用裸RNA免疫小鼠产生抗天然HIV-1包膜糖蛋白单克隆抗体

作者介绍了使用西门利克森林病毒（ＳＦＶ）这一新型表达系统产生具有天然构型的１型人类免疫缺陷症病毒（ＨＩＶ－１）包膜（Ｅｎｖ）糖蛋白，以及用裸ＳＦＶ－ｇｐ１６０ＲＮＡ免疫小鼠制备抗Ｅｎｖ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和对１２ＨＺ杂交瘤细胞系进行鉴定的结果。用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增全长ＨＩＶ－１ＨＸＢ２ｅｎｖ基因并将其插入ｐＳＦＶ－１载体的ＢａｍＨＩ位点，构建表达载体ＰＳＦＶ－ｇｐ１６０．纯比后采用电穿孔技术将ＳＦＶ－ｇｐｌ６０ＲＮＡ转染ＢＨＫ－２１细胞。以蛋白印迹法、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及免疫荧光法检测Ｈ…     

Tumor necrosis factor mediated release of platelet-derived growth factor from bovine cerebral microvascular endothelial cells

研究ＴＮＦ介导的ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ及药物对ＢＣＭＳＭＣ增殖的保护作用．方法：体外培养ＢＣＭＥＣ和ＢＣＭＳＭＣ，用结晶紫染色法观察ＴＮＦ引起的ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ继而促进ＢＣＭＳＭＣ增殖作用．结果：ＴＮＦ不能促进无血清培养的ＢＣＭＳＭＣ增殖，但ＴＮＦ（５－２０μｇ·Ｌ－１）剂量依赖地促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ．ＴＮＦ（２０μｇ·Ｌ－１）促进ＢＣＭＳＭＣ增殖的百分率为３４±４％．药物Ｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ，ｉｓｏｉｍｐｅｒａｔｏｒｉｎ和ＰＭＤＰ不影响ＴＮＦ引起ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ，但能剂量依赖地（１－１００μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制ＰＤＧＦ促ＢＣＭＳＭＣ增殖的作用．结论：ＴＮＦ促进ＢＣＭＥＣ释放ＰＤＧＦ继而引起ＢＣＭＳＭＣ的增殖．药物能抑制ＰＤＧＦ引起的ＢＣＭＳＭＣ增殖．     

β－内酰胺类抗生素联合舒巴坦对产酶大肠杆菌的体外抗菌活性研究

４种β－内酰胺类抗生素与舒巴坦（ＳＢＴ）以２：１比例联合对临床分离产酶大肠杆菌的体外抗菌活性研究结果表明：氨苄西林（ＡＭＰＣ）、哌拉西林（ＰＩＰＣ）、头孢唑林（ＣＥＺ）、头孢哌酮（ＣＰＺ）联合舒巴坦对４５株产酶大肠杆菌的体外抗菌活性均优于抗生素自身的抗菌活性，尤以ＡＭＰＣ／ＳＢＴ、ＰＩＰＣ／ＳＢＴ、ＣＥＺ／ＳＢＴ明显；８０％以上的产酶株对ＰＩＰＣ／ＳＢＴ、ＣＥＺ／ＳＢＴ、ＣＰＺ／ＳＢＴ和ＣＰＺ敏感；ＣＰＺ／ＳＢＴ与ＣＰＺ的抗菌活性比较差异不明显，可能与ＣＰＺ具有酶稳定性有关。     

1α,25-二羟维生素D_3对患者PBMC分泌的IFN-α和IL-10水平的影响

目 的 探 讨 １α，２５－二羟 维生 素 Ｄ_３（１α，２５－（ＯＨ ）２Ｄ ）对 系 统性 红斑 狼 疮（ＳＬＥ）患 者 外周 血 单个 核 ３细 胞（ＰＢＭ Ｃ）分 泌的 白细 胞 介素 （ＩＬ）－１０ 和 干扰 素 （ＩＦＮ ）－α水平 的 影响 。方法 ２０ 例 ＳＬＥ 患 者和 １０ 名健 康 志愿者 ＰＢＭ Ｃ 的提 取 采 用 Ｆｉｃｏｌ密 度 梯 度 离 心 法 ，ＳＬＥ 组 和 对 照 组 在 不 加 或 加 入 １α，２５－（Ｏ Ｈ ）２Ｄ３ 的 情 况 下 孵 育 ７２ ｈ收 集培 养 上清 ，上 清液 ＩＬ－１０ 和 ＩＦＮ－α水平 检 测采 用酶 联 免疫 吸附 试 验（ＥＬＩＳＡ ）。结 果 与 正常 对 照组 相比 ，ＳＬＥ组 ＰＢＭ Ｃ 中 ＩＬ－１０ 和 ＩＦＮ－α水 平 明 显 增高 （Ｐ＜０．０１）。０．０１ ｍ ｏｌ／Ｌ １α，２５－（Ｏ Ｈ ）２Ｄ３ 的 加 入 明 显 抑 制 了 ＳＬＥ 组ＰＢＭ Ｃ 中 ＩＦＮ －α的 产 生 （Ｐ＜０．０１），增 加 了 ＳＬＥ 组 ＰＢＭ Ｃ 中 ＩＬ－１０ 的 产 生 （Ｐ＜０．０１），但 对 正 常 对 照 组 ＩＦＮ －α和ＩＬ－１０ 水平 无明 显 影响 。结 论 １α，２５－（ＯＨ ）２Ｄ 可 能 抑制 体外 培 养的 ＳＬＥ 患 者 ＰＢＭ Ｃ ＩＦＮ －α的产 生     

地尔硫Zhuo抑制大鼠肝脏药物代谢的机制

目的：研究地尔硫Ｚｈｕｏ（ＤＺ）抑制大鼠肝脏药物代谢的机制。方法：（１）ＳＤ大鼠未诱导或经地塞米松（ＤＥＸ）、苯巴比妥（ＰＢ）、β－萘黄酮（ＢＮＦ）诱导，制备肝微粒体，于ＤＺ体外３７℃温孵２５ｍｉｎ，检测细胞色素Ｐ４５０－Ｆｅ（Ⅱ）－代谢物（ＭＩ）复合物。（２）未诱导大鼠ｉｐＤＺ１００ｍｇ／ｋｇ３ｄ，或经ＤＥＸ诱导再给予单剂量ＤＺ１００ｍｇ／ｋｇ，制备肝微粒体并检测ＭＩ复合物。结果：ＤＥＸ、ＢＰ诱     

RP－HPLC法测定人血清中卡马西平及其环氧化物

用ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定人血清中卡马西平（ＣＢＺ）及活性代谢产物卡马西平１０，１１－环氧化物（ＣＢＺ－Ｅ）的含量。血清样品用乙醚－二氯甲烷（３：１，Ｖ／Ｖ）混合溶剂提取，以硝基安定为内标，乙腈－水（４０：６０，Ｖ／Ｖ）为流动相，流速为１．２０ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２１５ｎｍ处测定；ＣＢＺ－Ｅ和ＣＢＺ最低检测浓度分别为５０和６０ｎｇ／ｍｌ；线性范围为０．１～５．０μｇ／ｍｌ和０．２～２０μｇ／ｍｌ；ＲＳＤ在５％以下。应用本法测定了８名癫痫病人单一服用ＣＢＺ治疗血清中ＣＢＺ和ＣＢＺ－Ｅ的浓度。     

三七总皂甙对Sprague-Dawley种系大鼠脑循环的影响

研究三七总皂甙（ＰＮＳ）对麻醉Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大鼠脑循环的影响，并与维拉帕米（Ｖｅｒ）和去甲肾上腺素（ＮＥ）进行比较。用电磁流量计测定脑血流量（ＣＢＦ），以股动脉平均血压（ＭＢＰ）除以ＣＢＦ为脑血管阻力（ＣＶＲ），结果为：ＰＮＳ５０～２００ｍｇ·ｋｇ－１　ｉｖ使大鼠的ＭＢＰ和ＣＶＲ分别下降１４～２１％和８～２２％，Ｖｅｒ３０ｕｇ·ｋｇ－１ｉｖ表现出类似效应，而ＮＥ３０ｕｇ·ｋｇ－１　ｉｖ则表现出相反效应，对ＣＢＦ，ＰＮＳ１００和２００ｍｇ·ｋｇ－１使其分别减少１５±１１％和３３±１０％，而Ｖｅｒ和ＮＥ均对其无影响。表明ＰＮＳ虽具扩张ＳＤ大鼠脑血管的作用，但并不因此而增加ＳＤ大鼠的脑血流量。     

RP—HPLC法测定人血清中卡马西平及其环氧化物

用ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定人血清中卡马西平（ＣＢＺ）及活性代谢产物卡马西平－１０，１１－环氧化物（ＣＢＺ－Ｅ）的含量。血清样品用乙醚－二甲烷（３：１，Ｖ／Ｖ）为流动相，流速为１．２０ｍｌ／ｍｉｎ，ＵＶ２１５ｎｍ处测定。ＣＢＺ－Ｅ和ＣＢＺ最低检测浓度分别为５０和６０ｎｇ／ｍｌ；线性范围为０．１－５．０μｇ／ｍｌ和０．２－２０μｇ／ｍｌ；ＲＳＤ在５％以下。应用本法测定了８名癫痫病人单一服用ＣＢＺ治疗血清中     

候选的减毒活疫苗和重组疫苗诱导的抗2型登革病毒保护性免疫力比较

作者将２型登革（ＤＥＮ－２）病毒的Ｅ基因克隆于穿梭载体ｐＶＬ－９４１－ｐｏｌｙ，通过在草地夜蛾细胞内同源重组将重组载体转染到苜蓿银纹夜蛾ＲＰ２３－ｌａｃＺ基因组中，从细胞上清提取的重组Ｅ蛋白用ＴＡＬＯＮＴＭ树脂纯化后制成重组疫苗，与ＤＥＮ－２ ＰＤＫ５３ Ｔｈａｉ活疫苗进行了保护性免疫力的对比研究。 将６只抗登革病毒血清阴性的食蟹猴分为３组，分别皮下免疫以明矾作佐剂的１００μｇ重组Ｅ蛋白（Ａ组）、ＤＥＮ－２ ＰＤＫ５３Ｔｈａｉ减毒活疫苗（Ｂ组）和ＰＢＳ（Ｃ组）。Ａ和Ｃ组分别于第１４和５６天加强免疫。…     

芬苯达唑精制方法

芬苯达唑精制方法邓晓林（上海宝达兽药制造有限公司，上海２０１９０８）ＰＵＲＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦＦＥＮＢＥＮＤＡＺＯＬＥ￥ＤＥＮＧＸｉａｏ－Ｌｉｎ（ＳｈａｎｇｈａｉＢａｏｄａＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ，Ｌｔｄ．，Ｓｈａｎｇｈ...     

喉鳞癌组织中P53和bc1—2蛋白的表达

用免疫组化ＬＳＡＢ法对５３例喉鳞状细胞癌（ＬＳＣＣ）癌组织的Ｐ５３和ｂｃ１－２蛋白表达进行了检测。结果表明５３例ＬＣＳＳ中２５例（４７．１７％）突变型Ｐ５３蛋白表达为阳性，同时一些癌旁不典型增生上皮中也有Ｐ５３表达，说明突变型Ｐ５３表达可能是ＬＳＣＣ发展的早期事件。此外，在所有检测病例中ｂｃ１－２蛋白表达率为６９．８１％（３７／５３），ｂｃ１－２蛋白表达和Ｐ５３蛋白表达间未见到相关关系     

氰戊菊酯对细胞色素P450 2B1/2B2的诱导

１５只ＳＤ大鼠随机分为氰戊菊酯（Ｆｅｎ）组（１２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×７,ｉｇ）,苯巴比妥（ＰＢ）诱导组（８０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１×３,ｉｐ）及溶剂对照组（给予Ｆｅｎ组等体积的二甲亚砜,处理同Ｆｅｎ组）．应用不连续ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分离细胞色素Ｐ４５０,用ＣＯ差示光谱法和细胞色素Ｃ还原法测定Ｐ４５０含量及ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ４５０还原酶活性,用ＣＹＰ２Ｂ１／２Ｂ２抗体及ＣＹＰ３Ａ１／３Ａ２抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析,用免疫组化和半定量ＲＴ－ＰＣＲ等技术观察Ｆｅｎ影响大鼠脑,肝组织细胞色素Ｐ４５０亚型的特异性．结果显示,与溶剂对照组相比Ｆｅｎ可使脑和肝中Ｐ４５０含量及ＮＡＤＰＨ－Ｐ４５０还原酶活性增高;Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２增加,Ｐ４５０３Ａ１／３Ａ２未见改变;Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２ｍＲＮＡ含量相应增加．由于正常大鼠脑,肝组织中Ｐ４５０２Ｂ１／２Ｂ２表达很低,Ｆｅｎ对该亚型Ｐ４５０的诱导可能会干扰机体对内,外源化合物的正常代谢,从而产生毒作用．     

Detection of DNA damage in peripheral lymphocytes by 7 compounds using comet assay

目的：检测过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）、甲磺酸乙酯（ＥＭＳ）、丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、二甲基亚硝胺（ＤＭＮＡ）、苯并（ａ）芘（ＢａＰ）、２氨基芴（２ＡＦ）和环磷酰胺（ＣＰ）诱发小鼠、大鼠及人外周血淋巴细胞ＤＮＡ单链断裂．方法：体外单细胞微量凝胶碱性电泳试验（慧星试验）．结果：除ＥＭＳ０９７ｍｍｏｌ·Ｌ－１在小鼠淋巴细胞，ＭＭＣ３０μｍｏｌ·Ｌ－１在小鼠、人淋巴细胞中呈阴性外，其余均为阳性．最低可检测浓度分别为Ｈ２Ｏ２１μｍｏｌ·Ｌ－１，ＥＭＳ０４８ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＢａＰ５０μｍｏｌ·Ｌ－１，ＣＰ２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ＭＭＣ１０μｍｏｌ·Ｌ－１，ＤＭＮＡ２７３ｍｍｏｌ·Ｌ－１，２ＡＦ６２５μｍｏｌ·Ｌ－１．ＣＰ、ＢａＰ、２ＡＦ需经Ｓ９Ｍｉｘ代谢活化才显示毒性．结论：彗星试验检测出ＭＭＣ诱导大鼠，ＥＭＳ诱导大鼠和人，以及Ｈ２Ｏ２、ＤＭＮＡ、ＢａＰ、ＣＰ和２ＡＦ诱导小鼠、大鼠和人外周血淋巴细胞ＤＮＡ单链断裂损伤．     

以DNA、痘苗病毒和蛋白免疫接种提呈HIV Env蛋白的新方法

重组ＤＮＡ、痘苗病毒载体（ＶＶ）作为人类免疫缺陷症病毒（ＨＩＶ）抗原的送递系统因其能同时诱导细胞免疫和体液免疫而受到重视,作者对表达ＨＩＶ包膜（Ｅｎｖ）蛋白的ＤＮＡ和ＶＶ载体（ＤＮＡ－Ｅｎｖ和ＶＶ－Ｅｎｖ）及纯化的Ｅｎｖ蛋白的免疫效果进行了检测。 将ＨＩＶ－ⅢＢ株的 ｇｐ１４０ Ｅｎｖ编码序列插入含有巨细胞病毒增强子／启动子的质粒中,用基因枪将包被于金粒上的重组质粒注入８～１２周龄的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠腹部;或腹腔接种表达 ＨＩＶ－ⅢＢ株蛋白的重组 ＶＶ感染细胞的裂解物;纯化蛋白疫苗则由ｇｐ １２０（１…     

地尔硫Zhou对大鼠离体肝脏灌注中安替比林代谢的影响

以安替比林（ＡＰ）为模型药,采用大鼠离体肝脏灌流模型（ＩＰＲＬ）,研究钙离子拮抗剂地尔硫Ｚｈｏｕ（ＤＺ）对ＡＰ代谢的影响。方法：１５只雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠随机分为３组,Ａ、Ｂ组灌胃（ｉｐ）生理盐水３ｄ,第４天分别用５ｍｇＡＰ及加用２ｍｇＤＺ循环灌流３ｈ,Ｃ组ｉｐＤＺ（１００ｍｇ．ｋｇ＾－１）３ｄ,第４天同Ｂ组灌流。ＨＰＬＣ法测定灌流液中ＡＰ及其代谢的浓度。结果：Ｂ、Ｃ组中,ＡＰ的Ｔ     

GM—CSF工程菌构建及鉴定

采用ＰＣＲ技术，从细胞中克隆粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）并在５′端设计上凝血酶切位点５个组氨酸密码子，起始密码子及ＥＣＯＲＩ酶切点位，在３′端设计上ＢａｍＨＩ酶切位点，将扩增产物酶切后克隆到ＰＢＶ２２０质粒的ＥＣＯＲＩ－ＨｉｎｄⅢ酶切位点，转化大肠杆菌ＤＨ５α筛选阳性重组子（Ｐ＾ＧＭ０９／ＤＨ５α）经细菌形态，菌落形态功生化鉴别均符合要求，在Ｅ．Ｃｏｌｉ中获得高效表达，表达量占体总     

咯利普兰逆转豚鼠离体气管对沙丁胺醇的耐受性

本研究目的旨在观察ＰＤＥＩＶ抑制剂咯利普兰对沙丁胺醇（ＳＢ）耐受性的影响。用豚鼠离体气管标本，预先接触ＳＢ１μｍｏｌ·Ｌ－１，１ｈ可使ＳＢ对抗乙酰甲胆碱气管收缩作用的剂量反应曲线右移５倍，最大松弛率下降３０％，形成ＳＢ气管松弛作用的耐受性。磷酸二酯酶（ＰＤＥ）ＩＶ抑制剂咯利普兰能翻转ＳＢ气管松弛作用的耐受性，但ＰＤＥＩＩ抑制剂氰胍哒嗪则不能。虽然蛋白合成抑制剂环己酰亚胺对ＳＢ耐受性无预防作用，但上述结果仍提示ＳＢ气管松弛作用的耐受性可能与ＰＤＥＩＶ活性的增高有关。     

1，3－二苄基咪唑－2－酮－顺－4，5－二羟酸的合成

１，３－二苄基咪唑－２－酮－顺－４，５－二羟酸的合成陈芬儿，万江陵，杨建设，张海云（武汉化工学院制药研究室，湖北４３００７４）ＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦ１，３－ＤＩＢＥＮＺＹＬ－２－ＩＭＩＤＡＺＯＬＩＤＯＮＥ－ｃｉｓ－４，５－ＤＩＣＡＲＢＯＸＹＬＩＣＡＣ...     

争光霉素复合物中两种新组份的研究

从争光霉素产生菌轮枝链霉菌平阳新变种（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓｖａｒ．Ｐｉｎｇｙａｎ－ｇｅｎｓｉｓｎ．ｓｐ．）的发酵产物争光霉素复合物中分离得到了二种新组份Ｚ－９０１和Ｚ－９０２，通过ＵＶ、ＩＲ、ＣＤ、ＦＡＢＭＳ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、１３Ｃ－１ＨＣＯＳＹ等光谱测定，确定了它们的结构，证明它们是二个新的化合物，分别称为ＤｅｐｙｒｕｖａｍｉｄｅＢＬＭＡ５（Ｚ－９０１）和Ｄｅａｍｉｄｅ－Ｄｅｐｙｒｕｖａ－ｍｉｄｅＢＬＭＡ５（Ｚ－９０２）。     

大鼠肝和心脏微粒体羧酸酯酶的诱导与抑制

用对硝基苯醋酸酯（ｐ－ＮＰＡ）为底物，测定大鼠肝和心脏敌酸醋酶（ＣＥ）的水解活性，苯巴比妥和氟贝特对肝脏ＣＥ活力有明显的诱导作用，而地塞米松（Ｄｅｘ）对心脏ＣＥ活力显示有诱导作用，表明相同药物对肝和心脏ＣＥ活力诱导是有差异的：双－对硝基苯磷酸酯钠（ＢＮＰＰ），苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）和氟磷酸二异丙酯（ＤＦＰ）对肝和心脏ＥＣ活力均有明显的抑制作用，ＢＮＰＰ，ＰＭＳＦ和ＤＦＰ对肝及心脏ＣＥ活力的Ｉ５０分别为１００，２００，５μｍｏｌ·Ｌ－１和５０．０，５．０、０１ｍｍｏｌ·Ｌ－１；对肝和心脏ＣＥ水解ｐ－ＮＰＡ的Ｋｉ分别为１．１．１．２．０．６７ｍｍｏｌ·Ｌ－１和１．０，０．８．０．５４ｍｍｏｌ·Ｌ－１，结果表明三种抑制剂对肝和心脏ＣＥ的抑制强度存在明显差异．