TMB-酶联免疫吸附方法检查特异性抗核抗体应用的研究

本文应用TMB-酶联免疫吸附试验(TMB-ElISA)对380例连续受检的病人血清中的特异性抗核抗体进行了检查。结果显示ANA与抗DNP,抗ECA及抗DNA的符合率为70％。SLE的阳性率为100％,而且抗体效价高。其它疾患的阳性率在40～54％,再障患者几乎无显著阳性病例。TMB-ELISA方法操作简便、灵敏度高,不需特殊设备,可以目测,有利于推广。可为自身免疫病的诊断提供依据。     

系统性自身免疫病患者抗核抗体的分类测定

可提取性核抗原 (ENA)中抗 Sm、抗 u1 - RNP、抗 SS- A、抗 SS- B、抗 Sc L- 70和抗 JO- 1分别是 SL E、MCTD、SS、PSS、PM与 DM的标志抗体 ,过去用琼脂双向扩散法、免疫荧光法、对流免疫电泳法、RNA-免疫沉淀法和免疫印迹法操作烦琐 ,结果判断不够客观 ,除免疫印迹法外均不能同时测定。本文介绍的 EIA法具有简便、快速、灵敏和大批量同步半定量检测的优点 ,易于推广应用。1　材料和方法1.1　研究对象1.1.1　器官非特异组 :检测 1996～ 1999年临床确诊的系统性结缔组织病患者 144例。其中系统性红斑狼疮 (SL E) 38例 ,类风…     

间接ELISA检测抗核抗体及其临床应用

用小鼠肝细胞核包被聚苯乙烯反应板建立了间接ＥＬＩＳＡ法检测抗核抗体。通过特异性、精密度试验，达到方法学要求。对临床５１例病人检测，与间接荧光抗体法比较，两种方法检出率无明显差异（ｘ２＝３．６７Ｐ＞０．０５）。可进行半定量分析及大批量操作。     

改良酶联免疫吸附试验检测抗磷脂抗体及其临床意义

应用改良的酶联免疫吸附试验拾测抗磷脂抗体。该法特异性强,经心磷脂抑制试验,其抑制率达67%,经心磷脂吸附纯化后,各类抗心磷脂抗体(ACL)与相应的抗人IgG、IgA、IgM均无反应,沉淀线消失。该法重复性好,三次重复实验附合率达87%。本文对111例系统性红斑狼疮(SLE)患者检测IgG、IgA、IgM三类抗心磷脂抗体及抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰肌醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸等五种负电性磷脂抗体,分析其阳性率及该抗体与疾病的相关性。本文发现各种抗磷脂抗体(APL)在SLE的阳性率十分接近,33～45%。但各类抗不同磷脂抗体的阳性率差异较大,5～32%。SLE患者的血栓形成与阳性抗磷脂抗体显著相关,分别是IgG-ACL(P=0.002),IgG-APA(P<0.05),IgG-APG(P<0.05)。抗磷脂抗体的升高还与SLE患者的血小板减少,中枢神经系统病变有关(P<0.05);但异常APL与自发性流产的关系尚无统计学意义。本文还发现抗ds-DNA(Farr试验)的升高和阳性直接Coomb′s试验与升高水平的APL显著相关(P<0.05)。抗心磷脂抗体较其他四种负电性磷脂抗体的阳性率高且敏感。因此ACL可作为临床血栓形成的危险标志性检测。     

抗核抗体核型分布及核型与特异性抗体相关性分析

目的通过对ANA核型分布及核型与特异性抗体相关性分析,为临床对ANA和ANA谱检测结果判读提供参考。方法用间接免疫荧光法检测ANA,免疫印迹法检测ANA谱,对449例ANA或ANA谱阳性的结果进行核型和特异性抗体分析。结果 ANA核型分布以核颗粒型为主,占78.2%;核型与特异性抗体有一定的相关性,但同一种自身抗体可出现不同的荧光核型。结论 ANA和ANA谱同时检测能提高AID的检出率,有助于准确的判断特异性抗体,对AID的诊断、病情监测、预后判断有十分重要的作用。     

以酶联免疫吸附试验测定红斑狼疮患者血清抗天然DNA抗体方法探讨

血清抗DNA抗体分为3型:第一型只与dsDNA起反应.而不与ssDNA起交叉反应,仅见于红斑狼疮(SLE),且所占比例极小。第二型是与dsDNA和ssDNA起相同的免疫反应,其交叉反应可以是部分的也可以是完全的,称之为抗天然DNA抗体(nDNA)。以SLE为最常见,其他风湿性疾病较少见。     

抗核抗体在自身免疫性疾病的检测及应用

自身免疫性疾病是机体的自身免疫应答失控,反应过度造成机体的正常结构成分被相应的抗体或具有免疫功能的细胞作用后引起器质性病变及功能性障碍的状态。自身免疫性疾病病人血循环中存在多种自身抗体,其中抗核抗体（ANA）、抗双链脱氧核糖核酸（抗dsDNA）、抗核抗原（抗ENA）三项联检为自身免疫性疾病的诊断、治疗及预后提供了重要依据。我们对198例自身免疫性疾病病人的血清进行了ANA、抗dsDNA、抗ENA的检测,并对这些自身抗体与自身免疫性疾病各疾病问的关系进行了分析,现报告如下。     

用免疫金银法检测抗核抗体

抗核抗体(ANA)是诊断风湿性疾病的常用实验室指标。经典的检测方法为间接荧光法(IFA)~。但此法受荧光显微镜、荧光抗体、底物(抗原)片的种类与质量影响甚大,荧光又极易淬灭,标本片不能长期保存。我们建立了一种免疫金银法(IGSS)测定ANA,操作简便,结果清晰,无需特殊设备,一般实验室均可采用。     

HEP-2细胞A蛋白酶免疫法检测抗核抗体

<正> 抗核抗体(ANA)对系统性红斑狼疮(SLE)和硬皮病(SD)等自身免疫性结缔组织病的诊断、鉴别诊断、预后估计等都有十分重要的意义。目前测定方法甚多,采用的核基质也各不相同,特异性、敏感性差异甚大。本文报道以HEP-2细胞为基质的A蛋白酶免疫法检测结果及其与间接荧光法(IF)检测结果的比较。     

87例抗核抗体斑点型阳性患者血清特异性抗核抗体谱分析

目的探讨血清斑点型抗核抗体（ANA）与特异性抗核抗体谱（ANAS）中不同项目阳性组合之间的相关性。方法分析87例斑点型ANA阳性病例的抗ANAS（抗Ul-nRNP、Sm、SS-A、SS—B、Scl-70、Jo-1、SCL-70、PM—Scl、centromereB、nukleosome、PCNA、ds—DNA、histones、ribosomal—Pprotein、AMA-M2抗体）多肽谱类型。结果斑点型ANA的特异性ANAS不同项目阳性组合类型达到23种,除SCL-70、PM—Scl外,其他13种特异性ANAS成分均见阳性。ds—DNA阴性的histone、Sm、nukleosome、PCNA、Rib-P．P单独阳性或合并其他抗体阳性率高达19．5％（17／87）,联合检测这些抗体能提高系统性红斑狼疮（SLE）诊断的敏感性。ANAS阳性率与ANA滴度之间没有绝对关系。结论不能简单地依据荧光核型来推断抗ANAS抗体的具体类型;多项指标联合检测能提高诊断疾病的敏感性和特异性;斑点型ANA低滴度时也应作特异性ANAS检测。     

抗卵细胞核抗体的研究

系统性自身免疫疾病患者体内出现的抗核抗体可与多种体细胞折胞核发生反应已有较多研究，但其是否可以与卵细胞核发生反应的研究尚少见报道。以鸡卵核为抗原建立了酶联免疫法，检验相应抗体。结果表明；体细胞ＡＮＡ阳性组卵核ＡＮＡ的阳性率为８３．３％，体细胞ＡＮＡ阴性组卵核ＡＮＡ的阳性率为２３．３％，两者具有显著性差异，从而证实ＡＮＡ亦可与卵细胞胞核发生反应。     

自身免疫性疾病与自身抗体的关系及评价

自身免疫性疾病患者的体内能产生多种针对正常细胞不同成分的自身抗体,已证实其中一些自身抗体与特定的疾病表现有相关性~[1]。应用免疫印迹法能同时检测血清中多种自身抗体,为进一步探讨自身免疫性疾病与抗-ENA抗体之间的关系,现将我院84例各种自身免疫病患者血清中抗-ENA抗体的阳性情况报告如下。1材料与方法1.1一般资料来源为本院1997-12～1999-06收治的自身免疫病患者,共84例。其中系统性红斑狼疮(SLE)43,皮肌炎21例,硬皮病11例,干燥综合征(SS)9例,所有患者均符合美国风湿病学会制定的诊断标准。1.2实验方法应用免疫印迹法检测患者…     

检测抗核抗体对系统性红斑狼疮的临床应用

目的探讨检测抗核抗体对系统性红斑狼疮的临床价值。方法采用回顾性分析的方法,分析我院收治的系统性红斑狼疮患者的临床资料。结果 SLE患者核颗粒型、核均质型、浆颗粒型、浆均质型、核仁型、着丝点型各型阳性率均高于对照组,SLE组总阳性率明显高于对照组,P<0.05。两种狼疮治疗后ANA含量均较治疗前有所降低,但神经性狼疮ANA降低效果明显优于狼疮肾炎患者,P<0.05,差异均有统计学意义。结论 ANA可以作为系统性红斑狼疮患者发生、发展的临床预警指标,值得临床推广检测。     

自身免疫病患者抗精浆免疫抑制物抗体的测定

用ＥＬＩＳＡ法测定血清中抗精浆免疫抑制物抗体（ＳＰＩＭ－Ａｂ），发现系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、混合性结缔组织病、重症肌无力和甲状腺疾病患者血清ＳＰＩＭ－Ａｂ水平与检出率均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）；抗核抗体、抗ｄｓ－ＤＮＡ抗体、抗Ｓｍ、抗ＲＮＰ抗体和类风湿因子与ＳＰＩＭ－Ａｂ无相关性，而抗甲状腺球蛋白抗体（Ａ－ＴＧ）和抗甲状腺微粒体抗体（Ａ－ＴＭ）阳性患者ＳＰＩＭ－Ａｂ水平均显著高于Ａ－ＴＧ、Ａ－ＴＭ阴性者（Ｐ＜０．０１）。     

普鲁卡因酰胺等诱导BALB／c小鼠产生抗核抗体

为了建立药物诱导狼疮（DIL）的动物模型,用普鲁卡因酰胺（Pca)、盐酸肼苯哒嗪（Hyd)和2,2-偶氮-双（3-乙苯基-噻唑啉-6-硫酸）（ABTS）对不同品系小鼠腹腔给药,用ELISA和间接免疫荧光法检测抗核抗体。三种药物都能够诱导小鼠产生抗核抗体,Pca诱导小鼠产生核抗体的阳性率为25%,而Hyd、ABTS诱导的阳性率均为12.5%。Pca、Hyd和ABTS都能诱导BALB/c小鼠而不是C57BL/6小鼠产生抗核抗体,其中DNA特异的抗体主要是IgG,而对组蛋白特异的抗体主要是IgM。结果表明在人体导致DIL的药物Pca、Hyd和ABTS能诱导昆明鼠及BALB/c小鼠产生抗核抗体,提示DIL的发生受遗传背景的影响。     

抗—hTSH抗独特型抗体的制备及生物活性的研究

本文根据独特性－抗独特性免疫网络学说的理论，探讨Ｇｒａｖｅｓ病发病机现。本文用ｈＴＳＨ免疫家兔制备了ＴＳＨ抗体（ＴＳＨＡｂ１）并进行纯化。用纯化后的ＴＳＨＡｂ１作为免疫源，免疫豚鼠获得了抗ＴＳＨＡｂ１的抗独特型抗体（ＴＳＨＡｂ２），并从免疫、生物活性方面进行鉴定，证明所制备同的抗体ＴＳＨＡｂ２有类似ＴＳＨ样的功能。