-1和磷脂酰肌醇3-激酶信号通路在自发逆转肝纤维化模型中变化的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子(IGF)-1和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在自发逆转肝纤维化模型中的动态变化及扶正化瘀方对其影响的机制. 方法 实验大鼠分为对照组、自发逆转模型组(模型组)与扶正化瘀组.模型组和扶正化瘀组以四氯化碳(CCl4)腹腔注射8周以建立肝纤维化模型,8周后模型组停用CCl4观察至14周,扶正化瘀组自CCl4造模同时以扶正化瘀方灌胃至8周.观察血清ALT、AST变化,用HE和Masson染色观察肝组织炎症和纤维化程度,免疫组织化学和RT-PCR法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白、IGF-1、PI3K蛋白和mRNA表达.多组数据间比较采用单因素方差分析,Student-Newman-Keuls法进行组间比较,相关分析采用直线相关分析法. 结果 随CCl4造模时间延长,模型组大鼠肝组织炎症及纤维化逐渐加重,Ishak评分,羟脯氨酸含量、α-平滑肌肌动蛋白及IGF-1、PI3K蛋白和mRNA表达逐渐升高,8周时达高峰.停用CCl4后随肝组织炎症和纤维化好转,Ishak评分、羟脯氨酸含量、α-平滑肌肌动蛋白表达及IGF-1、PI3K蛋白和mRNA表达亦逐渐降低,到14周时各指标达到最低;扶正化瘀组第4、6、8周各时间点大鼠肝组织炎症和纤维化程度,Ishak评分,羟脯氨酸含量,α-平滑肌肌动蛋白,IGF-1和PI3K蛋白及mRNA表达均较模型组相同时间点明显降低.结论 IGF-1和PI3K信号通路在肝纤维化发生和逆转中发挥重要作用,扶正化瘀方可通过阻断IGF-1、PI3K信号通路及减少肝星状细胞活化等作用发挥抗肝纤维化功效.     

松果菊苷对衰老大鼠生精细胞胰岛素通路IRS1、IGF-1、IGFBP3基因表达的影响

目的探讨松果菊苷对衰老大鼠生精细胞胰岛素信号通路胰岛素受体底物(IRS)1、胰岛素样生长因子(IGF)-1、IGF结合蛋白(IGFBP)3基因表达的影响。方法选用原代大鼠生精细胞为研究对象,采用自由基损伤的方法建立细胞衰老模型。运用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹、免疫荧光技术,观察松果菊苷对生精细胞胰岛素信号传导通路关键基因IRS1、IGF-1、IGFBP3 mRNA和蛋白表达变化。结果衰老组IRS1、IGF1的荧光免疫染色的平均光密度明显低于正常组(P0.05),IGFBP3平均光密度明显高于正常组(P0.05),Western印迹半定量分析结果与荧光免疫结果一致。衰老组IRS1、IGF1 mRNA表达水平明显低于正常组(P0.05),IGFBP3 mRNA表达水平明显高于正常组(P0.05)。松果菊苷干预后生精细胞中IRS1,IGF1 mRNA和蛋白表达明显高于衰老组(P0.05),IGFBP3表达明显低于衰老组(P0.05)。结论松果菊苷可通过降低IGFBP3表达,提高IRS1,IGF1表达,延缓生精细胞的衰老状态。     

迷走神经复合体注射GLP-1对糖尿病大鼠下丘脑GLP-1受体表达及胃排空的影响

目的探讨中枢迷走神经复合体注射GLP-1(胰高血糖素样肽-1)对糖尿病大鼠胃排空的影响和中枢作用机制。方法36只雄性清洁级Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组和糖尿病GLP-1(GLP-1)干预组。DM组和GLP-1组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),三组大鼠中枢迷走神经复合体(DVC区)埋置套管,注射STZ 4周后,GLP-1组经套管注射的GLP-1,NC组和DM组大鼠DVC区注射等体积生理盐水。用酚红灌胃法检测胃排空;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠下丘脑GLP-1RmRNA的表达。结果注射STZ 4周后,DM组大鼠胃排空率较NC组明显升高(P<0.05),下丘脑GLP-1受体mRNA表达较对照组无明显变化。GLP-1组大鼠胃排空率较DM组显著降低(P<0.05),但高于正常对照组(P<0.05),下丘脑GLP-1RmRNA的表达明显高于NC组及DM组(P<0.05),胃排空率与下丘脑GLP-1受体mRNA表达量成负相关。结论迷走神经复合体注射GLP-1可抑制DM大鼠早期胃排空加速,中枢作用机制可能与促进下丘脑GLP-1受体的表达有关。     

二甲双胍对糖尿病大鼠血糖、血脂水平及骨骼肌GLUT4表达的影响

雄性SD大鼠55只,分别予普通饲料和高糖高脂饲料(二甲双胍组)喂养。高糖高脂饲料饲养联合STZ(40 mg/kg)构建糖尿病大鼠模型。二甲双胍组予灌胃4周后检测血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂的水平变化,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。留取各组大鼠骨骼肌,RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达,免疫组化法检测GLUT4蛋白表达。结果与正常对照组比较,糖尿病大鼠模型FPG、FINS、TG、HOMA-IR显著增高(P 0. 05),骨骼肌GLUT4表达显著减少(P0. 05);与模型组比较,二甲双胍组FPG、FINS、HOMA-IR显著降低(P 0. 05),骨骼肌GLUT4表达显著增加(P 0. 05)。结论二甲双胍可降低糖尿病模型大鼠血糖。     

基于PI3K、Akt信号通路探讨山腊梅叶乙醇提取物的降糖降脂作用

目的观察分析山腊梅叶乙醇提取物对高脂高糖糖尿病大鼠的降糖降脂调控作用。方法将大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、山腊梅叶提取物低剂量组、山腊梅叶提取物高剂量组(下文简称低、高剂量组)及二甲双胍组,每组15只,除正常组大鼠外,其余大鼠采用高脂高糖饲料喂养+腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。给药结束后测定各组大鼠血糖和血脂相关指标,并检测胰岛素受体底物(IRS)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、葡萄糖转运体4(GLUT-4)表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清胰岛素水平下降,而空腹血糖、糖化血红蛋白,以及血清胆固醇(TC),三酰甘油(TG)及低密脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,低剂量、高剂量组及二甲双胍组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、血清TC、TG及LDL-C水平均明显降低,差异有统计学意义(P0.05),血清胰岛素、肝脏IRS、PI3K、AKT、GLUT-4蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论山腊梅叶具有降低血糖、血脂之效,其机制可能与调节IRS-1、PI3K、Akt信号通路有关。     

糖尿病胃轻瘫大鼠胃平滑肌细胞凋亡与胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇-3激酶/丝苏氨酸激酶信号通路的动态变化及意义

目的观察细胞凋亡与胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇-3激酶/丝苏氨酸激酶(IGF-1/PI3K/Akt)通路在糖尿病胃轻瘫大鼠胃平滑肌细胞中的变化,探讨其在糖尿病胃轻瘫发生过程中的意义。方法制备糖尿病大鼠模型,分为正常对照组(NC)组、模型2周(DM2W)组、模型4周(DM4W)组、模型6周(DM6W)组和模型8周(DM8W)组。通过观察模型大鼠胃内色素残留率和小肠传输率确定糖尿病胃轻瘫模型建立;流式细胞术检测各模型组胃平滑肌细胞凋亡率;Western blot检测各组胃平滑肌IGF-1、PI3K、p-Akt蛋白的表达。结果细胞凋亡率在DM2W、DM4W、DM6W和DM8W组逐步增高(P0.05或P0.01)。IGF-1、PI3K、p-AKT蛋白表达逐步降低(P0.05或P0.01)。结论细胞凋亡与IGF-1/PI3K/Akt通路的动态变化在糖尿病胃轻瘫发生中可能有重要作用。     

糖尿病大鼠VFN水平与GLUT1、GLUT4基因表达的相关性

目的探讨内脏脂肪素(VFN)与葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、GLUT4基因表达的相关性。方法健康雄性Wistar大鼠33只随机分为正常对照组(NC组),糖尿病模型组(DM组),高脂饮食组(HF组),分别为10只、13只、10只。检测3组大鼠体重、空腹血糖(FBG)和空腹血清胰岛素(FINS),用稳态模型评估法(HOMA)评价胰岛素抵抗(IR)指数,采尾血以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定VFN的含量。处死,分离附睾、肠系膜、折返腹膜脂肪及肾脏脂肪垫,称重,计为内脏脂肪重量,利用RT-PCR法分别检测3组大鼠内脏脂肪中VFN的表达。RT-PCR方法检测各组大鼠心肌组织GLUT1、GLUT4的基因表达水平。结果成功建立大鼠糖尿病模型。DM组VFN表达明显增加,GLUT1、GLUT4的相对表达水平明显降低(P0.05)。结论糖尿病大鼠体内VFN水平可影响GLUT1、GLUT4 mRNA的表达,且具有负相关性。     

GLUT4 mRNA在糖尿病大鼠骨骼肌及脂肪组织中的表达及意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）mRNA表达在2型糖尿病发病中的作用。方法将46只SD大鼠随机分为对照组及高脂组各10只、高血糖组及糖尿病组各13只,分别采用高脂饮食及腹腔内注射链脲佐菌素方法制备高脂、高血糖及2型糖尿病模型。10周末实验结束后,分别取血测空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）,计算胰岛素指数（ISI）;采用RT-PCR检测骨骼肌、脂肪组织中GLUT4 mRNA表达。结果与对照组比较,糖尿病组FBG、FINS及ISI显著升高、骨骼肌及脂肪组织中GLUT4 mRNA表达均明显下调,高血糖组、高脂组骨骼肌和脂肪组织中GLUT4 mRNA表达亦显著低于对照组,四组GLUT4 mRNA在骨骼肌中的表达均显著高于脂肪组织（P〈0.01、0.05）。结论 GLUT4 mRNA在骨骼肌中的表达高于脂肪组织;高脂饮食、高血糖可通过下调GLUT4 mRNA表达加重胰岛素抵抗,进而诱发2型糖尿病。     

人参皂甙对2型糖尿病大鼠模型胰岛素抵抗的逆转活性及相关机制

目的 探讨人参皂甙对糖尿病胰岛素抵抗大鼠胰岛素抵抗的逆转活性及相关机制.方法 用链脲佐菌素加高热量饲料的方法制出2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型；实验大鼠分为正常对照组、模型对照组、人参皂甙治疗组,用胰岛素敏感指数(ISI)衡量胰岛素抵抗程度；荧光定量PCR检测各实验组PI3K P85基因的表达.结果 人参皂甙治疗组使模型鼠ISI得到显著性提高,可以逆转模型鼠的胰岛素抵抗.荧光定量PCR结果显示正常对照组、模型对照组、人参皂甙治疗组PI3K P85基因扩增的△△CT值分别为:13.21±1.04、9.57±0.82、16.78±1.65,与正常对照组相比,人参皂甙治疗组增加了PI3K的表达(P＜0.05),模型对照组降低了PI3K的表达(P＜0.01).结论 人参皂甙可以有效地克服糖尿病模型鼠的胰岛素抵抗,显著的激活PI3K通路的活性.     

长链非编码RNA AW112010通过miR-204/POU2F2轴改善衰老小鼠脂肪细胞的胰岛素抵抗

目的探讨长链非编码RNA AW112010(lncRNA AW112010)是否可能通过miR-204/POU类同源盒2(POU2F2)信号通路改善衰老脂肪细胞的胰岛素抵抗。方法体内实验:将C57BL/6小鼠按体重分成年轻对照组(4月龄)、衰老模型组(18月龄);实时荧光定量PCR及Western印迹法检测附睾脂肪组织中lncRNA AW112010、miR-204-5p、POU2F2、衰老相关指标(p16、p21)及胰岛素信号通路基因[胰岛素受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)]的表达量。体外实验:用阿霉素诱导3T3-L1衰老脂肪细胞模型, β-gal染色观察细胞衰老, 成功构建miR-204抑制剂及miR-204模拟物的小干扰RNA, 转染3T3-L1脂肪细胞。结果实时荧光PCR与Western印迹结果表明, 与年轻小鼠比较, 衰老小鼠附睾脂肪组织中AW112010的表达水平增高, 而miR-204-5p的表达水平降低;衰老小鼠附睾脂肪组织中POU2F2、p16、p21的表达水平增高, 而INSR、IRS1、PI3K、GL...     

细胞因子信号转导抑制因子3表达下调抵抗高脂饮食诱导肥胖的作用机制研究

目的 探讨RNA干扰下丘脑弓状核细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)对饮食诱导大鼠肥胖的防治作用.方法 利用慢病毒介导的RNA干扰技术建立大鼠下丘脑弓状核SOCS3基因沉默的动物模型,然后给予高脂饲料喂养8周处死,采用放射免疫法测定血清瘦素和胰岛素的含量,免疫组化及实时定量PCR方法检测大鼠下丘脑注射部位SOCS3的表达.结果 干扰组大鼠下丘脑注射部位的SOCS3蛋白表达明显降低,SOCS3 mRNA表达量下调49％ (P＜0.01),干扰组大鼠体重增长缓慢,血清瘦素[(8.18±2.10对10.85±2.23)ng/ml]、胰岛素[(18.89±4.88对26.78±6.01)mU/L]、血糖[(4.89±0.91对6.26±1.41) mmol/L]及甘油三酯[(0.47±0.10对0.62±0.16)mmol/L]水平均明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 利用RNA干扰下调下丘脑弓状核SOCS3基因的表达能够抵抗高脂饮食诱导的肥胖、改善瘦素抵抗和相关的代谢紊乱.     

胰高血糖素样肽-1对糖尿病大鼠胃排空的非受体通路的影响

目的探讨室旁核(Paraventricular nucleus,PVN)内胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like pepetide-1,GLP-1)是否存在非受体通路参与糖尿病大鼠胃排空的中枢调节。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、GLP-1(7-36)干预组(GLP组)、Exendin(9-39)联合GLP-1干预组(E-G组)及Exendin(9-39)干预组(Exendin组)。制备糖尿病大鼠模型,PVN埋置套管并给予GLP-1(7-36)或Exendin(9-39)等药物,2周后甲基纤维素-酚红溶液测胃排空;实时荧光定量分析法检测PVN区GLP-1受体(GLP-1R)mRNA表达情况。结果注射STZ 2周后,GLP组及E-G组胃排空率较DM组、Exendin组均明显降低(P均0.05),但高于NC组(P0.05);GLP组及E-G组的下丘脑GLP-1R mRNA表达较DM组、NC组、Exendin组均明显增高(P均0.05)。GLP组胃排空率和空腹血糖较E-G组降低(P0.05);下丘脑GLP-1R mRNA表达GLP组与E-G组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论室旁核注射GLP-1可减缓糖尿病大鼠早期的胃排空,推测GLP-1影响胃排空的中枢作用机制除促进GLP-1受体表达增加外,非受体作用通路亦发挥重要作用。