脓毒症大鼠肠系膜淋巴结与机体免疫功能相关性研究

Objective To investigate the changes in T helper cells (Th1 and Th2) of mesenteric lymph node (MLN) and blood Th1 and Th2 cells in septic rats. Methods Ninety-six male Wistar rats were randomly divided into two groups according to random number table method: sham operation group and model group. Intra-abdominal infection with sepsis was induced by cecal ligation and puncture (CLP). Eight rats in each group were sacrificed after collection of blood samples and MLN samples at 0, 6, 12, 24, 48 and 72 hours after CLP. The ratio of Th1/Th2 and the percentage of regulatory T cell (Treg) in CD4+ T cells in blood and MLN were respectively determined by flow cytometry. Results In model group, the ratio of Th1/Th2 in abdominal aorta blood increased significantly at 6 hours and reached summit at 12 hours, then it decreased persistently, and when compared with sham group, the ratio of Th1/Th2 was significantly higher at 6, 12, 24 hours (0.82±0.15 vs. 0. 60±0. 22, 1. 23±0. 44 vs. 0. 76±0. 31, 0. 85±0. 25 vs. 0. 66±0. 32)and lower at 72 hours (0. 41±0.16 vs. 0. 59±0. 13, P＜0. 05 or P＜0. 01). The ratio of Th1/Th2 in MLN of model group reached summit at 6 hours, then decreased significantly, and when compared with sham group, the ratio of Th1/Th2 was significantly higher at 6 hours (1. 01±0.16 vs. 0. 52±0.13) and lower at 12, 24, 48 and 72 hours (0. 34±0.11 vs. 0. 53±0. 09, 0. 23±0. 08 vs. 0. 51±0. 09, 0.17±0. 07 vs. 0. 47±0.15, 0.16±0. 06 vs. 0. 53±0.11, P＜0. 05 or P＜0. 01). Compared with sham group, the percentage of Treg in MLN of model group was increased at 12, 24, 48 and 72 hours after CLP (9. 62±0. 69 vs. 7. 65±0.67, 9. 84±0. 74 vs. 8.08±1. 06, 10. 95±2. 09 vs. 7. 83±1.15, 10. 81±1. 34 vs. 8. 35±1.12, P＜0. 05 or P＜0. 01). There was a negative correlation between the ratio of Th1/Th2 and the percentage of Treg in MLN (r=-0. 882, P＜0. 05). Conclusion Cellular immune function of MLN is suppressed during severe intra-abdominal infection, which induces translocation of gut-derived endotoxin to mesenteric lymphatics,resulting in corporal immuno-suppression, with manifestation of Th1/Th2 cell shift. Immuno-suppression of MLN is related to a higher percentage of Treg due to the effect of endotoxin.     

胸腺肽联合血必净对老年肺部感染合并脓毒症患者的免疫调节作用

目的探讨胸腺肽联合血必净在老年肺部感染合并脓毒症患者中,通过改变辅助性T细胞1/2（Th1/Th2）、调节性T细胞（Treg细胞）的表达而发挥免疫调节作用。方法收集2012-01～2014-01南京医科大学附属南京医院ICU老年肺部感染合并脓毒症患者60例作为治疗组,应用胸腺肽联合血必净免疫调节治疗,采集入院时和第7天留取外周血,用流式细胞仪检测Th1、Th2细胞和Treg细胞,同时送检降钙素原（ PCT）、C-反应蛋白（ CRP）;以7 d死亡为终点将治疗组再分成两组,其中17例死亡患者为死亡组,存活的43例为生存组。以同期住ICU的老年肺部感染合并脓毒症未用胸腺肽和血必净治疗的19例患者为对照组。结果①治疗组第7天Th1、Th2细胞高于入院时及对照组治疗前后（P均＜0．05）;治疗组第7天Th1/Th2高于入院时及对照组治疗前后（P均＜0．01）;治疗组第7天Treg细胞低于入院时（P＜0．01）,与对照组治疗前后比较差异无统计学意义（ P＞0．05）。②生存组治疗第7天Th1、Th2细胞高于死亡组（ P分别＜0．01、＜0．05）,Treg细胞低于死亡组（P＜0．01）。③60例患者入院时CRP、PCT和APACHEⅡ评分与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。④治疗组住ICU时间短于对照组（P＜0.05）;两组病死率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论老年肺部感染合并脓毒症患者早期外周血Th1、Th2细胞和Treg细胞表达异常,胸腺肽联合血必净治疗可改善机体的免疫状态。     

脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对辅助性T细胞漂移的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨脓毒症大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡对辅助性T细胞(Th)漂移的影响及血必净注射液的干预作用.方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血必净组,每组8只.行盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.于第3日采用免疫磁珠法分选各组CD4+CD25+Treg并培养12 h,用流式细胞仪检测Treg凋亡率及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)的分泌量;再将CD4+CD25+ Treg与CD4+CD25-T细胞1∶1共培养,刀豆素A刺激68 h,ELISA检测Th1、Th2、Th17分泌的γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-17水平.结果 正常组Treg凋亡率[(12.03±0.89)%]与假手术组[(9.48±2.17)%]比较差异无统计学意义;模型组Treg凋亡率[(5.87±0.44)%]明显低于正常组和假手术组;而血必净组的Treg凋亡率[(27.29±2.48)%]显著高于其他各组(P均<0.01).Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌量随Treg凋亡率增加而减少,相关系数(r)分别为-0.878(P=0.042)、-0.877(P=0.042)、-0.743(P=0.010).与正常组比较,模型组IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显升高[IFN-γ:(254.70±44.88)ng/L比(0.68±0.78)ng/L,IL-4:(8.82±0.61)ng/L比(3.48±0.98)ng/L,IFN-γ/IL-4比值:30.28±4.87比0.23±0.30,P均<0.01];而血必净组IFN-γ[(491.54±84.28)ng/L]和IFN-γ/IL-4比值(45.31±8.01)均显著高于模型组(P<0.01和P<0.05);各组间IL-17水平无明显差异(P均>0.05).结论 脓毒症时Treg凋亡率增加可减轻对效应T细胞的抑制功能,血必净注射液能有效促进脓毒症Treg凋亡,介导Th2向Th1漂移.     

Th17/Treg比例失衡和HMGB1水平变化与脓毒症患者APACHEⅡ评分的关联性及动态监测指导意义

目的 探讨辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例失衡、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平变化与脓毒症患者急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)评分的关联性及动态监测指导意义.方法 回顾性收集2018年11月-2020年10月我院收治的脓毒症患者112例,根据28d后生存情况分为死亡组(n...     

NOD1mRNA调节Th1/Th2和Treg/Th17细胞因子在肺结核中的免疫机制及预后价值研究

目的 探究肺结核(tuberculosis,TB)患者核苷酸结合寡聚化结构域1(nucleotide binding oligomerization domain1,NOD1）表达水平与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2),辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡的相关性,分析NOD1 mRNA是否通过调节Th1/Th2,Treg/Th17的平衡参与肺结核细胞免疫进展过程。方法 运用病例对照研究,收集2021年6月～2022年7月昌吉市人民医院结核病门诊收治的肺结核患者50例作为肺结核组,同期健康体检者50例作为对照组。所有病例均标准抗结核治疗6个月,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测患者抗结核治疗前后外周血单个核细胞NOD1基因的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清Th1/Th2和Th17/Treg的细胞因子γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-17(IL-17)的表达水平。将抗结核治疗前后NOD1与细胞因...     

脓毒症与机体免疫状态紊乱

脓毒症 (sepsis)是临床危重病人死亡的常见原因。随着人们研究脓毒症致病机制和宿主对脓毒症反应基因学基础的不断深入 ,人们对脓毒症的病理生理机制有了新的认识 ,特别是认识到机体免疫状态紊乱在脓毒症的发生、发展中起到重要作用。1　免疫亢进与脓毒症许多研究认为 ,脓毒症反映了机体难以控制的炎症反应。在感染、损伤和急性炎症时激活的单核巨噬细胞和淋巴细胞可释放大量促炎介质如TNF -α、IL - 1、IL - 6、IL - 12、IL- 18以及IFN -γ。垂体前叶细胞表达TNF和IL - 1的受体 ,炎症介质可通过这些受体激活该细胞释放促肾上腺皮质…     

维生素D水平与脓毒症免疫功能相关性的临床研究

目的 探讨脓毒症患者血清维生素D(vitamin D,VD)水平与免疫功能的关系.方法 采用病例对照研究方法,以福建中医药大学附属第二人民医院2018年12月至2020年12月收治的30例脓毒症患者作为脓毒症组,选择20例本院体检中心同期健康体检人群作为对照组.同时根据VD水平将脓毒症组分为VD严重缺乏组(16例)、V...     

中医疗法对过敏性紫癜患者免疫功能的调节作用

目的探讨以疏风清热、活血化瘀立法治疗过敏性紫癜(HSP)前后,外周血白细胞总数、淋巴细胞数、淋巴细胞亚群、辅助性T细胞(Th)1/Th2及调节性T细胞的变化。方法使用血细胞分析仪检测36例住院患者血常规,统计其中的白细胞总数及淋巴细胞数。使用流式细胞仪检测36例住院患者外周血淋巴细胞亚群、Th1/Th2及调节性T细胞。结果 HSP患者治疗后(恢复期)与治疗前(急性期)相比较,白细胞数、淋巴细胞数、CD3~+、CD4~+、CD19~+降低(P0.05),CD8~+、CD16~+CD56~+、Th1/Th2、CD4~+CD25~+升高(P0.05);HSP患者治疗前与对照组相比较,白细胞数、淋巴细胞数、CD3~+、CD4~+、CD19~+明显升高(P0.05),CD8~+、CD16~+CD56~+、Th1/Th2、CD4~+CD25~+降低(P0.05);HSP患者治疗后与对照组相比较,白细胞数、淋巴细胞数、CD19~+升高(P0.05);CD16~+降低(P0.05);CD3~+、CD4~+、CD8~+、Th1/Th2、CD4~+CD25~+无差异(P0.05)。结论以疏风清热、活血化瘀立法治疗HSP,能明显干预患者的外周血白细胞总数、淋巴细胞数、淋巴细胞亚群、Th1/Th2及调节性T细胞,对患者的免疫功能的调节作用明确,临床效果显著,极大地提高了临床诊疗能力。     

烧伤脓毒症的实验研究

为探讨烧伤感染的机制及其防治机制，采用烫伤后盲肠结扎穿刺术（ＣＬＰ）建立烧伤脓毒症小鼠模型并观察ｒＩＬ－２（重组白细胞介素２）对其细胞免疫功能影响。结果表明：（１）烫伤加ＣＬＰ术后１８ｈ血培养均呈阳性，小鼠死亡时间集中在术后２４￣４８ｈ内；（２）单纯烫伤及烫伤加ＣＬＰ术小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ刺激的应答显著下降；（３）ｒＩＬ－２对受损的细胞免疫功能有一定恢复作用。提示：烫伤中ＣＬＰ脓毒症模型为进一步探     

脓毒症T淋巴细胞亚群免疫监测的研究进展

由于脓毒症免疫反应的异质性、复杂的信号通路、促炎与抗炎的相互作用等诸多因素影响,脓毒症疗效及预后依然欠佳。脓毒症免疫抑制增加院内感染及死亡的风险。即使存活的患者通常也会出现长期的免疫抑制状态,是远期死亡的主要原因之一。此次新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的流行,重型及危重型患者均符合脓毒症诊断标准。通过对脓毒症,尤其是重型、危重型COVID-19患者外周血辅助T细胞、调节性T细胞和CD8⁺T细胞研究,发现监测其变化趋势与脓毒症不同时期的免疫激活和免疫抑制显著相关。正确评估患者的免疫状态是个体化治疗的前提。本文综述了脓毒症T淋巴细胞亚群的变化,以期为精准治疗脓毒症和改善脓毒症患者的预后提供监测指标。     

参芪扶正注射液对脓毒症患者免疫功能的影响

目的 观察参芪扶正注射液对脓毒症患者外周血T细胞亚群、T细胞凋亡和细胞因子的影响并探讨其意义.方法 选择天津医科大学总医院普通外科收治的40例脓毒症患者,按随机数字表法分为常规治疗组(20例,给予常规西医治疗)和参芪扶正治疗组(20例,在西医常规治疗基础上加用参芪扶正注射液 250 mL静脉滴注,每日1次),两组均以7 d为1个疗程.两组患者均于治疗1、3、7 d进行急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分;用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和细胞凋亡情况,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素 (IL-6、IL-10)水平.结果 两组治疗后3 d APACHEⅡ评分均较治疗后1 d明显降低,并持续到治疗后7 d,且参芪扶正治疗组的降低程度较常规治疗组更显著(分:10.05±3.71比13.15±4.65,P<0.05).随着治疗时间的延长,两组外周血TNF-α、IL-6水平均逐渐下降;IL-10水平先升高,到7 d时又下降;7 d时参芪扶正治疗组TNF-α和IL-6明显低于常规治疗组〔TNF-α(ng/L):204.6±18.1比218.9±21.3,IL-6(ng/L):3.68±0.30比3.95±0.49,均P<0.05〕;而参芪扶正组与常规治疗组IL-10比较差异无统计学意义(ng/L:173.8±23.3比174.8±18.9,P>0.05).两组治疗后1、3、7 d CD4+T细胞和CD4+/CD8+先下降后上升,CD8+T细胞逐渐下降及CD4+、CD8+T细胞凋亡率先升后降,参芪扶正治疗组治疗后7 d CD4+T细胞、CD4+/CD8+及CD4+T细胞凋亡率与常规治疗组比较差异均有统计学意义〔CD4+T细胞:(38.3±4.7)%比(35.5±5.5)%,CD4+/CD8+:1.55±0.29比1.36±0.27,CD4+T细胞凋亡率:(11.2±3.8)%比(14.1±5.5)%,均P<0.05〕;两组各时间点CD8+T及其细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 参芪扶正注射液可有效降低脓毒症患者CD4+T细胞凋亡率,增加CD4+T细胞和CD4+/CD8+,降低炎症指标,改善脓毒症患者的免疫功能及病情严重程度.     

银屑病患者 Th17和 Treg细胞及其相关细胞因子的表达

目的：探讨银屑病患者辅助性T细胞17（Th17）和调节性T （Treg）细胞及其相关因子表达的临床意义。方法用流式细胞术检测28例轻度和25例重度银屑病患者及25名健康对照者外周血中Th17和Treg细胞的比例;用逆转录聚合酶链反应（PCR）检测维甲酸相关孤儿受体γt（RORγt）和抗人叉头状转录因子（Foxp3） mRNA的表达;用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血浆Th17和Treg相关细胞因子白细胞介素17（ IL-17）和转化生长因子β（ TGF-β）的水平。结果与健康对照组比较,银屑病患者组Th17细胞比例、RORγt的mRNA水平及IL-17的浓度显著上升,且重度组显著高于轻度组（P＜0．05）;而重度银屑病患者Treg细胞、Foxp3 mRNA和血浆TGF-β浓度均较健康对照组和轻度组显著降低（ P＜0．05）。结论 Th17和Treg细胞的比例及其相关因子的表达可作为银屑病病情进展的标志。     

Resting Respiratory Tract Dendritic Cells Preferentially Stimulate T Helper Cell Type 2 (Th2) Responses and Require Obligatory Cytokine Signals for Induction of ?Th1 Immunity

Consistent with their role in host defense, mature dendritic cells (DCs) from central lymphoid organs preferentially prime for T helper cell type 1 (Th1)-polarized immunity. However, the “default” T helper response at mucosal surfaces demonstrates Th2 polarity, which is reflected in the cytokine profiles of activated T cells from mucosal lymph nodes. This study on rat respiratory tract DCs (RTDCs) provides an explanation for this paradox. We demonstrate that freshly isolated RTDCs are functionally immature as defined in vitro, being surface major histocompatibility complex (MHC) II ^lo, endocytosis^hi, and mixed lymphocyte reaction^lo, and these cells produce mRNA encoding interleukin (IL)-10. After ovalbumin (OVA)-pulsing and adoptive transfer, freshly isolated RTDCs preferentially stimulated Th2-dependent OVA-specific immunoglobulin (Ig)G₁ responses, and antigen-stimulated splenocytes from recipient animals produced IL-4 in vitro. However, preculture with granulocyte/macrophage colony stimulating factor increased their in vivo IgG priming capacity by 2–3 logs, inducing production of both Th1- and Th2-dependent IgG subclasses and high levels of IFN-γ by antigen-stimulated splenocytes. Associated phenotypic changes included upregulation of surface MHC II and B7 expression and IL-12 p35 mRNA, and downregulation of endocytosis, MHC II processing– associated genes, and IL-10 mRNA expression. Full expression of IL-12 p40 required additional signals, such as tumor necrosis factor α or CD40 ligand. These results suggest that the observed Th2 polarity of the resting mucosal immune system may be an inherent property of the resident DC population, and furthermore that mobilization of Th1 immunity relies absolutely on the provision of appropriate microenvironmental costimuli.     

机体免疫功能与恶性肿瘤关系的探讨

应用CD3、CD4和CD8三种单克隆抗体,通过APAAP桥联酶标法,对86例恶性肿瘤患者进行外周血T细胞亚群检测,并与30例正常对照进行比较.结果 恶性肿瘤患者CD3和CD4阳性细胞明显低于正常对照,CD8阳性细胞显著增高,致使CD4/CD8比值显著降低,提示恶性肿瘤患者存在明显的细胞免疫功能低下,机体处于免疫抑制状态.用终点免疫浊度法将86例恶性肿瘤患者分为6组,分别测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的含量.结果 部分组别血清中IgG、IgA和IgM高于正常对照,其余组别与正常对照比较无明显差别,提示大部分恶性肿瘤患者体液免疫功能无明显变化,部分表现为体液免疫亢进.