HPLC-荧光法测定酒女贞子中羟基酪醇、红景天苷和酪醇

摘要：目的 建立一种简单、高灵敏度的HPLC-荧光法同时测定酒女贞子中羟基酪醇、红景天苷和酪醇含量。方法 采用Amethyst C18-P柱,以水-乙腈（92:8）为流动相等度洗脱,激发波长为280 nm,发射波长为310 nm,柱温35℃。结果 羟基酪醇、红景天苷和酪醇在一定浓度范围内线性关系良好,检测限分别可达23.0ng·mL-1,10.5 ng·mL-1,9.82 ng·mL-1,精密度好,准确度高。酒女贞子中羟基酪醇、红景天苷和酪醇的含量范围分别为642.9～867.2 μg·g-1,1932.3～15357.5 μg·g-1,239.1～638.1 μg·g-1。结论 所建立的HPLC-荧光法灵敏度高,选择性好、准确度高,可用于酒女贞子中羟基酪醇、红景天苷和酪醇含量测定。     

女贞子不同产地及采收期苯乙醇苷类成分的含量研究

目的:建立同时测定女贞子药材中酪醇、红景天苷、特女贞苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷含量的高效液相色谱方法,并考察女贞子不同产地及采收期苯乙醇苷类成分的含量.方法:样品经50％甲醇回流提取,采用ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温40℃,以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速...     

HPLC法测定不同生长期女贞子中红景天苷的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定不同生长期女贞子中红景天苷含量的方法。方法:色谱柱为InertsilODS-3C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(13∶87),流速为1mL·min-1,检测波长为222nm,柱温为室温,进样量为20μL。结果:红景天苷检测浓度在11.9～238μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均回收率为99.1%,RSD=1.2%(n=6)。红景天苷在女贞子幼果中(8月)含量最高并随生长期延长逐渐下降,到12月果实成熟时含量最低。结论:不同采收期女贞子中红景天苷的含量不同,故应适时采收。     

女贞子饮片质量评价研究

目的研究建立女贞子饮片质量评价标准。方法以红景天苷和酪醇为对照品进行TLC鉴别,同时进行HPLC含量测定,采用Luna C18柱,流动相:乙腈-0.05%磷酸(3∶97),流速:1.0mL·min-1,检测波长:224nm。结果女贞子酒蒸后TLC图谱有显著差别,红景天苷和酪醇的含量显著增加。结论TLC方法简便、专属性强,HPLC方法测定精密度高、重复性好,为女贞子饮片的质量评价方法提供了试验依据。     

不同干燥条件对女贞子有效成分影响的初步研究

目的采用液质联用(liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS)方法,分析测定不同干燥条件下女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分的含量,为其干燥条件和质量控制提供理论依据。方法采用Hypersll GOLD C_(18)(100 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以甲醇(A)-体积分数0.1%的甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min~(-1),柱温为25℃。结果红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷分别在质量浓度0.38～192.08、0.01～6.95、1.14～574.42、3.59～1 798.25 mg·L~(-1)内呈现良好的线性关系(r≥0.999 4),平均加样回收率(n=6)分别为100.4%、99.91%、99.87%和100.7%,RSD分别为0.5%、1.1%、2.2%和1.0%。不同的干燥方法和不同的干燥温度对女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷和橄榄苦苷4个成分具有一定的影响,不同干燥条件下女贞子中成分含量变化较为明显。结论建立女贞子中红景天苷、木犀草苷、特女贞苷、橄榄苦苷成分的含量测定方法,该方法可以为女贞子干燥条件和质量评价提供理论依据。     

HPLC测定心脑欣滴丸中红景天苷和酪醇含量

目的建立HPLC同时测定心脑欣滴丸中红景天苷和酪醇含量的方法,为科学评价和有效控制心脑欣滴丸提供依据。方法采用WondasiL C18（4.6×250mm,5μm）色谱柱,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL·min-1,检测波长275nm,柱温25℃。结果红景天苷、酪醇均能达到基线分离,线性范围分别为：25~400μg·mL-1（R2=1）,2.7~43.2μg·mL-1（R2=1）,平均回收率分别是99.82%（RSD=1.8%,n=6）,100.57%（RSD=2.5%,n=6）。结论该方法简单、准确度高、重复性好可用于测定心脑欣滴丸中红景天苷和酪醇的含量,可为该药的质量评价提供参考。     

高效液相色谱法测定清新胶囊中红景天苷和酪醇的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定清新胶囊中红景天苷和酪醇含量的方法。方法:色谱柱:安捷仑ZORBAX Stable Bound(50mm×4．6mm,1．8μm);流动相:甲醇-乙腈-水(6．5:3．5:90),流速0．8 ml·min-1,检测波长275 nm,柱温30℃。结果:红景天苷在0．11～1．59μg,酪醇在0．03～0．39μg范围内呈现良好的线性关系,相关系数分别为r1=0．999 9和r2= 0.999 9。平均回收率为红景天苷101．0％,酪醇99.6％,RSD分别为1．2％,2．0％。结论:谈方法简便,快速,结果准确可靠,可用于该制剂质量控制。     

高效液相色谱法测定不同厂家六味地黄浓缩丸中的5种成分的含量

目的:建立一种同时测定六味地黄浓缩丸中丹皮酚、芍药苷、马钱苷、没食子酸、尿囊素5种活性成分含量的方法.比较不同厂家六味地黄浓缩丸的质量差异.方法:应用高效液相法进行测定,流动相为乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱;流速为0.5 mL·min1;检测波长为242 nm;进样量5霯;柱温30℃.结果:10个厂家的六味地黄浓缩丸中,尿囊素含量为0.418 7～0.980 9mg·g1;没食子酸含量为0.894 2～1.641 2 mg·g-1;马钱苷含量为0.9005～1.961 4 mg·g-1;芍药苷含量为0.109 7～0.994 8 mg·g-1;丹皮酚含量为1.212 3～5.957 6 mg·g-1.结论:不同厂家六味地黄浓缩丸存在差异.     

2-氨基磷酸茚和茉莉酸甲酯对高山红景天愈伤组织生长和红景天苷积累的影响

目的考察2-氨基磷酸茚(2-aminoindan-2-phosphate,AIP)和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MJ)对高山红景天愈伤组织生长和红景天苷含量的影响。方法将培养10 d的高山红景天愈伤组织,分别接种在含有不同浓度的AIP和MJ的固体培养基中,每两天取样一次,测定愈伤组织生物量和红景天苷含量的变化趋势。结果 AIP和MJ最佳浓度分别为10μmol.L-1和200μmol.L-1时红景天苷含量达到最大值,分别为6.52 mg.g-1和5.98 mg.g-1,是空白对照组的1.43和1.32倍;愈伤组织中红景天苷的含量均高于野生药材中的含量。结论 AIP和MJ可显著提高红景天苷含量,高浓度的MJ和AIP对高山红景天愈伤组织的生长有抑制作用。     

天山地区红景天属植物根中红景天苷、苷元酪醇和百脉根苷的定量分析

目的:建立高效液相色谱方法测定天山地区红景天属植物根中红景天苷、苷元酪醇和百脉根苷的含量。方法:液相色谱分离系统采用岛津 VP5.0溶剂输送系统,LC10A TVP 自动进样器,PDA 检测器,色谱柱 VP-ODS 4 μm,150 mm×4.5mm,流动相为甲醇-乙腈-水(25:5:70),柱温40℃,分析时间15 min,检测波长275nm,进样量20μL。结果:方法简单、灵敏和精确。3物质的线性范围分别为:0.1714～2.2282 mg·mL~(-1)(r=0.9985),0.2012～2.6156 mg·mL~(-1)(r=0.9996)和0.1922～2.4986 mg·mL~(-1)(r=0.9994);回归方程分别为y=1.885×10~4 5.247×10~5X,Y=-1.284×10~4 7.077×10~5X 和 Y=-1.076×10~4 4.132×10~5X。结论:发现 Rhodiola rosea L.根中含有(44.38±0.7)mg·g~(-1)红景天苷,(16.37±0.9)mg·g~(-1)苷元酪醇和(8.06±0.7)mg·g~(-1)百脉根苷,并生长于相对较低海拔高度,认为是一个较具开发利用前景的目标植物。     

高效液相色谱法测定陕西境内不同产地、不同生长期女贞子中2组分的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定陕西境内不同产地、不同生长期女贞子中齐墩果酸与熊果酸含量的方法。方法:采收陕西境内关中3市(渭南、西安、宝鸡)与陕南2市(安康、汉中)10月产女贞子;并采收西安8、9、10、11和12月产女贞子,去杂质阴干,室温密闭贮藏。色谱柱为LichrospherC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-水-磷酸-三乙胺(50∶30∶20∶0.02∶0.04),流速为1mL.min-1。结果:安康产女贞子中齐墩果酸与熊果酸含量均达到同期最高。不同生长期女贞子在10月份出现齐墩果酸含量最高值;而熊果酸在幼果中(8月)含量最高并随生长期延长逐渐下降。到12月时二者含量均降至最低。结论:女贞子在不同产地、不同生长期齐墩果酸和熊果酸的含量是不同的,故在实际应用时应根据不同需要适时采收。     

HPLC法测定五味子不同炮制品中柠檬酸、L-苹果酸和5-羟甲基糠醛的含量

目的建立五味子不同炮制品中有机酸类成分含量的测定方法。方法采用HPLC法,以甲醇(A)-0.01mol·L-1磷酸二氢钠(B)为流动相;梯度洗脱;流速:0.5mL·min-1;柱温:25℃;进样量:10μL;在检测波长210nm处测定柠檬酸、L-苹果酸、5-羟甲基糠醛中各有机酸单体成分的含量。结果五味子生品、清蒸五味子、醋蒸五味子和蜜蒸五味子中柠檬酸的平均含量分别为172.8,127.1,126.5和117.9mg·g-1;L-苹果酸的平均含量分别为44.28,41.44,42.59和40.44mg·g-1;五味子生品中几乎不含5-羟甲基糠醛,而清蒸五味子、醋蒸五味子和蜜蒸五味子中5-羟甲基糠醛的平均含量分别为2.995,2.405和5.435mg·g-1。实验结果表明,柠檬酸的含量在炮制过程中明显减少;L-苹果酸的含量变化不大;5-羟甲基糠醛从无到有,其中蜜蒸五味子的含量增加最明显。结论有机酸类等成分是五味子饮片物质基础的重要组成部分,应将其与木脂素类成分一起用于五味子饮片的质量评价。     

红景天苷及其苷元酪醇的抗炎、抗肿瘤和免疫调节作用

红景天苷及其苷元酪醇是存在于红景天属、越桔属、杜鹃花属、女贞属等植物中的天然抗氧化剂,通过提高细胞的抗氧化能力,清除活性氧,调控炎性细胞因子表达和抑制炎症介质合成,从而产生抗炎作用和防止癌变的发生。红景天苷能上调几种细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子表达,减少细胞周期蛋白依赖激酶Cdc2和细胞周期蛋白B1表达,使癌细胞周期滞留在G2期,抑制癌细胞生长。红景天苷对非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫均有提高作用,也能对抗免疫抑制剂对骨髓造血功能的抑制。女贞子中的红景天苷和酪醇含量亦很高,因此应加强来源植物女贞子的化学、药理和药效研究。     

白英不同生长期不同药用部位绿原酸与咖啡酸及芦丁含量测定

目的探讨白英不同生长期不同药用部位绿原酸、咖啡酸及芦丁含量,为确定其最合适的采收季节提供理论依据。方法于5,6,7,8,9,10,11月采集白英根、茎、叶、果样品,采用高效液相色谱法测定。色谱条件：Angilent Zorbax ODS C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱前加保护柱;流动相为乙腈 1%醋酸溶液,梯度洗脱;流速：0.6 mL·min－1;柱温：25 ℃;检测波长327 nm。结果白英根、茎、叶、果实等不同部位绿原酸含量均较高,含量符合以下规律：果实＜下部茎＜根＜上部茎＜叶;不同生长周期根、茎中绿原酸：根部位8月达到最高值（2.583 mg·g－1）,下部茎9月达到最大（2.762 mg·g 1）,上部茎中8月达到最大（1.788 mg·g－1）;叶中绿原酸、咖啡酸、芦丁含量均较高,绿原酸在11月叶中达到峰值（8.169 mg·g－1）,咖啡酸在8月叶中达到峰值（0.397 mg·g 1）,芦丁在11月叶中达到峰值（3.777 mg·g－1）。结论白英不同药用部位不同生长期绿原酸、咖啡酸及芦丁含量随着生长发育进程而发生变化,综合考虑,以8～9月枝叶茂盛时采收,有效成分含量最高。     

女贞子抗炎、抗肿瘤和免疫调节作用的研究进展

女贞子是一味著名的补益类中药,《神农本草经》记载其具有补中、安五脏、养精神、除百疾等功效。现代医学认为炎症或免疫功能异常是包括肿瘤在内的许多疾病的病理、生理过程。女贞子具有抗非特异性炎症、抗变态反应性炎症、抗肿瘤及免疫调节作用,红景天苷、酪醇、羟基酪醇、齐墩果酸、熊果酸和多糖是其主要活性成分,因此其具有极高的医药保健价值,经深度研究后可开发为抗炎、抗肿瘤新药。     

女贞子中裂环环烯醚萜总苷的含量测定

目的:建立中药女贞子中活性成分裂环环烯醚萜总苷含量的测定方法。方法:采用碱水解-RP-HPLC法,色谱条件为:Hypersil-C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(20∶80),流速0.4ml/min,检测波长220nm,测定水解前后提取物中红景天苷的含量。通过公式:裂环环烯醚萜总苷含量(%)=(水解后红景天苷含量-水解前红景天苷含量)×694/305×100%,计算出裂环环烯醚萜总苷的含量。结果:红景天苷在1～80μg/ml(r=0.999 9)范围内线性关系良好,浓度为1、40、80μg/ml的红景天苷日内RSD分别为0.40%、0.15%、0.13%(n=5);日间RSD分别为0.47%、0.07%、0.15%(n=5)。稳定性实验的RSD=2.06%,表明红景天苷在24h内稳定;加样回收率为(101.5±5.2)%,RSD为0.05%(n=6)。应用该法测定女贞子中裂环环烯醚萜总苷的含量为10.76mg/g。结论:本法灵敏度高,操作简便,结果准确可靠,可用于女贞子中裂环环烯醚萜总苷含量测定及女贞子药材的质量控制与评价。     

HPLC法测定百咳静颗粒中8个成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定百咳静颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素8个成分的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温45℃,检测波长为215 nm(麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷)、280 nm(甘草苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素),进样量10μL。结果:盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素8个成分的含量测定结果分别为0.312～1.018、0.321～1.175、0.315～0.723、0.876～1.735、0.982～2.604、0.824～9.999、1.635～2.888、0.812～1.661 mg·g-1;8个成分均可实现较好的分离,在拟定的浓度范围内,各成分均有良好的线性关系(r≥0.999);平均回收率97.4%～99.7%,RSD为0.65%～1.5%。结论:本方法简便准确,重复性好,可用于百咳静颗粒的质量控制与评价。     

健肾壮腰力质量标准的研究

目的 建立健肾壮腰丸质量标准.方法 采用TLC对女贞子、金樱子、制何首乌进行鉴别;用HPLC法测定2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量,色谱柱为Shimadzu VP-ODS(150mm×4.6mm×5μm).流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液(15:85),流速为1.OmL·min-1,检测波...     

RP-HPLC柱前衍生化法测定大鼠肾组织中硫酸依替米星的含量

目的:建立测定大鼠肾组织中硫酸依替米星含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱柱前衍生化法,样品处理时加入异丙醇沉淀蛋白,以邻苯二甲醛进行衍生化。色谱柱为Platisil ODS C18,流动相为以水-冰醋酸-甲醇(20:5:75)制备的0.02mol.L-1的庚烷磺酸钠溶液,检测波长为330nm。检测大鼠单次肌肉注射硫酸依替米星2mg.kg-1后第1、2、4天以及连续5d腹腔注射硫酸依替米星60、100mg.kg-1.d-1后肾组织中的药物浓度。结果:肾组织匀浆中硫酸依替米星检测浓度线性范围为1.25～60μg.mL-1(r=0.9973)。肌肉注射硫酸依替米星第1、2、4天肾组织中的药物含量分别为(32.88±3.21)、(37.67±4.93)、(21.63±4.91)μg.g-1;连续腹腔注射60、100mg.kg-1.d-1后肾组织中的药物含量分别为(241.4±158.5)、(386.4±98.3)μg.g-1。结论:所建立的方法操作简单、结果可靠,可用于肾组织中硫酸依替米星的含量测定。