复发性流产患者主动免疫治疗后淋巴细胞免疫表型的变化

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)患者行淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)后淋巴细胞免疫表型的变化对治疗效果的评估价值。方法采用流式细胞术分析URSA患者LIT前后外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞和调节性T细胞免疫表型的变化(P0.05)。结果 25例URSA患者经LIT后成功妊娠16例,治疗后所有URSA患者(n=25)和妊娠成功组(n=16)外周血CD3+T细胞、CD4+HLA-DR+T细胞比例较治疗前均明显增加,CD4+T和CD3-CD56+NK细胞比例明显降低(P0.05);而治疗前后B细胞和Treg细胞、CD56bright CD16-NK、CD56dimCD16+NK、CD3+CD56+NKT及CD69+NK细胞比例则无明显变化(P0.05)。结论 LIT后外周血T细胞、NK细胞的比例发生了明显变化,CD4+T细胞、CD3-CD56+NK细胞比例降低和CD3+T细胞、活化CD4+T细胞增加也许有利于维持妊娠,T细胞和NK细胞的免疫表型有望作为LIT疗效评估的一个重要指标。     

蜕膜自然杀伤细胞与不明原因反复自然流产的关系

目的通过测定子宫蜕膜自然杀伤(NK)细胞亚群及其杀伤活性,探讨其在不明原因反复自然流产(URSA)发病中的作用。方法随机选取确定URSA的患者10例为实验组,选取15例正常妊娠(NP组)为对照,采用流式细胞仪检测两组蜕膜组织NK细胞亚群,MTT还原法测定NK细胞杀伤活性。结果URSA组蜕膜中CD56+NK细胞含量显著高于NP组(P<0.01),且URSA组CD56+CD16+细胞亚群含量及CD56+CD16+/CD56+CD16-比值也较NP组显著升高(P均<0.01),而CD56+CD16-细胞亚群含量两组比较无差异(P>0.05)。蜕膜NK细胞活性URSA组为(31.60±2.62)%,而NP组仅为(15.65±2.02)%,两组蜕膜NK细胞活性有显著差异(P<0.01)。结论URSA的发生可能与NK细胞亚群失衡及杀伤活性异常增高而导致母胎间的免疫耐受平衡被打破有关。     

早孕期蜕膜免疫细胞谱及其与妊娠结局的相关性

目的探讨早孕期蜕膜免疫细胞谱变化及稽留流产对妊娠免疫细胞谱的影响。方法选取2017年9月至2018年9月深圳中山泌尿外科医院收治的行人工流产的正常早孕患者(人工流产组,n=34),行清宫术的稽留流产患者(稽留流产组,n=17)及同期于本院IVF助孕成功的正常妇女(正常内膜组,n=27)作为研究对象。运用免疫组化及数字化分析系统定量检测正常妇女子宫内膜及流产组蜕膜组织中各免疫细胞的检测阳性率。结果早孕期妊娠前后的免疫细胞谱有如下改变:妊娠早期人工流产组蜕膜CD56⁺自然杀伤(NK)细胞、CD68⁺巨噬细胞、CD83⁺成熟树突状细胞数均显著高于正常内膜组(P<0.001),而CD8⁺T细胞、Foxp3⁺调节性T(Treg)细胞及CD1a⁺未成熟树突状细胞在两组之间则无显著差异(P>0.05)。在不良妊娠结局稽留流产组患者蜕膜组织中CD68⁺巨噬细胞、CD8⁺T细胞及Foxp3⁺调节性T(Treg)细胞数均显著高于人工流产组(P<0.05),而CD56⁺自然杀伤(NK)细胞、CD83⁺成熟树突状细胞及CD1a⁺未成熟树突状细胞与人工流产组相比无显著差异(P>0.05)。结论早孕期蜕膜中NK细胞、巨噬细胞及成熟树突状细胞的适度增加有利于母胎免疫耐受的形成,但异常高表达的蜕膜巨噬细胞、CD8⁺T细胞及Foxp3⁺Treg细胞可能与不良妊娠结局有关。     

胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞的检测及其临床意义

目的 研究胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞含量,并探讨其含量与肿瘤的临床病理类型及临床分期的相关性.方法 应用流式细胞仪分析胰腺癌患者和健康对照组外周血中CD4-CD8-T细胞含量.结果 20例胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.13±1.81)%;20例健康对照组CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(6.39±1.83)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).高、中分化的胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.41±1.66)%;低分化胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞比例为(4.18±2.32)%,两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(2.96±1.50)%;Ⅰ、Ⅱ期胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(5.09±1.50)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 CD4-CD8-T细胞在胰腺癌中低表达,可能促进胰腺癌进一步发生发展.     

丙泊酚与七氟醚对舌癌根治术患者NK细胞和B淋巴细胞的影响

目的比较丙泊酚与七氟醚对舌癌根治术患者外周血NK细胞和B淋巴细胞的影响。方法选择择期行舌癌根治术患者40例,男25例,女15例,年龄44~67岁,ASAⅠ或Ⅱ级。随机分为两组:丙泊酚组(P组)和七氟醚组(S组),每组20例。P组采用丙泊酚2.0~2.5mg/kg、瑞芬太尼1~2μg/kg、顺苯磺酸阿曲库铵0.15mg/kg静脉麻醉诱导,丙泊酚4~6mg·kg-1·h-1及瑞芬太尼0.2~0.3μg·kg-1·min-1静脉输注维持麻醉;S组采用8%七氟醚、新鲜气体流量5L/min吸入,瑞芬太尼1~2μg/kg、顺苯磺酸阿曲库铵0.15mg/kg静脉注射诱导,瑞芬太尼0.2~0.3μg·kg-1·min-1静脉输注及2%~3%七氟醚吸入维持麻醉。分别在麻醉诱导前30min(T0)、麻醉后1h(T1)、3h(T2)、5h(T3)、手术结束时(T4)、手术结束后24h(T5)、48h(T6)、72h(T7)采集外周静脉血,采用流式细胞仪测定外周血NK细胞(CD3-CD16+56+)及B淋巴细胞(CD3-CD19+)百分比。结果与T0时比较,T1~T5时两组CD3-CD16+56+和CD3-CD19+百分比明显降低(P0.05),T6时S组CD3-CD16+56+百分比明显降低(P0.05);T2~T6时S组CD3-CD16+56+百分比明显低于P组(P0.05),两组各时点CD3-CD19+百分比差异无统计学意义。结论与七氟醚比较,丙泊酚可维持较高的NK细胞百分比,有利于维持舌癌根治术患者免疫功能。     

肾移植术后外周血自然杀伤细胞的CD158b表达及意义

目的探讨肾移植术后外周血自然杀伤细胞(NK细胞)的CD158b表达及意义。方法测定62例患者肾移植前、术后第1d、术后第7d、肾功能正常时以及疑有排斥反应时外周血NK细胞的CD158b表达水平。结果62例中,术后38例肾功能恢复正常,观察期内无排斥反应发生,移植前后外周血CD3-CD16/CD56 细胞(NK细胞)及CD3-CD16/CD56 CD158b 细胞稳定,NK细胞中CD158b 细胞的比例也稳定;24例术后7～14d发生急性排斥反应,其外周血CD3-CD16/CD56 细胞呈上升趋势,CD3-CD16/CD56 CD158b 细胞呈下降趋势,NK细胞中CD158b 细胞的比例也呈下降趋势,经单因素方差分析,各指标在不同测定时点的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论干扰NK细胞表达CD158b的因素较少,在临床上做出排斥反应诊断前,患者外周血中NK细胞的CD158b表达即呈下降趋势,因此术后监测NK细胞的CD158b表达可为评价患者的免疫状况提供依据。     

原发性肝癌患者肝切除术前、后免疫细胞表型分析

目的研究原发性肝癌(PrimaryLiverCarcinoma,PLC)患者肝切除术前、后免疫细胞表型的变化。方法采用直接免疫荧光标记,流量血细胞计数法(FlowCytometry,FCM)检测方法,动态观察120例PLC患者肝切除术前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞和HLA鄄DR含量变化。结果肝切除术前肝功能Child鄄PughB级、OGTTL型和术前施行肝动脉栓塞化疗患者外周血CD8+T细胞含量明显低于正常人组,CD4+/CD8+比值则较高(P<0郾05)。全部肝癌患者肝切除术前、后CD3+CD4+T细胞和NK细胞(CD3-CD16+CD56+)含量无明显差异。术后第1天、第3天、第7天和第2周外周血淋巴细胞CD3+CD8+含量明显低于肝切除术前和术后第3周(P<0.01);而CD4+/CD8+比值则显著高于肝切除术前和术后第3周(P<0郾01)。结论PLC合并肝硬变肝储备功能不足、术前肝动脉栓塞化疗和肝切除术可导致机体细胞免疫功能低下,PLC患者肝切除术前行肝动脉栓塞化疗的价值有待深入研究。     

原发性肝癌患者体内的CD4+CD25+ T细胞变化及其意义

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者体内CD4+CD25+T细胞变化的及其意义。 方法:实验分HCC组（n=20）与正常人对照组(n=10)，采用免疫荧光标记法，流式细胞仪分离出外周血CD4+CD25+T细胞，分析两组CD4+CD25+T细胞所占T细胞的比例。计算并比较癌组织与癌旁组织中CD4+CD25+T细胞所占T细胞的比例。结果:HCC组机体的CD4+CD25+T 细胞比例为(19.3±3.0) %，明显高于对照组(5.2±1.6) % (P<0.05)。癌组织中CD4+CD25+T 细胞比例为(6.5±2.9) %，癌旁组织中CD4+CD25+T 细胞比例为(5.8 ±2.1) %， (P>0.05)。结论:原发性肝细胞癌患者机体免疫功能降低的原因之一可能是外周血CD4+CD25+T 细胞数明显增加。     

蜕膜CXCR6~(+/-)单核-巨噬细胞在人早孕期母胎界面的表型差异

目的分析正常早孕期和不明原因自然流产妇女蜕膜组织中CXCR6~+单核-巨噬细胞比例及表型差异。方法收集上海复旦大学附属妇产科医院门诊手术室正常早孕期(40例)和不明原因自然流产(20例)妇女的蜕膜组织,分离蜕膜免疫细胞群,采用流式细胞术分析正常早孕组及不明原因自然流产组蜕膜免疫细胞中单核-巨噬细胞所占比例的差异;比较两组妇女蜕膜单核-巨噬细胞(dMΦ)表面CXCR6~+、CD80、CD206的表达差异。结果不明原因自然流产组CD14+dMΦ在蜕膜免疫细胞群(DIC)中所占比例为(9.9±1.63)%,正常早孕期组CD14+dMΦ在DIC中所占比例为(8.9±0.88)%,两组差异并无显著性(P0.05);正常早孕组CXCR6~+在dMΦ的表达率为(40.0±1.90)%,而不明原因自然流产组表达率为(31.22±2.38)%,二者比较有显著差异(P0.05);正常早孕组CD206、CD80在CXCR6~+dMΦ中的表达均显著高于CXCR6~-dMΦ(P0.05),不明原因自然流产组CD206在CXCR6~+dMΦ的表达显著高于CXCR6~-dMΦ(P0.01),CD80并无显著变化(P0.05);与正常早孕组相比,不明原因自然流产组CD206在CXCR6~(+/-)dMΦ中的表达均显著降低(P0.05),CD80在CXCR6~-dMΦ中表达则显著升高(P0.05),在CXCR6~+dMΦ中的表达无显著差异(P0.05)。结论不明原因自然流产妇女中,蜕膜单核巨噬细胞数量并无显著的变化,CXCR6~+dMΦ、表面分子CD206的表达明显降低及CD80的表达明显升高,提示CXCR6~+dMΦ可能参与了自然流产的发病机制。     

反复自然流产患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)在反复自然流产发病机制中的作用。方法:应用流式细胞术检测29例原因不明的反复自然流产妇女(URSA组)和20例正常妊娠妇女(正常对照组)外周血中CD4+CD25+Tr的比例。结果:URSA组外周血中CD4+CD25brightTr百分率[(1.98±0.96)%]显著低于正常对照组[(3.21±1.25)%,P<0.05],而2组间CD4+CD25+总百分率、CD4+CD25dim细胞百分率以及CD4+CD25bright/CD4+比值均无显著性差异(P均>0.05)。结论:URSA的发生可能与患者CD4+CD25brightTr比例下降有关,CD4+CD25brightTr在母胎免疫耐受中发挥重要作用。     

异体手移植术后淋巴细胞亚群的早期监测

目的异体手移植术后患者外周血淋巴细胞亚群的变化和通过CD+3细胞数量的监测指导抗胸腺细胞球蛋白（antithymocyteglobulin,ATG）的用量。方法提取患者的外周血细胞，加入三荧光和双荧光标记的鼠抗人单克隆抗体CD     

Lymphocyte subsets in renal allograft recipients with chronic hepatitis C virus infection.

BACKGROUND: The pathogenetic mechanisms of chronic hepatitis C virus (HCV) infection in renal allograft recipients are not well established. This study aimed to examine the relationship between altered immune status and HCV-related liver disease, by determining the changes in peripheral blood lymphocyte and natural killer (NK) cell subsets in these subjects. METHODS: Peripheral blood lymphocyte, NK cell and activation markers were detected by flow cytometry in renal allograft recipients with (TpC+) or without (TpC-) HCV infection, and compared with age- and sex-matched patients with post-transfusional chronic HCV infection (TfC+) and healthy controls. RESULTS: CD19+ cells were reduced in renal allograft recipients compared with controls. TpC+ subjects had increased CD3+CD8+ cells compared with controls, and increased CD3+DR+ cells but reduced CD4+ CD38+ and CD3-CD16/56+ cells compared with controls as well as TfC+ patients. TfC+ patients and controls had similar numbers and proportions for the lymphocyte subsets and NK cells. Chronic liver disease in HCV-infected renal allograft recipients was associated with increased CD3+CD16/56+ cells but reduced CD4+CD38+ cells. Reduction of CD3-CD16/56+ cells was noted in TpC+ subjects without liver disease. Yet among post-transfusional (TfC+) subjects this was associated with chronic hepatitis. CONCLUSIONS: Peripheral blood suppressor/cytotoxic T lymphocytes are increased, whereas activated helper/inducer T lymphocytes and NK cells are reduced, in renal allograft recipients with HCV infection. Increased non-MHC-restricted cytotoxic T cells and reduced NK cells are associated with the presence or absence of liver disease respectively. These data suggest that immune mechanisms are important in the pathogenesis of chronic hepatitis C after renal transplantation.     

儿童肾病综合征T细胞亚群检测的临床意义

目的：探讨儿童原发性肾病综合征（NS）T细胞亚群检测的临床意义。方法：对25例NS活动期和缓解期患儿应用流式细胞仪检测T2细胞亚群的变化。结果：NS活动期组CD3^ ,CD4^ ,CD4^ /CD8^ 比值，NK[CD(16 56)]^ 细胞均明显低于缓解期组（P＜0．01）和对照组（P＜0．01）。结论：说明NS细胞免疫功能减低，T细胞亚群检测可作为肾病综合征活动指标之一。     

肺腺癌A549细胞CD133~+CD44~+表型在裸鼠体内成瘤能力的研究

目的 探讨肿瘤标志物CD133和CD44的表达与人肺腺癌A549细胞株在裸鼠体内形成肿瘤能力的关系.方法 使用单细胞克隆的方法 ,筛选出能够持续增殖分裂的肿瘤细胞,应用免疫荧光方法 和流式细胞仪检测CD133和CD44在具有增殖分裂能力的A549细胞和普通A549肿瘤细胞的表达情况;按表达结果 对A549细胞进行分组,应用单克隆方法 对各组细胞进行培养,并按不间密度注射于裸鼠皮下,观察各个组别的成瘤能力.结果 (1)在倒置显微镜下观察肿瘤细胞生长情况,发现多数细胞死亡,1周后仅有4.11%的细胞能够增殖分裂形成克隆.(2)具有增殖分裂能力肿瘤细胞的免疫荧光结果 :CD133阳性率为19.0%,CD44阳性率为57.0%;普通A549肿瘤细胞免疫荧光结果 :CD133阳性率为2.5%,CD44阳性率为34.0%;具有分裂增殖能力的肿瘤细胞CD133和CD44阳性表达率显著高于普通A549肿瘤细胞(P<0.01).(3)裸鼠体内成瘤能力实验提示:CD133~+CD44~+(A组)细胞成瘤能力显著高于CD133~-CD44~-(B组)、CD133~-CD44~+(C组)和CD133~+CD44~-(D组)细胞(P<0.05);裸鼠瘤块病理检查证实均为腺癌,各脏器检查未发现转移:在接种CD133~+CD44~+(A组)细胞的瘤块组织中发现除了有CD133~+CD44~+细胞外,还有CD133~-CD44~-细胞.结论 肺腺癌A549细胞株中CD133~+CD44~+细胞在裸鼠体内的成瘤能力显著高于其他细胞.     

人骨肉瘤外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞免疫变化的研究

目的研究人骨肉瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞(NK细胞)的变化。方法采用流式细胞术对42例骨肉瘤、41例骨髓炎、34例健康者的外周血CD4 、CD8 、CD4 、CD4 /CD8 、CD3 、CD16 56均显著性低于骨髓炎患者和健康对照组(P<0.01),而CD8 则升高(P<0.05)。骨髓炎患者外周血CD4 、CD4 /CD8 、CD3 较健康人降低,CD8 则升高,但差异均无统计学意义(P>0.05),而CD16 56与健康对照组相比降低(P<0.05)。结论骨肉瘤患者细胞免疫功能明显降低;骨肉瘤患者的免疫抑制远较骨髓炎的强;骨肉瘤患者NK细胞的降低较骨髓炎患者明显多。流式细胞术可作为检测骨肉瘤患者免疫功能的有效方法。     

The healthy rat prostate contains high levels of natural killer-like cells and unique subsets of CD4+ helper-inducer T cells: implications for prostatitis

PURPOSE: Chronic nonbacterial prostatitis spontaneously develops in aged Lewis and Wistar rats but not in Sprague-Dawley rats. We report the unique profile of lymphocyte subsets present in the healthy Sprague-Dawley rat prostate. MATERIALS AND METHODS: We compared enzymatic and mechanical methods of intraprostatic lymphocyte isolation in healthy 8 to 10-week-old Sprague-Dawley rats. Mechanical isolation was chosen because of its superior preservation of surface antigens. Intraprostatic lymphocyte subsets were analyzed by flow cytometry. RESULTS: Levels of prostatic alphabetaTCR+ T cells were similar and levels of prostatic B cells were decreased 5 to 10-fold compared with those found in other tissues (p 相似文献   

肾移植术后测定外周血CD3/HLA-DR及CD3/CD(16+56)的临床意义

目的探讨肾移植患者术后外周血ＣＤ３／ＨＬＡ－ＤＲ及ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）的变化及其意义。方法提取患者的外周血淋巴细胞,加入双荧光标记的鼠抗人单克隆抗体ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）、ＣＤ３／ＨＬＡＤＲ,流式细胞分析仪进行测定。结果术前患者的ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ－３／ＣＤ＋（１６＋５６）及ＣＤ－３／ＨＬＡＤＲ＋高于健康人,而ＣＤ＋３／ＣＤ－（１６＋５６）和ＣＤ＋３／ＨＬＡＤＲ－低于健康人;术后３天肾功能稳定者的全部淋巴细胞亚群下降,尤以ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）为著;术后排斥者的ＣＤ－３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ＋３／ＣＤ＋（１６＋５６）、ＣＤ－３／ＨＬＡＤＲ＋及ＣＤ＋３／ＨＬＡＤＲ＋较稳定者显著升高,而急性肾小管坏死者的上述４个指标异常增高,是排斥组的２倍。结论术后动态测定ＣＤ３／ＨＬＡＤＲ和ＣＤ３／ＣＤ（１６＋５６）有助于急性排斥和急性肾小管坏死的早期诊断及鉴别诊断,对及时治疗和抗排斥疗效的评价具有一定意义