雄激素对MCF-7乳腺癌细胞株增殖凋亡的影响

目的 观察睾丸酮对MCF-7乳腺癌细胞株增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将1×10~(-5)、1×10~(-7)、1×10~(-9)、1×10~(-11) mol/L的睾丸酮分别作用于乳腺癌MCF-7细胞24、48、72 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长,流式细胞术检测不同浓度睾丸酮作用48 h时MCF-7细胞的周期分布和凋亡以及该细胞株中细胞周期素D1蛋白和雄激素受体的表达.结果 高浓度睾丸酮抑制MCF-7乳腺癌细胞株的增殖,1×10~(-5) mol/L睾丸酮作用48 h时,细胞生长抑制率为22.21%,细胞凋亡率为(58.60±5.41)%,但可使细胞周期由G_1 期进入S期,并可使细胞周期素D1蛋白表达量增加,雄激素受体蛋白表达量下降.低浓度睾丸酮(1×10~(-9) mol/L)作用后细胞周期素D1蛋白表达量无明显变化,雄激素受体蛋白表达量升高,在短时间内(24 h)可促进MCF-7细胞增殖.结论 高浓度睾丸酮在体外可使MCF-7乳腺癌细胞株细胞周期素D1蛋白表达增加,使细胞周期由G_1进入S期,而同时促使细胞凋亡,表现出抗肿瘤作用.低浓度睾丸酮有短暂的促进MCF-7乳腺癌细胞增殖的作用.     

冬凌草甲素诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及机制

目的 探讨冬凌草甲素体外诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用及其机制.方法 10～80 μmol/L冬凌草甲素分别处理SGC-7901细胞后,CCK8法检测冬凌草甲素体外对SGC-7901细胞抑制生长的作用;用流式细胞仪分别观察冬凌草甲素诱导凋亡及细胞周期阻滞.Western blot测定凋亡相关蛋白的表达.结果 冬凌草甲素对SGC-7901细胞有明显的生长抑制作用,并随着药物浓度的增加(10～80 μmol/L)而逐渐增强,呈浓度、时间依赖关系.此外,流式细胞术检测发现,冬凌草甲素浓度为0、10、40、60、80 μmol/L,作用24 h后,G_2/M期细胞数分别是(9.90±1.17)%、(9.94±0.27)%、(11.76±0.16)%、(15.64±1.48)%和(22.59±1.01)%;而S期细胞比例分别为(31.79±1.03)%、(30.90±0.47)%、(29.25±0.80)%、(21.46±1.61)%、(18.81±0.61)%,冬凌草甲素能够使得SGC-7901细胞周期呈剂量依赖性阻滞于G_2/M期;冬凌草甲素浓度为80 μmol/L,作用12、24 h后,凋亡率分别为(12.78±1.54)%、(20.62±2.39)%,明显高于对照组的(9.92±0.56)%,其能使SGC-7901细胞发生凋亡.随着冬凌草甲素作用时间延长,SGC-7901细胞的bel-2蛋白表达逐渐减弱,前体Caapase-3被激活.结论 冬凌草甲素能够诱导SGC-7901细胞产生凋亡,并使细胞周期阻滞在G_2/M期.其凋亡机制可能与下调bcl-2蛋白表达及Caspase-3的激活相关.     

鱼藤素增加人胃癌细胞株SGC-7901对氟尿嘧啶的敏感性

目的 观察鱼藤素对胃癌细胞化疗敏感性的影响.方法 胃癌SGC-7901细胞以1 μmol/L鱼藤素处理24h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测对其对氟尿嘧啶处理48 h的敏感性变化;经鱼藤素联合氟尿嘧啶(12.5 mg/L)处理后形态学观察进一步验证MTT结果;提取1μmol/L鱼藤素处理24 h后细胞总蛋白,Western blot法检测相关蛋白表达水平的变化.结果 鱼藤素预处理后可明显增强氟尿嘧啶对SGC-7901细胞的抑制作用,其IC50值降至7.86 mg/L(P＜0.05);增强氟尿嘧啶对SGC-7901细胞增殖抑制和凋亡诱导作用;鱼藤素可明显降低蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平.结论 鱼藤素可通过下调Akt的活性,增强SGC-7901细胞对氟尿嘧啶的敏感性,与化疗药物联用可能有助于提高抗肿瘤治疗效果.     

鱼藤素诱导人前列腺癌细胞凋亡及其机制研究

目的 观察鱼藤素对于激素抵抗型前列腺癌(HRPC)细胞PC3和DU145增殖、细胞周期和凋亡的影响并探讨其机制.方法 设阴性对照组(有细胞但不加药),空白对照组(无细胞仅有培养液),阳性对照组(渥曼青霉素100 nmoL/L),及鱼藤素分别10、100、1 ìmol/L共6组.CCK-8法进行细胞毒性实验,检测细胞生长抑制率.流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Westem-blot检测Akt、MAPK及其磷酸化蛋白表达,探讨药物作用机制.结果 10 nmol/L～1 ìmol/L鱼藤素对PC3细胞均有生长抑制作用,呈现明显的时间、浓度依赖性,对DU145细胞则无此作用.鱼藤素使PC3细胞出现G2/M期阻滞现象并引起浓度依赖性的凋亡,而未改变DU145细胞的周期分布也不能诱导其凋亡.鱼藤素能够阻断P13K/AKT通路而对MAPK通路无影响.结论 鱼藤素通过阻断PI3K/AKT通路实现抑制PC3细胞增殖、诱导凋亡的作用.两株细胞间实验结果 的差异是因为其PI3K/AKT通路活化状态的差异造成的.     

环巴胺对DU145细胞增殖和细胞周期的影响

目的:研究Hedgehog信号通路阻断剂(环巴胺)对DU145细胞增殖的抑制作用。方法:不同浓度(1、10、50、100μmol/L)环巴胺干预DU145细胞,分别在24、48、72h后采用噻唑蓝比色法检测其对细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测环巴胺对细胞周期的影响;RT-PCR检测50μmol/L环巴胺作用48h后实验组和对照组细胞周期蛋白E(cyclinE)mRNA表达水平的差异。结果:环巴胺对DU145细胞的抑制作用呈时效和量效依赖关系,当浓度>10μmol/L作用24h后会显著抑制细胞增殖,10、50、100μmol/L浓度组对细胞的抑制率分别为7.42%、12.70%和59.15%,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测发现,当环巴胺浓度达10μmol/L以上,干预48h后G1期细胞比例明显升高。对照组、10、50μmol/L浓度组的G1期细胞百分比分别为:(52.17±2.21)%、(60.13±2.75)%和(74.30±3.52)%,差异有统计学意义(P<0.01);凋亡峰也随环巴胺浓度增加而逐渐增高。50μmol/L环巴胺作用48h后DU145细胞cyclinEmRNA表达显著降低,与空白对照组相比降低61.90%(P<0.01)。结论:环巴胺可以抑制DU145细胞的增殖能力,其机制可能与下调DU145细胞cyc-linEmRNA表达水平,从而将DU145细胞阻滞于G1期有关。环巴胺亦可以诱导DU145细胞凋亡。     

过氧化物酶增殖物活化受体γ对肝肿瘤细胞生物学行为影响的实验研究

目的探讨过氧化物酶增殖物活化受体γ在肝肿瘤细胞株中的表达,结合配体对其生长的影响,并初步探讨其机制。方法RT-PCR及Westen blot检测肝肿瘤细胞株中PPARγ的表达;MTT法检测PPARγ活化对肝肿瘤细胞生长的影响,Annexin V-FITC、DAPI染色、流式细胞仪、RT- PCR分别研究PPARγ对肝肿瘤细胞凋亡、细胞周期、周期调节因子影响。结果人类肝肿瘤细胞株SMMC-7721、Hep G2、Hep 3B在mRNA及蛋白水平均表达PPARγ;PPARγ/活化配体曲格列酮、吡格列酮作用肝肿瘤细胞株48 h后在25、50μmol/L浓度时显示明显的生长抑制作用,流式细胞仪显示细胞周期中G_0/G_1期显著延长,S期明显减少,曲格列酮10、25、50μmol/L作用SMMC-7721 48 h后,Cyclin D1的表达明显下调,P21~(WAF1/CIP1)的表达则明显上调,P27~(KIP1)未见明显变化。PPARγ配体在25、50μmol/L浓度时可诱导SMMC一7721凋亡。结论PPARγ在SMMC-7721、Hep G2、Hep 3B中存在表达;PPARγ配体对于肝肿瘤细胞株有明显的生长抑制作用,其生长抑制作用可能是通过下调Cyclin D1,上调P21~(WAF1/CIP1)表达,产生细胞周期阻滞及促进细胞凋亡而实现。     

阻断胰腺癌平衡型核苷转运载体对5-氟尿嘧啶诱导细胞凋亡及细胞周期改变的影响

目的研究应用潘生丁(DP)阻断平衡型核苷转运载体(hENTs)后,5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌细胞株Panc-1凋亡及细胞周期的影响。方法将Panc-1细胞分为hENTs未阻断组和hENTs阻断组,hENTs阻断组再根据DP浓度分为5μmol/L DP组和10μmol/L DP组。各组细胞分别在含有1.5×106ng/L 5-FU或不含5-FU的培养液中培养24 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和细胞周期改变。结果①各组细胞凋亡检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,5μmol/L及10μmol/L DP组的细胞凋亡率明显高于未阻断组(P<0.05),10μmol/L DP组又明显高于5μmol/L DP组(P<0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组之间细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。②各组细胞周期检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,未阻断组细胞进入合成期(S期)的比例减少,停滞在合成前期(G1期),5μmol/L DP组及10μmol/L DP组的细胞进入合成期(S期)的比例较未阻断组进一步减少(P<0.05),且随着DP浓度的增加,细胞进入合成期(S期)的比例减少得更多(P<0.05),5μmol/L DP组和10μmol/L DP组进入合成期(S期)的比例分别是未阻断组的87.09%和74.06%。5-FU对细胞合成后期(G2期)的影响较小,除5μmol/L DP组较未阻断组G2期细胞数量增加有统计学意义(P<0.05)外,其余各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组细胞周期中各期无明显改变,各组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在胰腺癌细胞株Panc-1中,DP阻断细胞膜上hENTs后,能显著增强5-FU对胰腺癌细胞促凋亡作用及抑制胰腺癌细胞分裂增殖的作用,这种增强作用可能与阻断hENTs后细胞内5-FU浓度提高有关,而与DP本身作用无关。     

多沙唑嗪对前列腺癌DU-145细胞生长的影响及机理研究

目的　观察多沙唑嗪对激素非依赖性前列腺癌DU- 145细胞增殖与凋亡的影响并探讨其作用机理。　方法　DU -145细胞培养液中加入多沙唑嗪,使其终浓度分别为0. 1、1、10、25、100μmol/L,不加多沙唑嗪者为对照组。24、48、72、96h后分别检测各组癌细胞的吸光度A值,并计算细胞生长抑制率,取与对照组比较有显著性差异的最低浓度为多沙唑嗪最佳浓度,取有显著性差异的最短时间为最佳作用时间。分析25μmol/L多沙唑嗪作用48h后的细胞周期分布及早期凋亡率,观察细胞形态,检测凋亡相关因子及蛋白的表达。　结果　0. 1、1、10μmol/L组的A值与对照组相比差异无统计学意义; 25、100μmol/L组的A值与对照组相比差异有统计学意义(P<0. 01); 25μmol/L多沙唑嗪作用48h时即出现统计学差异。25μmol/L多沙唑嗪作用48h后,细胞周期分布情况与对照组相比差异无统计学意义;早期凋亡率为14. 31%,与对照组(1. 07% )相比差异有统计学意义;电镜观察显示部分细胞呈现典型的凋亡形态学改变;细胞转化生长因子β1 (TGF- β1 )呈阳性表达,Fas表达增强,bcl -2表达与对照组比较差异无统计学意义。　结论　多沙唑嗪可能通过Fas系统或直接激活TGF -β1 信号通路介导凋亡的发生,从而抑制激素非依赖性前列腺癌细胞生长。     

全反式维甲酸对人结肠癌细胞亚株SW480/M5增殖和凋亡的影响

目的 观察全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌细胞亚株SW480/M5增殖和凋亡的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测1、2、4、8μmol/L ATRA作用24、48、72 h对SW480/M5细胞的抑制率.流式细胞仪检测8 μmol/L ATRA作用24、48、72 h及2、4μmol/L ATRA作用48 h的肿瘤细胞周期和凋亡率.结果 ATRA抑制SW480/M5细胞增殖作用呈一定时效和量效依赖性;8μmol/LATRA作用72 h明显抑制肿瘤细胞增殖,抑制率接近30％.2、4μmol/L ATRA作用SW480/M5细胞48 h或8μmol/L作用24 h,肿瘤细胞G1期比例开始降低,S期比例增加(P＜0.05).8umol/L ATRA作用48 h后,S期比例进一步增高,G2/M期细胞比例不增加;作用72 h后,G1期细胞比例进一步下降,伴G2/M期细胞比例增加(P＜0.05).8μmol/L ATRA作用24 h无明显诱导SW480/M5细胞凋亡作用,作用48 h或72 h可诱导肿瘤细胞凋亡,但凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 8μmoL/LATRA作用48 h或72 h通过阻滞SW480/M5细胞在S期或(和G2/M)期,并诱导肿瘤细胞凋亡,可明显抑制肿瘤细胞增殖.     

氧化苦参碱诱导胃癌BGC-823细胞发生caspase-12依赖性内质网应激凋亡的机制研究

目的研究氧化苦参碱对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响,并探讨内质网应激参与氧化苦参碱诱导胃癌细胞的凋亡情况并阐明其机制。方法将对数生长期的胃癌BGC-823细胞分为对照组、单药组(用10、30、60和90μmol/L浓度的氧化苦参碱处理)和联合组(各浓度的氧化苦参碱联合2μmol/L内质网应激抑制剂salubrinal处理)。用MTT法观察氧化苦参碱对胃癌BGC-823细胞生长的抑制作用,用流式细胞仪分析氧化苦参碱诱导胃癌BGC-823细胞凋亡及其对细胞周期的影响,用Western blot和RT-PCR法分别检测内质网应激标志分子GRP78/Bip和内质网应激介导凋亡分子caspase-12蛋白和基因的表达情况。结果 (1)与对照组比较,氧化苦参碱能明显抑制胃癌BGC-823细胞生长且呈浓度-时间依赖性(P0.05),其IC_(50)(48 h)值为(59.5±0.5)μmol/L;与相应浓度单药组比较,30、60和90μmol/L氧化苦参碱联合作用对细胞的抑制作用明显减弱(P0.05)。(2)与对照组比较,随着氧化苦参碱浓度的增加,G2/M期细胞数和细胞凋亡率呈增加(或增高)趋势(P0.05);与60μmol/L氧化苦参碱单药组比较,60μmol/L氧化苦参碱联合组处理胃癌BGC-823细胞48 h后明显降低细胞凋亡率和减少G_2/M期细胞数(P0.05)。(3)与对照组比较,随着氧化苦参碱浓度的增加(除外10μmol/L氧化苦参碱组caspase-12蛋白及基因),单药组GRP78/Bip和caspase-12蛋白及基因表达水平呈明显增高趋势(P0.05);与相应浓度单药组比较,60及90μmol/L氧化苦参碱联合作用时胃癌BGC-823细胞中GRP78/Bip和caspase-12蛋白及基因表达水平均明显降低(P0.05)。结论氧化苦参碱对人胃癌BGC-823细胞有明显的生长抑制作用,该作用可能与caspase-12依赖性诱导凋亡及上调GRP78/Bip表达水平有关,该结论需要进一步实验验证。     

熊果酸对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖及凋亡的影响研究

目的探讨熊果酸对人骨肉瘤细胞U2-OS增殖以及凋亡的影响,分析其作用机制。方法取人骨肉瘤细胞株U2-OS分为4组,分别采用浓度为0、10、20、40μmol/L的熊果酸进行培养。培养0、24、48、72 h,应用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化;培养48 h,使用流式细胞术测定熊果酸对骨肉瘤细胞周期和凋亡的影响,应用实时荧光定量PCR和Western blot检测周期蛋白cyclin D1的表达和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达和活化情况。结果 CCK-8检测示,培养0、24 h时各组吸光度(A)值比较,差异无统计学意义(P0.05);48、72 h时随浓度增加A值逐渐减小,各组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。流式细胞术检测示,随熊果酸浓度增加,U2-OS细胞的G_1期增加、S期及G_2/M期减少,细胞凋亡率逐渐增加,各组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。与0μmol/L组相比,10、20、40μmol/L组cyclin D1 m RNA及蛋白相对表达量下调(P0.05);各组间Caspase-3 m RNA相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05);但随熊果酸浓度增加,Caspase-3前体蛋白下降,活化的Caspase-3增加,各组间差异均有统计学意义(P0.05)。结论熊果酸能有效抑制U2-OS细胞增殖,诱导cyclin D1表达下调导致细胞在G_0/G_1期阻滞,同时使Caspase-3活化增加进而促进细胞凋亡。     

过氧化物酶体增殖活化受体γ激动剂罗格列酮对MG63细胞抑制生长及促进凋亡的作用

目的 观察过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对骨肉瘤细胞株MG63的生长抑制及诱导凋亡作用.方法 取人骨肉瘤MG63细胞,用终质量浓度为0.5、5.0、50.0、100.0 μmol/L罗格列酮分别处理细胞,对照组不给予药物,噻唑蓝(MTT)比色法测定药物作用24、48、72 h对细胞生长的抑制率;流式细胞术(FCM)检测终质量浓度0、0.5、5.0、50.0 μmol/L罗格列酮处理24、48 h细胞周期分布;TUNEL法检测终质量浓度0.5μmol/L罗格列酮处理48 h的细胞凋亡,并计算凋亡指数(AJ).结果 细胞生长抑制率:(1)罗格列酮各浓度作用24、48、72 h,2个时间点抑制率两两比较的差异均有统计学意义(P＜0.01),有随时间增长而增加的趋势,其中0.5μmol/L对细胞的抑制率(％)分别为30.10±0.01、46.70±0.01和48.80±0.02;(2)在各时间点,各浓度组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01),在0.5～50.0 μmol/L浓度组区间,相同时间点的抑制率有随浓度升高而降低的趋势.细胞周期:(1)不同浓度的各细胞周期分布差异有统计学意义(P＜0.01).在24、48h时间点均表现为用药组G0/G1期细胞比例高于对照组,0.5mol/L组细胞比例最高,但随用药浓度增加,G0/G1期比例有下降趋势;用药组S期细胞比例均低于对照组,随用药浓度增加,S期比例有增高趋势;即用药可将细胞周期阻滞在G0/G1期的作用;(2)不同时间点间细胞周期分布变化的差异无统计学意义(F=0.36,P＞0.05).细胞凋亡:0.5 μmol/L组凋亡率(14.33±3.35)％明显高于对照组(2.82±0.63)％(P＜0.01),光镜下可见药物组细胞核固缩及散在的凋亡小体.结论 PPARγ激动剂罗格列酮能明显抑制人骨肉瘤MG63细胞的增殖,诱导该细胞G1期阻滞和细胞凋亡.     

藤黄酸对膀胱癌细胞株BIU-87生长的抑制作用

目的 探讨GA(藤黄酸)对膀胱癌细胞株BIU-87生长的抑制作用及其机制.方法 分别以倒置相差显微镜、噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术观察GA对BIU-87的形态学改变作用、生长抑制效应、凋亡诱导以及周期阻滞作用.结果 倒置相差显微镜观察发现,GA作用后BIU-87细胞变圆、脱壁,部分死亡、漂浮;MTY法显示,GA对BIU-87具有明显的生长抑制作用,并随着药物浓度的增加(0～3 μmol/L)而逐渐增强,IC50为1.7μmol/L;流式细胞术检测发现,GA浓度为1.5、3.0μmol/L时凋亡率分别为(34.6±5.2)%和(58.6±6.9)%,显著高于对照组的(2.2±0.8)%;GA浓度为0、1.5、3.0 μmol/L,作用48 h后,G_0～G_1期细胞数分别是(35.0±1.2)%、(35.0±1.5)%、(46.0±3.1)%;而S期细胞比例分别为(33.5±0.7)%、(34.1±0.6)%、(15.6±3.3)%,并呈剂量依赖性阻滞BIU-87细胞周期于G_0/G_1期.结论 GA对BIU-87细胞有明显生长抑制作用,这可能与诱导BIU-87凋亡、阻滞其细胞周期进程有关.     

秦皮乙素对肾透明细胞癌增殖、周期和凋亡的影响

目的:探讨秦皮乙素对肾透明细胞癌增殖、周期和凋亡的作用。方法:选取肾透明细胞癌786-O和SN12-PM6细胞,分别给予秦皮乙素(0、12.5、25、50、100、200、400、800μg/mL),培养24 h或48 h后,通过MTS和平板克隆形成实验检测秦皮乙素对786-O和SN12-PM6细胞增殖能力的影响,通过流式细胞技术检测秦皮乙素对786-O和SN12-PM6细胞周期、凋亡的影响,通过Western Blot检测周期、凋亡相关蛋白表达情况。结果:秦皮乙素能够抑制肾透明细胞癌786-O和SN12-PM6细胞的增殖(P0.05),且呈浓度和时间依赖性,与空白组(0μg/mL)相比,秦皮乙素处理组(100、200μg/mL)S期比例明显减少,G_0/G_1期和G_2/M期比例明显增加,凋亡率也明显增加(P0.05,P0.01),与空白组(0μg/mL)相比,秦皮乙素处理组(100、200μg/mL)Cyclin D1、CDK4、CDK6、c-Myc表达明显减少,Caspase 3表达无明显差异,Cleaved Caspase 3表达明显增多(P0.05,P0.01)。结论:秦皮乙素可有效抑制肾透明细胞癌786-O和SN12-PM6细胞增殖,并抑制细胞周期及诱导凋亡。     

吗啡对胃癌细胞生物学性状的影响

目的 观察吗啡对人胃癌MGC-803细胞生物学性状的影响.方法 将吗啡加入细胞培养液中使吗啡浓度分别稀释至0.1、10、1000 μmol/L,分别与胃癌MGC-803细胞一同孵育,应用噻唑蓝(MTT)比色法绘制12、24、36、48、60、72h的细胞生长曲线并计算细胞增殖率,7d后应用克隆形成实验检测MGC-803细胞生长增殖的变化;应用流式细胞仪检测MGC-803细胞周期和细胞凋亡的变化,用透射电子显微镜观察MGC-803细胞超微结构的变化.结果 吗啡使胃癌细胞生长缓慢,0.1 μmol/L吗啡组、10 μmol/L吗啡组、1000 μmol/L吗啡组细胞增殖率分别为对照组的(81.89±6.44)%、(78.52±4.68)%和(78.53±5.68)%(P＜0.05),3组细胞的克隆形成率分别为(0.76±0.18)%、(0.72±0.17)%和(0.56±0.18)%,低于对照组的克隆形成率(1.19±0.29)%(P＜0.05);与对照组比较,各吗啡组细胞周期G2/M期比例上升,G0/G1期和S期比例下降(P＜0.05);0.1μmol/L吗啡组、10 μmol/L吗啡组、1000 μmol/L吗啡组细胞凋亡率分别为(17.20±2.95)%、(19.13±3.86)%、(24.38 ±4.94)%,明显高于对照组的凋亡率(11.40±2.86)%(P＜0.05);透射电镜显示吗啡使胃癌细胞出现明显的凋亡表现.结论 吗啡抑制胃癌MGC-803细胞的生长增殖,促进胃癌细胞的凋亡.     

血管紧张素Ⅱ1型受体在人胃癌细胞株中的表达及血管紧张素Ⅱ对MKN-28细胞增殖和周期的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)在人胃癌细胞株中的表达及AngⅡ对AT1R高表达胃癌细胞(MKN-28)增殖和周期的影响。方法 :采用Western印迹法检测AT1R在胃癌细胞中的表达。应用不同浓度的AngⅡ(10-10~10-5mol/L)、AT1R阻滞剂(氯沙坦)以及AngⅡ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)阻滞剂(PD123319)作用于MKN-28细胞,以CCK-8法测定各处理组细胞的相对数目,计算增殖促进效应;应用流式细胞仪检测各处理组细胞周期变化,计算各处理因素对细胞周期的影响。结果:AT1R在多数胃癌细胞株中表达,其中MKN-28细胞株表达量最高,AngⅡ可明显促进MKN-28细胞增殖以及G1期细胞向S、G2期转化,氯沙坦可明显抑制AngⅡ对MKN-28细胞的促增殖及促进G1期细胞向S、G2期转化的作用,PD123319无此作用。结论:AngⅡ通过AT1R明显促进MKN-28细胞增殖,促进G1期细胞向S、G2期转化。     

木脂素1对人胃癌细胞株SGC-7901体外抗肿瘤作用

目的研究木脂素1抑制人胃癌细胞株SGC-7901增殖的机理。方法使用倒置显微镜观察不同浓度的木脂素1对人胃癌细胞株SGC-7901细胞形态学变化的影响;采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测木脂素1在不同浓度范围内对人胃癌细胞株SGC-7901细胞存活率的影响,计算半数抑制浓度(IC50);通过流式细胞仪分析木脂素1对SGC-7901细胞凋亡以及细胞周期的影响;通过Western blot法分析木脂素1对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Bcl-2及Bax表达的影响。结果形态学结果显示,木脂素1对SGC-7901细胞有不同程度的杀伤作用,其作用随浓度的增加而增强;在不同浓度范围内(2.5~20μg/m L),木脂素1对SGC-7901细胞存活率表现出不同程度的抑制作用,且呈现出时间和浓度依赖关系(P0.05),其IC50为4.19μg/m L;木脂素1干预SGC-7901细胞48 h后,随着药物浓度增加,凋亡细胞比率、G2/M期细胞比率以及Caspase3和Bax的表达增高(P0.05),而G0/G1期细胞比率和Bcl-2的表达降低(P0.05)。结论木脂素1显著抑制SGC-7901细胞增殖并通过阻滞其于细胞周期的G2/M期而诱导细胞凋亡,其机理可能与活化该细胞中的Caspase3及Bax蛋白以及抑制Bcl-2蛋白表达有关。     

舒芬太尼对胃癌SGC-7901细胞活力的影响

目的通过不同浓度的舒芬太尼作用于胃癌SGC-7901细胞,研究舒芬太尼对胃癌细胞活力的影响。方法将对数生长期的胃癌细胞随机均分为对照组(C组)、舒芬太尼0.5nmol/L组(0.5nM组)、5nmol/L(5nM组)、50nmol/L(50nM组)和500nmol/L(500nM组)。分别以0、0.5、5、50、500nmol/L浓度的舒芬太尼作用于胃癌细胞,FDA/PI荧光双染观察染毒后的胃癌SGC-7901细胞存活情况;CCK-8试剂盒检测细胞活力;AnnexinV-FITC流式细胞术检测胃癌细胞的凋亡情况;最后运用细胞周期检测试剂盒分析胃癌细胞的细胞周期。结果 FDA/PI双染观察显示,随着舒芬太尼染毒浓度的增高,死亡的胃癌SGC-7901细胞比例不断增加,存活的正常细胞比例下降;CCK-8分析表明药物作用后的胃癌细胞的活力呈下降趋势,与C组比较,12h时500nM组和24、48h时50、500nM组细胞活力明显下降(P0.05或P0.01)。与C组比较,5nM组、50nM组和500nM组细胞凋亡率明显升高(P0.05或P0.01)。运用AnnexinV-FITC/PI凋亡实验发现胃癌细胞凋亡和死亡的数量也随药物浓度的增加而不断增多;最后通过检测染毒后的胃癌细胞,发现与C组比较,5nM、50nM和500nM组G2/M期细胞比例明显升高,S期细胞比例明显降低(P0.01)。结论舒芬太尼可以使胃癌SGC-7901细胞的活力下降,促进胃癌细胞凋亡。     

新型钌(Ⅱ)配合物抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖并诱导其凋亡

目的 通过体外实验探讨新型钌(Ⅱ)多吡啶配合物△-[Ru(phen)2MCMIP]2+(△-1)对人骨肉瘤细胞MG-63株增殖及凋亡作用. 方法 CCK-8法检测经0.00、12.50、25.00、50.00、100.00、150.00 μmol/L△-1作用24、48、72 h后,MG-63细胞的增殖情况;流式细胞术检测经0.00、25.00、50.00、100.00 μmol/L△-1作用24h后,MG-63细胞的凋亡及周期变化. 结果 △-1可明显抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖,并呈明显剂量和时间依赖性;24、48、72 h IC5o分别为57.80 μmol/L、45.27 μmol/L、32.51 μmol/L;流式细胞术检测得不同浓度△-1作用24h后,细胞早期凋亡比例从(1.06±0.12)％上升至(37.10±1.25)％,细胞周期被阻滞在Go/G1期. 结论 △-1能抑制MG-63细胞增殖,诱导细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在Go/G1期.     

槐耳颗粒对胃癌SGC-7901细胞的作用

目的 观察槐耳颗粒对胃癌SGC-7901细胞生长抑制的影响,探讨槐耳颗粒抗肿瘤的作用.方法 将不同浓度的槐耳颗粒作用于胃癌SGC-7901细胞;采用MTT法、流式细胞仪分析以及TUNEL法检测不同浓度的槐耳颗粒在不同时间对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响.采用方差分析和X~2检验分析结果.结果 槐耳颗粒作用于胃癌SGC-7901细胞后,细胞生长明显受抑制,有明显的凋亡特征性改变;不同时间、不同浓度之间抑制率比较,差异有统计学意义(F=53.33,63.28,P<0.01),作用效果呈明显的时间-剂量依赖性.流式细胞仪分析显示加药组G_0/G_1期细胞比例减少,随着药物浓度的增加凋亡细胞数也增加.槐耳颗粒作用胃癌SGC-7901细胞1～3 d后,细胞凋亡水平显著性升高,4.0 g/L组在24、48、72 h时凋亡指数分别为15.8%、34.5%、52.5%,差异有统计学意义(X~2=299.02,P<0.01).结论 槐耳颗粒能抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,抑制作用具有时间-剂量效应关系,可能是通过诱导胃癌细胞凋亡实现的.