尾加压素Ⅱ及G蛋白偶联受体14 mRNA 在人嗜铬细胞瘤组织中的表达

目的研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)及G蛋白偶联受体14(GPR14)mRNA在人嗜铬细胞瘤组织中的表达.方法提取正常肾上腺皮质、髓质和嗜铬细胞瘤组织总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应的方法,以扩增的目的条带灰度和内参照条带灰度比值作为检测指标,对UⅡ和GPR14 mRNA的表达进行半定量分析.结果正常肾上腺皮质和髓质中UⅡ及GPR14 mRNA表达差异无显著性;嗜铬细胞瘤组织中UⅡ及GPR14 mRNA的表达显著低于正常肾上腺皮质和髓质(P＜0.05);肾上腺嗜铬细胞瘤组织中GPR14 mRNA的表达显著低于肾上腺外嗜铬细胞瘤组织(P＜0.05).结论UⅡ及GPR14 mRNA在正常肾上腺和嗜铬细胞瘤组织中表达水平不同,提示其在嗜铬细胞瘤的发病机制和血压调节中可能起一定的作用.     

肾上腺髓质素及受体在肾上腺和嗜铬细胞瘤中的表达

目的研究肾上腺髓质素(ADM)及其特异性受体-受体活性调节蛋白2/降钙素受体样受体(RAMP2/CRLR)mRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中的表达.方法提取8例正常肾上腺髓质和18例嗜铬细胞瘤组织总RNA,行逆转录-聚合酶链反应,以扩增的ADM、RAMP2、CRLR条带灰度与内参照GAPDH条带灰度比值进行半定量分析.结果正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中均可见ADM及其特异性受体RAMP2/CRLR mRNA的表达,其ADM/GAPDH分别为0.48±0.09和0.75±0.24,RAMP2/GAPDH分别为0.79±0.12和1.29±0.30,CRLR/GAPDH分别为0.40±0.08和0.87±0.22,嗜铬细胞瘤组织中ADM及其特异性受体RAMP2/CRLR mRNA的表达显著高于正常肾上腺髓质(P＜0.05).结论ADM可能通过自分泌或旁分泌方式作用于肾上腺局部,在嗜铬细胞瘤的发生发展中起一定的作用.     

肾上腺嗜铬细胞瘤中c-myc、bcl-2 mRNA表达及意义的研究

目的　探讨癌基因c -myc、凋亡抑制基因bcl-2mRNA在肾上腺良性及恶性嗜铬细胞瘤中的表达及其意义。方法　应用核酸分子原位杂交方法检测 2 9例良性肾上腺嗜铬细胞瘤及 7例恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中c -myc、bcl-2基因表达情况。结果　原位杂交结果显示 :c -mycmRNA在良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中表达率分别为2 7.5 % (8 2 9) ,71.4% (5 7) (P <0 .0 5 ) ;bcl-2mRNA在良性肾上腺嗜铬细胞瘤中表达率分别为 48.2 % (14 2 9,71.4%(5 7) ,两者比较存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　 1、c -myc在肾上腺嗜铬细胞瘤的发生过程中c -myc基因不起主要作用 ,可能对该肿瘤的恶性变起重要作用 ,c -myc基因产物的检测对鉴别良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤有一定意义。 2、bcl-2基因的凋亡抑制作用对肾上腺嗜铬细胞瘤的发生发展有重要意义 ,但在良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤的鉴别上无临床意义。     

嗜铬蛋白A和神经特异性烯醇化酶及突触素在肾上腺皮质中的分布特点

目的:通过免疫组化方法,研究肾上腺皮质分泌物嗜铬蛋白A(CgA)、神经特异性烯醇化酶(NSE)和突触素(SYN)在肾上腺皮质的分布特点,为进一步深入研究皮髓质之间的相互作用奠定基础. 方法:运用免疫组化方法对肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌56份组织标本进行CgA、NSE和SYN染色,以正常肾上腺作为对照,观察其在皮质中的分布特点. 结果:肾上腺嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌的皮质中均可见CgA染色阳性细胞,髓质增生和正常肾上腺病例皮质CgA染色阴性;肾上腺髓质增生和嗜铬细胞癌皮质NSE染色呈阳性,嗜铬细胞瘤和正常肾上腺皮质NSE染色呈阴性;肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤的皮质中SYN染色呈阳性,正常肾上腺嗜铬细胞癌皮质SYN染色呈阴性. 结论:①肾上腺皮质CgA、NSE和SYN分布特点可以帮助鉴别肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌的异同;②肾上腺皮髓质之间联系紧密,受共同机制所调控,除经典的下丘脑-垂体-肾上腺轴和肾素-血管紧张素-醛固酮系统外,肾上腺皮髓质之间存在相互调节的解剖学和内分泌学基础.     

肾上腺髓质素的分子生物学意义及对肾脏损伤的影响

0 引言 肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)是一种从人嗜铬细胞瘤组织中分离纯化出的多肽,它在正常肾上腺髓质及源于肾上腺髓质的嗜铬细胞瘤中含量丰富.近年来发现ADM在肾脏功能调节方面起着重要作用,现对ADM的生物学特性、生物学作用及其对肾脏的作用进行概述.     

VIP和NPY在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及意义

【目的 探讨神经肽Y (Neuropeptide Y, NPY)和血管活性肠肽( vasocative intestinal peptide, VIP)在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中的表达与肾上腺嗜铬细胞瘤的关系。 方法 采用免疫组化SP法和图像分析技术对8例正常肾上腺组织20例肾上腺嗜铬细胞瘤中NPY和VIP进行检测。结果 免疫组织化学结果显示， NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤中阳性细胞面积、灰度与正常肾上腺组织比较差异有显著性(P <0.01)。NPY,VIP与尿儿茶酚胺（catecholamine，CA）存在正相关关系。结论 NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤发生发展中可能有重要意义,可能代表肾上腺嗜铬细胞瘤的分子基础，这可能是治疗和诊断AMH新的靶点。 【关键词】肾上腺肿瘤 嗜铬细胞瘤 神经肽Y 血管活性肠肽     

肾上腺嗜铬细胞瘤C-mycmRNA及蛋白表达的临床意义

目的 :探讨癌基因C myc及其表达产物在肾上腺良性及恶性嗜铬细胞瘤发生中的作用。方法 :应用核酸分子原位杂交及免疫组织化学方法检测 2 9例良性肾上腺嗜铬细胞瘤及 7例恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中C myc基因及其产物表达情况。结果 :原位杂交结果显示 :C mycmRNA在良性肾上腺嗜铬细胞瘤中表达率为 2 7.5 % (8 2 9) ,而在恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中为 71.4(5 7) (P <0 .0 5 ) ;免疫组化结果显示 :C myc蛋白表达率分别为 31.0 % (9 2 9)和 71.4% (5 7) (P <0 .0 5 ) ;结论 :在肾上腺嗜铬细胞瘤的发生过程中 ,C myc基因可能对该肿瘤的恶性变起重要作用 ;C myc基因产物的检测对鉴别良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤有一定意义。     

131I-MIBG核素显像对肾上腺髓质病变诊断的价值

目的:评价131I-MIBG核素显像对肾上腺髓质病变诊断的价值.方法:观察12例原发性高血压(对照组)、21例嗜铬细胞瘤及15例肾上腺髓质增生患者(后两组均经术后病理检查证实)131I-MIBG肾上腺髓质显像的结果,并与CT、B超等检查结果进行对照分析;采用感兴趣区(ROI)技术计算肾上腺(包括腺外嗜铬细胞瘤组织)与本底及心肌的摄取比值.结果:131I-MIBG核素显像:嗜铬细胞瘤组11例呈一侧肾上腺区域异常放射性浓聚,2例为腺外异常放射性浓聚影(术后证实为腺外嗜铬细胞瘤),3例单侧肾上腺异常放射性浓聚伴全身多处异常放射性浓聚(术后证实为单侧肾上腺恶性嗜铬细胞瘤伴转移),3例为一侧肾上腺清晰显影,2例仅表现为隐约显影(术前被诊断为正常),本组阳性检出率为90.5%;增生组8例表现为一侧肾上腺清晰显影,3例双侧肾上腺清晰显影,4例表现为双侧肾上腺仅隐约显影,阳性检出率为73.3%.摄取比值计算:上两组均明显高于对照组(P＜0.01),嗜铬细胞瘤组明显高于增生组(P＜0.01).结论:131I-MIBG核素显像对定位、定性诊断肾上腺髓质病变具有重要价值,可作为首选功能检查方法,ROI技术定量分析可提高阳性检出率并有利于鉴别病变性质.     

人嗜铬细胞瘤组织中转化生长因子α、肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子的表达

目的观察人嗜铬细胞瘤(PHEO)组织和正常肾上腺髓质中转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异.方法RT-PCR法比较22例经手术及病理证实的PHEO组织及18例意外死亡者(符合医学伦理学要求)的正常肾上腺髓质中TGFα、TNFα和VEGF mRNA表达的差异;免疫组化法比较石蜡包埋的27例PHEO和14例正常肾上腺髓质中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达的差异,并分析其与肿瘤的性质、部位、大小、重量的关系.结果PHEO中TGFα、TNFα mRNA和蛋白表达均高于正常肾上腺髓质.PHEO中VEGF145剪接体的mRNA表达高于正常肾上腺髓质;VEGF121和VEGF165剪接体的mRNA在PHEO和正常肾上腺髓质中的表达差异无显著性.PHEO的内皮细胞和肿瘤细胞VEGF的染色阳性率高于正常肾上腺髓质.肾上腺外PHEO中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达高于肾上腺PHEO.恶性和多发PHEO的TNFα蛋白表达高于良性和单发PHEO.结论PHEO中TGFα、TNFα和VEGF的mRNA和蛋白表达高于正常肾上腺髓质,TGFα、TNFα和VEGF在不同特点的PHEO中的表达不同.     

血管活性肠肽和神经肽Y在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及意义

目的探讨神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)和血管活性肠肽(vasocative intestinal peptide,VIP)在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中的表达与肾上腺嗜铬细胞瘤的关系。方法采用免疫组化SP法和图像分析技术对8例正常肾上腺组织20例肾上腺嗜铬细胞瘤中NPY和VIP进行检测。结果免疫组织化学结果显示,NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤中阳性细胞面积、灰度与正常肾上腺组织比较差异有显著性(P<0.01)。NPY,VIP与尿儿茶酚胺(catecholamine,CA)存在正相关关系。结论NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤发生发展中可能有重要意义,可能代表肾上腺嗜铬细胞瘤的分子基础,这可能是治疗和诊断AMH新的靶点。     

肾上腺嗜铬细胞瘤凋亡相关基因bak蛋白表达的意义

目的：探讨凋亡相关基因ｂａｋ在人肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及其对肿瘤发生的意义。方法：应用免疫组织化学的ＳＡＢＣ方法,和兔抗人Ｂａｋ了隆抗体,对２３例肾上腺嗜铬瘤（其中良属于 １８例,恶笥５例）和１０例正常肾上腺组织进行了检测。结果：Ｂａｋ在 腺髓质中不表达,而在良恶笥嗜铬细胞瘤中表达,阳怀率分别为８９％和４０％,在良性肿瘤中Ｂａｋ表达显著强于恶性肿瘤。结论：Ｂａｋ不同程度地参与了良恶性嗜铬细胞中的     

Expressions of angiotensin II type 1 receptor mRNA in fibrotic and normal liver tissues]

OBJECTIVE: To investigate the expression profile of angiotensin type 1 receptor (AT1R) mRNA in fibrotic and normal liver tissues. METHODS: Semi-quantitative RT-PCR was used to detect the expression of AT1R mRNA in 18 specimens of fibrotic liver tissues adjacent to liver cancers and 12 normal liver tissue specimens. Specific AT1R product and GAPDH product used as internal control were both amplified by RT-PCR, and the ratio of their integrated optical densities calculated to estimate the relative quantity of AT1R mRNA expression. RESULTS: The relative mRNA expression of AT1R in fibrotic liver tissues was significantly higher than that of normal liver tissues (1.27+/-0.45 vs 0.71+/-0.21, P < 0.01). CONCLUSION: AT1R may play an important role in the development of hepatic fibrosis.     

大肠癌及其肝转移组织骨桥蛋白mRNA的表达

目的　检测骨桥蛋白mRNA在大肠癌及其肝转移灶中的表达差异和蛋白定位 ,并探讨其在大肠癌肝转移发生发展中的意义。方法　提取 4 4例大肠癌及癌旁正常组织及 2 0例大肠癌肝转移组织RNA ,采用实时荧光定量PCR(FQ PCR)法检测其中骨桥蛋白mRNA的表达。用免疫组织化学法行骨桥蛋白的组织学检测。根据FQ PCR以CT 值为标准 ,所得数值与实际表达量对数值呈反比的原理 ,以骨桥蛋白CT GAPDHCT 的比值来评价不同组织骨桥蛋白的表达。结果　骨桥蛋白mRNA表达在大肠癌肝转移灶中表达最高 (1 0 7± 0 10 ) ,在原发大肠癌组织中次之 (1 15± 0 14 ) ,而在癌旁正常大肠组织中表达最低 (1 32± 0 18) ;统计分析差异有显著意义 (t=5 81,P =0 0 0 0及t=2 .12 ,P =0 .0 38)。免疫组织化学结果表明 ,骨桥蛋白定位于大肠癌细胞及肝转移灶旁正常肝细胞的细胞质。结论　骨桥蛋白mRNA在大肠癌中的表达高于正常组织 ,而在大肠癌肝转移组织中表达更高 ,骨桥蛋白定位于大肠癌细胞质。这提示骨桥蛋白与大肠癌的浸润转移有关 ,可作为大肠癌肝转移的预测指标之一。     

瘦素受体在肾上腺皮髓质及其肿瘤中的表达及与血浆瘦素的关系

目的 观察长型瘦素受体(Ob-Rb)在正常肾上腺皮、髓质及其肿瘤中的mRNA和蛋白表达;并观察原发性醛固酮增多症(PA)、皮质醇分泌瘤(CS)和嗜铬细胞瘤(PHEO)患者的血浆瘦素水平.方法 提取6名健康者肾上腺皮质和髓质和10例CS、14例醛固酮分泌瘤(APA)、20例PHEO患者的组织总RNA和蛋白,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测不同组织中Ob-Rb mRNA和蛋白表达.ELISA方法测定29例PA、11例CS、15例PHEO患者和20名年龄匹配的血压健康者血浆瘦素水平.结果 在肾上腺皮、髓质及其肿瘤中存在Ob-Rb的mRNA和蛋白表达.在正常肾上腺皮质中,Ob-Rb mRNA(0.32±0.12)和蛋白(1.31±0.26)表达明显均高于其余各组(均P＜0.05).Ob-Rb mRNA在APA(0.15±0.10)中的表达明显高于CS(0.05±0.02,P＜0.05).APA中Ob-Rb mRNA表达与立位血浆醛固酮水平正相关(r=0.670,P=0.024),而CS患者瘤内Ob-RbmRNA水平与其24 h尿UFC水平正相关(r=0.870,P=0.005).CS患者血浆瘦素水平明显高于非皮质醇瘤患者(P=0.001).结论 肾上腺皮髓质及其肿瘤广泛表达长型瘦素受体,且其表达之间存在差异,瘦素与肾上腺间的关系还需进一步研究.     

Study on molecular mechanism of liver yang ascending syndrome in hypertension

ＬｉｖｅｒＹａｎｇＡｓｃｅｎｄｉｎｇＳｙｎｄｒｏｍｅ（ＬＹＡＳ）ｉｓｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐａｌＳｙｎｄｒｏｍｅ ｔｙｐｅｏｆＬｉｖｅｒｄｉｓｏｒｄｅｒｉｎＴＣＭ,ｍｏｓｔｌｙｓｅｅｎｉｎｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ,（1）ａｎｄｉｔｓｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏ ｌｏｇｉｃａｌｂａｓｉｓｈａｓｂｅｅｎｄｅｅｐｌｙｓｔｕｄｉｅｄ,（2,3）　ｔｈｏｕｇｈｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｅｖｅｌｏｎｔｈｉｓＳｙｎｄｒｏｍｅｈａｓｎｏｔｂｅｅｎｓｅｅｎ．Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙ,ｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｐｒｅｖｉｏ…     

人肝硬化肝细胞生长激素受体及其mRNA的表达变化

目的　探讨人肝硬化肝组织和肝硬化肝细胞生长激素受体的表达变化。方法　采用放射配体法、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 32例癌旁肝硬化肝组织和 6例癌旁肝硬化肝细胞中生长激素受体及其mRNA的表达水平 ,并分别与 5例正常肝组织、3例正常肝细胞比较。结果　人肝硬化肝组织表达生长激素受体 ,其表达数量较正常肝组织明显减少 [RT,(2 2 4± 5 0 )fmol/mg蛋白 ,n =32vs (41 3± 5 3)fmol/mg蛋白 ,n =5 ;P <0 0 5 ],并且随着肝硬化程度的加重进一步减少 (P <0 0 5 ) ;人肝硬化肝细胞生长激素受体的位点数量较正常肝细胞明显减少 [位点 ,(2 4 0± 0 93)× 10 4/细胞 ,n =6vs (4 6 8± 1 14 )× 10 4/cell,n =3;P <0 0 5 ],人肝硬化肝组织生长激素受体mRNA的表达量也较正常肝组织明显减少 [riOD ,30 8%± 8 2 % ,n =32vs 4 4 9%± 6 3% ,n =5 ;P <0 0 5 ],并且随着肝硬化程度的加重进一步减少 (P <0 0 5 )。结论　肝硬化肝细胞表达生长激素受体 ,其表达水平降低 ;肝硬化越严重 ,该表达下调越明显。肝硬化肝组织生长激素受体表达下调的可能机制是肝硬化肝组织生长激素受体mRNA的表达明显减少     

胰蛋白酶原16对哮喘气道肌成纤维细胞分化的影响

目的 研究慢性哮喘发展过程中气管壁中肌成纤维细胞的异常分化与胰蛋白酶原16(trypsinogen16,TG16)表达量之间的关系,进一步探索气道基底膜增厚的具体机制.方法 利用SDS-PAGE蛋白电泳分析比较OVA诱导的慢性哮喘小鼠与对照鼠肺总蛋白谱的差异,筛选出差异条带进行质谱分析.对差异条带中的TG16基因从小鼠肺组织中进行克隆和表达,转染体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞同时给予转化生长因子-1(TGF-β1)刺激,RT-PCR分析过表达TG16对细胞机动蛋白α亚型(α-actin)的mRNA水平影响.给予TG16的RNA干扰,利用Western blotting检测TG16的下降对α-actin的表达水平的影响.结果 OVA慢性致敏小鼠的肺组织蛋白TG16含量明显增高;在TGF-β1刺激下,与对照组(α-actin/GAPDH=3.20±1.36)相比,3T3细胞外源表达TG16会明显抑制α-actin的表达(1.78±0.50);同样在TGF-β1刺激下,与转染对照寡核苷酸的3T3细胞(2.78±0.50)相比,应用RNAi干扰抑制TG16表达的同时α-actin的表达显著上调(3.60±0.44).结论 首次发现和证实TG16可以抑制α-actin在成纤维细胞中的表达,这可能是哮喘发展过程中机体本身的一种保护性反应.