早期康复介入对脑损伤幼鼠的行为学及其体内降钙素基因相关肽表达的影响

目的:研究早期康复治疗对缺血缺氧性脑损伤幼鼠的行为学及其体内降钙素基因相关肽表达的影响。方法:将40只15日龄SD大鼠平均分为4组,每组10只,分别为:脑损伤模型组:结扎大鼠左颈总动脉并置于含8%氧气和92%氮气的缺氧环境中,以此作为脑损伤模型;康复治疗组:造模后连续两周给予触摸(20 min/d)、丰富环境刺激(30 min/d)和平衡木训练(30min/d);假手术组:行左侧颈总动脉分离术后不作结扎及缺氧处理;对照组:不做处理。康复治疗两周后对各组大鼠进行平衡木实验、步伐失误实验和Morris水迷宫实验,并测定血浆、脑组织和脊髓中降钙素基因相关肽(CGRP)的含量。结果:与对照组相比,康复治疗组大鼠的平衡木实验评分增加1.6(P0.01),步伐失误率增加8.07%(P0.01),Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期增加18.1s(P0.01),2min内跨越原平台的次数减少6次(P0.01),血浆、脑组织和脊髓中CGRP含量分别增加18.94pg/ml、103.38pg/ml和197.26pg/ml(P0.01);与脑损伤模型组相比,康复治疗组大鼠的平衡木实验得分减少1.8(P0.01),步伐失误率减少15.59%(P0.01),Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期减少10.5s(P0.05),2min内跨越原平台的次数增加4次(P0.05),血浆、脑组织和脊髓中CGRP含量分别减少13.91pg/ml、86.57pg/ml和120.16pg/ml(P0.05)。结论:早期康复介入两周对脑损伤幼鼠的平衡能力、协调能力、学习记忆能力有明显改善,并能增加血浆、脑组织和脊髓中CGRP的含量,但未能恢复到正常水平。     

神经元谷氨酸转运体反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经保护作用

目的:测定神经元谷氨酸转运体(excitaforyaminoacidcarrierl,EAAC1)反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响,探讨脑缺血神经保护新方法。方法:将大鼠分为假手术组、模型组、反义寡核苷酸组(简称反义组)和正义寡核苷酸组(简称正义组),用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Westernblot法、神经功能缺损评分、TTC染色、尼氏染色观察缺血区EAAC1表达和EAAC1反义寡核苷酸对缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响。结果:模型组缺血区EAAC1表达(0.61±0.03)明显高于假手术组(0.20±0.01),差异有显著性意义(F=49.49,P<0.01),而反义组表达(0.31±0.01)低于模型组,差异有显著性意义(F=49.33,P<0.05)。反义组大鼠梗死体积(101.33±15.08)mm3显著小于模型组(140.5±20.27)mm3,差异有显著性意义(F=6.66,P<0.01),反义组大鼠神经功能缺损评分(3.33±0.41)分,显著高于模型组(1.42±0.34)分,差异有显著性意义(F=48.51,P<0.01),海马各区数密度值均高于模型组(P<0.01和P<0.05)。结论:EAAC1反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤有神经保护作用。     

行为学训练对海马梗死大鼠齿状回区神经干细胞分化能力的影响

目的研究行为学训练对海马梗死大鼠齿状回区神经干细胞分化能力的影响。 方法将78只SD大鼠随机分为梗死训练组、单纯梗死组及正常对照组。采用光化学法将梗死训练组及单纯梗死组大鼠制成单侧海马梗死模型,梗死训练组大鼠于造模结束后次日给予水迷宫训练,单纯梗死组大鼠于造模结束后正常饲养,未给予水迷宫训练。采用免疫荧光双标法观察各组大鼠不同时间点海马齿状回区溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）、神经元核心抗原（NeuN）及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的标记情况。 结果正常对照组海马齿状回区可见少量BrdU/NeuN、BrdU/GFAP阳性双标染色;在术后14~35 d期间,梗死训练组及单纯梗死组大鼠海马齿状回区BrdU/NeuN、BrdU/GFAP阳性双标染色均较正常对照组显著增强（均P<0.05）;并且以梗死训练组BrdU/NeuN、BrdU/GFAP的增强幅度较显著,与单纯梗死组比较,组间差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论行为学训练能促进脑缺血大鼠海马神经干细胞向神经元及星形胶质细胞分化,对改善其学习、记忆功能具有重要作用。     

移植神经干细胞对血管性痴呆大鼠的行为学效应

目的:移植神经干细胞于血管性痴呆(vasculardementia,VD)大鼠海马,研究移植后大鼠的行为学疗效。方法:实验于2002-09/2003-12在解放军南京军区福州总医院实验动物中心进行。①利用无血清培养和单细胞克隆技术从新生大鼠脊髓分离具有单细胞克隆能力的细胞群并连续传代培养,获得大量克隆细胞。②永久性结扎大鼠双侧颈总动脉法建立VD模型,结扎后饲养30d,以Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验来检测大鼠的空间记忆能力。③利用脑立体定位技术将5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU)标记后的神经干细胞移植入VD大鼠海马内,饲养8周后以Morris水迷宫来检测大鼠的空间记忆能力。结果:神经干细胞移植后8周,假手术组平均逃避潜伏期为(25.61±3.21)s,痴呆组的平均逃避潜伏期为(53.42±8.26)s,两组比较差异有显著性意义(F=7.82,P<0.01),移植组平均逃避潜伏期(36.93±6.24)s,两组比较差异有显著性意义(F=8.23,P<0.01),移植组平均逃避潜伏期与假手术组相比差异无显著性意义(F=5.77,P>0.05)。痴呆组、移植组及假手术组大鼠在平台象限的平均滞留时间分别为(8.21±2.90),(11.82±3.08),(13.48±3.35)s,痴呆组、移植组比较差异有显著性意义(F=9.76,P<0.01),痴呆组、假手术组比较差异有显著性意义(F=10.21,P<0.01),假手术组、移植组     

帕金森病模型大鼠行为学评价与黑质神经元凋亡的相关研究

目的检测帕金森病(PD)模型大鼠行为学及黑质神经元凋亡的相关指标。方法将6-羟基多巴胺(6-OHDA)通过立体定位仪注入大鼠右侧纹状体制备PD模型,5周后检测行为学指标;酪氨酸羟化酶(TH)组化染色观察各组大鼠右侧黑质神经元形态,Hoechst 33258染色了解其凋亡情况,Western blotting方法检测黑质内caspase-3蛋白表达。结果成功筛选的15只PD模型大鼠在露台Morris水迷宫实验中,与正常对照组及假手术组同侧相比,其寻台速度下降,时间延长(P<0-05);在平衡杆实验中,其潜伏期和过杆时间增加(P<0-05);模型组右侧黑质TH阳性神经元明显减少,该区域凋亡细胞明显增多,且caspase-3蛋白表达显著增高。结论6-OHDA诱导黑质内多巴胺(DA)神经元凋亡与其胞内caspase-3表达增高相关,模型大鼠在露台Morris水迷宫和平衡杆实验中行为学改变与TH免疫组化染色及Hoechst 33258染色结果吻合。     

FK506诱导热休克反应对大鼠脊髓冲击伤的神经保护作用

目的:探讨FK506诱导热休克反应对大鼠脊髓冲击伤的神经保护作用.方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为损伤组和FK506组,FK506组脊髓冲击伤后5 min一次性经尾静脉注射FK506(0.3 mg/kg),损伤组以相同方法给予生理盐水.术后行改良Tadov评分,尼氏染色和热休克蛋白70免疫组化染色.结果:FK506组尼氏染色和行为学评分结果明显优于损伤组(P＜0.05):热休克蛋白70表达在FK506组较损伤组明显增加(P＜0.05),于伤后24 h达高峰.结论:FK506能诱导脊髓冲击伤后热休克蛋白70的高表达而发挥神经保护作用.     

鼻腔内长期输送脐血单个核细胞对大鼠脑梗死体积及行为学的影响

背景:通过鼻腔输送细胞和具有生物活性的因子到大脑内是一种新的非侵入性输送方法,克服了其他给药方法受到血脑屏障限制和产生外周不良反应的缺点。目的:观察鼻腔内长期输送人脐血单个核细胞大鼠脑梗死梗死体积及行为学的变化。方法:直接切断Wistar大鼠一侧大脑中动脉制作脑梗死模型,将神经功能评分相当的模型大鼠,抽签随机分成对照组、单个核细胞组,随即单个核细胞组从鼻腔滴入培养的第3代人脐血单个核细胞,对照组滴入磷酸盐缓冲液,1次/d,共6周,每周进行1次行为学评价;最后1次行为学评价后行脑梗死体积量化检测。结果与结论:与对照组比较,治疗后3周单个核细胞组脑梗死大鼠改良的神经病学严重程度评分开始改善,之后进一步改善到5周(P<0.05,P<0.01);治疗后1～5周单个核细胞组Morris水迷宫实验平均潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01),并且随着时间的延长,效果越明显。与行为学改善相一致,单个核细胞组脑梗死体积(9.15±4.36)%较对照组(30.56±4.65)%显著缩小(P<0.01)。说明经鼻腔早期长期输注单个核细胞治疗大鼠脑梗死能改善其行为能力和缩小脑梗死体积,是治疗脑梗死的一种简便易行治疗方法。     

步长脑心通对改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆行为的作用

[目的]观察步长脑心通对血管性痴呆(VD)模型学习记忆能力的影响.[方法]将50只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、西药(喜德镇)组及步长脑心通组,建立实验动物模型.于制模30 d后分别进行跳台实验及Morris水迷宫实验进行大鼠行为学检测.[结果]模型大鼠行为学发生改变,模型组与正常组比较学习成绩及记忆成绩降低,差异有显著性(P＜0.01).治疗后步长脑心通组与模型组比较学习记忆成绩显著提高(P＜0.05).[结论]本实验研究结果说明VD模型大鼠学习记忆能力明显下降,步长脑心通能改善模型大鼠的学习记忆能力.     

栀子粗提物对拟痴呆模型鼠学习记忆功能障碍的影响

目的观察中药栀子粗提物对Aβ_25-35致痴呆小鼠模型及鹅膏蕈氨酸(IBO)致大鼠记忆获得障碍模型的影响。方法采用Aβ_25-35脑室注射致痴呆小鼠模型及前脑基底核注射IBO致大鼠记忆获得障碍模型,通过Morris水迷宫实验和避暗实验,观察栀子粗提物低、中、高3个剂量组(12-5、25、50 mg/kg)对模型鼠学习记忆功能的影响。阳性药采用多奈派齐(0-75 mg/kg)。结果栀子粗提物3个剂量均可提高Aβ_25-35致痴呆小鼠的Morris水迷宫空间学习记忆能力(P<0-05),中剂量对IBO致记忆获得障碍大鼠水迷宫空间学习记忆能力有明显改善作用(P<0-01);各给药组大鼠受到避暗箱内电击的潜伏期均有所延长,3 min内受到电击的次数均有所减少。结论栀子粗提物有改善拟痴呆模型鼠学习记忆功能的作用。     

高压氧联合复方海蛇胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力行为学的影响

目的:研究高压氧联合复方海蛇胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆能力行为学的影响。方法:成年Sprague-Dawly雄性大鼠40只,体重250—300g,采用线栓法再灌注大脑中动脉梗死建立血管性痴呆大鼠模型,随机分为假手术组、梗死模型组、高压氧组、药物组、高压氧+药物组,每组8只,用高压氧或(和)复方海蛇胶囊干预各模型组4周后,行Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力。结果:①水迷宫平均逃避潜伏期比较,高压氧组(41.15±6.75s)、药物组(44.11±6.05s)和高压氧+药物组(29.32±3.72s)均明显短于梗死模型组(67.05±9.00s)(P<0.05);高压氧+药物组均明显短于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。②平均游泳路程比较,高压氧组(7631.89±1277.73mm)、药物组(8114.48±1091.82mm)和高压氧+药物组(5699.27±1339.82mm)均明显短于梗死模型组(12492.46±2161.74mm)(P<0.05);高压氧+药物组均明显短于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。③跨越原平台位置的次数比较,高压氧组(2.74±0.65次)、药物组(2.25±0.87次)、高压氧+药物组(3.82±0.96次)跨越平台次数较梗死模型组(1.06±0.55次)明显增加(P<0.05);高压氧+药物组明显多于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义(P>0.05)。④平台滞留时间的比较,高压氧组(30.05±3.58s)、药物组(30.24±5.13s)、高压氧+药物组(35.29±3.51s)平台滞留时间较梗死模型组(24.52±4.05s)明显增加(P<0.05);高压氧+药物组明显长于高压氧组、药物组(P<0.05);高压氧组与药物组相比较,其差异无显著性意义。结论:高压氧或复方海蛇胶囊治疗均可改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力,如果二者联合使用治疗,大鼠学习记忆能力改善更为显著。