不同脉冲频率的半导体激光对荷瘤小鼠IL—2的影响

目的 :为了解脉冲半导体激光照射对小鼠Ｓ1 80 肉瘤血清中的ＩＬ 2的影响和对肿瘤的抑制作用。方法 :实验采用波长为 650ｎｍ脉冲半导体激光。 40只荷瘤小鼠随机分为 4组 ,其中 3组为激光照射组 ,1组为对照组 ,每组 1 0只。每组小鼠每天分别用 1 0 0、50 0、2 50 0Ｈｚ等 3种不同频率的脉冲半导体激光照射荷瘤小鼠的脾区。 1 0ｄ后采用了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定各组荷瘤小鼠血清中的ＩＬ 2含量及肿瘤重量 ,并计算肿瘤抑制率。结果 :结果表明 3种不同频率脉冲半导体激光照射后荷瘤小鼠血清中ＩＬ 2含量均有增加 ,对荷瘤小鼠的肿瘤生长均…     

830nm半导体激光照射荷瘤小鼠脾区的抑癌作用

激光照射机体产生的生物效应一直是激光生物学与激光医学研究的重点，目前普遍认为适当剂量的激光照射能增强机体的免疫功能。我们以荷乳腺癌小鼠为实验对象，观察了激光照射荷瘤小鼠脾区对肿瘤生长的抑制作用，并探讨其作用机制。材料和方法１－实验动物和肿瘤瘤源　采用本室培育的近交系ＴＡ２系雌性小鼠５０只。其中４０只接种本室建立的小鼠乳腺癌瘤株ＭＡ７３第４００代。２－激光照射　采用我校生物医学工程系研制的波长８３０ｎｍ半导体激光治疗仪，以功率２０ｍＷ的激光照射荷乳腺癌小鼠脾区，每天１次，每次２０ｍｉｎ，连续照射８…     

激光诱导荷乳腺癌小鼠内源性IL—2的研究

本文应用激光作为物理诱生剂来照射荷乳腺癌小鼠脾区，其目的为观察激光对机体内源性白细胞介素２（ＩＬ－２）的诱生作用及对肿瘤生长的抑制作用。采用天津医科大学肿瘤实验室培育的ＴＡ２近交系小鼠２４只，接种乳腺癌后第五天开始，用我们自己研制的波长８３０ｎｍ、功率２０ｍＷ的半导体激光免疫治疗仪，对实验组脾区照射两个疗程后，作ＩＬ－２活性测定与肿瘤抑制率的测定。结果激光照射组ＩＬ－２活性为１２±３Ｕ／ｍｌ，较对照组显著提高；肿瘤抑制率为６９．５％。提示激光作为物理诱生剂照射荷乳腺癌小鼠脾区，可显著增强ＩＬ－２的蛋白活性，能起到抑制肿瘤生长的作用。     

低频脉冲电刺激对小鼠黑色素瘤的抑瘤效应及心肌损伤作用观察

目的观察不同参数的低频脉冲电刺激对B16-F10黑色素瘤小鼠的抑瘤效应,评估其对心脏结构及功能的影响。方法将由B16F10细胞接种产生的荷瘤BALB/c小鼠随机分为4组。治疗组选择场强20V/cm,脉宽1ms,频率分别为10Hz(10Hz组)、20Hz(20Hz组)和25Hz(25Hz组)的脉冲电刺激作用于荷瘤小鼠30min/d,以不用电刺激为对照组(每组10只),治疗时监测各小鼠心电图变化情况。脉冲电刺激荷瘤小鼠7d后比较各组肿瘤体积及生存期的变化,HE染色观察肿瘤及心脏组织形态学变化,免疫组化法比较各组小鼠肿瘤组织中S-100B蛋白的表达变化,ELISA法检测小鼠血清肌钙蛋白T(c Tn T)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平变化。结果低频脉冲电刺激治疗15d后,10Hz组、20Hz组和25Hz组的肿瘤体积分别为463.0±33.0、248.6±34.6和229.9±15.9mm3,显著小于对照组(2027.0±133.4mm3,P<0.05),且20Hz组生存率延长率(67.4%)明显高于10Hz组(15.5%)和25Hz组(8.8%);随着频率增加,S-100B蛋白表达依次减少;25Hz组小鼠心律失常评分及血清c Tn T、CK-MB水平显著高于对照组(P<0.05);10Hz组和20Hz组小鼠心律失常评分及血清c Tn T、CK-MB表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论低频脉冲电刺激对小鼠黑色素瘤具有抑瘤作用,在20V/cm、20Hz时抑制作用最强,且不影响小鼠正常的心电活动。     

不同功率半导体激光照射与大鼠脊髓生长相关蛋白表达的关系

目的 研究不同功率半导体激光照射损伤的大鼠从骨神经后脊髓中生长相关蛋白（GAP－43）的表达与激光功率和照射时间的关系。方法 172只雄性SD大鼠制成从骨神经损伤模型,随机分为1个对照组和3个激光照射组,每组42只。分别以功率为5、10和15mW、波长810nm的半导体激光照射激光组大鼠神经损伤部位,第天1次,连续照射10天。照射后1、3、7、14、28、42和56天取恨鼠脊髓用于免疫组化方法观察脊髓内GAP－43表达的变化。结果 半导体激光照射后第7天内各激光照射组和对照组无明显差异。第14天和第28天时15mW激光照射组脊髓内GAP－43表达高于对照组。第56天时激光照射组较对照射组脊髓内GAP－43表达稍低,5mW和10mW激光照射组与对照组比较无明显差异。结论 15mW半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中GAP－43表达的变化,对神经再生过程有一定的影响,5mW和10mW半导体激光照射对损伤神经的鼠中GAP－43表达作用不明显。     

激光照射对小鼠非空间记忆能力影响的实验研究

目的分析不同照射剂量、不同波长和不同照射方式的激光体外照射小鼠头部海马区对小鼠非空间记忆能力的影响。方法采用专门设计的激光照射装置,照射光源为Nd∶YAG脉冲激光器和半导体激光器。脉冲激光输出波长为1 064、532 nm;半导体激光器连续输出,激光波长为659、532 nm,最大输出激光能量为180 mJ,光束直径5 mm。昆明小鼠80只,分为11组,分别进行小鼠头部海马区激光照射和非空间迷宫实验,并将激光照射前后小鼠出迷宫的时间进行比对。结果 （1）脉冲激光组：激光波长为532 nm和1 064 nm,大脑皮质区激光辐射功率密度分别为2.79×1010 W/m2和6.90×1010 W/m2时,小鼠出迷宫时间与照前相比无明显差异;而脑皮质区激光辐射功率密度分别为8.50×1010～4.60×1011 W/m2和2.40×1011～1.61×1012 W/m2时,小鼠出迷宫时间明显延长,差异显著。（2）连续激光组：激光波长为532nm和659nm,脑皮质区激光辐射能量密度分别为8.90×103～2.64×104 J/m2和1.75×104～5.30×104 J/m2,每天照射时间15min,连续照射3 d,第2天与第1天相比,出迷宫时间没有统计学意义;第3天与第1天相比,小鼠出迷宫时间明显延长,差异显著。结论脉冲激光和连续激光照射均可使小鼠的记忆能力降低;激光产生的生物学作用与照射剂量、激光波长和激光的发射方式有关,激光照射存在一定的累积效应。     

pEgr-IFNγ重组质粒辐射诱导表达及其抑瘤作用的实验研究

目的 探讨pEgr-IFNγ重组质粒在接种B16黑色素瘤小鼠体内的辐射诱导表达及其抑瘤效应。方法 小鼠肿瘤局部注射脂质体包裹的重组质粒pEgr-IFNγ后36h，接受不同剂量X射线照射，观察各组小鼠照射后不同时间肿瘤生长速率和平均存活时间，照射后第3天用RT-PCR法检测瘤内IFNγ转录水平，照射后第l，3和5天用ELISA法检测小鼠血清中IFNγ含量。结果 照射后第3天重组质粒 20Gy组瘤内IFNγ转录水平明显高于重组质粒组；照射后第l，3天血清中IFNγ含量明显高于重组质粒组和对照组；照射后第9-15天，4次(质粒 5Gy)组小鼠肿瘤生长速率明显低于重组质粒 20Gy组，且平均生存时间明显延长。结论 多次基因-较小剂量放射治疗的抑瘤效应优于单次基因．较大剂量放射治疗；基因-放射治疗组可能通过诱导瘤内IFNγ表达增强，使血液中IFNγ浓度升高，从而提高荷瘤机体免疫功能和抗肿瘤能力。     

pcEgr-IFNγ基因治疗联合放射治疗抗肿瘤作用的实验研究

目的：探讨pcEgr-IFNγ基因－放射联合治疗对修黑色素瘤B16小鼠的抗肿瘤作用及其免疫学机理。方法：肿瘤局部注射脂质体包裹的pcEgr-IFNγ重组质粒后36h,接受20GyX射线照射,观察放疗后不同时间肿瘤大小,放疗后3d瘤内IFNγ转录水平和15d部分免疫学指标。结果pcEgr-IFNγ基因－放射联合治疗后第3－15天,肿瘤生长速率明显低于单纯照射组,照第第9－15天明显低于单纯基因治疗组和空质料对照组;治疗后第3天,pcEgr-IFNγ基因－放射联合治疗组瘤内IFNγ表达水平明显高于单纯基因治疗组;脾脏NK毒胞毒活性、IL－2和IFNγ分泌活性均明显高于单纯放疗组和单纯基因治疗组。结论：pcEgr-IFNγ基因－放射联合治疗抗肿瘤作用明显优于单纯放疗和单纯基因治疗组,其机理可能与放疗诱导瘤内IFNγ基因表达增强,激活荷瘤机体抗肿瘤免疫功能有关。     

小鼠胶质母细胞瘤紫杉醇增敏放射的实验研究

目的：通过小鼠体内实验，评价紫杉醇对胶质母细胞瘤的放射增敏作用，方法：采用小鼠胶质母细胞瘤Ｃ４２２制成肌肉荷瘤模型和脑荷瘤模型，肌肉荷瘤鼠给予紫杉醇或（和）肿瘤照射治疗，测出肿瘤生长延迟（ＴＧＤ）的时间，脑荷瘤鼠给予紫杉醇或（和）全脑照射，观察小鼠的生存期，结果：紫杉醇＋照射组的ＴＧＤ及寿命延长均非常显著，结论：紫杉醇能增经胶质细胞瘤的放射生物学效应，值得进一步临床研究。     

放烧复合伤对小鼠白细胞介素-3的影响

目的：探讨放烧复合伤所造血功能与内源性IL－3之间的关系,方法：小鼠随机分为正常（N）,放射损伤（R）,烧伤（B）及放烧复合伤（C）共4组,利用Endogen MouseIL-3ELISA试剂盒,检测小鼠致伤不同时间的血清IL－3水平,结果：R组血清IL－3水平明显降低,其中第3,5天最低（低于检测灵敏度）,第15天开始缓慢回升,第28天仍未达正常水平,B组第3,5天低于正常,第10天开始回升,第15天达高峰,为正常组的210％,C组血清IL－3变化介于R,B组之间,各观测组外周血白细胞数量的变化与血清IL－3变化呈平行关系,小鼠15％III度烧伤后1－11d的血清对小鼠骨髓基质细胞（BMSC）贴壁率和CFU－F的形成主要表现为抑制作用,13－15d的血清主要为刺激作用,结论：小鼠烧伤后没蝗血清对BMSC贴壁率和CFU－F集落开的作用不同以及放烧复合伤所致外周血白细胞细胞数量异常可能与内源性IL－3的变化有关,本实验提示：内源性IL－3水平不足可能是放烧复合所致造血功能障碍形成的原因之一。     

放疗干预对宫颈癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及对Th1/Th2免疫细胞比例的影响

目的 探讨放疗干预对宫颈癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对辅助性T细胞1(Th1)/Th2细胞比例的影响.方法 建立宫颈癌荷瘤小鼠模型,随机分为荷瘤组和放疗组,每组各10只,另设对照组10只.放疗组进行放疗干预14天,荷瘤组和对照组不治疗.放疗后4、6、8、10、12、14天测量肿瘤体积;末次治疗后,ELISA法测定血清干扰素...     

低水平电离辐射单次或分割照射法的抗肿瘤效应比较

目的比较低水平电离辐射(LLIR)单次与分割照射的抗肿瘤效应。方法选用C57BL/6和ICR品系小鼠分别移植Lewis肺癌和S180肉瘤细胞,24h后再分别接受7.5cGy单次照射和分割照射(1.5cGy×5d);然后观察20d抑瘤率、脾NK细胞活性、T淋巴细胞表面CD4、CD8水平的变化以及荷瘤鼠的平均寿命。结果单次与分割照射对Lewis肺癌的抑瘤率分别为40.34%和51.19%,对S180肉瘤为34.26%和30.98%;脾NK细胞活性照后1～4d升高;CD4、CD8水平及CD4/CD8比值均有不同程度增高;荷瘤鼠的生命延长率分别为8.45%和8.84%。结论本实验采用的低水平单次或分割照射对Lewis肺癌和S180肉瘤均有明显的抑瘤效果,能显著增强荷瘤机体的免疫机能以及延长荷瘤鼠的平均寿命。经比较,两种照射方式在肿瘤生长抑制和免疫刺激作用等方面差异无显著性(P＞0.05)。     

太空环境对黑色素瘤B16细胞成瘤性的影响

目的观察空间诱变小鼠黑色素瘤B16细胞株的成瘤性，寻找免疫原性发生变异的细胞株。方法将B16细胞株应用细胞低温长期生存系统，搭载于我国第20颗返回式卫星，返地后进行单克隆化，从得到的110株单克隆太空诱变B16细胞株中随机选取4株，常规培养后和对照细胞株同时分别接种C57BL／6J小鼠，腹腔接种组观察生存期，皮下接种组14d后取血、处死，记录瘤重，脾脏重，胸腺重，并进行血清细胞因子检测和瘤体的病理学检测。结果初步确定了适合太空诱变肿瘤细胞株体内筛选实验的方法和筛选指标，并筛选出了1株出瘤时间延迟、瘤重缩小，生存期延长，荷瘤小鼠血清IL-2浓度升高，免疫原性可能发生变异的B16细胞株。结论空间环境可使体外培养肿瘤细胞产生变异，能否通过太空诱变的方法增强肿瘤细胞株的免疫原性需进一步实验验证。     

60Co-γ射线全身低剂量率辐照对小鼠血浆中IL-12和IL-10的影响

目的研究低剂量电离辐射对小鼠免疫系统影响的剂量率效应。方法以^60Co-γ射线为辐照源，低、中和高3个辐射剂量（0．075、0．5、2．0Gy），恒定剂量率（0．5mGy／min）全身一次性照射小鼠，ELISA检测照射4h后血浆IL-12和IL-10的含量。结果低、中剂量照射后，血浆中IL-12、IL-10和IL-12／IL-10出现程度几乎相同地下降；但高剂量照射后，IL-12进一步显著下降，而IL-10上升至对照组水平，IL-12／IL-10比值进一步下降。结论恒定0．5mGy／min剂量率的^60Co-γ射线照射可损伤机体免疫功能，在0．075～0．5Gy剂量范围内损伤轻微，在2．0Gy时损伤明显，表明低剂量率电离辐射对免疫系统具有损伤作用。     

半导体激光照射星状神经节联合牵引治疗椎动脉型颈椎病

目的观察半导体激光星状神经节照射结合牵引治疗椎动脉型颈椎病的临床疗效。方法60例椎动脉型颈椎病患者随机分为3组,每组20例。A组行半导体激光星状神经节照射,B组行牵引治疗,C组半导体激光星状神经节照射联合牵引。治疗前后采用颈性眩晕评估量表(ESCV)及经颅多普勒超声(TCD)进行测评。结果治疗后3组患者ESCV评分均有显著提高(P0.01),左、右椎动脉和基底动脉的平均血流速度(Vm)均较治疗前有提高(P0.05);但C组优于A、B组(P0.05)。结论半导体激光星状神经节照射联合牵引治疗椎动脉型颈椎病临床疗效显著,两种方法具有协同作用。     

Optimal light dose and drug dosage in the photodynamic treatment using PHOTOCYANINE

Background

To explore the effective dose range of PHOTOCYANINE, the intensity and duration of irradiation using a 670-nm laser, and changes of local tissues after photodynamic therapy (PDT) in mice with S180 tumors to provide evidence for the clinical application of PDT.

Basic methods

Kunming mice were administered the photosensitizer PHOTOCYANINE. After the administration of PHOTOCYANINE, irradiation with 670-nm laser had a remarkable inhibitory effect on the growth of the grafted tumor S180.

Main results

Within the power densities 36–144 J/cm², the irradiation dose showed a significant dose–response relationship; under the same drug dosage, an increase in irradiation dose could enhance the inhibitory effect on tumor growth. In the groups administered PHOTOCYANINE and irradiated with a 670-nm laser, the temperature of the local surface did not increase remarkably, an effect also seen in the negative control group. Local swelling around the tumor occurred immediately after PHOTOCYANINE administration and laser irradiation, and could last for about 3 days. Vertical resection of the tumors 72 h after irradiation showed that the depth of local-tissue necrosis after PHOTOCYANINE administration and laser irradiation was 5.7–7.5 mm.

Principal conclusions

The efficacy of PHOTOCYANINE was significantly correlated with its dose; under identical irradiation conditions, the increase in drug dose increased the tumor inhibition rate (TIR) within a certain dose range. The efficacy of PHOTOCYANINE also showed significant irradiation-dependent characteristics.     

高压氧对荷瘤鼠淋巴细胞功能的影响

目的探讨高压氧（HBO）暴露对淋巴细胞功能的影响。方法将Balb／c小鼠随机分成正常对照组、HBO组、肿瘤组、肿瘤HBO组。用接种S-180腹水癌细胞的方法制成免疫功能低下动物模型。经HBO暴露，取血标本观察淋巴细胞一肿瘤细胞花环率、淋巴细胞数、淋巴细胞百分比；用ELISA双抗夹心法测定小鼠血清IgG浓度；用^3H—TdR掺入法测定脾淋巴细胞增殖；用同位素靶细胞释放法观察NK细胞杀伤活性和LAK细胞活性；取脾脏观察小鼠脾指数的变化。结果（1）淋巴细胞一肿瘤细胞花环率肿瘤HBO组明显高于对照组（P〈0．01）。（2）淋巴细胞计数各组之间均无明显变化。（3）淋巴细胞百分比对照组分别比肿瘤HBO组和肿瘤组高（P〈0．01，P〈0．05），HBO组比肿瘤HBO组高（P〈0．01）。（4）IgG测定各组间无统计学差异。（5）淋巴细胞增殖HBO组比对照组低（P〈0．01），肿瘤HBO组比HBO组低（P〈0．01），肿瘤组比HBO组低（P〈0．01）。（6）NK细胞活性肿瘤组比对照组低（P〈0．05），肿瘤HBO组比肿瘤组高（P〈0．05），HBO组比对照组有降低的趋势（P=0．07）。（7）LAK细胞活性肿瘤组比对照组高（P〈0．05）。（8）脾指数各组之问差异无统计学意义（P〉0．05）。结论压力为0．2MPa，氧体积分数为87％的HBO暴露和／或肿瘤接种对免疫系统的作用是多方面的，有的部分增强，有的部分减弱，值得进一步研究。     

氯氧喹对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠的辐射增敏作用

目的 研究氯氧喹联合X射线对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠的辐射增敏作用.方法 细胞及动物实验均设置为对照组、给药组、照射组及给药+照射组(联合组)4个组别.采用体外细胞培养MTT检测及荷瘤动物模型观察方法,分别予以不同处理因素后,细胞实验用MTT法检测各组别细胞吸光度(A)值;小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞,予以相关处理因素后,观察记录肿瘤生长情况并测量其长、宽径从而计算出肿瘤抑制率及肿瘤生长延迟.照射结束后眼静脉采血,检测各组小鼠血液标本中细胞成分数量的变化情况.结果 MTT实验结果显示,细胞照射24 h后,给药+照射组SF值较单纯照射组有一定的降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),而照射48 h后,在10、20、40和80 mg/L浓度下,两组间差异有统计学意义(t=3.22、4.23、4.46和4.58,P＜0.05).动物实验结果显示,给药+照射组的肿瘤生长曲线明显较单纯照射组低平,但差异无统计学意义;给药+照射组的肿瘤控制率及肿瘤生长延迟远高于单独给药组及照射组(t=3.15～3.59,P＜0.05).另外,氯氧喹并未增加辐射对小鼠血液细胞成分的不良反应.结论 氯氧喹对Lewis肺癌细胞及荷瘤小鼠均具有明显的辐射增敏作用,对小鼠血液系统未见明显不良反应,值得进一步深入研究.

Abstract：

Objective To study whether Chloroxoquinoline could enhance the radiation sensitivity of Lewis lung cancer cells and xenograft tumors in tumor-bearing mice.Methods Both cell and animal experiments were divided into control group,drug group,irradiation group and combination group.MTT assay was used to detect the optical density of Lewis lung cancer cells cultured in vitro.The model of tumor-bearing mice was established first and then the tumor diameters of different groups were measured to figure out the tumor control rates and tumor growth delay.After irradiation,the blood samples in each group were collected to detect the amount of blood cells.Results MTT showed 24 hours after irradiation,the cell survival fraction of combination group was lower than that of irradiation group,but no statistical differences (P ＞ 0.05).However,48 hours later,the cell survival fraction of combination group was obviously lower than irradiation group with statistically significant differences( t = 3.22,4.23,4.46,4.58,P ＜ 0.05).Animal experiments showed the tumor growth curve of combination group was significantly lower than irradiation group.The tumor control rate and tumor growth delay of combination group was more above the other groups ( t = 3.15-3.59,P ＜ 0.05 ).Additionally,according to the analysis of blood samples,the hematological toxicity of chloroxoquinoline on mice was not found.Conclusion Chloroxoquinoline shows its radiation sensitizing effect on Lewis lung cancer cells and xenograft tumors in mice without hematological toxicity.     

外照射联合131I-chTNT对小鼠Lewis瘤影响的研究

目的 研究外照射联合¹³¹I-chTNT对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,并观察其在小鼠体内的分布和显像。方法 建立C57小鼠Lewis瘤模型,肿瘤直径达一定大小时随机分组进行实验。测量给药后不同时间肿瘤组织及感兴趣器官的放射性,观察活体显像情况及荷瘤小鼠肿瘤生长延迟效应。结果 联合外照射组肿瘤组织的放射性1、3和5d均高于单药组,组间差异有统计学意义(P值分别为0.018、0.041和0.024),两组中正常组织的放射性差别无统计学意义(P＞0.05)。联合组肿瘤区核素显像比单药组强且持续时间长。肿瘤生长效应实验中单药组、外照射组、联合组的绝对延迟时间为3.1、9.1和13.1d,标准化延迟时间为10d,¹³¹I-chTNT对放射的增益因子为1.08。结论外照射联合¹³¹I-chTNT后可促进其在小鼠体内肿瘤区的浓聚,而对正常组织无影响。联合应用¹³¹I-chTNT可提高外照射对荷瘤小鼠的放射效应。