卵巢恶性肿瘤p53基因表达产物及检测p53第七外显子突变的初步 …

为探讨ｐ５３基因突变表达产物与卵巢恶性肿瘤临床生物学行为以及ｐ５３第七外显子突变情况之间的关系，采用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）对５０例卵巢恶性肿瘤中的２３例病人新鲜组织标本进行了ｐ５３基因突变蛋白表达检测，结果显示：卵巢恶性肿瘤免疫组化ｐ５３阳性表达率２４％，２３例新鲜组织标本中４例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测第七外显子异常。提示ｐ５３阳性表达可能与遗传因素有关（Ｐ＝０．０３８），     

P53蛋白和增殖细胞核抗原在NSCLC中表达的免疫组化研究

Ｐ５３蛋白和增殖细胞核抗原在ＮＳＣＬＣ中表达的免疫组化研究刘卫民，李应珍，陈朝伦，周谦本文采用ＬＳＡＢ（ｌａｂｅｌｌｅｄｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎ）免疫组化方法，检测６５例ＮＳＣＬＣ中Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的表达并进行定量分析。结果与讨论Ｐ５...     

卵巢恶性肿瘤p53基因表达产物及检测p53第七外显子突变的初步分析研究

为探讨ｐ５３基因突变表达产物与卵巢恶性肿瘤临床生物学行为以及ｐ５３第七外显子突变情况之间的关系。采用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）对５０例卵巢恶性肿瘤中的２３例病人新鲜组织标本进行ｐ５３基因突变蛋白表达检测。结果显示：卵巢恶性肿瘤免疫组化ｐ５３阳性表达率２４％。２３例新鲜组织标本中４例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测第七外显子异常。提示ｐ５３阳性表达可能与遗传因素有关（Ｐ＝０．０３８）；卵巢恶性肿瘤第七外显子突变可出现ｐ５３蛋白高表达；第七外显子突变可出现于不同临床分期及组织分型     

肺癌组织抑癌基因P53异常分析

Ｐ５３基因５－８外显子ＰＣＲ产物的ＤＮＡ序列分析及石蜡包埋组织Ｐ５３鼠抗人单克隆抗体（Ｄｏ－１）免疫组化分析发现：５７例原发性肺癌中３７例有Ｐ５３蛋白积累。ＤＮＡ／ＰＣＲ产物直接测序发现：９／１２例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），８／１５非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）Ｐ５３基因突变，错义突变为１２／１７，Ｇ→Ｔ突变为６／１７。免疫组化发现：１１／１９例ＳＣＬＣ，１９／３７例ＮＳＣＬＣ Ｐ５３蛋白染色阳性。４／     

PCNA,p53蛋白在肝癌临床中的意义

原发性肝癌易发生肝内转移，其术后复发率很高，为寻找有效的方法以降低术后的复发率，我们用抗ｐ５３和ＰＣＮＡ单克隆抗体对１０２例手术切除的肝癌标本作免疫组化检测。本文分析了肝癌的不同病理形态，ｐ５３，ＰＣＮＡ情况，结果表明：ＰＣＮＡ指数与ｐ５３的表达呈正相关系，ＰＣＮＡ指数与肿瘤大小，肿瘤包膜，组织分化程度无统计学差异；ｐ５３的表达多见于大肝癌中，但与肿瘤包膜，组织分化程度无统计学差异。ＰＣＮＡ和ｐ５     

P~(53)基因突变及P~(53)突变蛋白在卵巢上皮肿瘤中表达检测方法的探讨

采用改进的ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术和ＳＰ免疫组化技术检测３６例卵巢上皮癌，１２例卵巢上皮交界瘤和１５例良性卵巢上皮肿瘤的Ｐ５３基因的突变和突变蛋白的表达。结果卵巢上皮癌Ｐ５３基因突变率为３０．６％，突变蛋白表达为５８．４％。Ｐ５３基因突变主要发生在外显子５～８上，以第７外显子突变率最高。交界性肿瘤个别出现Ｐ５３基因突变和突变蛋白表达，而在良性肿瘤无一例出现。提示Ｐ５３基因突变是卵巢癌形成过程中的晚期事件。Ｐ５３基因突变可作为肿瘤标记物判定卵巢癌的预后。ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ非同位素基因突变技术克服了常规ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测方法的缺陷，可提高准确性。     

骨肉瘤细胞凋亡与p53和bcl-2表达的关系

目的：探讨骨肉瘤细胞凋亡的和５３、ｂｃｌ－２表达及细胞增殖的相关性,及其对患者预后的影响。方法：在８０例骨肉瘤标本中,用ＤＮＡ末端标记方法检测细胞凋亡,免疫组化检测Ｐ５３、ｂｃｌ－２和增殖细胞核怕的表达。结果：８０例骨肉瘤中凋亡指数范围为０．６３￣１８．８％,Ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白检出率分别为３７．５％和６０％,ＰＣＮＡ指数范围为１２￣９６％。统计学分析表明,细胞凋亡与Ｐ５３、ＰＣＮＡ表达呈正相关     

卵巢上皮性癌p53基因改变,蛋白过度表达及临床意义

目的：检测卵巢上皮性癌ｐ５３基因改变、蛋白过度表达，探讨其与临床病理和预后的关系。方法：应用ＡＢＣ免疫组化法检测５６例卵巢上皮性肿瘤ｐ５３蛋白表达，对其中４０例应用聚合酶链反应单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）溴乙锭染色法检测ｐ５３基因５～８外显子突变及杂合性缺失（ＬＯＨ）。结果：（１）ｐ５３蛋白表达阳性率：良性肿瘤０／１０；交界性肿瘤１／４；卵巢上皮性癌２２／４２（５２．３８％），浆液性与粘液性癌表达相似，且３例原发灶与转移灶表达一致。（２）ｐ５３基因突变率：良性肿瘤０／１０；交界性肿瘤１／３；卵巢上皮性癌１３／２７（４８．１５％），其中８例杂合型基因的病例中４例基因突变伴等位基因杂合性缺失。本研究１３例ｐ５３基因突变者中１２例ｐ５３蛋白过度表达。ｐ５３蛋白过度表达与卵巢上皮性癌组织学类型、临床分期及预后无关（Ｐ＞０．０５）。而与卵巢上皮性癌病理有关（Ｐ＜０００５）。结论：ｐ５３基因改变及蛋白过度表达在卵巢癌中较常发生，且与卵巢上皮性癌病理分级有关，这些改变可能是卵巢上皮性癌的早发事件，亦在卵巢上皮性癌的发生发展过程中起重要作用。     

大肠癌旁膜细胞增殖模式与术后复发机制的探讨

目的：探讨大肠癌旁粘膜细胞模式变化与肿瘤术后复发的关系。方法：用免疫组化染色方法对７８例大肠癌标本的癌组织、癌旁粘膜及１２例正常大肠粘膜进行Ｐ５３蛋白、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测，并进行随访。结果：癌组织ＰＣＮＡ高表达明显高于癌旁，癌旁ＰＣＮＡ高表达与隐窝增殖区扩大、上移，明显影响术后第１年局部复发死亡率，癌组织Ｐ５３蛋白阳性表达率６１．５４％，癌旁为２６．９２％，癌及癌旁Ｐ５３阳性表达不影响     

胃癌组织中p16、p53、Rb和增殖细胞核抗原的表达与临床病理特征的关系

目的：研究胃癌中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ蛋白及ＰＣＮＡ表达与临床病理的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法对６３例胃癌组织中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ和ＰＣＮＡ进行检测。结果：６３例胃癌组织中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ和ＰＣＮＡ进行检测。结果：６３例胃癌组织中ｐ１６、ｐ５３、Ｒｂ蛋白和ＰＣＮＡ表达阳性率分别为６３．５％、６０．３％、６５．６％和７１．４％。ｐ１６蛋白阳性表达随着肿瘤分化程序降低、恶性程度增加和浸润深度的     

肝细胞癌p53蛋白、增殖细胞核抗原与临床关系的研究

目的　探讨在肝细胞癌中突变型 p5 3蛋白与增殖细胞核抗原 (PCNA)的相互关系及其意义。 方法　应用免疫组化ABC法检测肝细胞癌和肝硬化中 p5 3蛋白及增殖细胞核抗原。 结果　 37例肝细胞癌 (HCC)中 p5 3阳性 19例 ,33例肝硬化标本中p5 3阳性 2例 ,两者有显著差异 (P <0 .0 1) ;HCC中PCNA阳性细胞均数显著高于肝硬化组 (P <0 .0 1) ;p5 3阳性者PCNA阳性细胞数高于p5 3阴性者 (P <0 .0 5 )。p5 3与PCNA两者表达存在显著正相关关系 (r=0 .5 936 2 ,P <0 .0 5 ) ,p5 3表达与年龄、性别、组织分化无关 ,PCNA表达分别与组织分化及血AFP成负相关及正相关。结论　p5 3基因突变在由肝硬化转变为癌过程中是频发事件 ,其表达异常与HCC发生密切相关。PCNA与 p5 3的正相关提示p5 3突变型主要存在于异常增生细胞中 ,且PCNA可反映癌细胞分化及增殖程度 ,可为肝硬变与肝癌关系的探讨及临床诊断、治疗、预后提供参考资料。     

GEP associates with wild-type p53 in hepatocellular carcinoma

Granulin-epithelin precursor (GEP) is a novel growth factor whose up-regulation we previously reported in 72% of hepatocellular carcinoma (HCC). GEP expression has been reported to be associated with p53 protein accumulation in a breast cancer study, though the p53 mutation status was not revealed. We aim to investigate whether p53 protein and mutation status correlates with GEP expression in HCC. The statistical comparison of p53 and GEP data revealed an overall positive association between the two protein expression patterns (P<0.001). Upon detailed analysis, the association of p53 and GEP protein expression was found to be highly significant only in HCCs with wild-type p53 (P=0.001); there was no association in HCCs with p53 mutation (P=0.669). The GEP levels in the HepG2 hepatoma cell line with a wild-type p53 background were modulated by transfection experiments. Overexpression of the GEP protein resulted in an increased p53 protein level and suppression of the GEP protein resulted in a decreased p53 protein level in HepG2 cells. In summary, we demonstrated that p53 wild-type protein nuclei accumulation is associated with GEP protein expression in human HCC specimens, and GEP modulates p53 wild-type protein levels in vitro.     

人肝细胞癌及癌旁组织中p53蛋白和PCNA的表达

应用免疫组化方法检测了７３例肝细胞癌及癌旁组织中ｐ５３蛋白的表达，７０例肝细胞癌及癌旁组织中ＰＣＮＡ的表达。结果ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ在肝细胞癌中阳性表达率显著高于癌旁组织，且与肝细胞癌分化程度密切相关。癌旁组织中，ｐ５３蛋白表达仅见于增生结节中，肝硬化组织均为阴性；增生结节中ＰＣＮＡ阳性表达显著高于肝硬化组织。提示ｐ５３基因突变是肝细胞癌的频发事件，在肝细胞癌的发生发展中起重要作用；增生结节细胞的增殖活性增强，是肝细胞癌的癌前病变。作者还讨论了ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ表达间的关系     

Down-regulation of tumor suppressor gene PTEN, overexpression of p53, plus high proliferating cell nuclear antigen index predict poor patient outcome of hepatocellular carcinoma after resection

We aimed to evaluate the interaction of two tumor suppressor genes PTEN and p53 and their relationship with cell cycle protein proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in hepatocellular carcinoma (HCC). A total of 124 resected HCC paraffin specimens were collected from 1987 to 1999 for immunohistochemistry. Expression of PTEN, p53 and PCNA in HCC were analyzed for clinicopathologic correlation. The study revealed decreased or absent PTEN immunostaining (PTEN down-regulation) in 42.7% and positive p53 (p53+) immunostaining in 41.9% of HCC. There was a positive correlation between PTEN down-regulation and p53 (+) (P=0.001). PTEN down-regulation or p53 (+) correlated with increased HCC dedifferentiation, advanced pathologic stages and high PCNA labeling index (LI) of tumors (P<0.05). Patients with either PTEN down-regulation, p53 (+), or high PCNA LI had shorter survival and higher recurrence rates than patients with intact PTEN expression, p53 (-), or low PCNA LI respectively (P<0.05). By combining the three genes, patients with all PTEN down-regulation (+)/p53 (+)/high PCNA LI had the shortest overall survival (P<0.001) and the highest recurrence rates (P<0.001), followed by patients with two, one and none of three events accordingly. Combination of PTEN/p53/PCNA represented an independent prognostic factor for tumor recurrence and disease-specific survival (P<0.05). In conclusion, the down-regulated PTEN expression and p53 over-expression are involved in the pathogenesis of HCC. They correlate with high PCNA expression, HCC de-differentiation and advanced HCC stages. A combination of the three genes predicts patient outcome more powerfully than any of the individual genes.     

EB病毒相关胃癌与mdm2，p53及p21基因异常的研究

 目的 探讨p53基因突变以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常在EBV相关胃癌（EBVaGC）发生发展中的作用。方法 应用免疫组化技术检测13例EBVaGC、45例临床病理资料与之匹配的EBV阴性胃癌（EBVnGC）组织中 mdm2，p53和p21蛋白的表达；PCR-SSCP银染技术结合DNA序列分析检测p53基因exon 5~8突变；RT-PCR检测EBV相关基因的表达。结果 E-BVaGC组与EBVnGC组相比，两组间mdm2，p53和p21蛋白的阳性检出率差异无统计学意义（P = 0.830 0；P = 0.791 2；P = 0.353 1），但EBVaGC组p53蛋白过表达率（15.38 %）明显低于EBVnGC组（57.78 %），两组间差异有统计学意义（P = 0.008 5）。mdm2蛋白阳性表达与p53蛋白过表达呈显著正相关（P = 0.000 8，r = 0.439 1）；p21与p53蛋白共同表达率较高，但经计数资料相关性统计学分析表明两者无显著相关性（P = 0.2501，r = 0.202 5）。2例EBVnGC检测到p53基因突变，突变均位于exon 5，13例E-BVaGC和58例相应癌旁组织均未检测到p53基因突变。13例EBVaGC核抗原基因EBNA1均为阳性，潜伏膜蛋白基因LMP1均为阴性，即刻早期基因BZLF1，早期基因BARF1和BHRF1阳性率分别为46.15 %（6／13），46.15 %（6／13）和15.38 %（2／13），三者与EBVaGC组织中mdm2，p21和p53蛋白的表达均无显著相关性（P＞0.05）。 结论 EBV感染以及mdm2，p53和p21蛋白表达异常与胃癌发生有关； p53基因突变可能并非胃癌组织中p53蛋白异常累积的主要原因；胃癌组织中EBV感染与p53蛋白的异常表达有关，而与mdm2和p21蛋白的异常表达以及p53基因突变无显著相关性。     

Association among p53 gene mutation,nuclear accumulation of the p53 protein and aggressive phenotypes in breast cancer

In order to reveal whether differences in the type and site of p53 gene mutations influence the function of the gene and tumor phenotype, we examined nuclear accumulation of the p53 protein immunohistochemically, loss of the other p53 allele by restriction-fragment-length polymorphism analysis, and histological grade of atypia in 52 breast-cancer tissue specimens in which the position and pattern of the mutation were identified. When mis-sense point mutations ordeletionsof3nbases(n = 1, 2,…), which did not cause a frame shift downstream, occurred within codons 110-180 or 234-285, containing highly conserved regions, the p53 protein was almost always (92%) accumulated in nuclei in a majority of the cancer cells. When these mutations occurred outside these regions, only 46% of the cases showed nuclear accumulation of the protein in a majority of cancer cells. In tumors with non-sense point mutations or deletion of 3n+1 or 3n + 2 bases (n = 0, 1, 2,…), which caused a downstream frameshift, nuclear accumulation of the p53 protein was absent in 93% of cases. Irrespective of the mutation site or pattern, a majority of cases showing p53 mutation revealed loss of hetero-zygosity on 17p13 (83%), which suggested they do not carry wild-type p53 allele, and the highest histological grade of atypia (90%). Regardless of differences in their protein-expression pattern, a majority of the p53 gene mutations were suggested to function in a recessive mode and to be involved in the development of histologically aggressive breast cancer. © 1994 Wiley-Liss, Inc.     

人肝细胞癌及癌周组织内P53蛋白表达的研究

 应用LSAB免疫组化方法检测73例原发性肝细胞癌(HCC))及其癌旁组织中P53蛋白的异常表达。 结果显示:P53蛋白在HCC中阳性表达率显著高于癌旁组织, 且与HCC分化程度呈显著正相关，低分化组P53蛋白阳性表达率显著高于高分化组(P<0.05); 癌旁组织中, p53蛋白表达仅见于增生结节中, 肝硬化组织内未见p53蛋白阳性表达。 提示P53基因突变是HCC的频发事件, 在HCC的发生发展中发挥重要作用; 增生结节是HCC的癌前病变。     

bcl-2、p53和PCNA子宫内膜增生与内膜癌的表达

[目的]探讨bcl-2、p53蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）表达与子宫内膜增生性病变和内膜癌的关系。[方法]应用免疫组织化学ABC法对子宫内膜场50例,不典型子宫内股增生、复杂型子宫内膜增生和单纯型内膜增生各15例,进行bcl－2、p53蛋白和PCNA的检测。[结果]bcl－2、p53在内膜癌、不典型子宫内膜增生、复杂型子宫内膜增生的表达分别为64．0％和52.0％,40．0％和20．0％,13．3％和0,单纯型子宫内膜增生表达均为阴性。内膜癌、内膜不典型增生及复杂型单纯型增生三者之间差异有显著性（P＜0．01）。PCNA在子宫内膜癌、不典型子宫内膜增生表达为100．0%和73.3%,显著高于复杂型及单纯型子宫内膜增生（26．7%和20.0％,P＜0．05）。本实验发现p53和PCNA与内膜癌分化程度,转移扩散有关（P＜0．05）,与临床分期,肌层浸润之间无显著相关性（P＞0．05）。bcol－2与内膜癌分化程度有关,与转移、扩散、分期及肌层浸润之间无显著相关性。[结论]p53和PCNA联合检测可以作为子宫内膜癌预后判断的良好指标。bcl－2与PCNA在不典型内膜增生内有较高表达,是癌变危险因素,联合检测有较高价值。     

p53、Cyclin D1及PCNA在非小细胞肺癌的表达

目的 研究非小细胞肺癌（NSCLC）中p53、Cyclin D1蛋白表达及与细胞增殖的关系。方法 应用免疫组织化学技术（SP法）检测74例NSCLC中p53、Cyclin D1蛋白和增殖细胞抗原（PCNA）的表达情况。结果 p53蛋白、CyclinD1蛋白在NSCLC中阳性表达率分别为55．41％和37．84％,均明显高于正常肺组织（P1＝0．0031,P2＝0．0429）。 p53蛋白表达与淋巴结转移有密切关系（P＝0．0222）。p53蛋白、CyclinD1蛋白表达分别与PCNA指数有密切关系（P1＝0．001,P2＝0．0009）。p53蛋白与CyclinD1蛋白表达之间未见明显关系（P＞0．05）。结论 p53蛋白和CyclinD1蛋白近表达参与了NSCLC的发生发展,有促进细胞增殖的作用。p53的诊断和评价NSCLC预后的重要参数。