放射配基结合抑制分析监测抗β受体抗体应答

通过正交试验改良放射配基(~(125)I-心得静)结合抑制分析(RBIA),所得的最佳实验条件为孵育温度30℃,缓冲液pH7.4,加血清预孵育40min,加~(125)I-PIN孵育20min;用于监测猪心肌细胞膜免疫BALB/c小鼠的抗β受体抗体应答,其血清中抗体对~(125)I-PIN结合β受体的抑制呈浓度依赖性,且为非竞争性抑制。同时还讨论了RBIA对于测定病人体内循环抗β受体自身抗体的临床应用价值。     

绒毛膜促性腺激素受体单克隆抗体的制备及其特性的初步研究

以纯化嗜麦芽假单胞菌的绒毛膜促性腺激素(CG)受体为抗原,融合得到4株(ED490,DG390,AB890,GE590)对细菌CG受体特异的单克隆抗体杂交瘤细胞,其腹水和培养上清中的抗体滴度分别为10~(-2)～10~(-6)和1～10~(-2);亚类鉴定显示:单抗GE590为IgGl,单抗ED490、DG390和AB890为IgG2b。研究发现,ED490、AB890和DG390与细菌CG受体作用后,~(125)I-HCG仍能结合该受体,揭示其作用于受体不同位点。GE590与CG受体结合实验发现,随着单抗浓度不断增加,~(125)I-HCG与受体结合逐渐减少,推测该单抗与~(125)I-HCG结合受体同一位点。     

抗β2—受体自身抗体在心肌梗死急性期的动态变化

目的:了解抗β2-受体的自身抗体在急性心肌梗死(AMI)时的变化规律.方法:以合成的人心脏β2-受体细胞外第二环表位肽段172-197氨基酸序列作为抗原,应用酶联免疫吸附(ELISA)方法,检测41例AMI患者,发病24小时、7天、2～4周时,血清中抗β2-受体自身抗体的阳性率,并与61例正常人的检测结果进行对比.结果:心肌梗死患者急性期抗β2-受体自身抗体的阳性率显著高于对照组(P＜0.05);心肌梗死发病24小时时抗β2-受体自身抗体的阳性率(29.3%)明显低于发病2～4周时(56.1%)的检测结果(P＜0.05);心肌梗死急性期心功能killip-1级者与killip-2级者比较,抗β2-受体自身抗体的阳性率无显著性差异.结论:抗β2-受体自身抗体存在于AMI患者血清中,且在发病2～4周内逐渐升高.该抗体的产生与心肌梗死急性期心功能状态无明显的相关性.     

心脏病患儿抗心肌β-肾上腺素能受体抗体的测定

目的探讨抗心肌β-肾上腺素能受体(简称β-受体)抗体对小儿心脏病的诊断价值。方法运用免疫印转法检测了30例病毒性心肌炎(VMC),14例扩张型心肌病(DCM),22例先天性心脏病(CHD),10例风湿性心脏病(RHD)患儿和25例正常对照组(NC)血浆抗β-受体抗体水平。结果VMC和DCM患几中抗β-受体抗体的阳性率显著高于CHD、RHD和NC组(P＜0.01)。抗β-受体抗体诊断VMC和DCM的灵敏度为80％,特异度为98％。结论小儿心脏病的鉴别诊断中抗β-受体抗体的测定有重要价值,可作为小儿VMC和DCM的特异性诊断指标。     

用双抗体免疫沉淀法检测重症肌无力患者血清中乙酰胆碱受体抗体

本文报告用~(125)I-α-银环蛇毒素-烟碱型乙酰胆碱受体复合物,经双抗体免疫沉淀法检测我国重症肌无力患者(88例)、正常人(30例)及其它疾病患者(20例)血清中乙酰胆硷受体抗体。正常值为0～0.4pmol/ml。正常人和其它疾病患者两组抗体滴度无显著差异,而重症肌无力患者滴度大于正常值上限者占69.3％,与前两组比较相差均非常显     

^125I（±）心得静的制备及其与小鼠肺,脑β受体的结合特性

用氯胺-T氧化法制备[125Ⅰ]-心得静(125Ⅰ-IPIN)为探针,研究其与小鼠脑、肺组织β-肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β-AR)的结合特性。平衡结合试验、结合解离动力学试验及竞争抑制试验结果表明:125Ⅰ-IPIN与上述组织β-AR的结合具有可饱和性、可逆性和特异性。其平衡解离常数(KD)为0.143±0.042nM(脑,n=14),0.180±0.072nM(肺,n=13);最大结合容量(Bmax)为37.04±6.68 fmol/mg蛋白(脑),370.05±86.36 fmol/mg蛋白(肺);Hill系数接近1.当配基浓度在0.01～0.3nM的范围内。Scatchard分析呈一直线。     

实验性过敏性哮喘豚鼠末梢肺组织β受体的数量及功能的变化

观察实验性过敏性哮喘豚鼠末梢肺组织的冰冻切片β-肾上腺素受体与~3H-DHA的结合量及离体肺条对异丙肾上腺素的松弛反应。结果表明,哮喘豚鼠肺组织冰冻切片的β-受体与~3H-DHA结合的最大结合量明显低于对照组(P<0.01),离体肺条对异丙肾上腺素松弛反应的曲线明显右移,ED_(50)值明显高于对照组(P<0.01)。认为过敏性哮喘时气道反应性亢进与末梢肺组织β受体数量减少及激动剂的亲和性降低有关。     

~(125)碘标记单克隆抗体检测钩端螺旋体抗原在豚鼠体内的分布

作者用~(125)碘标记抗黄疸出血群赖型017株钩体的McAb(LB_1株IgG_2b)静脉注入钩体病肺弥漫性出血型豚鼠,证实钩体抗原主要分布在肝、肾、肺及脾器官内。以往抗血清抗体放射自显影实验在肺内钩体抗原很少,本结果表明肺内有不少钩体抗原(平均为82.2 16×10~3cpm/200mg),揭示了用单克隆抗体结合~(125)碘探讨钩体特异性抗原在肺组织分布,具有高特异性和敏感性。     

~(125)I-MGB_2-DM在荷胃癌裸鼠体内的定位

作者用碘~(125)标记由顺-乌头酸酐法制备的胃癌单抗(MGB_2)-柔红霉素(DM)结合物,观察其在荷人胃癌SGC-7901裸鼠体内分布状态.在MGB_2—DM中,每个抗体分子引入4～5个分子DM,抗体活性保存良好.结果表明,~(125)Ⅰ—MGB_2—DM能较满意地定位于肿瘤组织,腹腔给予~(125)Ⅰ-MGB_2 DM 96h,瘤/血比值达203,其结果与未修饰MGB_2相近.     

内毒素休克狗心脏β-受体的变化

本文观察狗注射内毒素后4小时,心脏β-受体的变化。Scatchard分析显示,[~3H]-DHA最大结合量(B_(max))明显减少,结合解离常数(K_D)无显著改变。竞争性抑制试验发现休克时K_I和IC_(50)无明显变化。此结果表明,β-受体数目的减少可能是内毒素休克时心功能障碍的重要原因之一。本文对其机制进行了讨论。     

高血压病肾损害血清抗AT_1、α_1、β_1、M_2受体自身抗体临床研究

目的探讨血清AT1、α1、β1、M2-受体自身抗体与高血压病肾损害的关系及干预治疗效果。方法检测58例高血压病肾损害患者、60例高血压病无肾损害患者、50例正常人AT1、α1、β1、M2-受体自身抗体及早期肾功能损害指标,高血压患者均给予氯沙坦治疗。结果肾损害患者血清AT1、α1、β1、M2-受体自身抗体阳性率明显高于无肾损害患者,氯沙坦降压作用明显,能显著改善肾功能。结论血清抗AT1、α1、β1、M2-受体自身抗体可能与高血压病肾损害有关,氯沙坦能降低血压,可减轻和延缓高血压病引起的肾损害。     

心脏β1和M2受体自身抗体与心力衰竭相关性的研究

目的:本研究拟对不同心脏病所致的心力衰竭(CHF)患者,检测心脏β1和M2受体的自身抗体,探讨心功能发生病理变化时,这两种自身抗体的产生与疾病发生、发展的相关性。方法:以细胞外第2环表位肽段的合成肽作为抗原,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,随机检测265例受试者血清中心脏β1和M2受体的自身抗体。结果:CHF组β1受体自身抗体的阳性率为45.7%(86/188),明显高于对照组的10.4%(8/77)(P<0.01);CHF组M2受体自身抗体的阳性率为49.5%(93/188),明显高于对照组的11.7%(9/77)(P<0.01);心功能Ⅱ-Ⅲ级(NYHA心功能分级)的患者自身抗体的阳性率及抗体滴度明显高于Ⅳ级;CHF组β1受体自身抗体阳性血清中高达56.1%的患者同时具有M2受体的自身抗体。结论:心脏β1和M2受体自身抗体存在于多种心脏病所致心力衰竭患者的血清中,可能与心力衰竭时心肌结构变化和功能下降有关;β1和M2受体的双抗体阳性可能是自身免疫反应的多重性表现,提示免疫学机制参与心力衰竭和/或心肌重构的病理生理过程,参与的程度在疾病的早、中期大于晚期。     

家兔主动脉平滑肌细胞HDL3受体及配体特性的探讨

应用同位素标记高密度脂蛋白_3(HDL_3),探讨家兔主动脉平滑肌细胞HDL_3的结合部位及其影响因素。结果表明,在平滑肌细胞表面存在具有特异性、高亲和力的HDL_3受体(Bmax=0.31μg/mg细胞蛋白,KD=5.6×10~(-8)mol/L)。培养液中的高浓度apoA_1可抑制~(125)I-HDL_3结合量的50％;用大鼠抗apoA_2抗体封闭~(125)I-HDL_3,其结合量可下降70％,而~(125)I-HDL_3与胆固醇预孵育,其与平滑肌细胞的结合率不受影响,提示apoA_1在HDL_3与受体结合过程中起着主要作用。培养液的pH在6.0～8.0之间,不影响HDL_3的结合;HDL_3结合部位对胰酶和裂解蛋白酶(pronase)处理均不敏感,且不依赖于Ca~(2+);4℃时其结合量最大。这些特性均与LDL受体不同,提示在平滑肌细胞表面存在着不同于apoB、E、apoE受体的HDL_3受体。     

原发性高血压与心脏β2、α1及AT1受体自身抗体的关系

目的探讨抗G-蛋白偶联型β2、α1及AT1受体的自身抗体在原发性高血压病程中的分布情况。方法应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,检测50例高血压心脏病、40例单纯高血压和40例正常人血清中抗G-蛋白偶联家族中β2、α1和AT1受体的自身抗体。结果高血压心脏病患者血清中抗G-蛋白偶联型β2、α1和AT1受体自身抗体的阳性率明显高于单纯高血压和正常组(P<0.05);高血压心脏病自身抗体阳性的平均几何滴度与单纯性高血压比较无明显差异(P>0.05),但两组阳性抗体的平均几何滴度均明显高于正常组。高血压心脏病抗β2受体自身抗体阳性患者中,81.0%同时具有α1受体的自身抗体,76.2%同时具有AT1受体的自身抗体,52.4%存在上述3种受体的自身抗体。结论抗G-蛋白偶联型β2、α1及AT1受体的自身抗体参与原发性高血压的病理生理过程,可能与心肌和血管重构有关。     

新的人肾上腺素受体

法国国立科学研究中心(CNRS)的一个研究小组发现并分析了一种新型β-肾上腺素受体。另外两种已知的肾上腺素受体为:β-1型,主要在心脏表达,β-2型主要在于肺中。     

大鼠内毒素性肺损伤中肺脏肾上腺素能受体的变化及机理研究

采用放射性配基结合分析法,以[~2H]-哌唑嗪和[~3H]-双氢烯丙洛尔测定大鼠肺脏α_1-和β-肾上腺素能受体(α_1-AR和β-AR)。根据Scatchard公式计算受体的最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(K_D)。结果表明,大鼠肺脏含高密度α_1-AR和β-AR。它们具有可饱和性、可逆性、高亲和力和立体专一性。 大鼠静注大肠杆菌内毒素诱导急性肺损伤后,α_1-AR和β-AR的Bmax值分别降低35％和43％。K_D值无变化。该组静注伊文思蓝判定肺微血管通透性指数(PMPI),显著高于对照组和山莨菪碱等组(P<     

中介素及其受体系统在油酸致大鼠急性肺损伤中的变化和意义

目的:观察油酸(OA)致大鼠急性肺损伤(ALI)模型中,血管活性肽中介素(Intermedin,IMD)及其受体系统--降钙素受体样受体(CL)与受体活性修饰蛋白(RAMPs) 在肺组织中含量的变化及其病理意义.方法:尾静脉注射OA(0.2 mL/kg)制备大鼠ALI模型为OA组,测定大鼠动脉血氧分压(PaO2)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数及中性粒细胞百分比(%PMN);放射免疫法测定血浆和肺组织匀浆IMD1-53含量; 半定量RT-PCR方法测定肺组织IMD,CL 和RAMP1,-2,-3 mRNA水平; 受体放射配体结合实验检测肺浆膜125I-IMD1-53受体结合力.结果:与正常对照组比较,油酸组大鼠血浆及肺组织匀浆中IMD1-53含量分别下降20.8%和74.5%(均P＜0.05);肺组织IMD,CL,RAMP1,RAMP2的mRNA表达水平分别下降30%,38%,26%和37.9%(均P＜0.01),肺组织中IMD与其受体系统mRNA变化水平有一定的相关性.125I- IMD1-53受体最大结合位点增加.肺组织、血浆中IMD浓度与PaO2呈正相关,与BALF中%PMN呈负相关(P＜0.01或0.05).结论:油酸致急性肺损伤大鼠肺组织IMD1-53含量降低,IMD,CL 和RAMP1,-2,-3基因表达有不同程度的降低,提示IMD及其受体系统参与了OA致急性肺损伤的发病过程.     

~(125)碘-绒电膜促性腺激素的制备与鉴定

作者制备了~(125)碘-绒毛膜促性腺激素,作为该激素受体放射分析的示踪物。结果显示,~(125)碘际记激素具有免疫活性及生物活性,可用于受体放射分析。对~(125)碘标记条件作了讨论。     

联合吸入糖皮质激素和长效β_2-受体激动剂治疗慢性阻塞性肺疾病的疗效观察

目的:观察联合吸入糖皮质激素(ICS)和长效β2-受体激动剂(LABA)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的疗效观察。方法:选取2008年1月~2009年12月本院呼吸科门诊就诊的60例慢性阻塞性肺疾病中度至重度的患者,随机分为治疗组和对照组各30例。治疗组给予糖皮质激素布地奈德和长效β2受体激动剂福莫特罗干粉吸入剂吸入;对照组给予长效β2-受体激动剂福莫特罗干粉吸入剂吸入,1吸/次,2次/d,疗程为3个月。对比两组治疗前后临床症状和肺功能(FEV1)变化。结果:60例患者全部完成了3个月或更长随访观察,治疗组联合吸入ICS及LABA治疗1个月及3个月后临床症状及FEV1值明显改善,与对照组治疗前后比较其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于COPD患者来说,吸入ICS及LABA能改善肺功能,减轻症状,提高生活质量。     

回顾：心脏选择性的β—受体阻滞剂不降低慢性阻塞性肺疾病患者的呼吸功能

问题:心脏选择性的β_1-受体阻滞剂对患有慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的呼吸功能有何影响?β_1-受体阻滞剂对患者应用β_2-受体激动剂的反应有何影响?