国产阳离子交换树脂CM—FF分离,纯化表皮生长因子的 研究

采用国产阳离子交换树脂，从雄性小鼠的颌小腺中分离、纯化表皮生长因子（ＥＧＦ）。实验结果表明，两步ＣＭ－ＦＦ柱层析吸附ＥＧＦ的最佳流速和最适ｐＨ分别为：柱１，０．５ｍｌ／ｍｉｎ，ｐＨ５．５，柱０．３ｍｌ／ｍｉｎ，ｐＨ４．０ＣＭ－ＦＦ柱Ⅱ的最佳解析剂为０．２ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ溶液。ＣＭ－ＦＦ在分离、纯化ＥＧＦ中的效果与ＣＭ－３２是基本相似的。     

蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离方法研究

目的：探索蝎毒抗癌多肽组分Ⅲ的分离和纯化方法：方法：蝎毒经预处理后,分别采用ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换凝胶柱层析法和ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换凝胶柱ｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶柱联合层析法,分离ＡＰ－Ⅲ,用ＨＰＬＣ仪检测２种方法分离出的ＡＰ－Ⅲ的纯度及产率。结果：单独用ｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离了交换凝胶柱分离,ＡＰ－Ⅲ产率为２．２４％,纯度为８９％。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶柱与Ｓｅｐ     

阳离子交换色谱一步法制备级纯化单克隆抗体

应用快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立一种一步法制备级纯化单隆抗体方法。方法：将ＭｃＡｂ腹水用ｐＨ６．０，０．０１ｍｏｌ／Ｌ ＰＢ透析或稀释８倍后直接上ＳＰ－４０ＨＲ阳离子交换色谱柱，用ＰＢ－ＮａＣｌ二元线性离子梯度洗脱，即得到纯化的ＭｃＡｂ。结果：每次上样量７０～８０ｍｌ腹水，可获得纯化ＭｃＡｂ５００～５８０ｍｇ，得率７～７．５ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为７０％～７５％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测纯度为     

人血浆中尼美舒利的高效液相色谱法测定及其药代动力学研究

以对羟基联苯为内标设计了血浆中尼美舒利的高效液相色谱测定法。色谱柱为Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＯＤＳ２ ２０ｃｍ×４．６ｍｍ ＩＤ５μｍ，流动相为甲醇－水－冰醋酸（６０：４０：１），流速１ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为２３０ｎｍ。血样经盐酸溶液酸化反以乙醚提取，回收率为８１．５３％￣８９．１７％，血浆中尼美舒利的最低检出浓度为０．０２μｇ／ｍｌ，线性范围为０．１￣２０μｇ／ｍｌ。１０名志愿者随机交叉ｐｏ单剂量２     

环丙沙星血药浓度的高效液相色谱法测定及人体药代动力学

本文建立了一种反相高效液相色谱（ＨＰＬＣ）测定环丙沙星血药浓度的方法。固定相为５μｍＵｌｆｒａｓｐｈｅｒｅ－ＯＤＳ，流动相为柠檬酸，醋酸钠与０．１％的三乙胺组成的缓冲液，乙腈，流速１ｍｌ／ｍｉｎ，室温ＵＶ检测波长２７８ｎｍ。线性范围０．１２５－１６．０μｇ／ｍｌ，ｒ＝０．９９９７，最低检测限０．０２５μｇ／ｍｌ。５例感洒病人的ＣＰＦ药时曲线用非房室模型拟合动力学参数结果：ＡＵＣ＝１１．１±２．８ｍ     

核素显像法测定肾小球滤过率及其临床应用的价值

用９９ｍ锝－二乙三胺五乙酸（９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ）显像法测定了８４例受检者的肾小球滤过率（ＧＦＲ）。１５例正常人ＧＦＲ为１１４．５±１２．９ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２；泌尿系结石组及慢性肾炎组病人ＧＦＲ分别为６７．６±３７．２ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２及５３．２±３６．５ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２，与正常组比较差异有极显著意义（Ｐ＜０．００１）；原发性高血压组病人ＧＦＲ为８８．１±４０．３ｍｌ·ｍｉｎ－１／１．７３ｍ２，较正常组有显著差异（Ｐ＜０．０５）。５３例病人的自身对比研究证实，ＧＦＲ明显比尿素氮和肌酐灵敏（Ｐ＜０．００１），且该方法在测定总肾功能的同时，可显示分肾功能及肾脏形态学方面的资料。讨论了该法测定ＧＦＲ的注意事项。     

蝎毒素Ⅳ分离、纯化研究

取东亚钳蝎毒４ｍｌ，用０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲液（ｐＨ７．４）稀释，在４℃条件下，１５０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，取上清上柱（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０，长１８０ｃｍ，流速１～１．５ｍｌ／ｍｉｎ）。蝎毒经分离可得１１个组分，取ＳＶＣ－Ⅳ再次柱层析（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５，长４０ｃｍ，流速２～２．５ｍｌ／ｍｉｎ）以脱盐，经真空冷冻干燥，置－１０℃以下贮藏，生物活性可保持５ａ以上。蝎毒在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示１２条带以上，而ＳＶＣ－Ⅳ呈现出单一条带，相对分子质量为８５００～９０００。     

阳离子交换色谱—步法制备级纯化单克隆抗体

目的：应用快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立一种一步法制备级纯化单克隆抗体方法．方法：将ＭｃＡｂ腹水用ｐＨ６．０，０．０ｌｍｏ１／ＬＰＢ透析或稀释８倍后直接上ＳＰ－４０ＨＲ阳离于交换色谱柱，用ＰＢ－ＮａＣｌ二元线性离子梯度洗脱，即得到纯化的ＭｃＡｂ．结果：每次上样量７０～８０ｍｌ腹水，可获得纯化ＭｃＡｂ５００～５８０ｍｇ，得率７～７．５ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为７０％～７５％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测纯度为大于９２％，ＡＢＣ染色法测定活性为１：８００００（７．８×１０－１１ｍｏ１／Ｌ），一次纯化周期仅需５０ｍｉｎ。结论：本方法操作简单，既具有常压色谱的制备量，又具有ＨＰＬＣ的纯化速度，是获得高纯度、高活性ＩｇＧ类ＭｃＡｂ的实用纯化方法。     

SPECT快速法测定肾小球滤过率的研究

受检者静脉注射９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ（３～８ｍｃｉ），使用ｒ相机，采集６分钟，利用Ｇａｔｅｓ法计算肾小球滤过率（ＧＦＲ）．重复性实验ｌ０例ＧＦＲ（１１～１０１．９ｍｌ／ｍｉｎ），结果两均数分别是６３．３５ｍｌ／ｍｉｎ，６２．５５ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ＝０．４７，两均数间均无差别，相关性很好，ｒ＝０．９８６，１５例ＧＦＲ与肌酐清除率（ＣＣｒ）比较，ＧＦＲ（８．１～１０１．７ｍｌ／ｍｉｎ）．ＣＣｒ（５．２～９７．４ｍｌ／ｍｉｎ）回归方程是ＣＣｒ＝－４．６３８＋０．９５ＧＦＲ，相关性很好，ｒ＝０．９８３     

改变硬膜外麻醉给药方法的临床探讨

３９例ＡＳＡⅠ￣Ⅱ级盆腔或下肢手术患者术前随机分成三组,每组１３例。Ⅰ组首先经下管给予１：２０万肾上腺素盐水０．１ｍｌ／ｃｍ身高,１５ｍｉｎ后再给予１．６％利多卡因０．０８ｍｌ／ｃｍ身高,此后间断测试麻醉起效时间、麻醉维持时间和麻醉最大平面,以及各时ｐ、ＨＲ、Ⅱ组首先经下管给予生理盐水０．１ｍｌ／ｃｍ身高,１５ｍｉｎ后给予１．６％利多卡因０．０８ｍｌ／ｃｍ身高,其后测试同１组。Ⅲ组仅经下管给予１．     

小儿心力衰竭定量诊断标准的研究

用多普勒超声心动图测定２８６名正常儿童和４１例心衰患儿的５８项心脏血流参数，选出主动脉峰值流速（ＰＦＶＡ）、肺动脉峰值流速（ＰＦＶＰ）、二尖瓣Ｅ峰峰值流速（ＰＦＶＭＥ）、三尖瓣Ｅ峰流速（ＰＦＶＴＥ）、心脏指数（ＣＩ）等５项作为心衰定量诊断标准。这５项指标为ＰＦＶＡ：６个月以下＜７３．１ｃｍ／ｓ，６个月～＜８７．１ｃｍ／ｓ，４岁～＜１０１．９ｃｍ／ｓ，１０～１４岁＜１１０ｃｍ／ｓ；ＰＦＶＰ：６个月以下＜６９．２ｃｍ／ｓ，６个月～１４岁＜８２．４ｃｍ／ｓ；ＰＦＶＭＥ：６个月以下＞７８．５或＜５０．１ｃｍ／ｓ，６个月～１４岁＞１０１．６或＜７５．２ｃｍ／ｓ；ＰＦＶＴＥ：６个月以下＞６５．９或＜３７．１ｃｍ／ｓ，６个月～１４岁＞６７．１或＜４３．１ｃｍ／ｓ；ＣＩ＜２．６Ｌ／ｍ~２·ｍｉｎ~（－１）。     

RP－HPLC法测定氢氯噻嗪片中氢氯噻嗪及其有关物质的含量

建立了氢氯噻嗪片中氢氯噻嗪及其有关物质含量的反相高效液相色谱测定法。色谱条件：色谱柱：ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１６（４ＩＤ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相：水－乙腈（８８∶１２）；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；柱温：室温；ＡＵＦＳ：０．３２；检测波长：２７３ｎｍ。在本实验条件下，氢氯噻嗪与４－氨基－６－氯－１，３－苯二磺酰胺分离效果良好。氢氯噻嗪在５～３５μｇ浓度范围内具有良好的线性关系，其最小检出限约为０．２μｇ／ｍｌ；４－氨基－６－氯－１，３－苯二磺酰胺在２～３０μｇ／ｍｌ浓度范围内具有良好的线性关系，其最小检出限约为０．１μｇ／ｍｌ。     

高效液相色谱法测定氟氧头孢的血药浓度

建立了测定氟氧头孢血药浓度的ＨＰＬＣ法。采用Ｈｙｐｅｒｓｌｌ Ｃ１８色 柱,以甲醇－乙腈－水－磷酸－三乙胺（１６：６７８：０．２８：０．４）为流动相,流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ,检测波长２７０ｎｍ灵敏度０．０５ＡＵＦＳ。该法线性范围为０．２５～１００μｇ／ｍｌ（ｒ－０．９９９８）,回事率大于９３％,日内、日间ＲＳＤ小于８．０％。     

^99mTc标记抗癌胚抗原单抗C50片段Fab‘及其生物分布研究

目的：研究克服＾９９ｍＴｃ示记抗癌胚抗原（ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ,ＣＥＡ）单抗体内生物半衰期长、血液廓清速度慢、晚时相放射性信号弱等缺点的方法,用直接标记法进行了＾９９ｍＴｃ标记抗ＣＥＡ抗体Ｃ５０片断Ｆａｂ’的研究。方法：经胃蛋白酶切得的Ｃ５０片段Ｆ（ａｂ’）２用适量的２－巯基乙醇还原,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０柱分离获得纯度大于９０％的Ｆａｂ’片断。取０．６～１．０ｍｇ纯化的片段Ｆａｂ’（体积〈１．０ｍｌ）,加入０．４～０．８ｍｇ葡庚糖酸钠及新鲜配制的ＳｎＣｌ２溶液５～１０μｇ,然后加入新鲜淋洗的Ｎａ＾９９ｍＴｃＯ４淋洗液,反应１０～１５ｍｉｎ。用高压液相色谱监测放化纯度和抗体纯度。荷ＣＬ－１８７（结肠癌）裸鼠静脉注射＾９９ｍＴｃ－Ｆａｂ’,观察标记抗体片段在不同时相的体内分布。结果：     

N－单甲基左旋精氨酸对犬冠脉内皮依赖性舒张功能及内皮素－1含量的影响

作者在开胸麻醉犬心脏上，观察冠脉内灌注Ｎ－单甲基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）５ｍｇ／ｋｇ，前后冠脉血流动力学、冠脉血流储备（以阻断冠脉１５ｓ再灌注所致的反应性充血血流峰值表示）以及冠脉对不同浓度乙酰胆硷（Ａｃｈ）反应的变化，同时用放射免疫法（ＲＩＡ）测定冠脉前降支（ＬＡＤ）伴行静脉血中的内皮素－１（ＥＴ－１）含量．结果证明，Ｌ－ＮＭＭＡ灌注后心率下降，基础冠脉血流量（ＣＢＦ）下降（χ±ｓ，从２７±６ｍｌ／ｍｉｎ下降至２０±８ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ＜０．０５），冠脉储备下降（χ±ｓ，从９１±１９ｍｌ／ｍｉｎ下降至５０±１０ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ＜０．０１），平均主动脉压升高，ＥＴ－１含量明显升高（χ±ｓ，从６．５±１．０ｎｇ／Ｌ升至１５．５±３．０ｎｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１），Ａｃｈ引起的ＣＢＦ增加减弱（Ｐ＜０．０１）．实验结果提示，生理条件下犬冠脉一氧化氮（ＮＯ）形成对ＣＢＦ，冠脉储备有重要调节作用，同时可抑制冠脉ＥＴ－１释放．     

RP—HPLC法测定氢氯噻嗪片中氢氯噻嗪瘃其有关物质的含量

建立了氢氯噻嗪片中氢氯噻嗪诼其有关物质含量的反盯高效液相色谱测定法。色谱条件：色谱柱：ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１６（４ＩＤ×１５０ｍｍ，５μｍ）；流动相；水－乙腈（８８：１２）；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；柱温；室温；ＡＵＦＳ；０．３２；检测波长：２７３ｎｍ。在本实验条件下，氢氯噻嗪与４－氨基－６－氯－１，３－苯二磺酰胺分离效果良好。氢氯噻嗪在５－３５μｇ浓度范围内具有良好的线性关系，其最小检出限约为     

人血浆中尼美舒利的高效液相色谱测定及其药代动力学研究

以对羟基联苯为内标设计了血浆中尼美舒利的高效液相色谱测定法。色谱柱为ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ２２０ｃｍ×４．６ｍｍＩＤ５μｍ，流动相为甲醇－水－冰醋酸（６０４０１），流速１ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为２３０ｎｍ。血样经盐酸溶液酸化后以乙醚提取，回收率为８１．５３％～８９．１７％，血浆中尼美舒利的最低检出浓度为０．０２μｇ／ｍｌ，线性范围为０．１～２０μｇ／ｍｌ。１０名志愿者随机交叉ｐｏ单剂量２００ｍｇ两种国产尼美舒利制剂后，以本法测定其体内过程符合一室模型，统计学结果表明两种制剂吸收程度相近     

SDS—PAGE法检测人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs条件的选择

探讨ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法检测人甲状及其肿瘤组织中ｂＦＧＦｓ（ｂａｓｉｃ Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ）的条件，。方法：采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳法检测人甲状腺及其肿瘤组织中的ｂＦＧＦｓ。结果；分离胶浓度为１２．５％，胶原为０．５ｃｍ，电流强度为３０ｍＡ，样品量为５－６ｕｌ，标准ｂＦＧＦｓ上样量为２０ｕｌ较适全人甲状腺及其肿瘤组织中各种分子量的ｂＦＧＦｓ的分离及鉴定。结论：人甲状腺     

高效液相色谱测定体液乙酰白霉素

为建立一种灵敏度高、特异性和实用性强的体液乙酰白霉素测定方法，采用Ｌｃ－６Ａ高效液相色谱仪、Ｓｈｉｍ－ＰａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ分析法，并根据原药理化性质选用甲醇：０．２ｍｏｌ／Ｌ醋酸铵＝２．８：１为流动相，流速１．５ｍｌ／ｍｉｎ，波长２３１ｎｍ条件下对测定方法进行研究，结果表明：血尿药物浓度在０．０５０～３．０００μｇ／ｍｌ范围内，药物浓度与Ａ５峰高线性关系良好：回收率血、尿药物平均值分别为９６．４３％与９６．２５；变异系数血、尿药物浓度为０．５μｇ／ｍｌ与１．５μｇ／ｍｌ时，两者批内变异系数在４．７５％～５．７５％间，批间系数在６．４９％～６．７０％范围间。     

鳀鱼鱼油中EPA和DHA的气相色谱分析

用气相色谱法测定鳀鱼鱼油中ＥＰＡ、ＤＨＡ的含量，鱼油ＰＵＦＡ用０．５ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ－甲醇液皂化，ＢＦ＿３－甲醇酯化成脂肪酸甲酯，进行气相色谱测定。内标物用ＴＳＡ－Ｍ。模拟试验５份平均回收率ＥＰＡ－Ｍ为８９．８６％，ＤＨＡ－Ｍ为８９．７８％。变异系数ＥＰＡ－Ｍ为０．８０％，ＤＨＡ－Ｍ为０．６４％。表明本法简便、快速、重现性好。