CCl4致大鼠慢性肝损伤模型参数优化及代谢组学评价

目的 研究CCl₄致大鼠慢性肝损伤模型的最佳造模剂量和时间,并进行代谢组学评价。方法 SPF级雄性SD大鼠随机分为6组,即对照组和10%、20%、30%、40%、50% CCl₄组。CCl₄组sc给予不同浓度的CCl₄大豆油溶液,注射体积为2 mL/kg,每周2次,连续8周,对照组给予等体积溶剂油。大鼠于造模0、2、4、6、8周末置代谢笼12 h收集尿液,取出后采用眼球后静脉丛穿刺法取静脉血0.3 mL,常规分离血清;4、6周末各处死3只大鼠,取肝脏;8周末造模后处死大鼠,分离各脏器,称质量计算脏器系数。观察动物体质量、肝脏外观和病理切片、全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）。对10% CCl₄组尿液进行氢核磁共振（¹H-NMR）代谢组学测定,运用SPSS、MatLab7.5、SIMCA-P软件对数据进行分析。结果 对照组大鼠体质量保持增长;随着CCl₄剂量增高,各模型组大鼠体质量增长速度渐趋缓慢。造模8周后,与对照组比较,10% CCl₄组肝脏系数显著升高（P<0.01）,其他组肝脏系数无显著性变化;20%~50% CCl₄组的脾脏、肾脏系数,20%、40%、50% CCl₄组的肺脏系数均显著升高（P<0.05、0.01）。造模4周后,10% CCl₄组大鼠肝脏出现了慢性炎症表现,而20%~50% CCl₄组大鼠肝脏损伤明显,出现明显坏死现象;6周后,造模组大鼠肝脏均出现肝硬化病变。造模组大鼠血清ALT和AST与对照组比较均显著升高（P<0.05、0.01）,且均出现了先升高后降低趋势。代谢组学研究结果显示,造模4周起大鼠尿液与0周可以显著分离。共寻找到差异代谢物15个,6条重要的代谢通路,涉及能量代谢、脂质代谢、氨基酸和核苷酸代谢等途径。结论 慢性肝损伤模型造模剂量以10% CCl₄、2 mL/kg为宜,造模时间以4~6周为宜,代谢组学研究可以动态追踪造模过程。     

马齿苋提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用及其化学成分分析

目的 探究马齿苋乙醇提取物对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用,并对其有效成分进行分析。方法 将80%乙醇马齿苋提取物经离心、减压蒸馏、真空干燥为全草提取物、上清提取物和沉淀提取物。将80只ICR雄性小鼠随机分为8组：对照组、肝损伤模型组、马齿苋全草提取物低剂量组、高剂量组、马齿苋上清提取物低剂量组、高剂量组、马齿苋沉淀提取物低剂量组、高剂量组。经口灌胃去离子水或3种马齿苋提取物不同剂量混悬液1周后,分别皮下注射橄榄油或CCl₄橄榄油溶液,16 h后收集血清,检测小鼠血清ALT、AST、IL-6水平,以评价马齿笕对肝损伤的保护作用。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）技术分析马齿苋的有效成分。结果 与模型组相比,马齿苋全草提取物高剂量组小鼠血清AST、ALT、IL-6水平显著降低;沉淀高剂量组小鼠血清ALT显著降低（P<0.05）,IL-6水平有所降低,但不具统计学意义;其他各干预组小鼠血清AST、ALT、IL-6水平没有显著性变化。应用UPLC-Q-TOF/MS法共鉴别出苹果酸、柠檬酸、亮氨酸、异亮氨酸、腺苷、琥珀酸、染料木素、酪氨酸、苯丙氨酸等15种主要成分。结论 马齿苋乙醇全草提取物对CCl₄急性肝损伤小鼠具有保肝抗炎作用,可能是15种有效成分发挥的联合作用。     

人参茎叶皂甙(SSLG)对实验性肝损伤的影响

SSLG可抑制CCl₄和硫代乙酰胺中毒小鼠SGPT的升高和肝中P-450、RNA及糖元含量的降低。此外,SSLG还能降低中毒大鼠肝中脂肪和羟脯氨酸的含量。对于小鼠的免疫性肝损伤,SSLG仅能使血中LDH-5含量降低,而对血清免疫复合物含量及组织学改变均无影响。SSLG还可诱导正常或中毒小鼠肝脏P-450含量增加及缩短小鼠的戊巴比妥钠睡眠时间,并能促进肝脏排泄BSP的功能。上述结果表明,SSLG对实验性肝损伤具有一定的保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸治疗慢性阻塞性肺疾病患者疗效和作用机制研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床疗效和作用机制。方法将78例COPD患者随机分为治疗组和对照组,观察其治疗前后对痰液炎症细胞计数及核因子-kB(NF-kB)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的影响,以及对临床症状、肺功能指标和血丙二醛(MDA)、全血超氧化物歧化酶(SOD)和血清血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)活性及血内皮素-1(ET-1)含量的变化情况,并与20名健康人作比较。结果78例COPD患者中脱落5例(治疗组3例,对照组2例)。NAC治疗COPD的总显效率为72.50%,总有效率为87.50%,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。与对照组比较,治疗组能明显改善肺功能指标(FEV1、FVC、mPAP)和血MDA、SOD、ACE活性及ET-1含量(P<0.05)。治疗后治疗组痰液中性粒细胞(PMN)、非中性粒细胞(mPMN);IL-8、TNF-α和NF-kB活性(A值)较治疗前显著降低(P<0.01),降低作用优于对照组(P<0.05),治疗期间未见明显毒副作用。结论NAC治疗COPD患者可改善其临床症状和肺功能,安全性良好,通过增强抗氧化能力和减轻COPD患者气道炎症反应而发挥其治疗作用。     

N-乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病患者的治疗作用与影响

目的分析讨论临床对慢性阻塞性肺疾病患者实施N-乙酰半胱氨酸治疗后的临床效果。方法将我院近期内收治的87例慢性阻塞性肺疾病患者随机分为A、B两组,给予A组43例患者实施常规治疗,在A组的治疗基础上给予B组44例患者增加实施N-乙酰半胱氨酸治疗。结果经过治疗后,在血浆肿瘤坏死因子-α、超敏C-反应蛋白等临床指标方面比较,B组患者的改善幅度明显优于A组患者(P<0.05);在肺功能改善情况方面比较,B组患者同样明显优于A组患者(P<0.05)。结论临床对慢性阻塞性肺疾病患者实施N-乙酰半胱氨酸治疗,可以显著的改善患者的肺功能以及各项临床指标,是一种安全、有效的治疗措施,值得临床推广应用。     

基于核因子NF-E2相关因子/血红素氧合酶-1信号通路研究丁苯酞对糖尿病脑小血管病大鼠的作用机制

目的:通过核因子NF-E2相关因子(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路研究丁苯酞治疗糖尿病脑小血管病大鼠的作用机制。方法:将建模成功的糖尿病脑小血管病大鼠随机分为丁苯酞治疗组和模型组,行水迷宫实验,取材后石蜡切片染色、脱水封片,显微镜观察大鼠大脑皮质的组织学结构及该区域神经元细胞的组织病理学改变;应用Western blot法检测脑组织Nrf2/HO-1信号通路中Nrf2和HO-1蛋白表达。结果:水迷宫实验d 1～d 4,与模型组相比,丁苯酞治疗组大鼠定位航行实验逃避潜伏期逐渐缩短。脑组织镜下观察,与模型组相比,丁苯酞治疗组大鼠脑组织细胞排列规则、细胞核饱满圆润、固缩现象减少。Western blot法检测发现,与模型组相比,丁苯酞治疗组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1蛋白表达增高。结论:丁苯酞治疗组大鼠脑组织中Nrf2和HO-1增加,表明丁苯酞可能通过上调抗氧化应激蛋白的表达发挥脑保护作用。     

新型含二硫键和硫酯键的乙酰半胱氨酸衍生物的合成与抗肝损伤活性评价

目的 设计、合成N-乙酰半胱氨酸衍生物,并评价目标化合物对H₂O₂诱导的LO2细胞氧化损伤的保护作用。方法 以L-半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸为起始原料,采用酰氯酯化法合成具有全新结构的乙酰半胱氨酸衍生物;以H₂O₂损伤LO2人肝细胞建立体外氧化损伤模型,利用CCK-8法检测不同浓度H₂O₂对LO2细胞存活率的影响,并检测细胞上清中MDA含量和SOD活性。结果 共合成了6个全新结构的N-乙酰半胱氨酸衍生物,其结构经¹H-NMR、¹³C-NMR、ESI-MS确证,目标化合物能够抑制H₂O₂诱导的LO2氧化损伤,并能够降低MDA含量和提高SOD活性（P<0.01或P<0.05）。结论 本研究快速、高效地合成了N-乙酰半胱氨酸系列衍生物,目标化合物对体外肝细胞损伤具有保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对长烟龄老年慢性阻塞性肺疾病患者的治疗作用

目的 观察N-乙酰半胱氨酸对长烟龄老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者治疗作用.方法 选取烟龄10年以上老年COPD患者58例,随机分为两组,对照组29例给予β受体和胆碱受体阻滞剂、广谱抗生素等常规治疗.治疗组29例在常规治疗的基础上加用N-乙酰半胱氨酸治疗,口服每次600 mg,2次/d,疗程8周.结果 治疗组治疗前后第一秒用力呼吸量(FEV1)(t=2.72,P＜0.05)、用力肺活量(FVC)(t =2.36,P＜0.05)以及治疗组治疗后与对照组组间FEV1(t=2.24,P＜0.05)、FVC(t =2.37,P＜0.05)差异均有统计学意义;治疗组治疗前后痰液干/湿重(t =3.42,P＜0.05)、痰液黏度(t=2.68,P＜0.05)以及治疗组治疗后与对照组组间痰液干/湿重(t =2.24,P＜0.05)、痰液黏度(t=2.18,P＜0.05)差异均有统计学意义.结论 N-乙酰半胱氨酸对长烟龄老年COPD患者肺功能改善显著,具有强力黏液溶解特性.     

小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠联合乙酰半胱氨酸治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效

目的 探讨小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠联合乙酰半胱氨酸治疗慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)的临床疗效.方法 选取南华大学附属长沙中心医院2019年5月—2020年5月收治的慢阻肺患者94例,按照随机摸球法分为对照组和研究组,每组47例.对照组给予乙酰半胱氨酸治疗,研究组在对照组基础上加用小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠治疗.2组均持续治...     

7-羟乙基白杨素对心肌细胞缺氧损伤的保护作用及机制研究

目的 探究7-羟乙基白杨素对心肌细胞缺氧损伤的保护作用及其信号转导机制。方法 将心肌细胞株H9C2传代后随机分为正常对照组(常氧条件培养24 h)、模型组(1%O₂浓度缺氧培养24 h)、白杨素组(1%O₂浓度缺氧培养24 h, 1.0×10^-6 mol·L^-1白杨素处理)、7-羟乙基白杨素组(1%O₂浓度缺氧培养24 h, 1.0×10^-6 mol·L^-1 7-羟乙基白杨素处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况;用WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量;用钼酸铵法测定过氧化氢酶(CAT)含量;用蛋白质印迹法检测血红素加氧酶1(HO-1)、过氧化氢酶(CAT)蛋白表达水平。结果 正常对照组、模型组、白杨素组和7-羟乙基白杨素组的细胞存活率分别为(100.00±4.48)%、(61.95±2.14)%、(86.01±3.60)%和(93.16±2.91)%;SOD活力分别为111.43±3.06、196.12...     

姜黄素对四氯化碳诱导大鼠急性肝损害的保护作用

目的 研究姜黄素对四氯化碳诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制。方法 60只健康♂SD大鼠随机分成6组,即正常对照组,肝损伤模型组,阳性药物对照水飞蓟素组（100 mg·kg^-1）,姜黄素低剂量组（25 mg·kg^-1）,姜黄素中剂量组（50 mg·kg^-1）和姜黄素高剂量组（100 mg·kg^-1）。隔天灌胃给药,共30 d;末次给药1 h后,腹腔注射20 mg·kg^-1 CCl₄玉米油溶液（2 mL·kg^-1）造模,禁食不禁水,12 h后乌拉坦麻醉。取下腔静脉血和肝脏后,分别检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（AST）及天门冬氨酸氨基转移酶（ASL）的活性,大鼠肝脏组织中血红素加氧酶Ⅰ（HO-1）及静脉血中HbCO的水平,在体外测定姜黄素清除DPPH自由基及ABTS自由基的能力。结果 与正常对照组相比,模型组血清中ALT、AST活性显著升高,肝组织中HO-1活性及静脉血中HbCO的含量显著降低,组织病理检查显示肝组织损伤明显增加。与模型组相比,姜黄素各剂量组可不同程度的降低血清AST及ASL的活性,增加肝脏组织中HO-1的活性及HbCO的水平,组织病理检查显示肝损伤有不同程度减轻。并且姜黄素具有清除DPPH自由基及ABTS自由基的能力。结论 姜黄素对CCl₄诱导的大鼠急性肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与其自身抗氧化能力及诱导HO-1及HbCO有关。     

辣椒素对四氯化碳致大鼠急性肝损伤的影响

目的 探究辣椒素对四氯化碳所致急性肝损伤的影响。方法 30只SD大鼠随机分为5组：对照组、模型组、辣椒素低、中、高剂量组,每组6只。除对照组外,其他4组大鼠腹腔注射5 ml·kg^-1 25%四氯化碳溶液进行急性肝损伤造模,辣椒素低、中、高剂量组分别给予腹腔注射辣椒素1.0,2.0,5.0 mg·kg^-1,对照组和模型组腹腔注射等量花生油,连续5 d;末次给药1 d后,取大鼠肝脏和血清,并测定各组血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和肝组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量。结果 辣椒素组血清中的ALT和AST显著低于模型组（P<0.05）,而CAT酶活性显著高于模型组（P<0.05）;中、高剂量辣椒素组肝组织中的SOD酶活性显著高于模型组（P<0.05）,而MDA含量显著低于模型组（P<0.05）;低剂量辣椒素组SOD酶活性也有升高趋势、MDA有降低趋势,但两者与模型组相比没有显著性差异。结论 辣椒素对四氯化碳所致急性肝损伤大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与氧化应激有关。     

鲨肝肽对CCl4所致大鼠慢性肝损伤的治疗作用

从海洋生物鲨鱼肝脏纯化获得一种活性多肽—鲨肝肽,研究了其对CCl     

水飞蓟宾自乳化制剂对CCl4所致肝损伤的保护作用

目的 探讨水飞蓟宾自乳化制剂对CCl₄所致急性肝损伤的保护作用。方法 以CCl₄所致小鼠急性肝损伤为模型,以生理盐水为阴性对照,以联苯双酯为阳性对照,以水飞蓟宾混悬剂为参比,以血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性及肝脏病理组织切片检查为指标,对比研究水飞蓟宾自乳化制剂对CCl₄所致急性肝损伤的保护作用。结果 水飞蓟宾自乳化制剂能显著的抑制CCl₄所致的血清ALT和AST活性升高,使肝脏中的GSH-PX维持在正常水平,保护肝脏并避免其发生严重病变。结论 水飞蓟宾自乳化制剂对CCl₄所致急性肝损伤有保护作用。     

白头翁皂苷B4对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病的治疗作用及其机制研究

目的 考察白头翁皂苷B₄对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的炎症及免疫相关指标的影响,探讨其对小鼠银屑病的治疗作用及其机制。方法 将56只BALB/c小鼠随机分成对照组,模型组,阿维A胶囊组（6 mg/kg）,白头翁皂苷B₄低、中、高剂量（5、10、20 mg/kg）组,白头翁皂苷B₄乳膏组（20 mg/kg）,每组各8只。通过局部涂抹5%咪喹莫特乳膏诱导小鼠银屑病模型,各组小鼠口服或涂抹相应药物,14 d后通过银屑病皮损面积及严重程度评分（PASI）评价小鼠皮损程度;HE染色观察皮肤组织病理学形态;血常规检测血液中免疫细胞的变化;酶联免疫吸附试剂（ELISA）检测小鼠皮肤中白细胞介素（IL）-6、IL-12、IL-17、IL-1β的水平。结果 与模型组相比,阿维A胶囊组,白头翁皂苷B₄ 5、10、20 mg/kg组,白头翁皂苷B₄乳膏组小鼠皮损组织棘层厚度减小,真皮层炎症细胞浸润减少,PASI评分、血液中的免疫细胞及皮肤组织中IL-6、IL-12、IL-17、IL-1β的表达水平均显著降低。结论 白头翁皂苷B₄对5%咪喹莫特诱导小鼠银屑病皮损具有明显的治疗作用,其机制可能是通过抑制IL-6、IL-12、IL-17、IL-1β等细胞因子表达发挥治疗作用。     

基于Nrf2/Keap1信号通路探讨金盏银盘水提液对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠抗氧化应激作用

目的 探究金盏银盘Bidens biternata(Lour.)Merr.&Sherff.水提液对四氯化碳诱导的急性肝损伤改善作用及其机制。方法 将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟素（0.15 g/kg）组和金盏银盘低、高剂量（3.9、7.8 g/kg）组,每组12只。各组小鼠连续ig给予相应药物7 d,末次给药后除对照组外均ip 0.4%四氯化碳构建急性肝损伤小鼠模型。24 h后收集小鼠血清及肝脏组织。用生化试剂盒检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量,并取肝组织匀浆检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。采用苏木精–伊红染色（HE）切片观察小鼠肝脏病理变化。Western blotting测定肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、抗体Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白的表达情况。结果 与模型组比较,金盏银盘水提液组小鼠组织病理学观察发现肝脏炎症细胞浸润明显减少,血清AST、ALT、MDA水平降低,血清SOD和肝组织GSH-Px活性...     

二至丸水提物对体外肝细胞损伤的保护作用

目的研究二至丸水提物（aqueous extract of Erzhi Pill,AEEP）对体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法培养L-O2型肝细胞,采用H2O2和CCl4体外分别诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶（AST）和丙氨酸氨基转换酶（ALT）水平,测定上清液中丙二醛（MDA）的含量和过氧化物岐化酶（SOD）活力,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果①AEEP（0.32~40μg/ml）剂量组可明显降低由H2O2升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量,还可提高H2O2降低的肝细胞存活率和SOD活力;②AEEP（0.32~40μg/ml）剂量组可使CCl4升高的肝细胞培养上清液中ALT和ALT水平及MDA含量明显降低或恢复,还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和SOD活力。结论提示AEEP对体外肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

Antioxidant effects of the chestnut (Castanea crenata) inner shell extract in t-BHP-treated HepG2 cells,and CCl4- and high-fat diet-treated mice

The antioxidant effects of chestnut inner shell extract (CISE) were investigated in a tert-butylhydroperoxide (t-BHP)-treated HepG2 cells, and in mice that were administered carbon tetrachloride (CCl₄) and fed a high-fat diet (HFD). Pre-incubation with CISE significantly blocked the oxidative stress induced by t-BHP treatment in HepG2 cells (P < 0.05) and preserved the activities of catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and glutathione reductase compared to group treated with t-BHP only. Similarly, the CCl₄- and HFD-induced reduction of antioxidant enzymes activities in liver was prevented by CISE treatment compared to control groups. Furthermore, hepatic lipid peroxidation were remarkably lower (P < 0.05) in the CISE-treated groups with t-BHP or HFD. To determine the active compound of CISE, the fractionation of CISE has been conducted and scoparone and scopoletin were identified as main compounds. These compounds were also shown to inhibit the t-BHP-induced ROS generation and reduction in antioxidant enzyme activity in an in vitro model system. From these results, it was demonstrated that CISE has the ability to protect against damage from oxidative stressors such as t-BHP, CCl₄ and HFD in in vitro and in vivo models. The CISE might be useful for the prevention of oxidative damage in liver cells and tissues.     

PKC-ERK1/2通路在臭氧预处理减轻大鼠肝缺血再灌注损伤的作用

目的 探讨PKC介导的ERK1/2信号通路在臭氧（ozone,O₃）预处理大鼠肝缺血再灌注中的作用。方法 60只大鼠随机分成6组：对照组、缺血再灌注组、O₃预处理组、O₃预处理+ERK抑制剂组（O₃+PD98059组）、O₃预处理+PKC抑制剂组（O₃+CHE组）、缺血再灌注+PKC激活剂组（IR+PMA组）。除对照组外,其余各组均进行肝缺血再灌注手术。O₃相关组予O₃预处理,调节剂组予相应的调节剂。分别检测各组的血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转氨酶水平,进行病理学观察,Western blotting检测肝组织中的热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）、蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）和细胞外调节蛋白激酶1/2（extracellular regulated protein kinases,ERK1/2）的表达水平。结果 与对照组相比,缺血再灌注组肝组织细胞损伤明显加重（P<0.05）,肝组织中PKC、ERK1/2的磷酸化和HSP70的表达水平明显升高（P<0.05）。与缺血再灌注组相比,O₃相关组肝组织细胞损伤明显减轻（P<0.05）,肝组织中PKC、ERK1/2的磷酸化和HSP70的表达水平明显升高（P<0.05）。与O₃预处理组相比,当使用PKC和ERK1/2抑制剂后,肝组织细胞损伤明显加重（P<0.05）,肝组织中PKC、ERK1/2的磷酸化和HSP70的表达水平明显降低（P<0.05）。结论 O₃氧化预处理可通过激活PKC介导的ERK1/2信号通路,使HSP70的表达水平明显增加,使大鼠肝脏缺血再灌注损伤明显减轻。