婴幼儿人巨细胞病毒感染154例PCR与ELISA检测比较

目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率。方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCMV DNA的检测。结果:血和尿HCMV DNA同时检测,尿检出率明显高于血;血和尿HCMVDNA检出率明显高于血清HCMV IgM;两种方法的联合检测进一步提高阳性率。结论:两种方法同时检测可提高HCMV的检出率;尿标本HCMV DNA的检出率明显高于血标本,采用尿标本更方便,且阳性率高。     

人巨细胞病毒感染与婴儿肝炎综合征及肝功能损害的相关性研究

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染与婴儿肝炎综合征（IHS）和肝功能损害的关系。方法采用荧光定量 PCR对236例 IHS 患儿和对照组健康婴儿行尿 HCMV DNA 检测,并对254例 HCMV 感染阳性的患儿行肝功能回顾性分析。结果236例 IHS 患儿尿 HCMV DNA 阳性率为62．7％（148／236）。 IHS 患儿 HCMV DNA 和 HCMV IgM 阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．01）。254例 HCMV 感染阳性的患儿肝功能指标：血清总胆红素（TBIL）、谷氨酰转肽酶（GGT ）、总胆汁酸（TBA）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST ）和丙氨酸氨基转移酶（ALT ）均高于正常参考范围,差异均有统计学意义（P ＜0．01）。结论广西地区 IHS 患儿 HCMV 检出率高,HCMV 是 IHS 的重要病原体,对婴儿肝功能有损害。     

FQ-PCR法对孕前及孕中进行HCMV检测的临床意义

目的 运用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对孕前及孕中进行人巨细胞病毒(HCMV)检测,探讨受检者孕前及孕时感染HCMV的临床意义.方法 对302例孕前妇女和620例产前孕妇均做HCMV检测,取宫颈分泌物标本用FQ-PCR法做HCMV-DNA检测,取血清标本用ELISA法做HCMV-IgM检测.结果 302例孕前妇女宫颈分泌物标本HCMV-DNA阳性96例,血清标本HCMV-DNA阳性5例;620例产前孕妇宫颈分泌物标本HCMV-DNA阳性94例,血清标本HCMV-DNA阳性7例.可见用FQ-PCR法检测HCMV-DNA的阳性率远高于用ELISA法检测HCMV-IgM,ELISA法检测HCMV感染阳性率明显偏低,说明FQ-PCR法敏感性显著高于ELISA法.结论 宫颈分泌物组和血清组有明显差异,运用FQ-PCR技术对孕前及孕时进行HCMV检测具有重要的临床意义.     

慢性肾盂肾炎发病与巨细胞病毒感染关系研究

应用免疫酶斑点法(dat-immunobindingassay.DIBA),检测慢性肾盂肾炎病人尿液中巨细胞病毒(HCMV),同时应用ELISA法检测血中HCMV抗体。结果表明,尿中HCMV阳性率为52.9％,血清中HCMV抗体为57.3％,证明慢性肾盂肾炎发病与HCMV感染有关。     

实时荧光PCR检测黄疸婴儿尿中人巨细胞病毒感染研究

目的探讨实时荧光PCR技术检测尿中人巨细胞病毒(HCMV)在黄疸婴儿HCMV活动性感染的检测价值。方法分别应用实时荧光PCR法和ELISA法检测2585例黄疸婴儿尿HCMV-DNA和血清HCMV-IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果 2585例黄疸婴儿尿中实时荧光PCR检测HCMV-DNA阳性1428例;ELISA检测HCMV-IgM阳性1084例。两种方法阳性符合率为73.88%,实时荧光PCR法和ELISA法阳性检出率分别为55.24%和41.93%,差异有统计学意义(P0.01);实时荧光PCR法阳性标本的平均拷贝数为7.86×105。结论 HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,实时荧光PCR法检测敏感性要高于ELISA法检测,可以有效地提示体内活动性HCMV感染,具有良好的应用价值。     

组织学、血清学、尿荧光定量聚合酶链反应及尿沉渣中巨细胞包涵体检测方法在诊断巨细胞病毒所致胆汁淤积型婴儿肝炎综合征作用的研究

目的:探讨肝脏光镜组织学检查、血清学检测巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)特异性免疫球蛋白M(Immune globulin M,IgM)、尿HCMV荧光定量PCR(Fluorescence quantitative polumerase chain reaction,QPCR)检测和晨尿找包涵体方法在诊断婴儿肝炎综合征中HCMV感染的作用.方法:免疫组织化学法检测肝组织HCMV的极早期抗原(Immediately early antigen,IEA)和早期抗原(Early antigen,EA).采用Fisher精确检验比较HCMV-IEA/EA阳性组和阴性组在组织形态改变上的差异.运用ELISA方法常规检测血清HCMV抗体IgM、荧光定量PCR技术检测尿HCMV-DNA和瑞氏染色后显微镜下检测晨尿脱落细胞沉渣中包涵体,分析上述检查方法的灵敏度和特异度.结果:淤胆型婴儿肝炎综合征(Infantile hepatitissyndrome,IHS)患儿肝组织HCMV-IEA/EA阳性22/36例.HCMV-IEA/EA阳性组及阴性组比较,光镜组织形态学分析无明显特异性,晨尿脱落细胞找HCMV包涵体差异无统计学意义(P均＞0.05),而血清HCMV-IgM、荧光定量PCR技术检测尿HCMV-DNA差异有统计学意义(P均＜0.01).血清HCMV-lgM、荧光定量PCR技术检测尿HCMV-DNA和晨尿脱落细胞找HCMv包涵体诊断符合率分别为77.8%、69.4%和50.0%.结论:普通组织病理对淤胆型婴儿HCMv肝炎的诊断缺乏诊断特异性,血清HCMv-IgM检测仍不失为简单易行的实验室诊断方法.     

酶联免疫吸附试验、胶体金法和化学发光法检测孕妇人巨细胞病毒感染的对比研究

目的:分析酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金法和化学发光法检测孕妇人巨细胞病毒(HCMV)特异性抗体IgG、IgM的价值。方法:纳入862例孕妇,分别采用ELISA法、胶体金法和化学发光法检测IgG及IgM抗体水平,并计算3种方法诊断孕妇HCMV感染的灵敏度、特异度和阳性预测值,对3组结果进行比较。结果:ELISA法、胶体金法及化学发光法检测得HCMV IgG抗体的阳性率分别为90.37%、46.06%、91.88%,ELISA法及化学发光法的阳性率高于胶体金法(P<0.01);ELISA法、胶体金法及化学发光法检测得HCMV IgM抗体的阳性率分别为69.72%、49.54%、91.07%,化学发光法及ELISA法的阳性率显著高于胶体金法(P<0.01),化学发光法的阳性率高于ELISA法(P<0.05)。3种方法检测HCMV感染的灵敏度、特异度及阳性预测值差异均有统计学意义(P<0.05),其中化学发光法的灵敏度、特异度及阳性预测值均显著高于ELISA法和胶体金法。结论:化学发光法检测孕妇HCMV IgG、IgM抗体水平阳性检出率高,诊断灵敏度、特异度及阳性预测值高,可以为临床诊断及治疗提供可靠的依据。     

FQ—PCR法与IBT法在人巨细胞病毒检测中的价值比较

目的对荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒进行比较分析。方法分别应用FQ—PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMVDNA和血清HCMV IgM。结果42例小儿尿HCMVDNA阳性检出率为57．14％,血HCMV IgM阳性检出率为35．71％。前者的诊断阳性率高于后者（χ2=3．88,P〈0．05）,有统计学差异;42例成人尿HCMVDNA阳性检出率为14．29％,血HCMVIsM阳性检出率为71．43％。后者的诊断阳性率显著高于前者（χ2=28,P〈0．005）,有统计学差异;84例患者尿HCMVDNA阳性检出率为38．10％,血HCMVIgM阳性检出率为48．81％。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ2=1．96,P〉0．1）。结论FQ—PCR检测HCMVDNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

HCMV（pp65）抗原血症-肝、肾移植术后巨细胞病毒感染监测的分析

目的通过5000次肝、肾移植术后病人外周血HCMV（pp65）抗原血症检测结果与用ELISA方法检测HCMV特异性IgM、IgG抗体的检测结果进行比较和观察，探讨各种检测方法在检测器官移植术后HCMV感染中的作用。方法应用间接免疫荧光方法，检测2002年1月至2004年11月在我院接受肝、肾移植手术后病人外周血白细胞内人巨细胞病毒（HCMV）的基质磷蛋白（pp65）共检测血标本5000次，阳性病人应用ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体。结果5000次HCMV（PP65）抗原血症检测中，阳性1053次，占21．06％；1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人，ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体，103次出现阳性。1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人中约85．23％出现HCMV感染的症状及HCMV病。结论HCMV（PP65）抗原血症检测与其它检测HCMV方法相比，可以早期、快速、准确的检测出肝、肾移植术后病人巨细胞病毒感染，为临床抗病毒治疗提供依据，使HCMV病的发生率明显降低。     

肝、肾移植术后受者人巨细胞病毒巢式PCR检测

目的 探讨巢式PCR（Nest PCR)检测器官移植术后受体人巨细胞病毒（HCMV）DNA，并与传统ELISA法作方法学对照。方法 巢式PCR针对HCMV AD169株IEA基因设计内外两对引物，对59例肝、肾移植术后受体（肝移植27例、肾移植32例）血、尿标本进行HCMV DNA检测。分离血清作ELISA检测IgG、IgM。结果 血液Nest PCR阳性率肝移植62.9%，肾移植46.8%；ELISA法阳性率：IgG35.5%,IgM27.1%,IgG IgM18.6%，IgM阳性标本（16例）DNA检测皆为阳性，6例IgG、IgM皆阴性标本DNA检测仍为阳性。结论 巢式PCR是一种敏感特异、简便快速诊断HCVM感染的方法，灵敏度及特异性高于传统ELISA，能弥补ELISA的假阴性，更适用于临床检测器官移植术后HCMV感染。     

婴儿肝炎综合征病因探讨

我科于1983年1月～1993年12月，对诊断婴儿（包括新生儿）肝炎综合征的病儿92例，进行尿病毒检测70例，结果人类巨细胞病毒阳性44例，占63％，乙肝病毒阳性5例，单纯疱疹病毒及类冠状病毒各1例，总病毒检出率为72．9％。提示病毒感染，特别是人类巨细胞病毒感染是婴儿肝炎综合征的重要病因。经住院治疗4周。黄疸无明显减退者，应用单光子同位素断层扫描（SPECT）进行肝胆动态显像检查13例，结果11例为胆道闭锁，2例为肝内毛细胆管炎。此13例中尿人类巨细胞病毒（HCMV）阳性11例，提示肝胆管闭锁与人类巨细胞感染有关。     

CMV感染病儿实时荧光定量PCR检测及意义

目的 探讨实时荧光定量PCR法检测病儿尿液中巨细胞病毒(CMV)-DNA含量在诊断和动态监测CMV感染中的意义.方法 应用PE 5700全自动PCR扩增分析仪,检测35例临床高度怀疑有CMV感染病儿(病儿组)尿液中的CMV-DNA拷贝数,随机选择45例同年龄段患非感染性疾病病儿作为对照组,比较两组CMV阳性标本中CMV-DNA含量,并测定治疗后的病毒载量.同时与血清CMV-IgM抗体检测结果进行比较.对部分病儿进行临床观察和随访.结果 病儿组CMV感染27例,阳性检出率为77.14%;对照组CMV感染12例,阳性检出率为26.67%.治疗后两组病儿尿液中CMV-DNA拷贝数下降幅度均较大,与治疗前比较, 差异有显著性(t=4.159、5.438,P<0.01).实时荧光定量PCR法CMV阳性检出率高于血清CMV-IgM检测方法.9 例病儿随访2年,1例胆管闭锁病儿手术后CMV病毒载量仍在较高水平,1年后发展为肝硬化;4例CMV 肝炎经治疗后, 1 例CMV-DNA转阴,3例仍阳性;4例无症状性感染病儿CMV-DNA转阴或降至低水平.结论 实时荧光定量PCR技术检测CMV感染具有快捷、灵敏度高、特异度高等优点,量化结果便于对治疗过程进行连续监测,为病儿治疗和随访提供有效帮助.     

温州地区婴幼儿HCMV感染现状的分析及其临床意义

目的探讨婴幼儿人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）的感染状态与其感染标志物的关系及其临床意义。方法收集我院住院婴幼儿（0～3岁）病例,以化学发光法（chemiluminesence immunoassay,CLIA）定量检测其HCMV—IgM以及HCMV—IgG,以实时荧光定量PCR法（Fluorescence Quantitative PCR,FQ—PCR）检测HCMV-IgM阳性者尿液标本中病毒核酸载量,分析婴幼儿HCMV的感染状态及其临床意义。结果在900例患者中,HCMV—IgM阳性病例为161例（17．9％）,即HCMV现症感染率达到17．9％;HCMV—IgG阳性者738例（82％）,即82％的婴幼儿通过胎盘获得HCMV—IgG抗体,其中148例为HCMV—IgM及HCMV—IgG同时阳性（16．4％）,即16．4％的婴幼儿在从母体获得了HCMV—IgG抗体的基础上感染了HCMV;HCMV—IgM及HCMV—IgG均阴性者为73例,即未获得HCMV感染及免疫力的患者占8．1％。在161例现症感染患者中,有59例检测到HCMV的DNA（36．7％）,即约有一半的现症感染患儿出现了病毒活动性感染。结论虽然绝大部分婴幼儿从母体获得了HCMV—IgG抗体,但由于该抗体缺乏中和病毒的作用以及0～3岁婴幼儿免疫系统的不完善,有超过四分之一（17．9％±8．1％）已经感染HCMV或者将受到HCMV感染的威胁,且活动性HCMV感染主要发生在婴儿组（28d～1岁）。该病毒感染是导致婴幼儿肝功能损害的重要病原体之一,因此加强HCMV的防治具有十分重要的意义,尤其是目前出现了对更昔洛韦等抗病毒药物耐受的病毒突变,开发疫苗将是行之有效的手段。     

巨细胞病毒感染与婴儿肝炎综合征的关系及其对体液免疫影响的研究

本文以巨细胞病毒(CMV)核酸杂交技术检测34例婴儿肝炎综合征患者尿标本的带病毒水平。结果表明其感染率(44.1％)明显高于正常对照组(15％,P<0.05)。并初步发现CMV感染在患者母婴间分布有较高的相关性(符合率为13/14)。对患者体液免疫分析的结果表明,伴发CMV感染的婴儿肝炎病理过程不涉及类似Ⅲ型变态反应的免疫病理变化,但其血清C_3水平明显低下,原因值得进一步探讨。     

婴儿肝炎综合征巨细胞病毒感染的研究

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）在婴儿肝炎综合征中的病因学地位，方法：52例以黄疸，肝肿大和血清转氨酶（ALT）升高为主要临床表现的婴儿肝炎综合征患儿为观察组，50例无黄疸，肝肿大和ALT升高的肺炎，败血症和腹泻病患儿为对照组，测定血清HCMV－IgG,IgM(ELISA法）和HCMV－DNA（PCR法），进行组间比较。，结果：观察组血清IgG,IgM和DNA的阳性率都高于对照组，分别是：IgG73%和50％（P＜0．05），IgM40%和4％（P＜0．001），DNA44％和24％。结论：HCMV是婴儿肝炎综合征的重要致病因子，HCMV肝炎约占婴儿肝炎综合征的40％左右。     

免疫酶法检测血清中CMV抗体的建立及应用

用间接免疫酶标法(ELISA)检测血清中 CMV-IgG 抗体。361名孕妇所生胎儿的脐血标本中,99.45%妇女有过 CMV 感染。50例婴儿肝炎综合征患儿血清标本中,有14例患儿恢复期血清较急性期有4倍升高,50例患儿的母血中全可查到 CMV 抗体,说明 CMV 在孕龄妇女中的感染极为普遍,也是婴儿肝炎综合征的主要病原之一,必须采取适当的防护措施使之免于 CMV 感染。     

Cytomegalovirus Infection in Children's Liver Tissues

Humancytomaglovirus(HCMV)infectioninchildrenisverycommonandisoneofthecausesofinfantilehepatitissyndrome(IHS)[lj.ThedetectionofHCMVinthesamplesofurine,salivaandserumcouldnotdirectlyreflecttheHCMVinfectioninlivertissues,becauseHCMVisdemonstratedtohaveawidetissuetropism.Inthisstudy,immediateearlyantigen(IEA)andearlyantigen(EA)ofHCMVinfectioninlivertissueweredetectedin72patientsbyusingimmunoperoxidasehistochemicalstaining.1METERIALSANDMETHODS1.1SamplesOf72samplesoflivertissue,34…     

Cytomegalovirus infection in children’s liver tissues

Summary Immunoperoxidase histochemical assay with monoclonal antibody against human cytomaglovirus (HCMV) was used to detect immediate early antigen (IEA) and early antigen (EA) of HCMV infection in liver tissue of 72 pediatric cases (34 autopsies and 38 biopsies). The HCMV antigen was positive in 25 % (18/27). Among them, 12 cases were both HCMV-IEA and EA positive; 4 were HCMV-IEA positive and 2 HCMV-EA positive only. Liver HCMV infection rate in neonates, the infants with the age <1 year and >1 year was 8. 0 %, 60. 0 %, and 14. 8 %, respectively, indicating that liver HCMV infection occurred at various ages. The liver HCMV infection rate in different diseases was 50. 0 % in infantile hepatitis syndrome; 70. 0 % in extrabiliary malformation, and 12. 5 % in other hepatopathies, suggesting that infantile hepatitis syndrome and extrabiliary malformation were related with HCMV infection in liver tissues.