雷帕霉素对大鼠坐骨神经再生作用的实验研究

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)的不同给药时间对大鼠坐骨神经损伤后神经再生和功能恢复的影响。方法健康Wistar大鼠共24只,随机分为4组,制备大鼠右侧坐骨神经挤压伤模型。A组(早期对照组)注射生理盐水,B组(早期用药组)损伤后当即注射雷帕霉素[1mg(/kg.d)],连续应用7d,C组(晚期对照组)注射生理盐水,D组(晚期用药组)损伤后24h注射雷帕霉素[1mg(/kg.d)],连续应用7d,每组各6只。于术后6周进行坐骨神经功能检测(SFI),神经电生理检测及组织形态学观察。结果坐骨神经功能检测(SFI),B组明显优于A组、C组、D组(F=6.51,P0.01)。复合肌肉动作电位(CMAP)的潜伏期(LTP),B组明显慢于A组、C组、D组(F=12.56,P0.01);坐骨神经传导速度(F=20.30,P0.01)和复合肌肉动作电位波幅(F=8.07,P0.01)B组明显优于A组、C组、D组。结论①全身应用雷帕霉素具有神经保护作用,可以加速神经的修复和功能恢复。②早期应用雷帕霉素促进神经再生和功能恢复的效果优于晚期。     

血管生成抑制剂YH-16联合化疗栓塞抑制大鼠移植型肝癌的研究

目的 观察经动脉插管注入血管生成抑制剂YH-16和化疗栓塞联合应用对大鼠移植型肝癌的抑制作用.方法 取大鼠乳腺癌细胞株(Walker 256)转染至肝脏的荷瘤大鼠动物模型,随机分成4组,每组12只.各组具体治疗方案如下:A组:经肝动脉缓慢灌注生理盐水;B组:经肝动脉缓慢灌注超液化碘油;C组:经肝动脉缓慢灌注丝裂霉素+超液化碘油;D组:经肝动脉灌注丝裂霉素+超液化碘油+YH-16,术后10 d观察各组大鼠原发肿块大小并采用免疫组化方法检测肝肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)的表达和肿瘤微血管密度(MVD).结果 B、C、D 3组肝肿瘤的体积均小于A组(均P＜0.05),而D组又小于B、C组(均P＜0.05).B组VEGF的表达以及MVD计数明显大于A组(P＜0.05),A、C2组组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).D组VEGF的表达及MVD计数均明显小于A、C2组(均P＜0.05).结论 经肝动脉灌注血管生成抑制剂YH-16联合经动脉化疗栓塞能抑制移植型肝癌的生长,并对肿瘤组织的微血管数目和VEGF的表达具有显著的抑制作用.     

局部应用重组人生长激素对大鼠烧伤创面血管形成的影响

[目的]观察局部应用重组人生长激素(rhGH)对烧伤创面血管形成的影响.[方法]制作大鼠深Ⅱ度烧伤模型,随机分为4个组,A组局部创面皮下注射给予生理盐水2.00mL,B,C组分别局部创面皮下注射给予rhGH 0.15,0.30U/mL,D组腹部皮下注射给予rhGH 0.30U/mL,各组疗程均为21d.监测各组创面微血管形态和密度计数情况;利用免疫组织化学法检测创面组织中跨膜糖蛋白(CD34)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的活性和含量.[结果]与A组比较,B,C,D组烧伤创面上皮化时间均明显缩短(P<0.05),治疗后1周时B,C,D组创面组织中CD34,VEGF水平均明显升高(P<0.05),且均表现活跃,微血管密度值亦均明显升高(P<0.05).[结论]烧伤创面局部浸润注射给予rhGH可加速烧伤创面新生血管形成,促进创面愈合.     

电针足三里对大鼠腹腔粘连组织微血管生成的影响

目的:研究电针足三里(ST36)对大鼠腹腔粘连组织微血管生成的影响,并探讨其作用机制与胆碱能抗炎通路的关系.方法:将48只雄性Wistar大鼠随机分为6组:A组(模型组)、B组(电针足三里)、C组(迷走神经切断组)、D组(迷走神经切断+电针足三里组)、E组(α-银环蛇毒素组)和F组(α-银环蛇毒素+电针足三里组),每组8只.参考Chiang方法制作大鼠腹腔粘连模型.B组、D组、F组给予连续电针双侧足三里穴3d,每次持续1 h;C组和D组大鼠麻醉后,在无菌条件下切断双侧腹腔迷走神经干;E组和F组大鼠术毕即腹腔注射α银环蛇毒素.各组大鼠于术后第10天处死,剪取盲肠粘连组织切片行HE染色,在奥林巴斯显微镜下观察、拍照.每张切片随机测定5个视野,计算视野内微血管数,取均值作为结果.结果:术后第10天,各组大鼠盲肠组织均出现了不同程度的增厚、挛缩,与周围肠管及肠系膜之间均形成了粗细不等的粘连带.显微镜下,各组盲肠粘连组织均可见增生的微血管,和B组相比,其余各组微血管增生程度较重(P＜0.01).B组盲肠浆膜层微血管数量(20.38±5.40)明显低于A组(45.43±6.27)(P＜0.01);F组与D组盲肠粘连组织微血管数量较B组明显增多(P＜0.01),二者与A组比较无明显差异(P＞0.05).结论:电针足三里对腹腔粘连大鼠粘连组织微血管生成具有明显的抑制作用,从而起到干预大鼠腹腔粘连形成的作用,其机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关.     

非那雄胺对大鼠前列腺增生组织血管内皮生长因子和微血管密度的影响

目的 探讨非那雄胺对大鼠前列腺增生组织血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的影响. 方法 雄性SD大鼠40只,隔日于颈部皮下注射丙酸睾丸酮(连续28 d),建立大鼠前列腺增生模型,之后将大鼠随机分为5组:A组灌胃给予安慰剂,B、C、D、E组灌胃给予非那雄胺,持续时间分别1周,2周,3周,4周.采用免疫组化法检测大鼠前列腺组织中VEGF和MVD的表达. 结果 A组前列腺组织中VEGF的表达和MVD明显高于B、C、D、E组,差异有统计学意义(P<0.05);B组前列腺组织中VEGF的表达和MVD高于D、E组,差异有统计学意义(P<0.05);C组前列腺组织VEGF的表达和MVD高于D、E组,差异有统计学意义(P<0.05);B组前列腺组织中VEGF的表达和MVD与C组比较差异无统计学意义(P>0.05);D组前列腺组织中VEGF的表达和MVD与E组之间比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 非那雄胺可以抑制大鼠前列腺组织中VEGF的表达,降低腺体内微血管密度,并且其抑制程度与非那雄胺的作用时间有关.     

血管化纳米复合材料n-PDLLA/PRGD/HAP/VPA神经导管修复大鼠坐骨神经缺损

目的:探讨血管化复合纳米材料n-PDLLA/PRGD/HAP/VPA神经导管对损伤大鼠坐骨神经再生及修复的效果。方法:将60只SPF级雄性成年SD大鼠随机平均分为4组,均于右侧制备坐骨神经15mm缺损模型。A组:PDLLA/PRGD/HAP/VPA神经导管桥接+局部注射血管内皮生长因子基因(pHVEGF16);B组:单纯PDLLA/PRGD/HAP/VPA神经导管桥接;C组:自体神经移植;D组:硅胶管桥接。术后每隔2周检测坐骨神经功能指数(SFI),每4周检测腓肠肌湿重,3个月后取材并进行神经肌肉电生理、组织学和透射电子显微镜观察等检测。结果:A组大鼠运动功能恢复最快(P<0.05),腓肠肌湿重检测优于B、D组(P<0.05)。术后12周,A组坐骨神经传导速度、轴突计数结果较B、D组好(P<0.05)。A组再生坐骨神经纤维较B、D组排列密集且成熟,接近正常神经组织,脱髓鞘改变和雪旺细胞空泡样改变少见。结论:运用n-HAP/PRGD/PDLLA/VPA复合神经材料导管合并局部注射pHVEGF16对大鼠15mm坐骨神经缺损显示出了良好的神经修复效果,说明此种复合神经材料导管对于损伤神经再生和血管化效果明显。     

参附注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性及神经功能的影响

目的:观察参附注射液(Shenfu injection,SFI)对大鼠脑局灶性缺血再灌注(Ischemic-reperfusion,IR)损伤后血脑屏障(Blood brain barrier,BBB)通透性和神经功能的影响,评价参附注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有无保护作用,为参附注射液的临床应用提供参考.方法:清洁级的SD雄性大鼠80只.随机分为A、B、C、D4个组:A组为假手术加生理盐水处理组,B组为假手术加参附注射液处理组,C组为造模加生理盐水处理组,D组为造模加参附注射液处理组.A、C组于麻醉后5 min经尾静脉注射生理盐水10 ml/kg,B、D组在相同时点给予相同剂量的SFI.随后对C、D两组采用Zea Longa线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉(Middle cerebral artery,MCA)缺血2 h再灌注24 h模型.A、B两组均不作造模处理,其余处理步骤与C、D两组相同.记录各组麻醉后苏醒时间,缺血2 h及再灌注24 h两时间点观察神经功能缺损情况,于再灌注24 h结束时在每组随机选择5只取右侧额顶叶大脑皮质部分电镜下观察血脑屏障超微结构的情况,其余15只大鼠静脉注射伊文思蓝(Evan's blue,EB),对比两组伊文思蓝通过血脑屏障进入脑组织的量.结果:各组间比较,体重差异无统计学意义.麻醉后苏醒时间A、B两组短于C、D两组(P＜0.05),A、B两组之间无差异,C组长于D组(P＜0.05).缺血2 h神经功能缺损评分(Longa score,Longa评分):A、B两组低于C、D两组(P＜0.01),A、B两组之间以及C、D两组之间差异无统计学意义.再灌注24 h后Longa评分:A、B两组低于C、D两组(P＜0.01),A、B两组之间差异无统计学意义,C组高于D组(P＜0.01).C组再灌注24 h Longa评分明显高于缺血2 h(P＜0.01),D组这两个时点比较,差异无统计学意义.缺血2 h,再灌注24h结束时,A、B两组大鼠脑组织内伊文思蓝含量明显低于C、D两组(P＜0.01),A、B两组之间差异无统计学意义,C组明显高于D组(P＜0.05).电镜下,A、B两组大鼠大脑皮质毛细血管周围及管腔未见明显变化.C组大鼠大脑皮质缺血再灌注区毛细血管周围重度水肿,毛细血管管腔明显受压.D组相应区域毛细血管周围轻度水肿,毛细血管轻度受压.结论:参附注射液可减轻局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性升高程度.减轻神经功能受损伤程度,发挥脑保护作用.     

电针“环跳、委中”对大鼠坐骨神经损伤修复作用研究

目的:比较电针环跳穴、委中穴对大鼠坐骨神经损伤的修复作用差异。方法:将健康清洁级SD大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、模型组、委中组、环跳组,每组各8只。钳夹法制备急性坐骨神经损伤模型。委中组、环跳组在模型制备成功后分别电针委中穴、环跳穴,每日1次,每次20 min,连续干预14 d。电针治疗前后均检测坐骨神经功能指数(SFI)与神经传导速度(MNCV),苏木精-伊红(HE)染色法观察坐骨神经病理变化,透射电镜法观察钳夹处坐骨神经超微结构,免疫组化法检测脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果:与假手术组相比,造模各组SFI、MNCV值均明显降低(P0.01);与模型组相比,委中组、环跳组SFI、MNCV值均明显升高(P0.01);且与委中组相比,环跳组SFI、MNCV值升高更明显(P0.05、P0.01)。与假手术组相比,模型组髓鞘厚度明显降低(P0.01);与模型组相比,环跳组和委中组髓鞘厚度明显增加(P0.01)。与假手术组相比,模型组BDNF蛋白阳性表达上调(P0.01);与模型组相比,环跳组、委中组均可增加BDNF蛋白的上调(P0.01);且环跳组比委中组上调幅度增加更明显(P0.01)。结论:电针委中穴、环跳穴均可提高坐骨神经损伤大鼠运动功能及神经传导速度,促进受损神经结构修复,且电针环跳穴提升幅度更大,这可能是电针环跳穴疗效优于委中穴的作用机制之一。     

Effect of Huatan Tongluo Fang on collagen-induced arthritis in rats

目的 观察化痰通络方对胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用.方法 选择牛Ⅱ型胶原为免疫原,建立CIA模型,选取40只造模成功的大鼠随机分为4组:生理盐水组(A组)、化痰通络方组(B组)、甲胺喋呤组(C组)、化痰通络方+甲胺喋呤组(D组),每组各10只,疗程30 d.采用关节炎指数评分(AI)对大鼠关节炎程度进行评分;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、血管内皮生长因子(VEGF),根据滑膜病理评估滑膜炎指数积分.结果 AI评分:A组治疗前后AI明显升高(P＜0.01),C组与D组治疗前后AI明显降低(P＜0.01);B组、C组、D组AI均低于A组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),D组AI低于B组(P＜0.05).血清VEGF、MMP-3检测结果显示:B、C、D组均显著低于A组(P＜0.01);D组显著低于B组(P＜0.05),而B组与C组、C组与D组差异不显著(P＞0.05).滑膜炎指数积分(SMII)评估结果:B、C、D组SMII均低于A组(P＜0.01);D组SMII低于B组(P＜0.05);D组SMII低于C组,C组SMII低于B组,但差异不显著(P＞0.05).结论 化痰通络方能减轻CIA关节炎症;化痰通络方能明显降低血清VEGF、MMP-3水平;化痰通络方与甲胺喋呤(MTX)联合使用可进一步增强疗效.     

PAI-1、u-PA、VEGF、CD34在动脉粥样硬化鼠急性脑缺血中的表达及意义

目的:探讨PAI-1、u-PA、VEGF、CD34在动脉粥样硬化大鼠急性脑缺血中的表达及意义。方法:将大鼠随机分成正常饮食组(A组)和高脂饮食组(B组),分别制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型;观察大鼠神经病学评分,HE染色法检测脑缺血区病理改变,免疫组化法检测缺血区PAI-1、u-PA、VEGF、CD34表达,并应用流式细胞仪计数外周血CD34+血管内皮祖细胞(EPC)。结果:脑缺血后再灌注24h,PAI-1、u-PA、VEGF的表达增高,B组PAI-1、VEGF表达较A组明显,u-PA相反;再灌注48h后,外周血CD34+EPC计数B组(0.89%)较A组(1.11%)降低(P<0.05),脑缺血区CD34+细胞B组也少于A组。结论:PAI-1、u-PA及VEGF高表达促进了动脉粥样硬化的形成并加重急性脑缺血/再灌注损伤,CD34+低表达及EPC减少使血管再生能力降低。     

NGF促周围神经再生过程中对血管生成的影响

目的探讨再生周围神经中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)促血管生成作用及其促血管作用对周围神经再生的影响.方法用单通道的硅胶管桥接75只Wistar大鼠1 cm的坐骨神经缺损,在桥接管内给药,并将它们随机分为4组:生理盐水组(A组)、几丁糖组(B组,医用几丁糖简称几丁糖),NGF 几丁糖组(C组),NGF 几丁糖 抗VEGF组,前3组每组20只,术后7、14、30 d,用免疫组化的方法检测大鼠再生坐骨神经新生血管内皮细胞中CD34、FactorⅧ、VEGF的表达,并作半定量分析.术后14 d,Holmes染色再生坐骨神经纤维.结果生理盐水组、几丁糖组再生坐骨神经中表达的CD34、FactorⅧ、VEGF比较没有显著性差异,NGF 几丁糖组上述三抗原的表达比生理盐水组或几丁糖组有明显增加(P＜0.05),NGF 几丁糖 抗VEGF组再生坐骨神经血管中的CD34和VEGF的表达完全被抑制,FactorⅧ的表达与NGF 几丁糖组相比也显著减少(P＜0.01 46).Holmes染色发现,术后14 d再生坐骨神经纤维数量及排列规则程度:NGF 几丁糖组＞几丁糖组＞生理盐水组＞NGF 几丁糖 抗VEGF组.结论NGF可能通过促进VEGF产生发挥促周围神经再生作用.     

自噬对电针治疗大鼠实验性坐骨神经损伤后神经再生的影响

[目的]研究自噬在电针治疗周围神经再生中的作用。[方法]通过手术造成大鼠实验性坐骨神经钳夹伤模型,采用电针治疗,自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)干预等措施,不同时间点进行坐骨神经功能指数(STI)测定和再生神经组织学观察。[结果]组间比较发现,在实施干预后第7天和第28天,电针联合自噬抑制剂组的SFI比其他各组更差(P0.05)。组内比较发现,模型组、电针组在第1、2、7天时的SFI无差异,均在第28天时出现统计学差异(P0.01);而电针联合自噬抑制剂组在第1、2天时的SFI无差异,但在第7、28天时出现统计学差异(P0.05)且劣于上述各组。另外,再生神经组织的苏木精-伊红(HE)染色切片和镀银染色切片显示,第28天时,电针联合自噬抑制剂组的再生神经组织和神经纤维的连续性和密集程度较其他各组要差。[结论]电针在坐骨神经功能的长期恢复中发挥较大作用。在相同电针情况下,抑制自噬反应对坐骨神经功能恢复和形态改善造成较大负面影响,说明电针可能通过促进细胞自噬来改善坐骨神经功能及组织形态。     

电针少阳经特定穴对偏头痛大鼠血清中NO、ET-1含量及50%PWT的影响

目的观察电针少阳经特定穴对于硝酸甘油(nitroglycerin,NTG)诱导的偏头痛(migraine,ME)大鼠模型血清中一氧化氮(NO)和内皮素(endothelin-1,ET-1)含量及50%缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)的影响,比较电针少阳经特定穴和非经非穴在治疗ME大鼠的疗效差异。方法健康SD大鼠40只,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、电针少阳经特定穴治疗组(C组)和电针非经非穴治疗组(D组),每组10只。B、C、D组按10 mg/kg臀部皮下注射NTG造模,A组臀部皮下注射等量生理盐水。造模后30 min,C组和D组分别行相应电针治疗30 min,测量各组大鼠不同阶段的50%PWT,采用硝酸还原酶法和ELISA分别检测大鼠血清中NO和ET-1含量。结果造模后30 min:与造模前30 min比较,B、C、D组50%PWT显著降低(P0.01)。治疗后30 min:与造模后30 min比较,C、D组的50%PWT显著升高(P0.01);与D组比较,C组50%PWT显著升高(P0.01)。与A组比较,B组大鼠血清中的NO、ET-1的含量显著增高(P0.01);与B组比较:C组大鼠血清中的NO、ET-1含量显著降低(P0.01),而D组大鼠血清中的NO、ET-1含量差异无统计学意义(P0.05);与D组比较,C组大鼠血清中的NO、ET-1含量显著降低(P0.01)。结论电针少阳经特定穴在治疗NTG诱导的ME大鼠模型中,能显著降低大鼠血清中NO、ET-1的含量,提高大鼠50%PWT,疗效明显优于电针非经非穴,该结果为临床应用电针少阳经特定穴治疗偏头痛提供一定的实验依据。     

慢性卡压对大鼠坐骨神经影响的实验研究

目的　探讨慢性卡压对大鼠坐骨神经功能和组织形态学的影响。方法　采用Mackinnon设计的大鼠坐骨神经慢性卡压模型 ,选用SD雄性大鼠制造慢性卡压模型 32只 ,作为卡压组 ;同样手术方法但硅胶管不卡压而取出者 16只 ,作为空白对照组 ;另选 8只不手术 ,作为正常组。空白组和卡压组每周测一次坐骨神经功能指数(SFI) ;空白对照组在造模后 2、4周 ;卡压组在造模后 2、4、6、8周 ;正常组在第 2周分别测定运动神经传导速度(MNCV) ,并取坐骨神经 (卡压组取卡压段神经 )进行组织学观察。结果　第 4周空白对照组的SFI、MNCV已与正常组差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,但卡压组和空白对照组及正常组差异均有显著性 (P <0 0 5 )。组织学观察 :神经卡压后髓鞘先受累 ,首先表现为形态改变 ,之后厚薄变化 ,最后轴索受累 ,第 4周时出现脱髓鞘改变。结论　Mackinnon设计的大鼠坐骨神经慢性卡压模型中存在着牵拉因素对神经的损伤 ;神经慢性卡压的组织学变化规律为髓鞘先受累 ,首先表现为形态改变 ,之后厚薄变化 ,最后轴索受累 ,第 4周时出现脱髓鞘改变     

参红通络颗粒对实验性心肌梗死大鼠VEGF及PDGF表达量的影响

目的观察参红通络颗粒对心肌梗死后大鼠血管内皮生长因子(VEGF)及血小板衍化生长因子(PDGF)表达的影响。方法健康Wistar大鼠正常喂养1周,建立大鼠心肌梗死模型后,随机分为冠心舒通胶囊高、低剂量组(A、B),阳性药物对照组(贝复济与肝素对照组,C),模型对照组(D)及假手术组(E)5组,每组15只。连续给药4周后处死大鼠,取梗死边缘区心肌组织,进行总RNA抽提,RT-PCR法检测心梗边缘区VEGF、PDGF mRNA的表达。结果与E组相比,其他各组VEGF水平明显升高(P0.001);与D组相比,C组、A组和B组VEGFmRNA水平明显升高(P0.05);A组、B组及C组3组组间比较差异有统计学意义(P0.05)。与E组相比,其他各组的PDGF mRNA水平明显升高(P0.05);与D组比较,C组和A组PDGF mRNA水平明显升高(P0.05),且C组PDGF mRNA表达升高水平高于A组(P0.05);B组与D组PDGF mRNA表达水平相当,差异无统计学意义(P0.05)。结论参红通络颗粒可以上调心肌梗死后大鼠心肌局部VEGF、PDGF mRNA表达量。     

电针联合脂肪源性干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注后血管生成的影响

目的探讨电针联合脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cell,ADSC)移植对大鼠缺血再灌注损伤后血管生成的影响。方法将36只成年SD大鼠随机分为模型组、电针组、ADSC组、电针+ADSC组。大鼠大脑中动脉线栓法复制缺血再灌注模型,电针组取大椎穴和内关穴进行电针治疗。ADSC组尾静脉注射PKH26标记的ADSC细胞悬液,电针+ADSC组联合电针和ADSC移植治疗。缺血后7d行神经功能损害评分(neurological severity scores,NSS),采用Western bolt法检测血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应检测血管VEGF mRNA表达,CD34免疫组织化学染色计数微血管密度(microvessel density,MVD)。结果电针+ADSC组海马CA1区PKH26标记的细胞数高于ADSC组(P0.05)。与模型组比较,电针组、ADSC组和电针+ADSC组NSS评分均显著降低,海马CA1区VEGF蛋白和mRNA表达及MVD显著增加(P0.05)。其中电针+ADSC组较电针组和ADSC组NSS评分降低更为显著,海马CA1区VEGF蛋白和mRNA表达水平及MVD计数显著增高(P0.05)。结论电针联合脂肪源性干细胞移植促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复作用优于单独治疗组,其机制可能与电针促进血管生成,改善干细胞生存内环境,促进移植的ADSC迁移和存活有关。     

雷公藤多甙对冷保存坐骨神经雪旺细胞凋亡及免疫原性的影响

目的:观察雷公藤多甙(Tripterygium glycoside,TG)对冷保存大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡和主要组织相容性复合体(Major histocompatibility complex,MHC)表达的影响.方法:Wistar大鼠坐骨神经在0、200、400、800mg/LTG溶液(A、B、C、D组)中,4℃保存24h、3 d、7d,HE染色光镜观察,免疫组化检测Bcl-2表达,TUNEL法检测细胞凋亡.用TG溶液保存24 h的Wistar大鼠坐骨神经桥接对应组SD大鼠(A'、B'、C'、D'组)坐骨神经10 mm缺损,E'组为新鲜异体移植,移植后1、2、4周,行大体及光镜观察,免疫组化检测移植物MHC-Ⅰ、Ⅱ分子表达.结果:冷保存不同时间,各组神经纤维结构正常.保存24 h,各组间细胞凋亡差异无统计学意义(P＞0.05).保存3、7 d时,Bcl-2表达B、C组高于A、D组(P＜0.05),而B组与C组间、A组与D组间差异无统计学意义(均P＞0.05);细胞凋亡A组高于B、C、D组,B、D组高于C组(均P＜0.05),但B、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).移植术后移植物与周围组织粘连、炎症细胞入侵,B'、C'、D'组比A'、E'组轻;移植物MHC-Ⅰ、Ⅱ分子表达,术后第1周出现高峰,同一时相B'、C'、D'组低于A'、E'组,C'、D'组低于B'组(均P＜0.05),但A'与E'组间、C'与D'组间差异无统计学意义(均P＞0.05).结论:一定浓度的TG能抑制冷保存大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡和主要组织相容性抗原表达,降低异体移植后排斥反应.     

联合应用Schwann细胞与同种异体基底膜修复鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 :观察自体Schwann细胞与同种异体基底膜合用促进鼠坐骨神经再生的能力。方法 :将无细胞成分的同种异体基底膜与Schwann细胞混合培养 7d ,获得含Schwann细胞的基底膜。 2 4只BALB/C小鼠随机分为A、B两组并分别移植含有Schwann细胞的基底膜及无细胞成分的基底膜。术后 1,2 ,4,8周测定A、B两组坐骨神经功能指数 (SFI)及再生髓鞘平均厚度 (TRMS)。结果 :术后 1,2周 ,A、B两组SFI及TRMS无差异 (P >0 .0 5 ) ,术后 4,8周 ,A组SFI及TRMS优于B组 (P <0 .0 1)。结论 :自体Schwann细胞与同种异体基底膜合用可较单纯的基底膜更好地促进神经再生及功能的恢复。     

VEGF以明胶海绵为载体可提高糖尿病的大鼠缺血皮瓣成活能力

目的:观察皮瓣下放置携带有血管内皮生长因子(VEGF)的明胶海绵对糖尿病大鼠缺血皮瓣存活能力的影响。方法:60只SD大鼠。15只为对照组(A组),其余45只尾静脉注射STZ,糖尿病大鼠模型,并随机分为3组,每组各15只。均于背部作6cm×1.5cm蒂位于双侧髂棘连线上的全层缺血皮瓣。B组在皮瓣下注射生理盐水,C组皮瓣下注射VEGF生理盐水溶液,D组皮瓣下放置含VEGF生理盐水溶液明胶海绵,原位缝合皮瓣。术后3,7,14d观察缺血皮瓣的成活面积,并进行组织学观察;CD31测定皮下组织中微血管密度(MVD)及CDK4阳性细胞的灰度值。结果:14天时,D组皮瓣的成活面积率明显高于其余组,微血管记数密度D组高于A、C组,A、C组间无差异并高于B组,且于7天时表达量最高。CDK4的灰度值B组明显低于其余组,而C组又低于D组。结论:VEGF的局部应用,可以加速皮瓣内血管再生,从而改善了糖尿病大鼠缺血皮瓣远端的血供状态,尤其采用明胶海绵携带VEGF皮瓣下放置的方法,更能明显地增强糖尿病大鼠缺血皮瓣的成活能力。     

栝楼薤白半夏汤对MIRI大鼠VEGF蛋白、基因表达及MVD影响的实验研究

目的 探讨栝楼薤白半夏汤(GXBD)对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌组织中VEGF蛋白、基因表达及MVD的影响.方法 随机将50只雄性SD大鼠分为假手术组(A组)、模型组(B组)、缺血预处理组(C组)、GXBD低剂量预处理组[D组,4.6 g/(kg· d)]、GXBD高剂量预处理组[E组,18.4 g/(kg·d)].免疫组化方法检测VEGF蛋白表达、MVD,RT-PCR方法检测VEGF mRNA的表达.结果 与A组比较,B、C、D、E组VEGF蛋白与基因表达、MVD增加(P＜0.05);与B组比较,C、D、E组VEGF蛋白与基因表达、MVD增加(P＜0.05);与C组比较,D组VEGF蛋白与基因表达、MVD明显增加(P＜0.01),而E组差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 GXBD能通过上调VEGF蛋白和基因的表达、升高MVD,促进大鼠MIRI后心肌组织的血管新生,形成冠脉侧支,改善血液循环,减轻再灌注损伤.