造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖的临床前及人体试用研究

为了阐明临床应用造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖(DS)的可能性,用不同动物进行了动员效果、LD_(50)过敏实验和正常人体试用研究。结果表明,给狗静脉注射分子量为10kDa的DS后,血中MNC和CFU-GM呈时相性变化,1h开始增加,5h达到高峰值;LD_(50)为1128.6mg/kg(雄性小鼠)和1369.4mg/kg(雌性小鼠),两者之间无显著差异;分子量为10kDa的DS过敏反应为阴性结果,15kDa的DS为阳性结果;34例正常人体试用,DS可使血中CFU-GM、BFU-E和CFU-GEMM,分别增加到给药前的8倍、10.5倍和12倍,有效、安全剂量约为15～20mg/kg。分子量为10kDa的DS人体试用研究属国内外首次报道。     

各种动员剂方案在恶性淋巴瘤自身外周血造血干细胞移植…

对３组共２０例恶性淋巴瘤病人进行自身外周血干细胞回输，采用了皮质激素；硫酸葡聚糖；粒细胞集落刺激因子或环磷酰胺（ＣＴＸ）＋Ｇ－ＣＳＦ等３组不同的动员剂和治疗方案。结果显示，１组口服泼尼松或静脉注射地塞米松可使白细胞明显增多，是给药前自身血的４．６１倍和７．２４倍；２组ＷＢＣ，单个核细胞和粒细胞巨噬细胞集落生成单位分别且用药前的２．０４倍，４．１４倍和２．０４倍，３组平均分离２．６次，总细胞数可获得     

葡聚糖硫酸酯对狗外周血祖细胞的动员作用

为了研究可供人体应用的造血干细胞动员剂，将低相对分子质量葡聚糖硫酯给狗静脉观察其对造血干细胞的动员作用。结果显示，注射ＤＳ １５ｍｇ／ｋｇ１ｈ后外周血中ＷＢＣ、单个核细胞和粒－巨细胞集落形成单位计数开始升高，３ｈ达到峰值，每升血中的细胞计数分别为药前的１．６、２．１和４．５倍。     

造血干细胞移植中干细胞来源的多元化

异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）是治疗血液系统恶性疾病和部分非恶性疾病的有效方法,有时甚至是惟一可以治愈该病的手段,在血液系统疾病的治疗中占有重要地位。过去由于供者来源所限,只有少部分患者从中受益,更多患者因为没有配型相合的同胞供者而失去了移植的机会。独生子女时代的来临使供者来源越趋困难。令人鼓舞的是,随着HSCT技术体系的不断完善,临床用于移植的造血干细胞来源呈现了多元化的局面。目前用于HSCT的造血干细胞主要有以下几种：     

造血干细胞“归巢”机制的探讨

近年来,诸如骨髓、外周血、脐血等多种来源的造血干细胞（ＨＳＣ）移植在临床上日益广泛地开展起来,同时关于干细胞归巢机制的研究也有所进展。造血干细胞的归巢是一个多步骤过程。经研究发现,在归巢中涉及了干细胞表面和造血微环境中的一系列的分子与细胞因子。本文综述了其中一些研究较多的分子与因子,并对今后的研究提出了自己的看法。     

外周血造血干细胞移植后造血重建的细胞学动态观察

目的：了解自体外外周血造血干细胞移植（APBSCT）与异基因外周血造血干细胞移植（alloPBSCT)后骨髓重建造血功能的规律与差异。方法：观察了两组13例外周血造血干细胞移植（PBSC）后骨髓造血重建的细胞学特点,其中,APBSCT6例,allPBSCT7例,结果：两组人在移植后在白细胞（WBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（Hb)下降与回升有一定规律,不受年龄、性别的影响。两组之间无明显差异,P＞0．05。结论：重建造血的速度与输入单个细胞（MNC）数有一定相关性,移植时病人状态及适时的对症支持治疗也是决定重建速度的重要因素。     

Bone marrow MR imaging as predictors of outcome in hemopoietic stem cell transplantation

The purpose of this study is to investigate the role of femoral marrow MR imaging as predictor of outcome for hemopoietic stem cell transplantation (HSCT) in beta-thalassemia major. MR imaging of the proximal femur, including T1- and T2-weighted spin echo and short-tau inversion recovery and in-phase and out-of-phase fast field echo images, was prospectively performed in 27 thalassemia major patients being prepared for HSCT. The area of red marrow and its percentage of the proximal femur were measured, and the presence of marrow hemosiderosis was assessed. Age-adjusted multivariate logistic regression was used to determine the relationship between red marrow area percentage and marrow hemosiderosis and HSCT outcome. Red area percentage were less in patients with successful (90.25 +/- 4.14%) compared to unsuccessful transplants (94.54% +/- 2.93%; p = 0.01). Red marrow area percentage correlated positively with duration of symptoms(r = 0.428, p = 0.026) and serum ferritin (r = 0.511, p = 0.006). In multivariate-adjusted logistic regression analyses, red marrow area percentage was significantly inversely associated with successful HSCT (OR = 1.383, 95% CI: 1.059-1.805, p = 0.005). Marrow hemosidersosis and duration of sympotms and serum ferritin were not associated with HSCT outcome(p = 0.174, 0.974, 0.762, respectively). Red marrow area percentage of proximal femur on MR imaging is a useful predictor of HSCT outcome.     

超声对造血干细胞移植后肝静脉闭塞症的诊断价值

目的探讨血液病患者造血干细胞移植(hemopoietic stem cell transplantation,HSCT)治疗后并发肝静脉闭塞症(hepatic venoocclusive disease,HVOD)的声像图特点及其诊断价值。方法对45例HSCT患者进行常规腹部超声检查,并对其中9例并发HVOD患者进行密切追踪观察,以未发生HVOD患者(36例)为对照组,分析发生HVOD患者的声像图变化特征。结果HVOD患者出现肝大、肝静脉纤细、胆囊壁增厚、脾大、腹水等变化的发生率明显高于对照组(P<0.05)。结论密切追踪超声检查能为HSCT患者移植后并发HVOD的诊断提供可靠依据。     

同种Beagle狗循环血造血干细胞移植治疗急性放射病的实验研究

实验中用Ｂｅａｇｌｅ狗１０只，以０．０２４７～０．０２７８Ｃ·ｋｇ－１·ｍｉｎ－１照射量率，全身照射６．５Ｇｙ，分３组：第１组３只，作为对照，不给任何治疗，照射后全部死亡，平均活存７．５天。第２组４只，移植性别相反的同种血造血干细胞。供受体混合淋巴细胞培养刺激指数小于０．６９，红细胞交叉凝集试验阴性，未在体外去除供体血细胞中的Ｔ淋巴细胞。结果表明，照射后１１，２０和２６天检查性染色体，均为供体核型。４只狗死于严重ＧＶＨＤ，平均活存４ｌ．６天。第３组３只，移植去除Ｔ淋巴细胞的同种血干细胞，２只死亡，１只发生轻度ＧＶＨＤ，长期活存４年以上。     

胶质瘤干细胞的生存微环境及其示踪研究进展

胶质瘤干细胞在胶质瘤的形成和生长中发挥至关重要的作用。胶质瘤干细胞的生存微环境是维持干细胞特性的关键,在体无创性示踪为研究胶质瘤干细胞的生存、繁殖、自我更新等特性以及促进胶质瘤发展的机制具有重要意义。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血干细胞的辐射防护作用

目的：骨髓造血干细胞（ｈｅｍｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＨＳＣ）损伤所致的造血抑制是急性骨髓型放射病死亡的重要原因之一，本实验旨在观察人基因工程重组超氧化物歧化酶（ｒｈＳＯＤ）对ＨＳＣ有无辐射防护作用以及化学修饰对ｒｈＳＯＤ抗辐射作用的影响。方法：实验用照射小鼠的外源性脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）形成法。组间比较用ｔ检验。结果：ｒｈＳＯＤ和ＰＥＧ－ＳＯＤ均能明显提高ＣＦＵ－Ｓ形成数，其中ｒｈＳＯＤ在照射前１小时给药效果好，而ＰＥＧ－ＳＯＤ在照射前２～３小时给药作用更为明显。结论：ｒｈＳＯＤ具有对骨髓造血于细胞的辐射防护作用，化学修饰后ＳＯＤ的血浆半衰期延长而使药物作用持续时间延长。     

人脐带间充质干细胞对NOD/SCID小鼠造血重建的影响

目的探讨脐带间充质干细胞(MSC)对NOD/SCID小鼠造血重建的影响。方法以足月胎儿脐带分离的MSC和脐血单个核细胞作为供体,化疗预处理后NOD/SCID小鼠作为受体。将小鼠随机分为以下3组(每组10只):单纯化疗组,仅做化疗预处理,不输注任何细胞;单移植组,化疗后输注单纯脐血单个核细胞(1×107/只);共移植组,化疗后输注脐血单个核细胞(1×107/只)和脐带MSC(1×106/只)。移植后第3、7、14、21、28天分别计数小鼠外周血白细胞,观察其变化;移植后第6周计算小鼠的生存率,并用流式细胞仪检测小鼠骨髓内人CD45 细胞的表达(即植入率)。结果共移植组小鼠移植后第14、21天外周血白细胞[分别为(5.73±0.38)×109/L、(5.90±0.42)×109/L]明显高于单移植组[分别为(3.30±0.58)×109/L、(4.83±0.41)×109/L],差异有显著性(P<0.05)。移植后第6周,共移植组小鼠骨髓人CD45 细胞表达明显高于单移植组(P<0.05),而两组小鼠生存率无显著性差异(P>0.05)。结论成功地建立了异种异基因小鼠脐血移植模型,脐带MSC作为一种新来源的MSC,能够促进造血重建,提高植入率,有望应用于临床共移植治疗中。     

低剂量全身照射在非清髓性干细胞移植中的临床研究

目的 观察非清髓性低剂量全身照射的临床效果和急性毒副作用。方法 2006年1月至2008年1月对27例异基因造血干细胞移植患者采用含有全身照射的非清髓预处理方案:全身照射(TBI)2 Gy,一次完成;受者原发病不同,受者机体状态、年龄、脏器功能以及供受者HAL相合情况等不同,使用的化疗方案也有不同,包括氟达拉宾、环磷酰胺、阿糖胞苷、马法兰等。预防移植物抗宿主病(GVHD)采用:环孢霉素、霉酚酸酯。结果 造血重建情况: 27例均于移植后第4~8天外周血WBC降至(0.05~0.9)×10⁹/L。中性粒细胞计数>0.5×10⁹/L为8~22 d(中位数为10.5 d),血小板计数>30×10⁹/L为11~28 d(中位数为14.5 d)。1、2年生存率为85.2%(23/27)、77.8%(21/27)。发热率65%,10例发生感染。无出血性膀胱炎和肝静脉闭塞症等并发症。急性GVHD 4例(15%), 慢性GVHD 5例(19%)。随访3~22个月21例(77.8%)仍存活。结论 采用低剂量全身照射的非清髓性造血干细胞移植预处理方案简便安全,并发症少,适应证广;全身照射总剂量2 Gy,1次完成的方案是安全有效的,可以达到免疫抑制效果。     

非灵长类动物精原干细胞及其多潜能性的研究进展

精原干细胞(SSC)既具有自我更新能力又能分化成精子,是雄性动物体内唯一能将遗传信息传递给子代的成体干细胞.最新研究发现,SSC在体外特殊培养条件下能够去分化形成胚胎样多潜能干细胞,进而转分化生成3个胚层来源的细胞.上述研究主要是在非灵长类动物体内进行的.本文主要针对非灵长类动物SSC的生物学特性、分离纯化、培养、鉴定、移植等进行简要的概述,并对其多潜能性及可塑性的研究进展进行讨论,旨在探讨SSC在男性不育症治疗和人类再生医学领域的应用潜能.