三氧化二砷联合热疗对Hep-2细胞周期进程及凋亡率的影响

目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)联合热疗对人喉癌细胞株Hep-2的增殖抑制率,细胞凋亡率及细胞周期进程的影响。方法应用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同条件下对Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化及凋亡率,电子显微镜检测不同条件下Hep-2细胞超微结构改变。结果单纯热疗组、As2O3组及联合组对Hep-2细胞增殖抑制率分别为19.2%、28.2%和45.1%,与对照组相比差异非常显著(P<0.01);且细胞周期进程发生明显改变,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高。电子显微镜结果显示细胞核染色质趋边凝集,线粒体肿胀。结论 As2O3联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

雷公藤内脂醇诱导Hep-2细胞凋亡及对细胞增殖周期的影响

目的 观察雷公藤内酯醇(TL)诱导人喉癌细胞株(Hep-2细胞株)的增殖抑制率、细胞凋亡率及其对细胞增殖周期各时相的影响.方法 应用噻唑蓝(MTT)染色法检测Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化及凋亡率,吖啶橙染色计算凋亡率及形态学改变.结果 不同浓度的TL对Hep-2细胞增殖均有抑制作用,呈剂量依赖性.流式细胞仪结果 显示,G_1期细胞增多,S期细胞减少,G_2/M期细胞相对增多,吖啶橙染色可见细胞凋亡率随着药物浓度的增加而升高.结论 TL对Hep-2细胞有显著的增殖抑制作用,抑制Hep-2细胞G_1期向S期的转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡.     

土贝母制剂联合热疗对Hep-2细胞凋亡及细胞周期各时相的影响

目的 探讨土贝母制剂联合热疗对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)增殖抑制率、细胞周期各时相的影响及亚细胞结构改变.方法 应用MTT比色法检测Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期各时相的变化及凋亡率,电子显微镜观察亚细胞结构改变.结果 单纯热疗组、土贝母组,联合组与对照组相比差别非常显著(P<0.01);且Hep-2细胞周期进程发生明显改变:G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高.电子显微镜显示染色质趋边凝集,线粒体肿胀,可见凋亡小体.结论 土贝母制剂联合热疗可提高Hep-2细胞增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡及亚细胞结构改变.     

SEA联合热疗对Hep-2细胞体外生物学行为的影响及相关机制

目的探讨体外葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合热疗对人喉癌细胞株(Hep-2株)生长、增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同条件下对Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测Hep-2细胞周期进程的变化及凋亡率,透射电子显微镜检测亚细胞结构改变。结果单纯热疗组、单纯SEA组及联合组(SEA+热疗)对Hep-2细胞增殖抑制率分别16.5%、25%和45.4%,与对照组相比差别有显著意义;流式细胞仪结果显示G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,且细胞凋亡率升高,组间比较差异显著(P0.05)。结论 SEA联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制G1期细胞向S期细胞转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡及亚细胞结构改变。     

5-氟尿嘧啶联合热疗体外诱导Hep-2细胞凋亡及细胞周期阻滞

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合热疗对人喉癌细胞株Hep-2细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞周期进程的影响。方法应用噻唑蓝(MTT)染色法检测不同条件下Hep-2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期进程的变化及凋亡率。结果单纯热疗组、单纯5-FU组及联合组对Hep-2细胞的增殖抑制率分别为13.7%、22.3%和46.5%,与对照组相比差异显著(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞凋亡率升高,组间比较差异显著。结论 5-FU联合热疗能显著提高Hep-2细胞的增殖抑制率,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,诱导Hep-2细胞凋亡。     

蜂胶诱导喉鳞癌Hep-2细胞凋亡及机制探讨

采用体外细胞培养实验方法,应用四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞仪检测、共聚焦显微镜技术,观察蜂胶对喉鳞癌Hep-2细胞的抑制率、凋亡率的影响及细胞内Ca2 变化.细胞抑制率随用药时间的延长、剂量增加而增大.蜂胶能诱导喉鳞癌细胞凋亡,非特异性地阻滞Hep-2细胞周期的全过程.细胞内Ca2 随药物浓度的增加而升高(P<0.05).认为蜂胶有诱导Hep-2细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞内Ca2 变化有关.     

三氧化二砷体外对人卵巢上皮癌细胞3AO增殖及凋亡的影响

目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3 )体外对人卵巢上皮癌细胞株 3AO增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法　将人卵巢上皮癌细胞株 3AO与不同浓度的As2 O3 进行体外培养 ,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定不同浓度As2 O3 对 3AO细胞的生长抑制率 ,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期时相及其Fas、FasL、P53 和bcl 2蛋白的表达。结果　 0 2 5～ 8 0 μmol /L浓度的As2 O3 均显著抑制3AO细胞的增殖 ,且随浓度升高及作用时间的延长 ,抑制率上升 ,As2 O3 与 3AO细胞联合培养 4 8小时的半数致死量 (IC50 )为 (3 90± 0 2 0 ) μmol /L。 0 2 5～ 4 0 μmol /L浓度的As2 O3 均诱导 3AO细胞凋亡 ,随浓度升高 ,凋亡率上升。As2 O3 阻滞 3AO细胞停滞于S期 ,并诱导细胞凋亡。As2 O3 (2 μmol/L )培养3AO细胞 4 8小时 ,Fas蛋白表达率为 (4 6 76± 4 5 0 ) % ,明显高于对照组的 (6 36± 0 82 ) % ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ,FasL、P53 和bcl 2蛋白表达无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　As2 O3 以剂量 时间依赖性方式抑制人卵巢上皮癌细胞 3AO增殖并诱导其凋亡 ,其作用机制与上调Fas基因表达有关。     

斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的探讨斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌细胞株(Hep-2细胞)增殖抑制率、凋亡率及其细胞周期进程的影响。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测斑蝥酸钠维生素B6对Hep-2细胞增殖抑制率、流式细胞仪定量检测经斑蝥酸钠维生素B6作用后的Hep-2细胞周期进程变化及凋亡率。结果不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6注射液对Hep-2细胞增殖均有抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞仪结果显示,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,Hep-2细胞凋亡率升高。结论斑蝥酸钠维生素B6对人喉癌Hep-2细胞生长、增殖有明显的抑制作用,抑制Hep-2细胞G1期向S期转化进程,从而使S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,诱导Hep-2细胞凋亡。     

氯丙嗪协同榄香烯对Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的 体外观察盐酸氯丙嗪与榄香烯联合应用对人喉癌细胞株Hep-2细胞的增殖抑制率及对细胞周期进程各时相的影响.方法 应用 MTT(噻唑蓝)比色法和流式细胞术检测单纯榄香烯制剂及榄香烯联合氯丙嗪制剂对Hep-2细胞的增殖抑制作用.结果 单纯榄香烯组Hep-2细胞增殖抑制率随着药物浓度的增加而升高,而榄香烯联合氯丙嗪组明显高于单纯用药组,且Hep-2细胞周期进程发生明显改变,细胞凋亡率升高.结论 在一定浓度范围内盐酸氯丙嗪能够增强榄香烯对Hep-2细胞的增殖抑制率及细胞周期进程各时相变化和凋亡率,有明显的协同作用.     

三氧化二砷对人体胃肠癌细胞凋亡及P53、Bcl-2表达的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）在人体内诱导胃癌、结肠癌细胞凋亡及对凋亡相关基因P53、Bel-2表达的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。方法采用原位末端转移酶标记技术和免疫组化法分别检测As2O3用药前后胃癌和结肠癌细胞凋亡指数和凋亡相关基因P53、Bcl-2的表达变化情况。结果As2O3用药后胃癌、结肠癌细胞凋亡率分别为15．53％和16．76％,与用药前比较均有显著性差异（P〈0．05）;用药后胃癌、结肠癌细胞P53蛋白阳性表达率分别为35．42％和30．83％,与用药前的38．08％和31．58％比较无显著性差异（P〉0．05）;用药后胃癌、结肠癌细胞Bcl-2蛋白阳性表达率分别为23．80％和16．90％,与用药前比较显著下调,二者均具有显著性（P〈0．05）。结论As2O3在人体内可诱导胃癌和结肠癌细胞凋亡发挥抗肿瘤作用,其机制可能是通过调节bcl-2基因的表达来实现。     

三氧化二砷对人体胃肠癌细胞凋亡及p53、survivin表达的影响

目的研究三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）在人体内诱导胃肠癌细胞凋亡作用及对凋亡相关基因p53、survivin表达的影响,探讨其抗肿瘤作用及发生机制。方法采用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）和免疫组化法分别检测As2O3用药前后胃肠癌细胞凋亡指数和凋亡相关基因蛋白P53、Survivin的表达变化情况。结果 As2O3用药后胃肠癌细胞凋亡指数为（17.04±3.67）%,与用药前（6.07±2.21）%相比差异有统计学意义（P〈0.01）;用药后胃肠癌细胞P53蛋白阳性表达率为（35.05±19.64）%,与用药前（34.80±16.48）%相比差异无统计学意义（P〉0.05）;用药后胃肠癌细胞Survivin蛋白阳性表达率为（15.59±3.94）%,与用药前（36.74±20.5）%相比明显下调,差异有统计学意义（P〈0.01）;As2O3作用后胃肠癌细胞Survivin蛋白表达下调时凋亡率升高,二者之间具有相关性（r=-0.47,P=0.04）。结论 As2O3在人体内可诱导胃肠癌细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用,其机制可能与下调survivin基因的表达有关。     

低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响及其机制探讨

目的 观察低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将体外培养的人喉鳞癌细胞分为常氧组、低氧组.流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法分别检测各组细胞低氧诱导因子α（HIF-1α）、赖氨酰氧化酶（LOX）mRNA及蛋白.结果 常氧组细胞凋亡率13.86％±0.12％、低氧组5.13％±0.67％,P≤0.05.与常氧组比较,低氧组细胞中HIF-1 α、LOX蛋白及其mRNA表达增加（P均≤0.05）,且二者表达呈正相关（r均为0.862,P均≤0.05）.结论 低氧可抑制Hep-2细胞凋亡,该作用可能与其上调细胞中HIF-1α、LOX表达有关.     

三氧化二砷对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制

肺泡炎是肺纤维化疾病的发病机制之一，有研究发现诱导肺内炎性细胞凋亡可以减轻博莱霉素A5（BLM-A5）所致大鼠肺泡炎和肺纤维化程度。三氧化二砷（As2O3）可以诱导多系统的多种细胞发生凋亡，但As2O3对肺纤维化疾病是否有作用，目前尚未见报道。本实验目的是探索适当剂量的As2O3能否诱导肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的炎性细胞发生凋亡，从而减轻肺泡炎和肺纤维化。     

三氧化二砷对肺腺癌化学治疗敏感性的影响及其机制

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3)对肺腺癌细胞生长过程及化学治疗 (简称化疗 )敏感性的影响。方法　应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色、免疫组织化学、流式细胞仪、逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)等方法 ,观察不同浓度As2 O3 对人肺腺癌A549细胞株生长、化疗敏感性、细胞周期 ,及凋亡基因Fas/FasL、抗凋亡基因B淋巴细胞白血病 2 (bcl 2 )和多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (LRP)表达水平的影响。结果　 1、2 μmol/L的As2 O3 对人肺腺癌A549细胞株的生长抑制作用较弱 ,但能显著提高A549细胞对顺铂的敏感性 (P <0 .0 5)、提高A549在G1期细胞的比率 ,上调Fas、下调bcl 2及MRP、LRP的表达水平。 5μmol/L的As2 O3 对人肺腺癌A549细胞有一定的抑制作用 ,并可上调bcl 2、MRP、LRP的表达水平 ,但不能提高A549细胞对顺铂的敏感性。结论　低浓度的As2 O3 可能通过提高A549细胞在G1期的比率 ,上调Fas基因和下调bcl 2、MRP、LRP基因的表达水平 ,提高肺腺瘤细胞对化疗的敏感性     

氧化砷诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的观察As2O3对胰腺癌细胞株体外生长和裸鼠腹腔种植腹水生成的影响及其作用机制.方法O.125～2 μmol/L的As2O3与胰腺癌细胞株SW-8902共同孵育,观察不同浓度、不同作用时间对胰腺癌细胞生长的抑制作用、作用后胰腺癌细胞的凋亡特征及Fas Fas L表达的变化.80只BALB/C-nu/nu裸鼠腹腔内接种胰腺癌细胞株SW-8902,并随机分为4组,然后分别腹腔内注射生理盐水及不同剂量的As2O3,观察各组裸鼠的生存时间.结果1～2 μmol/L的As2O3作用后,胰腺癌细胞呈典型的凋亡特征性改变,流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰,DNA电泳呈现特征性Ladder,细胞核内可见染色质浓缩、碎裂和边聚.As2O3也可显著抑制荷胰腺癌裸鼠腹水的生成,延长生存期(P＜O.01),Fas、Fas-L表达在As2O3作用后2 d上升,3 d达最高,以后表达量下降.结论As2O3诱导胰腺癌细胞凋亡,抑制裸鼠胰腺癌腹腔种植及腹水的生成,延长生存期.Fas、Fas-L表达上调是As2O3诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一.     

榄香烯诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的探讨榄香烯对体外培养的人喉癌细胞株Hep-2细胞诱导分化的机制。方法Hep-2细胞经不同浓度的榄香烯（25、50、100μg/L）作用后,相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期改变,同时应用电子显微镜观察Hep-2亚细胞结构改变。结果对照组细胞呈梭形贴壁生长,榄香烯组细胞变圆,贴壁不佳,细胞数目变少。流式细胞仪结果显示,G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,与对照组比较差异显著（P〈0.01或P〈0.05）。电子显微镜下可见细胞染色质趋边、凝集、线粒体肿胀,细胞核破碎,可见凋亡小体改变。结论榄香烯能够抑制体外培养的Hep-2细胞生长,阻止G1期细胞向S期转化进程,且呈剂量依赖性,诱导Hep-2细胞凋亡。     

灵芝多糖对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响

目的观察灵芝多糖对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响。方法应用MTT法检测不同浓度、不同作用时间灵芝多糖对Hep-2细胞增殖活性的影响。结果 Hep-2细胞随着灵芝多糖浓度的增加,OD值逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05);随着用药时间的延长,OD值逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论灵芝多糖具有抑制人喉癌Hep-2细胞增殖的作用。     

As2O3对肾癌细胞增殖、凋亡的影响及意义

目的观察As2O3对肾癌细胞株786-0增殖、凋亡及细胞内X染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的影响,探讨其意义。方法取对数生长期786-0,分别经0．5、1．0、2．0μmol／L的As2O3处理后,采用MTT比色法检测细胞生长情况,流式细胞仪测算细胞凋亡率,蛋白质印迹法及RT—PCR法检测细胞中的XIAP及其mRNA。结果0．5、1．0、2．0μmol／LAs2O3均可抑制786-0增殖。随着作用时间的延长,细胞生长抑制率升高（P均〈0．01）;随着As2O3浓度的增加,细胞凋亡率升高（P均〈0．01）、细胞内XIAP及其mRNA表达明显下调（P均〈0．05）。结论As2O3可抑制786-0增殖,并诱导其凋亡。这一作用与As2O3抑制786-0中XIAP及其mRNA表达有关。     

缺氧环境下三氧化二砷对肝癌细胞株BEL-7402生长及凋亡影响的研究

在人类实体肿瘤中，缺氧情况普遍存在。三氧化二砷（As2O3）在抗肿瘤治疗方面的主要机制为诱导肿瘤细胞凋亡。有研究证明，其对多种消化系肿瘤细胞的生长有抑制作用，但在模拟体内缺氧微环境条件下其对肝癌细胞的生长抑制作用及机制尚少有相关报道，本研究旨在探讨As2O3在缺氧环境下对肝癌细胞的生长抑制、诱导凋亡作用及其机制。