结肠癌中RUNX3基因表达和启动子甲基化及其临床意义

目的 探讨RUNX3基因表达和启动子甲基化在结肠癌发生发展过程中的作用及其临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测RUNX3基因表达,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测RUNX3基因启动子甲基化.结果 47例结肠癌中,癌旁肠粘膜、原发灶、肝转移灶中RUNX3表达阳性率分别为100%(47/47)、38.3%(18/47)、14.3%(1/7).原发灶和肝转移灶中RUNX3表达明显降低(P<0.01).癌旁肠粘膜组织、癌原发灶、肝转移灶组织中RUNX3基因启动子甲基化阳性率分别为10.6%(5/47),44.7%(21/47),57.1%(4/7),3种组织RUNX3基因启动子甲基化率的差别有显著性意义(P<0.01).在7例出现肝转移者中发生RUNX3失活者6例,其中4例(66.7%)存在RUNX3基因启动子甲基化.结论 RUNX3基因启动子甲基化和RUNX3蛋白表达在结肠癌的癌旁组织和原发癌灶间存在显著的差异,可能与结肠癌的发生发展有关.     

大肠癌DAPK、FHIT基因启动子区的甲基化水平研究

目的:评价DAPK、FHIT基因启动子区甲基化状态在大肠癌发生发展中的作用和临床意义。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测23例大肠癌及相应癌旁正常组织的DAPK、FHIT基因启动子区甲基化状态。结果:大肠癌组织的DAPK、FHIT基因甲基化率分别为60.86%(14/23)、52.17%(12/23),高于癌旁正常组织的13.04%(3/23)、8.69%(2/23),组间差异均有统计学意义(P<0.05),DAPK、FHIT基因甲基化状态与分化程度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、Dukes分期无相关性(P>0.05)。结论:DAPK基因和FHIT基因启动子区的高甲基化可能与大肠癌的发生、发展、预后有关。     

胃癌中RUNX3基因表达失活及临床意义的研究

目的:研究胃癌中RUNX3的表达情况并分析临床意义,评价RUNX3基因能否作为胃癌的抑癌基因.方法:基于RT PCR方法检测RUNX3基因,在mRNA水平上胃癌细胞株SGC7901、60例胃癌组织及50例癌旁正常组织中表达的差异、并分析其与临床病理参数的关系等.结果:RT-PCR结果表明RUNX3 mRNA在SGC7901细胞株中没有表达,在79.3%(47/60)的胃癌组织中没有表达或表达明显下降,而在50例癌旁正常组织中正常表达.统计学结果显示,与癌旁正常组织相比,RUNX3 mRNA在癌组织的表达有显著性差异(P<0.001).本研究结果表明,胃癌淋巴结转移和TNM分期与RUNX3 mRNA的表达异常下降有明显关系,而RUNX3 mRNA的表达与患者性别和年龄、是否有饮酒史与家族史、以及肿瘤大小和分化程度等无显著相关(P>0.05).结论:RUNX3基因在胃癌组织及细胞株SGC7901中表达异常下降,RUNX3基因的表达下降与胃癌TNM分期及淋巴结转移呈显著相关,RUNX3可以作为胃癌的新抑癌基因.     

RUNX3蛋白在肝癌组织中的表达及其意义

目的探讨RUNX3蛋白在肝癌组织及其癌旁组织中的表达情况,并分析其与临床病理因素的相关性。方法采用免疫组织化学法检测RUNX3蛋白在肝癌组织及其癌旁组织中的表达水平,并分析其与临床病理因素的相关性。结果 RUNX3蛋白在肝癌组织、癌旁组织中的表达阳性率分别为49.02%(25/51)、82.35%(42/51),两者间有显著差异(χ2=12.5706,P<0.01)。RUNX3蛋白在分化程度、门静脉癌栓、肝内转移等病理因素的表达差异有统计学意义(P<0.05),而在性别、肿瘤直径、肿瘤部位、癌肿出血坏死、组织分型的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RUNX3蛋白在肝癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织。RUNX3蛋白表达下调可能对肝癌的发生、发展具有重要作用,RUNX3基因可能是肝癌的抑癌基因。     

Tip30和p53蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Tip30和p53蛋白在胃癌中的表达及其临床意义。方法收集2013年1月—2014年12月秦皇岛市第一医院普外一科收治的60例胃癌患者为研究对象,采用免疫组化SP法检测胃癌组织及其癌旁正常组织中Tip30和p53的表达,并探讨两者的相关性及临床意义。结果 60例胃癌组织中Tip30阳性率为46.67%(28/60),显著低于癌旁正常组织中的95.00%(57/60),差异有统计学意义(P<0.05)。60例胃癌组织中p53的阳性率为48.33%(29/60),高于癌旁正常组织中的5.00%(3/60),差异有统计学意义(P<0.05)。Tip30蛋白表达相关因素包括胃癌分化程度、浸润程度、临床分期、是否发生淋巴结转移等(P<0.05)。p53蛋白表达相关因素包括胃癌浸润程度、临床分期及淋巴结转移等(P<0.05)。胃癌组织中Tip30蛋白与p53蛋白表达呈显著负相关(r=-0.637,P<0.05)。结论 Tip30低表达和p53高表达可作为预测胃癌不良预后的重要指标。     

胃癌DAPK1基因启动子甲基化状况及表达的研究

目的对DAPK1基因甲基化状态、表达进行研究,探讨基因甲基化在胃癌发病中的作用。方法用半定量RT-PCR方法研究胃癌及癌旁组织中DAPK1基因的表达,用甲基化特异性PCR（MSP）对胃癌及癌旁组织中DAPK1基因启动子区甲基化情况进行研究。结果 DAPK1有16例表达下调,6例表达上调,基因在癌旁组织的mRNA表达明显高于癌组织,具有统计学意义（P=0.465）。DAPK1在胃癌组织及癌旁组织中甲基化率均为100%,无统计学意义（P〉0.05）。结论胃癌组织中DAPK1基因表达下降与该基因甲基化无明确相关性。     

RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1蛋白在肝细胞性肝癌(HCC)和癌旁组织中的表达,以及三者在HCC组织中表达的相关性,三者的表达与临床病理因素之间的关系.方法 采用回顾性分析方法,收集43例HCC新鲜标本及其癌旁组织,用免疫印迹(Western Blot)技术检测癌及癌旁组织中RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1蛋白的表达.结果 RUNX3、p21CIP1/WAF1蛋白在HCC组织中的相对表达值低于癌旁组织,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);cyclinD1蛋白在肝癌组织中的相对表达值高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);RUNX3、p21CIP1/WAF1、cyclinD1蛋白相对表达值均与TNM分期及组织分化程度有关(P<0.05);HCC组织中RUNX3蛋白与p21CIP1/WAF1蛋白表达呈正相关(r=0.696,P<0.05),RUNX3蛋白与cyclinD1蛋白表达呈负相关性(r=-0.435,P<0.05).结论 RUNX3蛋白可能通过影响p21CIP1/WAF1和cyclinD1蛋白的表达影响肝细胞性肝癌的发生发展;联合检测RUNX3、p21CIP1/WAF1和cyclinD1蛋白的表达可能对HCC的诊断及预后判断有一定参考价值.     

内蒙古地区ＲASSF 1A、P16、DAPK、ＲUNX3 基因甲基化在非小细胞肺癌中的研究

目的: 探讨内蒙古地区RASSF 1A、P16、DAPK、
RUNX 3 基因甲基化在非小细胞肺癌( nonsmall cell
lung cancer,NSCLC) 早期诊断及判断预后之间的关系。方法: 应用甲基化特异性PCR( ( methlation specific PCRMSP) 方法检测50 例NSCLC 病人和50 例健康人群外周血、30 例NSCLC 癌组织和30 例癌旁正常组织中RASSF
1A、P16、DAPK、RUNX 3 基因启动子区的甲基化率,分析NSCLC 病人与健康人群甲基化水平的差异,癌组织、癌
旁组织及外周血中各基因甲基化水平的差异,并分析年龄、性别、吸烟史、组织学类型及临床分期对基因启动子
区甲基化率的影响。结果: 肺癌组织中RASSF 1A、P16、DAPK 和RUNX 3 基因启动子区甲基化检出率分别为
66． 67%( 20 /30) 、56． 67%( 17 /30) 、63． 33%( 19 /30) 和56． 67%( 17 /30) ; 其对应的血浆标本中这4 个基因的甲基
化检出率分别为60． 00%( 30 /50) 、44． 00% ( 22 /50) 、60． 00% ( 30 /50) 和42． 00% ( 21 /50) ,两组标本甲基化检出
率存在着较好的一致性( P ＞ 0． 05) 。30 例癌旁正常组织标本和50 例健康人群血浆标本均未检测出基因甲基
化,与肺癌组比较差异有统计学意义( P ＜ 0． 05) 。RASSFIA 基因启动子区甲基化检出率与病人分化程度、淋巴
结转移有关( P ＜ 0． 05) ; P16 基因启动子区甲基化检出率与病人临床分期有关( P ＜ 0． 05) ;RUNX 3 基因启动子
甲基化与病人临床分期、分化程度、淋巴结转移有关( P ＜ 0． 05) 。结论: RASSF 1A、P16、DAPK、RUNX 3 基因启动
子区的甲基化与NSCLC 有关,检测外周血中RASSF 1A、P16、DAPK、RUNX 3 基因启动子区甲基化水平可能有助
于NSCLC 的早期预警、早期诊断与判断预后。     

p16基因甲基化及蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 探讨p16基因甲基化及蛋白在人非小细胞肺癌组织中的表达情况.方法 应用甲基化特异性PCR法(MS-PCR)及免疫组化SP法检测45例非小细胞肺癌组织、21例肺良性疾病组织中p16基因甲基化及蛋白的表达情况.结果 肺良性疾病中p16基因甲基化阳性率低于癌组织,差异有显著性(P=0.001),p16基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05);肺良性疾病中p16蛋白阳性率高于癌组织,差异有显著性(P=0.007);p16蛋白表达与非小细胞肺癌临床分期、细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性(P<0.05).p16甲基化和p16蛋白表达缺失存在相关性(P=0.004).结论 p16基因甲基化及蛋白的表达情况与非小细胞肺癌的发生、发展有关.     

RUNX3和CerbB-2在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨乳腺癌组织中RUNX3和cerbB-2的表达及其与乳腺癌生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测55例乳腺癌组织及癌旁乳腺组织中RUNX3、cerbB-2的表达。结果乳腺癌组织中RUNX3蛋白表达(40.0%)显著低于癌旁乳腺组织的表达(98.2%)(P<0.01),且与年龄、组织分化及临床分期呈负相关(均P<0.05),而与肿块大小、淋巴结转移等无关(均P>0.05)。cerbB-2在乳腺癌中的表达(50.9%)显著高于癌旁乳腺组织的表达(29.1%)(P<0.01),且与肿块大小、组织分化、淋巴结转移及临床分期呈正相关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05)。RUNX3在乳腺癌中的表达与cerbB-2呈负相关(P<0.01)。结论乳腺癌中RUNX3蛋白表达降低,其表达与年龄、组织分化及临床分期密切相关,且与cerbB-2表达呈负相关。联合检测RUNX3、cerbB-2有助于提高乳腺癌侵袭转移能力的评估,对乳腺癌的预后判断具有重要的临床意义。     

口腔鳞状细胞癌组织中死亡相关蛋白激酶的甲基化及其蛋白的表达

目的：探讨死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因的表达、甲基化状态及与口腔鳞状细胞癌（OSCC）的关系,为研究DAPK基因在OSCC组织中表达改变的机制及肿瘤基因治疗方法打下基础。方法：采用甲基特异性PCR和免疫组织化学方法分别检测23例正常口腔黏膜组织和53例OSCC组织中DAPK基因甲基化率、DAPK蛋白表达率。结果：23例正常口腔黏膜组织中无一例检测到DAPK基因启动子区甲基化,53例OSCC患者30例（56.60%）口腔黏膜组织中DAPK基因启动子区完全甲基化,8例（15.09%）DAPK基因部分甲基化,总甲基化率为71.69%（38/53）,与正常口腔黏膜组织甲基化率比较差异有显著性（P<0.01）。在23例（100%）正常口腔黏膜组织中DAPK蛋白表达均呈阳性,53例OSCC患者中36例（67.92%）口腔黏膜组织中DAPK蛋白表达下调,二者比较差异具有显著性（P<0.01）;OSCC患者口腔黏膜组织中DAPK蛋白低表达组DAPK基因甲基化率（32/36,88.89%）高于正常表达组（6/17,35.29%）（P<0.01）。结论：DAPK基因启动子区甲基化是该基因在OSCC组织中表达降低的机制之一,DAPK基因甲基化引起的基因功能静默可能与OSCC的发生有关。     

RUNX3基因甲基化与鼻咽癌的临床生物学行为关系

目的探讨RUNX3基因甲基化与鼻咽癌临床生物学行为关系。方法运用甲基化特异性PCR对54例鼻咽癌组织、18例慢性鼻咽炎症组织和20例正常鼻咽上皮组织的RUNX3基因启动子区甲基化状态进行检测。结果 RUNX3基因在鼻咽癌组织中启动子甲基化频率为59%(32/54);而在慢性鼻咽炎症组织和正常鼻咽上皮组织中均未检测到RUNX3基因启动子甲基化。RUNX3基因启动子区甲基化与患者临床生物学行为无明显相关关系。结论 RUNX3基因甲基化具有肿瘤特异性,RUNX3基因甲基化参与鼻咽癌发生发展,但目前尚不能作为判断鼻咽癌临床预后预测指标。     

RUNX3启动子甲基化与胃癌发生发展的关系

目的检测胃癌RUNX3基因启动子区域甲基化情况,探讨RUNX3基因在胃癌发生和发展过程中的意义。方法采用DNA甲基化特异性聚合酶链反应[methylation-specific polymerase chain reaction,PCR（MSP）]技术对30例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织RUNX3基因启动子区域甲基化进行检测。结果 RUNX3基因甲基化率在胃癌中为70.0%（21/30）,其癌旁组织中为16.7%（5/30）,有统计学差异（P〈0.05）。结论 RUNX3的甲基化可能是癌症特异性的,其启动子区甲基化与胃癌的发生、发展密切相关。     

胰腺癌中人RUNT相关转录因子3基因启动子区甲基化及其临床意义

目的检测胰腺癌人RUNT相关转录因子3(RUNX3)基因启动子的甲基化情况并探讨其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测56例胰腺癌组织及癌旁组织、14例正常胰腺组织、3株人胰腺癌细胞株(PANC1、CFPAC-1、SW1990)、1株正常肝细胞株(HL-7702)中RUNX3基因启动子区CpG岛甲基化状态。检测用甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-cdR)处理前后胰腺癌细胞株RUNX3 mRNA的表达。分析RUNX3异常甲基化与胰腺癌临床特征的关系。结果56例胰腺癌组织中,51.79%(29/56)存在RUNX3基因启动子区CpG岛的异常甲基化,癌旁胰腺组织有10.7%(6/56)存在异常甲基化,而正常胰腺组织中未检测到RUNX3基因异常甲基化。RUNX3基因异常甲基化与患者病理分化程度(r=0.314,P=0.018)、淋巴结转移(r=0.370,P=0.005)显著相关。在5-Aza-cdR处理前,胰腺癌细胞株PANC1、CFPAC-1、SW1990的RUNX3 mRNA无表达或低表达,经5-Aza-cdR处理后各胰腺癌细胞株RUNX3 mRNA恢复表达。结论胰腺癌组织及胰腺癌细胞株均存在RUNX3基因CpG岛异常甲基化;RUNX3启动子的高甲基化与其基因表达降低有关,与胰腺癌组织分化程度、淋巴结转移相关。     

胃癌p53基因甲基化及其表达情况的研究

目的检测胃癌组织中p53基因甲基化状态和p53蛋白表达情况。方法选择p53基因第5外显子,应用限制性内切酶HpaII和MspI酶切胃癌组织及正常胃组织DNA,经PCR扩增和免疫组化等方法对100例胃癌患者的癌组织和癌旁组织进行检测。结果有71%的患者p53蛋白表达阳性,54%的患者具有p53蛋白基因的高甲基化,50%同时有p53蛋白表达阳性和p53基因的高甲基化。结论提示p53基因高甲基化状态引起的突变或失活是胃癌发生发展的重要因素之一。     

RUNX3、SMAD4、VEGF在人胃癌中的表达及意义

目的:检测RUNX3、SMAD4和VEGF蛋白在胃腺癌组织中的表达,观察其与胃腺癌临床病理因素的关系,探讨RUNX3、SMAD4基因在胃腺癌浸润、转移过程中的作用及意义。方法:收集病人临床资料,免疫组织化学SP法检测97例胃腺癌及20例正常胃黏膜组织中RUNX3、SMAD4和VEGF的表达情况。SPSS 13.0统计软件进行数据处理3指标表达与临床病理参数之间的关系,及3项指标之间的相关性。结果:①胃腺癌组织中RUNX3、SMAD4阳性表达率明显低于它们在正常胃黏膜组织中的阳性表达;VEGF在胃腺癌组织中的阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织;上述表达差异有显著性。②RUNX3,SMAD4低表达,VEGF高表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关,差异具有显著性。③胃腺癌组织RUNX3与SMAD4阳性表达率之间呈正相关,二指标与VEGF阳性表达率均呈负相关,差异具有显著意义。结论:胃腺癌组织中RUNX3、SMAD4低表达可能协同上调VEGF的表达,从而促进胃癌的浸润、转移;RUNX3、SMAD4、VEGF可以作为判断胃癌预后及指导临床治疗的指标。     

急性白血病死亡相关蛋白激酶基因启动子的甲基化

目的 研究死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化和基因表达在初治急性白血病患者中的临床意义.方法 采用MSP方法和RT-PCR方法分别检测60例急性髓系白血病患者、55例急性淋巴细胞白血病患者和17例正常人DAPK基因的甲基化状态及其mRNA的表达,统计学分析各组之间的表达差异.结果 急性淋巴细胞白血病组的DAPK甲基化阳性率(29.1％)高于急性髓细胞白血病组(5％)和正常组(0％)(P＜0.0l25),但甲基化与急性淋巴细胞白血病组患者临床特征无关(P＞0.05).DAPK基因mRNA的表达水平以正常组最高,急性髓细胞白血病组次之,急性淋巴细胞白血病组最低(P=0.000).急性淋巴细胞白血病组患者DAPK mRNA表达与其启动子甲基化呈显著负相关(P＜0.05).结论 DAPK基因启动子在初治急性淋巴细胞白血病患者中甲基化率高于初治急性髓细胞白血病患者和正常人,但与患者临床特征无关.急性淋巴细胞白血病患者DAPK基因表达水平低或不表达可能与其甲基化有关.     

胃癌组织中RASGRF1基因甲基化及蛋白表达与其临床意义

目的探讨胃癌组织中Ras蛋白特异性鸟苷酸释放因子1（RASGRF1）基因甲基化及蛋白表达以及临床意义。方法收集80例胃癌病人病历资料,采用免疫组织化学法检测80例胃癌组织和相应癌旁组织中RASGRF1蛋白表达情况,采用甲基化特异性PCR检测RASGRF1基因甲基化状态,分析胃癌组织中RASGRF1基因甲基化及蛋白表达的相关性,并观察胃癌组织中RASGRF1基因甲基化状态及蛋白表达情况与病人临床病理参数的关系。结果胃癌组织和相应癌旁组织中RASGRF1蛋白表达与基因甲基化表达情况差异均有统计学意义（P < 0.05）;Spearman相关分析结果显示,胃癌组织中RASGRF1蛋白表达与基因甲基化呈负相关关系（P < 0.01）;胃癌组织中RASGRF1蛋白表达与性别、年龄、肿瘤直径、组织学分化程度、发生远处转移无关（P>0.05）,与肿瘤分期有关（P < 0.05）;胃癌组织中RASGRF1基因甲基化与性别、年龄、肿瘤直径、组织学分化程度无关（P>0.05）,与肿瘤分期、发生远处转移有关（P < 0.05和P < 0.01）。结论胃癌组织中RASGRF1基因甲基化和蛋白表达二者呈负相关关系,RASGRF1基因甲基化及蛋白表达与肿瘤分期、发生远处转移有一定关系。