p16 INK4A、Ki－67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的应用

目的探讨p16INK4A、Ki-67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的临床应用价值。方法宫颈细胞学诊断疑难病例54例,其中绝经25例;液基细胞学技术(TCT)初诊后制片,进行p16INK4A、Ki-67免疫细胞化学检测。结果反应性不成熟鳞状化生18例,p16INK4A、Ki-67均为阴性表达,组织活检或TCT复查均未见上皮内病变;ACS-H或HSIL 11例,p16INK4A、Ki-67阳性表达分别为11例和10例,病理活检证实为CINⅡ或CINⅢ。25例绝经患者中上皮萎缩鳞状7例,p16INK4A、Ki-67均阴性,活检结果或TCT复查未见上皮内病变或恶性病变;HSIL 12例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检CINⅢ8例、鳞癌4例;鳞癌6例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检结果均为鳞癌。结论 TCT结合免疫细胞化学在诊断疑难宫颈细胞学病例中具有重要临床意义,p16INK4A、Ki-67对非上皮内病变和上皮内瘤变有鉴别诊断价值。     

360例宫颈疾病患者HPV亚型检测与分析

采用核酸分子快速杂交基因分型技术对360例宫颈分泌物进行21种人乳头瘤病毒（HPV）亚型检测,对高危型HPv感染病例与宫颈细胞（病理）学检查结果进行回顾性分析。结果显示,360例宫颈疾病患者中HPV感染135例（37．5％）。高危型以16、58型为主,构成比分别为20.1％和12．9％。按宫颈炎／糜烂、不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）、宫颈上皮内轻度瘤变（CINⅠ）、宫颈上皮内中度瘤变（CINⅡ）、宫颈上皮内重度瘤变（CINⅢ）／宫颈癌顺序,高危型HPV感染率依次递增分别为：20％、50％、66．7％、91．2％和94、1％。CINⅡ、CINⅢ／宫颈癌中高危型HPV感染率明显高于宫颈炎／糜烂、ASCUS和CINⅠ（P均〈0．05）。认为HPV感染率及亚型分布有地域差异,以高危型HPV16型感染最多。随着宫颈病变程度加重,高危HPV感染率增高。     

21种HPV亚型检测在宫颈病变诊断及预测中的价值

目的探讨HPV亚型感染与宫颈病变的关系。方法360例宫颈病变患者组织病理学检查诊断为宫颈炎／宫颈尖锐湿疣254例,宫颈上皮内瘤变（CIN）52例（其中CINⅠ12例、CINⅡ16例、CINⅢ24例）,宫颈癌54例,采用导流杂交基因芯片技术检测宫颈脱落细胞中HPV亚型,分析不同病变的HPV感染情况。结果本组HPV感染率为83．3％（300／360）;宫颈炎／宫颈尖锐湿疣、CIN、宫颈癌高危型感染率明显高于低危型（P〈0．01）;高危型HPV感染率随宫颈病变程度加重而升高;不同宫颈病变中单一型感染率明显高于多重型感染率（P〈0．01）,多重型感染率随宫颈病变程度加重而升高。不同HPV亚型致病性不同。结论HPV亚型检测可用于宫颈病变的筛查病情判断。     

人乳头瘤病毒检测在宫颈癌前病变及宫颈癌筛查中的应用

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）检测在宫颈癌前病变及宫颈癌筛查中的应用价值。方法对363例患者进行薄层液基细胞学检查、人乳头瘤病毒检测及阴道镜检查。结果 363例标本中,HPV感染阳性191例,占52.6%。宫颈炎组HPV感染率为27.2%,宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ级为66.2%,CINⅡ级为71.0%,CINⅢ级为86.0%,宫颈癌组感染率为100%,HPV感染阳性率随宫颈病变程度加重而明显升高（P=0.000）。在191例感染者中,HPV的主要基因型依次为HPV-16、HPV-58、HPV-33、HPV-18、HPV-31和HPV-11。CIN组的多重感染率明显高于宫颈炎组（P=0.001）。结论 HPV感染及多重HPV感染与宫颈病变的严重程度密切相关,HPV检测在宫颈癌前病变及宫颈癌的筛查中有重要的临床价值。     

突变型p53、Ki67在宫颈病变组织中的表达及临床意义

目的探讨突变型p53与Ki67作为宫颈病变早期生物学标志的可能性。方法采用免疫组化SP法检测10例正常宫颈、50例宫颈上皮内瘤变（CIN）和60例宫颈鳞癌组织中p53、Ki67的表达。结果 p53和Ki67在慢性宫颈炎中的表达率低于CIN、宫颈鳞癌（P〈0.01）;CINⅠ、CINⅡ与CINⅢ、宫颈癌间有显著性差异（P〈0.05）,而CINⅢ与宫颈癌间无统计学差异（P〉0.05）。p53、Ki67蛋白的表达与宫颈癌临床分期、病理分级有关（P〈0.05）。结论突变型p53、Ki67的异常表达与宫颈癌发生、发展有关,两者协同检测有可能成为筛选高危人群及判断预后的指标之一。     

宫颈癌患者宫颈脱落细胞HPV、病变组织Brn-3a的表达变化及意义

目的观察宫颈癌脱落细胞中人乳头状瘤病毒（HPV）及病变组织中Brn-3a的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择经病理确诊的19例宫颈癌、55例CIN（CINⅠ级20例、CINⅡ级16例和CINⅢ级19例）和30例宫颈炎患者,采用基因芯片技术检测其宫颈脱落细胞中的HPV,采用免疫组化SP法检测宫颈病变组织中的Brn-3a。结果宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中HPV阳性率分别为43.3%、50.0%、68.8%、84.2%、94.7%,宫颈组织中Brn-3a阳性率分别为6.7%、15.0%、62.5%、78.9%、89.5%。CINⅡ~Ⅲ级及宫颈癌组患者HPV、Brn-3a阳性率均明显高于宫颈炎和CINⅠ患者（P均〈0.01）。宫颈癌患者宫颈脱落细胞HPV及病变组织中Brn-3a的表达呈正相关（r=0.283,P〈0.01）。结论宫颈癌脱落细胞中HPV及病变组织中的Brn-3a高表达,两项指标联合检测有助于宫颈癌前病变的诊断。     

HPV16感染与宫颈病变组织HDAC1和P21waf表达的关系

目的 探讨不同病理类型的宫颈病变中组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、细胞周期调控抑癌基因P21waf蛋白的表达及其与人乳头瘤病毒(HPV) 16感染的关系.方法 选择宫颈病变病理蜡块标本110例,其中包括慢性宫颈炎20例(慢性宫颈炎组)、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ 22例(CIN Ⅰ组)、CINⅡ24例(CINⅡ组)、CINⅢ24例(CINⅢ组)、宫颈癌20例(宫颈癌组).应用免疫组化SP法检测各组宫颈组织中HDAC1、P21waf的表达,应用PCR法检测HPV16 DNA.统计各组宫颈组织中HPV16 DNA、HDAC1与P21waf的阳性率,比较HDAC1、P21waf与病理级别的相关性.结果 慢性宫颈炎组、CIN Ⅰ组、CINⅡ组、CINⅢ组及宫颈癌组HPV16感染阳性率逐渐增加、HDAC1表达逐渐增强(P均＜0.05).HDAC1表达强度与病理级别及HPV16感染呈正相关(r=0.510,P＜0.01),P21waf表达强度与病理级别及HPV16感染呈负相关(r=-0.468,P＜0.01).HDAC1与P21waf的表达呈负相关(r=-0.349,P＜0.05).结论HDAC1可能促进宫颈癌的发生、发展,P21waf可能参与阻止宫颈癌病变过程.HPV16能提高HDAC1的表达及降低P21waf的表达,从而促进宫颈癌的发生发展.     

Numb蛋白与宫颈病变类型及高危型HPV负荷量的关系

目的探讨细胞命运决定子（Numb）蛋白表达与宫颈病变类型、高危型人乳头状瘤病毒（hr-HPV）负荷量的关系。方法选择宫颈病变患者的宫颈病变组织石蜡切片63例份,其中慢性宫颈炎13例份、CINⅠ～Ⅱ13例份、CINⅢ16例份、宫颈癌23例份,采用HC-2法检测宫颈病变组织中hr-HPV负荷量,采用免疫组化染色法检测各病变宫颈组织中Numb蛋白的表达情况。按照hr-HPV负荷量为〈2.00、2.00～3.00、〉3.00 lg RLU/CO水平将全部宫颈病变组织分为三个水平,分析hr-HPV负荷量为〈2.00、2.00～3.00、〉3.00 lg RLU/CO的宫颈病变组织中Numb蛋白的表达情况,分析Numb蛋白表达与hr-HPV负荷量的相关性。结果慢性宫颈炎、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ及宫颈鳞癌组织中Numb蛋白的阳性率分别为7.69%（1/13）、9.09%（1/11）、51.25%（5/16）及47.83%（11/23）,慢性宫颈炎、CINⅠ～Ⅱ组织中Numb蛋白的阳性率低于CINⅢ及宫颈鳞癌组织（P〈0.05）。hr-HPV负荷量为〈2.00、2.00～3.00、〉3.00 lg RLU/CO的宫颈病变组织中Numb蛋白阳性率分别为19%（4/22）、44%（6/25）、50%（8/16）,宫颈病变组织中Numb蛋白表达与hr-HPV病毒负荷量呈正相关（r=0.345,P〈0.05）。结论随着宫颈病变程度的加重,Numb蛋白表达逐渐增加。宫颈病变组织中的hr-HPV感染负荷量与Numb蛋白表达呈正相关关系。     

HPV多重感染在宫颈病变中的流行分布及意义

目的探讨人乳头状瘤病毒（HPV）多重感染与宫颈病变发生、发展关系。方法应用HPV基因芯片检测技术,对287例宫颈病变患者（CINⅠ130例、CINⅡ69例、CINⅢ48例、宫颈癌40例）的宫颈液基细胞残余标本进行HPV感染基因型检测,并与组织学检测结果比较。结果287例宫颈病变中HPV感染率为89．9％（258／287）,在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈鳞癌多重感染率分别为48．6％、40．3％、31．1％、27．5％,CINI与CINⅢ及宫颈癌比较,P均〈0．05;HPV最常见亚型为HPV16、HPV58及HPV52;多重感染中以二重感染常见（51／105,48．6％）,偶有五重感染（3／105,2．9％）。40岁以下者HPV多重感染率高于40岁以上者。结论宫颈HPV多重感染率有随宫颈病变程度增加有降低趋势,宫颈病变严重程度可能与HPV基因型多寡无关,而与感染HPV亚型的致病能力密切相关;40岁以下者HPV多重感染发生率高。     

宫颈脱落细胞HR-HPV载量与宫颈病变严重程度的关系

目的探讨宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）载量与宫颈病变程度的关系。方法经病理检查确诊的宫颈病变患者171例,包括慢性宫颈炎68例、轻度宫颈上皮内瘤变（CINⅠ）35例、中重度宫颈上皮内瘤变（CINIⅡ～Ⅲ）45例、宫颈癌23例,采集其宫颈脱落细胞,采用第二代杂交试验（HC-Ⅱ）进行宫颈脱落细胞HR-HPV载量检测。结果 171例患者宫颈脱落细胞中HR-HPV阳性者114例,其中慢性宫颈炎患者中有26例、CINⅠ患者中有26、CINIⅡ～Ⅲ患者中有41例、宫颈癌患者中有21例;宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ患者中HR-HPV检出率与慢性宫颈炎、CINⅠ患者相比,P均〈0.01。慢性宫颈炎、CINⅠ、CINIⅡ～Ⅲ、宫颈癌患者宫颈脱落细胞中HR-HPV载量分别为（113.65±370.65）（、639.83±967.19）（、851.19±864.41）（、1 114.70±850.65）pg/ml,各级病变之间HR-HPV载量相比,P均〈0.01。结论宫颈脱落细胞HR-HPV载量与宫颈病变程度有关。     

KiSS-1、P16INK4A及Ki67在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨KiSS-1、P16INK4A及Ki67在正常宫颈黏膜上皮、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测40例正常宫颈黏膜上皮、40例CIN及40例宫颈鳞癌组织中KiSS-1、P16INK4A及Ki67的表达。结果 KiSS-1、P16INK4A及Ki67在正常宫颈黏膜上皮的阳性表达率为85.00%、62.50%、29.70%,CINⅡ~Ⅲ为10.00%、65.00%、87.50%,宫颈鳞癌为8.00%、40.00%、95.00%;KiSS-1蛋白失表达与宫颈鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）,P16INK4A及Ki67的高表达与宫颈鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）;宫颈鳞癌组织中KiSS-1和P16INK4A、Ki67的表达具有相关性（P〈0.01）。结论 KiSS-1低表达和P16INK4A、Ki67过表达与宫颈癌的发生、发展、浸润及转移有关,联合检测KiSS-1、P16INK4A及Ki67的表达可以在一定程度上预测宫颈癌患者预后并指导治疗。     

HPV感染宫颈病变组织中IL-2、IL-4的表达变化及意义

采用原位杂交法检测高危型HPV16／18阳性的宫颈上皮内瘤变（CIN,55例）、宫颈癌（20例）及高危型HPV16／18阳性和阴性的宫颈炎（各15例）组织中的IL-2 mRNA、IL-4 mRNA。结果显示,与高危HPV阴性及阳性宫颈炎组织、高危HPV阳性CINⅠ、CINⅡ组织相比,高危型HPV16／18阳性的CINⅢ和宫颈癌组织中IL-4 mRNA的表达明显上升,IL-2 mRNA则明显下降,P均〈0．01。认为感染高危型HPV16／18的宫颈组织容易发展为CINⅢ甚至宫颈癌,其机制可能是局部细胞因子表达发生变化。     

DAPK1、ERα、HLA-Ⅰ基因蛋白表达水平与宫颈病变病理进程的相关性

目的从蛋白质水平观察死亡相关蛋白激酶(DAPK1)、人类白细胞抗原-Ⅰ(HLA-Ⅰ)、雌激素受体(ER)α基因表达水平与不同病理级别的宫颈病变的相关性。方法收集汉族妇女宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈鳞癌患者石蜡包埋组织标本115例,采用免疫组织化学方法鉴定蛋白表达水平。结果 DAPK-1、ERα、HLA-Ⅰ基因在宫颈炎/CINⅠ组织中阳性表达率分别为90%、76%、88%;在CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中这些基因阳性表达率分别为53%、48%;45%、24%;67%、40%。在CINⅡ/Ⅲ和宫颈鳞癌中这些基因阳性表达率明显低于宫颈炎/CINⅠ,各组阳性表达率差异显著(P<0.05),随着宫颈病变病理变化的加重,基因蛋白阳性表达率逐渐降低。结论 DAPK1、HLA-Ⅰ、ERα基因表达阳性或缺失可能是CIN及宫颈鳞癌的重要生物学特征,与宫颈癌发生关系密切,这些基因的检测可能作为预测CIN和宫颈癌的重要生物指标。     

黄石市620例女性宫颈病变与宫颈HPV亚型分布关系分析

目的分析黄石市620例女性宫颈病变与宫颈人乳头瘤病毒(HPV)亚型的关系,为宫颈癌防治及宫颈HPV疫苗研制提供数据支持。方法选取2015-01~2015-12在黄石市妇幼保健院进行宫颈癌筛查女性6 500例,结合液基薄层细胞(TCT)、阴道镜和宫颈活检结果进行分组研究。结果 HPV感染阳性率为25.23%;根据病检结果:慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ级、CINⅡ/Ⅲ级、宫颈癌HPV感染率分别为37.50%、60.00%、83.33%、100.00%。其中高危型HPV16(33.87%)、高危型HPV52(14.52%)、低危型HPV43(6.45%)、低危型HPV42(6.45%)所占比率最高,而单一感染占79.55%,≤30岁感染率为40.28%。结论黄石地区最多见的感染宫颈HPV亚型为高危型HPV16、HPV52及低危型HPV43、HPV42,且随着宫颈病变程度的增加,宫颈HPV的阳性率也随之增加,以单一感染为主。宫颈HPV感染有年轻化的趋势。     

HPV16/18和端粒酶在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达及临床意义

目的 探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌(CC)中人乳头瘤病毒(HPV)16和18以及人端粒酶基因(hTERC)的表达及其临床意义.方法 随机选择2010年1月至2012年1月该院收治的CIN和CC患者各30例,并随机选择同时期在本院门诊就诊的宫颈正常30例病理标本作为对照.分别采用PCR和TRAP-PCR技术,对所有样本宫颈组织中hTERC和HPV16/18的感染和表达情况进行检测.利用SPSS17.0软件,运用Logistic分析各组HPV 16/18和hTERC的感染和表达与宫颈病变的关联性.结果 ICC和CIN组HPV-16/18和hTERC阳性率显著高于正常宫颈组(P＜0.05),而ICC组HPV16/18和hTERC阳性感染率显著高于CIN组(P＜0.05);CINⅢHPV16/18和hTERC阳性感染率极显著高于CINⅡ和CINⅠ组(P＜0.05),CINⅡHPV16/18和hTERC阳性感染率极显著高于CIN Ⅰ组(P＜0.05);ICC和CINⅢ与HPV16/18和hTERC阳性存在显著正相关(P＜0.05),正常宫颈组织与HPV16/18和hTERC阳性不存在关联性(P＞0.05).结论 HPV16/18感染和hTERC的表达在CC发生发展中起重要作用,与CC宫颈组织病变有密切的关联性,两者联合检测是宫颈CIN早期筛查的理想手段之一.     

TRAIL受体在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨宫颈病变组织中TRAIL受体（DR4，DcR1）的表达与宫颈病变之间的关系。方法 免疫组化SP法检测21例慢性宫颈炎，16例CINⅠ，15例CINⅡ、Ⅲ级，36例宫颈癌，其中高分化和中分化21例，低分化15例标本中的受体（DR4，DcRⅠ）的表达。结果 DR4在慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级～Ⅲ级的表达无明显趋向性，三组之间比较无显著性差异，宫颈癌组织中的表达减少，宫颈癌与慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级～Ⅲ级比较差异有显著性；DcRⅠ在慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级～Ⅲ级、宫颈癌组织中的表达逐渐减少；DcRⅠ在慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级～Ⅲ级间比较差异无显著性，宫颈癌与慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级～Ⅲ级间比较差异有显著性；DR4、DcR1的表达随着宫颈癌分化程度的降低而降低，DR4表达差异有显著性，DcR1的表达各组之间差异无显著性。结论 DR4的表达与宫颈癌的预后有关，DCR1在正常组织表达量高，在癌症组织表达量低，从而说明TRAIL与诱捕受体结合保护正常细胞。     

人乳头瘤病毒检测阳性者宫颈黏膜病理表现分析

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）基因亚型检测,在宫颈病变筛查中的意义。方法选择2008年7月1日至12月31日,在台州医院宫颈疾病门诊要求进行宫颈病变筛查的病人,检测HPV-DNA21种亚型。对检测阳性者,常规行阴道镜检查与宫颈活检。结果 3300例病人中,筛查出HPV阳性者990例,阳性率30%,高危型61.8%（612/990）,低危型28.9%（286/990）,未确定型9.3%（92/990）。990例HPV-DNA阳性者行宫颈活检报告：湿疣样改变39.4%（390/990）,慢性宫颈炎21.6%（214/990）,宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ级18.8%（186/990）,CINⅡ13.1%（130/990）,CINⅢ4.7%（46/990））,宫颈癌2.4%（24/990）。结论高危型HPV持续感染与宫颈病变密切相关,高危型HPV检测可进一步浓缩高风险人群,使筛查更加有针对性,而感染HPV不等同于患宫颈癌。     

P16INK4A在宫颈癌及癌前病变的表达及临床意义

采用免疫组织化学技术SP法检测31例宫颈癌(UCC)、31例宫颈上皮内瘤变(CIN)、10例宫颈炎标本中P16INK4A表达情况.发现P16INK4A在上述3种组织中均有表达,且表达阳性率逐渐降低,分别为100.00%、74.19%、30.00%,且其表达与UCC病理分级和肌层浸润程度有关.提示P16INK4A的检测可提高对宫颈癌前变及UCC的早期诊断率.     

黏着斑激酶在宫颈鳞癌上皮细胞中的表达

选择宫颈鳞癌组织标本76例、CIN Ⅰ～Ⅱ级宫颈组织标本20例、CIN Ⅲ级宫颈组织标本30例,以正常宫颈组织标本10例作对照,采用免疫组化SP法测定标本中黏着斑激酶(FAK)的表达.发现正常对照组标本FAK均为阴性,CIN Ⅰ～Ⅱ组、CINⅢ组、宫颈鳞癌组表达阳性率分别为10.0%、40.0%、78.9%.宫颈癌组FAK表达明显高于其他3组.FAK表达强度与组织分化级别、淋巴转移有关.认为FAK的表达随着宫颈病变的严重程度增加而呈增加趋势,宫颈癌变时较上皮内病变时显著增高.     

IMP3、EZH2在宫颈癌前病变中表达及其联合液基细胞学检查的价值

目的 探讨胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白(IMP)3、组蛋白甲基化转移酶(EZH)2在宫颈癌前病变中的表达水平及其联合液基细胞学(LCT)检查的价值。方法 118例宫颈癌筛查妇科疾病患者分为正常或宫颈炎症组(52例)、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ组(28例)、CINⅡ组(24例)、CINⅢ组(14例)。研究对象均接受LCT检查,并采用免疫组织化学检测并比较宫颈不同病变程度患者宫颈组织IMP3、EZH2蛋白表达情况,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析IMP3、EZH2蛋白表达水平联合LCT对宫颈癌癌前病变的诊断价值。结果 IMP3蛋白阳性表达率为44.91%(53/118),其中点状表达患者占比为41.51%(22/53),带状表达患者占比为58.49%(31/53)。CINⅠ组IMP3阳性率明显高于正常或宫颈炎症组,CINⅡ组和CINⅢ组IMP3阳性率均明显高于正常或宫颈炎症组和CINⅠ组(P<0.05,P<0.001)。CINⅠ组、CINⅡ组及CINⅢ组EZH2蛋白阳性表达率均显著高于正常或宫颈炎症组(χ²=8.138、23.685、23.99...