补肾健脾方对大鼠脾肾两虚型骨质疏松症的治疗作用

目的:深入探讨补肾健脾方对脾肾两虚型大鼠骨质疏松症的治疗作用,并为骨质疏松发生过程中脾肾相关性研究提供实验依据。方法:建立脾肾两虚型大鼠骨质疏松模型,并在此基础上,分别给予阳性对照药、补肾方药、补脾方药及补肾健脾方药进行治疗。给药3个月结束后,采用骨组织形态计量学方法检测反映骨量的指标骨小梁体积百分比(TBV%),反映骨吸收情况的指标骨小梁吸收表面百分比(TRS%)以及反映骨形成情况的指标骨小梁形成表面百分比(TFS%)、类骨质平均宽度(OSW)、骨小梁矿化率(MAR)和骨皮质矿化率(mAR)。结果:与假手术组相比,脾肾两虚模型组大鼠胫骨TBV%显著降低(P0.01),TRS%、TFS%、OSW、MAR和mAR显著增高(P0.01)。与脾肾两虚模型组相比,补肾组、健脾组、补肾健脾组、己烯雌酚组TBV%均显著增高(P0.05,P0.01),TRS%、TFS%、OSW、MAR和mAR均显著降低(P0.01)。与健脾组相比,补肾组及补肾健脾组的TBV%明显增高(P0.05,P0.01),TRS%和TFS%明显降低(P0.05,P0.01);且补肾健脾组对上述指标的逆转较补肾组更为显著(P0.05,P0.01)。结论:健脾法、补肾法和补肾健脾法对脾肾两虚型大鼠骨质疏松症均具有治疗作用,其中补肾健脾法的效果最佳。提示在骨质疏松症的发生过程中,中医的脾肾两脏是密切相关的。     

补肾益肝方对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的:探讨补肾益肝方对骨质疏松症的治疗作用.方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV%、TRS%、TFS%、MAR、OWS和mAR.结果:大鼠切除卵巢后,胫骨TBV%显著降低,TRS%以及TFS%、MAR、OWS和mAR均显著增高,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症.给大鼠灌服补肾益肝方后,能使上述情况发生逆转,即能使TBV%显著增高,使TRS%以及TFS%、MAR、OWS和mAR均显著降低.结论:补肾益肝方对骨质疏松症具有良好的治疗作用.     

“肾主骨”机理研究——左归丸对Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的:从Hepcidin对其下游OPG/RANKL通路调节的角度,初步探讨左归丸对骨质疏松症的作用机理,并为进一步揭示"肾主骨"理论的科学内涵提供实验依据。方法:60只雌性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组12只,假手术组12只,造模组36只共3组,造模组大鼠实行双侧卵巢切除术以制作骨质疏松症模型。造模结束后再将造模组大鼠随机分为OVX组、E2组、左归丸组,每组各12只,开始给予相应药物。给药3个月后,检测大鼠胫骨骨量(TBV%)、骨吸收(TRS%)和骨形成(TFS%、OSW、MAR、mAR)情况;采用原位杂交法检测各组大鼠肝组织中Hepcidin mRNA及胫骨骨髓中Fpn1、OPG及RANKL mRNA的表达。结果:OVX组大鼠胫骨TBV%较假手术组显著降低,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR较假手术组均有显著增高;与OVX组比较,左归丸组的TBV%显著增高,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR水平明显低于OVX组。与假手术组比较,OVX组大鼠肝脏中Hepcidin的mRNA表达强度均明显降低,大鼠胫骨骨髓中Fpn1和RANKL mRNA表达强度则明显增强,OPG mRNA的表达强度明显降低。与OVX组比较,左归丸组的大鼠肝组织中Hepcidin mRNA表达强度明显增高,胫骨骨髓中OPG mRNA表达强度明显增高,Fpn1和RANKL mRNA表达强度则明显下调。结论:左归丸可通过提高Hepcidin水平,增加与受体Fpn1的结合,进而对下游OPG/RANKL信号通路起到一定的调节作用,使OPG表达上调而下调RANKL的表达,从而降低破骨细胞活性,减少骨量丢失,这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。     

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠IL-1和IL-6活性的影响

目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)、骨小梁吸收表面百分比(TRS%)和骨小梁形成表面百分比(TFS%),采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇(E_2)含量,分别采用小鼠胸腺细胞检测法和依赖株细胞增殖反应法测定白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的活性。结果:左归丸能使胫骨TBV%显著增高,使TRS%和TFS%显著降低。大鼠切除卵巢后,E_2含量大幅度降低,而IL-1和IL—6活性显著增高。左归丸对E_2含量无显著性影响,但对IL—1和IL—6活性有明显的抑制作用。结论:左归丸能够抑制IL-1和IL-6的活性是其防治骨质疏松症的机理之一。     

秦皮对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨

目的:初步探讨秦皮治疗骨质疏松症的作用机理。方法:健康雌性SD大鼠40只按随机数字表法分为空白对照组、假手术组各10只、造模组20只,造模组大鼠行双侧卵巢切除术制作骨质疏松症模型,造模结束后再将造模组大鼠按随机数字表法分为模型组和秦皮组各10只,开始给予相应药物。给药3个月后取左侧胫骨检测骨组织形态计量学指标,取右侧胫骨检测大鼠胫骨骨髓中OPG和RANKL的蛋白表达。结果:模型组大鼠胫骨TBV%、胫骨骨髓中OPG蛋白表达显著低于假手术组,而RANKL蛋白表达及TRS%、TFS%、OSW和MAR均明显高于假手术组。与模型组比较,秦皮组大鼠胫骨TBV%、OPG蛋白表达明显增高,但仍显著低于假手术组;而RANKL蛋白表达、TRS%、TFS%、OSW和MAR均明显降低。结论:秦皮对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,其作用途径是对OPG/RANKL通路进行调节,促进OPG蛋白表达而抑制RANKL蛋白表达,从而抑制过度增强的破骨细胞活性,防止骨量的快速丢失。     

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响

目的：探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型。采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比（TBV%），骨小梁吸收表面百分比（TRS%）和骨小梁形成表面百分比（TFS%），采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇（E2），骨钙素（BGP）和降钙素（CT）的含量。结果：左归丸能使胫骨TBV%显著增高，使TRS%和TFS%显著降低，大鼠切除卵巢后，在E2含量大幅度降低的同时。BGP含量明显增加，CT含量明显降低，左归丸对E2含量无显著影响，但能使CT含量增加。使BGP含量降低。结论：左归丸能使CT含量增加是其防治骨质疏松症的机理之一。     

骨质疏松症脾肾两虚型病证结合动物模型的建立

目的:建立骨质疏松症脾肾两虚型动物模型,为中医药治疗骨质疏松症的研究提供工具。方法:采用雌性大鼠卵巢切除法建立肾虚型骨质疏松模型,在此基础上灌胃给予200%大黄浓煎液以建立脾肾两虚型骨质疏松模型,并采用骨组织形态计量学方法检测大鼠胫骨的骨量、骨形成及骨吸收情况以对建立的模型进行验证。结果:脾虚模型组和脾肾两虚模型组大鼠均毛色不光、食量减少、体重下降、行为迟缓、喜聚堆、弓背蜷缩、稀便等与临床脾虚证相似的证候特征。与假手术组相比,肾虚及脾肾两虚模型组大鼠胫骨TBV%显著降低,TRS%、TFS%、OSW、MAR和mAR显著增高,而脾虚模型组则无明显差异。与肾虚模型组相比,脾肾两虚模型组TBV%的降低,TRS%和TFS%的升高更为明显。结论:去卵巢能够造成大鼠肾虚型骨质疏松症,而单纯给予大黄浓煎剂可造成大鼠脾虚但不能导致骨质疏松症。若将去卵巢和灌胃给予大黄2种方法合用,可造成大鼠脾肾两虚型骨质疏松症,且发病程度较单纯去卵巢明显加重。该模型有明显的脾虚证候特征,且其骨质疏松的病理过程与人类绝经后骨质疏松症相似,能反映脾肾两虚型骨质疏松患者的发病特点,具有可行性。     

大补阴丸对去卵巢所致骨质疏松症大鼠骨组织形态计量学指标的影响

目的:观察大补阴丸对去卵巢所致骨质疏松症大鼠胫骨骨组织形态计量学指标的影响,以探讨其对骨质疏松症的作用。方法:将88只雌性Wistar大鼠按随机数字表法分为空白对照组、假手术组、模型组、己烯雌酚组和大补阴丸高、中、低剂量组7组。采用摘除卵巢的方法制作骨质疏松症动物模型,在灌胃给药3个月后,运用骨组织形态计量学方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量。结果:与模型组比较,大补阴丸高、中剂量组TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR、m AR显著降低。结论:大补阴丸对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用。     

壮骨伸筋胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗及其作用机制

目的:研究壮骨伸筋胶囊(Zhuanggu Shenjin capsule,ZGSJC)对去卵巢骨质疏松大鼠的治疗作用,探讨ZGSJC治疗绝经后骨质疏松的机制。方法:将去卵巢大鼠随即分为模型组,阳性药结合雌激素组,ZGSJC高、中、低剂量组(生药5.42,2.71,1.36 g·kg-1),另设假手术组,每组12只。实验结束,取右侧胫骨制作不脱钙骨切片,用于骨形态计量学考察;左侧胫骨提取蛋白后用蛋白免疫印迹法测定Ⅰ型胶原蛋白表达。结果:与假手术比,模型组大鼠骨小梁体积百分率(TBV)显著降低(P0.01),骨小梁吸收表面百分率(TRS),骨小梁形成表面百分率(TFS),骨小梁矿化率(MAR),类骨质平均宽度(OSW),骨皮质矿化率(m AR)显著增高(P0.01),Ⅰ型胶原蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组比,ZGSJC能够显著抑制TBV%的降低(P0.01),抑制TRS,TFS,MAR,m AR的升高(P0.01,P0.05),提高Ⅰ型胶原蛋白表达(P0.01),对OSW则无明显作用。结论:壮骨伸筋胶囊对卵巢切除所致大鼠骨质疏松具有一定的治疗作用,具体体现在调节去卵巢所致的骨代谢高转换状态,能提高Ⅰ型胶原蛋白表达含量。     

乌鸡白凤丸对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态计量学参数的影响

目的:通过比较去卵巢骨质疏松大鼠骨形态计量学参数的变化,以评价乌鸡白凤丸对骨微观结构的影响.方法:实验选择6月龄SD大鼠,采用卵巢切除致大鼠骨质疏松模型,术后将大鼠随机分为假手术组、去卵巢模型组、乌鸡白凤丸低剂量组(1.0 g/(kg·d))、乌鸡白凤丸中剂量组(2.0g/(kg·d))、乌鸡白凤丸高剂量组(4.0 g/(kg·d))及阳性药仙灵骨葆胶囊组(0.6 g/(kg·d)),连续灌胃给药12周.各组动物于处死前16天和前3天分别腹腔注射盐酸四环素进行荧光标记,处死后取左侧胫骨,制作不脱钙骨切片和甲苯胺蓝染色切片,采用Leica Qwin图象分析系统进行骨组织形态参数计量.结果:去卵巢模型组大鼠骨小梁体积百分比(TBV)明显较假手术组大鼠降低(P＜0.01),骨小梁吸收表面百分比(TRS)、骨小梁形成表面百分比(TFS)、活性生成表面百分比(AFS)、骨小梁矿化率(MAR)、骨小梁骨生成率(BFR)、类骨质平均宽度(OSW)、骨皮质矿化率(mAR)均较假手术组大鼠升高(P＜0.01);乌鸡白凤丸(1.0g/kg、2.0 g/kg、4.0g/kg)组大鼠TBV%较去卵巢模型组大鼠升高,TRS、TFS、AFS、MAR、BFR、OSW、mAR较去卵巢模型组大鼠降低.结论:乌鸡白凤丸能纠正骨质疏松骨形态计量学参数的异常,对骨质疏松症具有一定的治疗作用.     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和骨组织形态计量学影响

目的 :以卵巢切除雌性大鼠为模型 ,观察骨碎补总黄酮对骨质疏松模型大鼠的组织形态计量学的影响。方法 :去卵巢制作模型 ,制作不脱钙骨切片及染色 ,采用LeicaQwin图象分析系统进行骨组织形态计量。结果 :对胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组和中剂量组的TBV %明显增高 ;对胫骨骨小梁吸收表面百分比 (TRS % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TRS %显著降低 ;对胫骨骨小梁形成表面百分比 (TFS % ) ,活性生成表面百分比 (AFS % ) ,骨小梁矿化率 (MAR)和骨小梁骨生成率(BFR)的影响 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR较模型组皆明显降低 ;对胫骨类骨质平均宽度 (OSW)和骨皮质矿化率 (mAR)的影响 ,骨碎补总黄酮中剂量组的OSW和mAR与模型组比较 ,明显降低 ;骨碎补总黄酮小剂量组与之相比 ,有下降的趋势 ,但无统计学意义。结论 :给去卵巢大鼠灌服骨碎补总黄酮 6个月后 ,TBV %明显增高 ,TRS %以及TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR ,OSW ,mAR均明显降低 ,表明骨碎补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显的防治作用。     

滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠成骨细胞COX-2蛋白和mRNA表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠成骨细胞COX-2蛋白和mRNA表达影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理。方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组。摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量,采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测成骨细胞COX-2蛋白和mRNA的表达。结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其成骨细胞COX-2蛋白和mRNA的表达皆显著降低。结论:滋阴补肾法对成骨细胞PG的合成具有抑制作用,这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。     

滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理.方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组.摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月.采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达.结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6蛋白和mRNA的表达皆显著降低.结论:滋阴补肾法能使骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达降低,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一.     

补肾健骨方对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血清中TNF-α的影响

目的:探讨补肾健骨方治疗骨质疏松症的机理.方法:切除大鼠的双侧卵巢造成骨质疏松模型.采用骨组织形态汁量学方法对胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用放射免疫分析方法测定大鼠外周血清中TNF-α的含量.结果:切除大鼠卵巢后,胫骨TBV%显著降低,而TRS%以及TFS%、MAR和mAR皆显著增高,表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松模型.而补肾健骨方能使上述指标发生逆转.同时,大鼠外周血清中TNF-α含量显著增高,而该方能使之降低.结论:补肾健骨方对卵巢切除所致的骨质疏松症有明显的治疗作用,而能使TNF-α含量降低是其治疗机理之一.     

补肾方剂对去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

目的:观察补肾方剂预防去卵巢大鼠骨质疏松的作用和作用机理。方法:将大鼠切除双侧卵巢,实验分为假术组、去势组和去势加中药组。另选雌性小鼠,切除卵巢,检测阴道角化上皮细胞阳性率。结果:与假术组比较,去势组胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)明显下降(P<0.01),股骨头、股骨近端和远端骨密度(BMD)明显下降(P<0.05)。去势加中药组使 TBV%上升,股骨头、股骨颈和远端处 BMD 上升,与去势组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。去势小鼠加中药组阴道角化上皮细胞阳性率与去势组小鼠比较无显著差异(P>0.05)。结论:补肾方剂有延缓去卵巢大鼠骨质疏松作用,这一作用不是类雌激素作用的结果。     

五子衍宗丸对去势致骨质疏松大鼠骨形态计量学参数的影响

目的：研究五子衍宗丸对去势致骨质疏松大鼠形态计量学的影响，评价其抗骨质疏松作用。方法：雄性大鼠采用去势致大鼠骨质疏松模型，连续灌胃给药12周，各组动物于处死前16天和前3天分别腹腔注射盐酸四环素进行荧光标记，处死后取左侧胫骨，制作不脱钙骨切片和甲苯胺蓝染色切片，采用Leica Qwin图象分析系统进行骨组织形态参数计量。结果：去势模型组大鼠骨小梁体积百分比（TBV）明显降低，骨小梁吸收表面百分比（TRS）、骨小梁形成表面百分比（TFS）、活性生成表面百分比（AFS）、骨小梁矿化率（MAR）、骨小梁骨生成率（BVR）、类骨质平均宽度（OSW）、骨皮质矿化率（mAR）均升高；五子衍宗丸1．0g／kg、2．0g／k只、4．0g／kg组大鼠TBV较去势模型组大鼠升高，TRS、TFS、AFS、MAR、BFR、OSW、mAR降低。结论：五子衍宗丸能改善骨形态计量学参数，对骨质疏松症具有一定的治疗作用。     

骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将60只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组和骨碎补组5组,每组12只。摘除大鼠双侧卵巢1个月后,灌胃给予骨碎补水煎剂,给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用ELISA方法检测外周血清中IL-1、IL-6、BGP、CT含量。结果:与模型组比较,骨碎补组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR、mAR显著降低;外周血清中IL-1、IL-6、BGP显著降低,CT显著升高。结论:骨碎补对卵巢切除所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,具体体现在调节去卵巢所致的骨代谢高转换状态,能降低外周血清中IL-1、IL-6含量以及提高CT水平是其治疗机理之一。     

左归丸对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中E_2、PTH含量的影响

目的:探讨左归丸对糖皮质激素性骨质疏松症的治疗作用及机理。方法:将42只雌性Wistar大鼠随机分为3组:空白对照组12只,模型组15只,左归丸组15只。造模给药8周后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,并采用ELISA法检测大鼠外周血血清中E2、PTH的含量。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠胫骨TBV%及TFS%显著降低,TRS%显著增高;且大鼠血清中PTH含量显著增高,E2含量则显著降低。而左归丸组大鼠TBV%则显著高于模型组,TFS%亦显著增高,TRS%虽无差异,但有明显降低趋势;且血清中PTH含量显著降低,E2含量较之模型组显著增高。结论:左归丸可使糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中PTH的水平下调,同时上调E2水平,使其紊乱状态基本恢复正常,这可能是其治疗糖皮质激素所致大鼠骨质疏松症的机理之一。     

杜仲、千年健对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨具有温补肾阳作用的单味中药杜仲、千年健对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将72只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组、杜仲组以及千年健组6组。给药3个月后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,免疫组化和原位杂交法检测大鼠胫骨OB和MSC OPG、RANKL蛋白及其mRNA表达。结果:与模型组相比,杜仲组、千年健组胫骨TBV%显著增高,TRS%明显降低,千年健组TFS%、MAR、OSW明显降低,杜仲组无显著性变化;千年健组OB和MSC OPG蛋白及其mRNA的表达显著升高,RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低;杜仲组OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低。结论:千年健不仅可以增加OB和MSC OPG蛋白及其mRNA表达,还能抑制RANKL蛋白及其mRNA的表达,而杜仲是通过抑制OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达达到治疗骨质疏松症作用的。     

电针对骨质疏松大鼠骨量和胰岛素样生长因子的影响

目的 观察电针对骨质疏松大鼠骨量和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的影响.方法 雌性未孕SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、雌激素组、电针组,采用双侧卵巢摘除术复制骨质疏松模型.给予相关治疗方法后,检测各组大鼠骨密度(BMD)、骨矿含量(BMC)和血清中IGF-1的变化.结果 骨质疏松大鼠腰椎和股骨的BMD...