益髓生血灵对小鼠骨髓造血干/祖细胞的影响

目的 :观察中药益髓生血灵对小鼠骨髓造血祖细胞的刺激作用 ,以探讨其治疗 β地中海贫血的疗效机理。方法 :以益髓生血灵 1 .9、3 .8和 7.6g· kg· d- 13个剂量分别给小鼠灌胃 ,并分别以生理盐水、环磷酰胺和生血丸对照组 ,1 0天后应用半固体琼脂克隆形成法及微量甲基纤维素法 ,研究小鼠骨髓粒单系祖细胞( CFU-GM)和早期红系祖细胞 ( BFU-E)和晚期红系祖细胞 ( CFU-E)的生长情况。结果 :益髓生血灵灌胃的 3个剂量组的小鼠骨髓 CFU-GM、BFU-E和 CFU-E集落数都明显增多 ,与生理盐水对照组比较 CFU-GM和 CFU-E集落数的增多有统计学意义 ( P<0 .0 1 ) ,1 .9g· kg· d- 1和 3 .8g· kg· d- 1剂量组的 BFU-E集落数增多也有统计学意义 ( P<0 .0 5和 P<0 .0 1 )。结论 :益髓生血灵对小鼠骨髓 GM-CFU、 BFU-E和 CFU-E均有促进增殖分化作用。     

补肾加和解法中药对人骨髓造血祖细胞作用的实验研究

补肾加和解法中药治疗再生障碍性贫血(以下简称再障)应用于临床已多年,疗效满意。为了进一步探讨该类中药临床疗效作用机制,本文应用造血祖细胞体外培养法研究了补肾加和解法中药对人骨髓造血祖细胞体外集落形成的影响,目的在于为该类中药临床推广应用提供实验依据。1　材料与方法11　标本来源　实验组24例,男15例,女9例;年龄在10～51岁之间,平均29岁。以上病例均为1994年10月～1995年12月期间在黑龙江中医药大学一附院血液内科住院及门诊患者,全部病例的诊断均符合1987年第四届全国再障学术会议制定的再障诊断标准[1]。取其髂前和髂后上棘…     

中药复方对免疫介导小鼠再生障碍性贫血红系造血祖细胞的影响

目的研究中药复方地甘口服液、红霖四物口服液对免疫介导再障小鼠模型骨髓红系造血祖细胞体外增殖影响。方法选用Ｂａｌｂ／ｃ小鼠为实验对象,在注射ＤＢＡ／２小鼠胸腺、淋巴结混合细胞后,立即接受亚致死剂量射线照射,形成免疫介导再障小鼠模型,然后分组处理。结果地甘口服液、红霖四物口服液在有ＥＰＯ存在的条件下,能促进小鼠骨髓细胞体外培养ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成,其中１００％浓度的地甘口服液效果明显优于２００％地甘口服液及红霖四物口服液。结论中药复方地甘口服液、红霖四物口服液能促进免疫介导再障小鼠模型骨髓红系祖细胞的体外细胞培殖。     

牛膝精对辐射小鼠造血干细胞增殖与分化的影响

目的：观察牛膝的活性成分-牛膝精对骨髓辐射损伤的治疗作用，并探讨其作用机制。方法：采用常规组织学和实验血液学方法及脾集落形成技术观察牛膝精对小鼠造血干细胞(CFU-S)和免疫功能的影响。结果：牛膝精能显著提高辐射鼠CFU-S数，并促进其向各系祖细胞分化，但分化呈均衡性；实验结果也表明，牛膝精能提高Kupffer细胞的吞噬率和吞噬指数，表明该药还能影响巨噬细胞的免疫功能。结论：牛膝精能促进造血干细胞的增殖与分化，该作用可能与改善造血组织的微环境和激活免疫细胞使其分泌较多的造血刺激因子等因素有关。     

地黄多糖对正常小鼠造血干细胞、祖细胞及外周血像的影响

本文采用实验血液学研究造血系统功能的常规方法，研究了地黄多糖对小鼠骨髓造血干细胞、造血祖细胞及外周血像的作用。结果表明，地黄多糖２０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×６ｄｉｐ可促进正常小鼠骨髓造血干细胞（ＣＦＵ－Ｓ）的增殖，１０～４０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×６ｄｉｐ可明显促进粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＣＭ）和早期、晚期红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ）的增殖分化，并在外周血像中有一定的反映。提示地黄多糖在一定剂量下可刺激小鼠的造血功能     

人参皂甙对CD34+造血干/祖细胞的增殖和分化作用

目的：探索人参皂甙（ＧＳ）对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：采用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＾＋细胞，在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的ＧＳ，检测对ＣＤ３４＾＋造血干／祖细胞增殖，形成祖细胞集落的提高率，并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果：ＧＳ（５～５０μｇ／ｍｌ）能提高ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ集落     

中药对内皮祖细胞功能影响的研究进展

内皮祖细胞(EPCs)来源于骨髓,具有分化为成熟内皮细胞的能力,可以发挥修复内皮损伤的作用。EPCs治疗代表了一种新的治疗方法,通过参与血管新生和受损血管内膜再内皮化,促进血管内皮损伤和缺血心肌修复。药物干预EPCs治疗安全性高,具有调动机体自身的内源性修复机制的优势,因而日益成为研究的热点。对中药干预EPCs的研究进行综述。     

黄芪对辐射小鼠造血功能的影响

结果表明黄芪能促进造血干细胞的增殖和向红系与粒系细胞分化,但对外周血血小板却无明显影响。     

脊髓生血灵对小鼠骨髓造血干／祖细胞的影响

目的观察中药益髓生血灵对小鼠骨髓造血祖细胞的刺激作用,以探讨其治疗β地中海贫血的疗效机理.方法以益髓生血灵1.9、3.8和7.6g*kg*d-1 3个剂量分别给小鼠灌胃,并分别以生理盐水、环磷酰胺和生血丸对照组,10天后应用半固体琼脂克隆形成法及微量甲基纤维素法,研究小鼠骨髓粒单系祖细胞(CFU-GM)和早期红系祖细胞(BFU-E)和晚期红系祖细胞(CFU-E)的生长情况.结果益髓生血灵灌胃的3个剂量组的小鼠骨髓CFU-GM、BFU-E和CFU-E集落数都明显增多,与生理盐水对照组比较CFU-GM和CFU-E集落数的增多有统计学意义(P＜0.01),1.9g*kg*d-1和3.8g*kg*d-1剂量组的BFU-E集落数增多也有统计学意义(P＜0.05和P＜0.01).结论益髓生血灵对小鼠骨髓GM-CFU、BFU-E和CFU-E均有促进增殖分化作用.     

人参皂甙对CD_(34)~ 造血干/祖细胞的增殖和分化作用

目的 :探索人参皂甙 (GS)对CD34 造血干 /祖细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法 :采用免疫磁珠法 (MACS)分离纯化脐血CD34 细胞 ,在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的GS ,检测对CD34 造血干 /祖细胞增殖 ,形成祖细胞集落的提高率 ,并用流式细胞仪检测液体培养后细胞表面标记的变化。结果 :GS( 5～ 50 μg/ml)能提高BFU E、CFU E、CFU GM、CFU GEMM集落产率 ( % ) ,分别为87 6± 2 6、63 3± 2 8、58 0± 3 1和 96 3± 5 5(均P <0 0 1)。GS 2 5μg/ml是液体培养刺激CD34 细胞体外增殖的最佳浓度。GS诱导细胞 14天后 ,细胞表面表达CD33 细胞随GS的浓度升高而增加 ,在GS 50 μg/ml时以CD15 细胞数最高 ,CD71 细胞和G A 细胞数仅在 2 5μg/ml时高于未加GS的对照组。结论 :GS不但能促进CD34 造血干 /祖细胞的增殖 ,并且能诱导定向分化 ,具有类生长因子和协同生长因子的作用。     

人参二醇、三醇皂苷对人骨髓造血祖细胞增殖作用的研究

目的：探讨人参二醇皂苷(panaxadiol saponin,PDS)和三醇皂苷(panaxtrol saponin,PTS)对骨髓造血祖细胞增殖的作用。方法：从人参总皂苷进一步分离纯化出PDS和PTS,用体外造血祖细胞集落形成技术,观察PDS、PTS对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU—E、BFU—E)、粒单系祖细胞(CFU—GM)和多向祖细胞(CFU—Mix)的刺激增殖作用。结果：不同浓度的PDS(2．5～200μg／m1)可促进造血祖细胞增殖;CFU—E,BFU—E,CFU—GM和CFU—Mix集落产率均显著高于对照组(P<0．05),提高率(％)分别达54．9±6．3、48．8±5．1、27．6±4．2和48．9±3．9。而PTS在同样浓度时,CFU—E、BFU—E产率均显著低于对照组(P<0．05)：终浓度为200μg／ml时,CFU—E、BFU—E集落产率为零。在CFU—GM培养中,12．5μg／ml浓度的PTS使集落产率提高(29．7±2．2)％(P<0．05);而100μg／ml和200μg／ml的PTS却出现对CFU—GM的抑制作用,抑制率分别为(48．6±3．9)％和100％,、结论：PDS是总皂苷内促进造血的有效成分,而PTS对红系祖细胞具有抑制作用,对粒-单系祖细胞的作用呈剂量依赖关系。     

成对和单味中药对造血细胞的作用

用体内扩散盒方法测试了中药复方大菟丝子饮、十四味建中汤中药味对粒系祖细胞的作用,结果发现六对对药、九味单味药对粒系祖细胞的生长有促进作用,其中多数为补肾中药,并对有关问题进行了讨论。     

中药调节神经干细胞增殖分化的研究进展

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)指能自我更新,并具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞潜能的细胞群。目前,神经再生和NSCs移植已成为治疗神经系统疾病的新策略,但NSCs移植仍存在存活率不高、定向分化困难、易成瘤和难以穿透疤痕组织等问题。如何通过调控内源性NSCs的增殖和定向分化是成体神经再生研究的新热点问题。药物诱导内源性NSCs增殖和定向分化的技术有望应用于再生医学,修复受损的神经,治疗中枢神经系统疾病。中药作为我国的传统医药,具有多靶点、多环节、多途径的治疗特点,在促进神经再生方面具有独特优势和广阔前景。近年来药理学研究表明中药可通过调控胞外信号通路[如Notch,Wnt/β-catenin,the Sonic Hedgehog(Shh)通路等],影响胞内转录因子以及改变神经发生微环境(如神经营养因子BNDF等)等多种途径间接或直接调控NSCs的增殖和分化。对近年来中药复方、中成药、单味中药及天然产物调节NSCs增殖分化的分子机制相关研究加以归纳总结,为中药防治中枢神经系统疾病提供新的思路。     

梓醇对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖和成软骨分化能力的影响

目的探讨梓醇对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)体外增殖和成软骨分化能力的影响。方法全骨髓贴壁筛选法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,并作成骨、成脂分化鉴定。CCK-8法检测25、50、100、200μmol/L梓醇在12、24、36 h对BMSCs增殖效应,选取含50、100、150μmol/L梓醇的经典诱导液、经典诱导液、普通培养基诱导BMSCs成软骨分化,诱导3周后,HE染色观察成软骨大小。选取相同浓度的梓醇、经典诱导液、普通培养基培养BMSCs12 h后,实时荧光定量PCR检测COL1、Aggrecan和SOX9基因表达。结果不同浓度的梓醇对BMSCs均无毒性作用,24 h后不同浓度的梓醇都可促进BMSCs增殖,随着梓醇浓度增大及作用时间的延长,BMSCs增殖也明显增加,与空白正常组比较均有统计学意义(P<0.01)。HE染色观察,加入含150μmol/L梓醇的经典诱导组诱导的软骨小球较单纯经典诱导液组大,而PCR结果显示与空白组比较,不同浓度组梓醇均能提高COL1、Aggrecan和SOX9基因表达(P<0.01),与经典诱导组比较,低、中剂量的梓醇组可以提高COL1基因的表达(P<0.05),高剂量梓醇可提高Aggrecan基因的表达(P<0.05),高、中、低剂量梓醇组都可以提高SOX9的基因的表达(P<0.05)。然而,经典诱导组SOX9表达量与空白组比较没有明显统计学差异(P>0.05)。结论梓醇能促进大鼠BMSCs体外增殖,与时间和浓度成正相关,亦能促进大鼠BMSCs体外成软骨分化,可能与促进COL1、Aggrecan基因表达相关。     

不同浓度梓醇对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖及骨向分化的影响

目的 观察梓醇对SD大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及骨向分化的影响.方法 采用机械分离及差速贴壁法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞;MTT法检测不同浓度梓醇在不同时间点(1,3,5,7,9,11 d)对大鼠BMSCs增殖情况的影响;氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度梓醇在第3天,6天,9天,12天,15天,18天,21天对细胞上清中ALP活性的影响,茜素红染色法检测不同浓度梓醇对BMSCs矿化情况的影响.结果 梓醇促BMSCs增殖的最佳浓度为1.0 mg/L;促BMSCs骨向分化的最佳浓度为2.0 mg/L.结论 梓醇具有促BMSCs增殖及骨向分化的作用.     

淫羊藿对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化过程中Cbfa1和Osterix表达的影响

目的:研究淫羊藿对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化过程中Cbfa1和Osterix表达的影响。方法:24只雌性SD大鼠被随机分成观察组和对照组各12只,其中观察组给予淫羊藿0.5 g/0.1 kg,每天1次灌胃,持续两周;对照组给予相同剂量的生理盐水。于分组时间将大鼠处死,取右侧股骨远侧段用于骨组织形态计量学检测;抽取左侧股骨骨髓用于细胞培养,于培养21 d时提取细胞总RNA,经PCR方法分离获得cbfa1,osterix扩增产物。结果两组大鼠的骨形态计量学进行比较,观察结果表明,观察组大鼠骨组织计量学动态参数以及静态参数BV/TV、BFR/BS、tb.th、MAR比着对照组明显要高,差异具有统计学意义(P0.05)。两组大鼠的Cbfa1,Cbfb和OSX m RNA表达的差异比较,研究组Cb fa1 m RNA,OSX m RNA在各时间点的表达均明显增加(P0.05),并且这种差异随SIM作用时间增加而增强,研究组与对照组Cbfbm RNA差异无统计学意义(P0.05)两组大鼠的骨形态蛋白-2以及转化因子β1相比,骨形态蛋白-2观察组明显高于对照组,差异存在统计学意义(P0.05),转化因子β1比较观察组明显高于对照组,差异存在统计学意义(P0.05)。结论:骨组织形态计量学方法显示淫羊藿组促进骨量增加;细胞分子生物学显示淫羊藿能够促进成骨细胞分化增殖作用,为中药抗骨质疏松提供组织细胞和分子生物学基础证据。     

巨细胞病毒对造血干细胞增殖和分化情况的影响

目的 探讨人巨细胞病毒(human cytomeglavirus,HCMV)对造血干细胞的增殖和分化情况的影响.方法 采用造血干细胞体外培养技术,研究HCMV -AD169株对脐血造血干细胞增殖和分化情况的影响,采用PCR技术检测干细胞中的HCMV DNA..结果 HCMV 在体外能明显抑制造血干细胞的增殖和分化,抑制程度随病毒浓度的升高而增大,经PCR检测病毒感染的细胞中有HCMV DNA的存在.结论 HCMV-AD169对造血干细胞增殖和分化情况的有抑制作用.     

从雌激素样活性解析中药诱导神经干细胞增殖及分化

中医药治疗神经退行性疾病的临床历史悠久,而近年来中药诱导神经干细胞增殖和分化的现代药理学研究进展迅速。为了发掘传统中医学理论的有关阐述与现代药理学研究成果的内在联系,笔者通过总结中药诱导神经干细胞增殖与分化的研究进展,以中医滋补肝肾理论及益气活血理论为出发点,结合雌激素诱导神经干细胞增殖与分化的研究成果,提出中药雌激素样活性滋补肝肾是中药诱导神经干细胞增殖分化的机制之一。