miR-494通过抑制SIRT1表达调节人宫颈癌Hela细胞系增殖和迁移

目的观察宫颈癌组织中miR-494的表达情况及其对宫颈癌细胞系Hela增殖和迁移的影响,并对其相关机制进行初步的分析。方法 RT-PCR方法检测miR-494在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达情况。克隆形成实验检测miR-494对宫颈癌细胞系Hela增殖能力的影响;划痕实验检测miR-494对宫颈癌细胞系Hela迁移能力的影响。Target Scans软件预测miR-494可能的靶基因,并采用荧光素酶报告基因实验验证预测的靶基因。Western blot方法检测miR-494对预测靶基因表达的影响。结果 miR-494在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达较正常组织相比显著降低(P0.01)。转染miR-494可显著抑制Hela细胞的增殖和迁移能力(P0.01),而转染anti-miR-494可增加Hela细胞的增殖和迁移能力(P0.01)。Targetsscan软件预测miR-494可能的靶基因为去乙酰化酶1(sirtuin 1,SIRT1),且得到荧光素报告实验结果证实。Western blot结果显示转染miR-494可显著抑制Hela细胞中SIRT1的表达(P0.01),而转染anti-miR-494可增加Hela细胞中SIRT1的表达(P0.01)。结论 miR-494可通过调节SIRT1的表达而发挥宫颈癌抑制作用。     

miR-378和miR-10b对子宫颈癌增殖、侵袭与转移的影响

目的探讨miR-378、miR-10b在子宫颈癌增殖、侵袭及转移中所发挥的作用。方法以宫颈癌Hela细胞为靶点,通过细胞转染技术将miR-378、miR-10b质粒及空白质粒转染细胞,通过Transwell侵袭实验检测宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移行为的改变。结果高表达miR-378可促进宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭及转移;低表达miR-10b可促进宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭及转移。结论 miR-378、miR-10b在宫颈癌的增殖、侵袭和转移中可能发挥了重要的作用,为宫颈癌的诊断和治疗提供了新的靶点和方向。     

Caveolin-1对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响及其机制

目的探讨Caveolin-1对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响及其机制。方法体外培养宫颈癌细胞株Hela,将细胞株分为实验组、阴性对照组和正常对照组,实验组为运用质粒转染技术建立过表达的稳定细胞株Hela/Caveolin-1,空载体细胞株Hela/pc DNA3.1作为阴性对照组,正常对照组为未转染的常规培养细胞。采用RT-PCR方法检测3组细胞中Caveolin-1的表达水平,MTT方法检测宫颈癌细胞增殖能力,Transwell细胞侵袭实验测定转染Caveolin-1后宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力。结果 RT-PCR方法结果说明,Hela/Caveolin-1实验组中Caveolin-1的表达(5.82±0.19)明显高于阴性对照组(1.19±0.01)和正常对照组(1.32±0.06),且实验组Hela细胞的增殖和迁移能力显著减弱。结论 Caveolin-1与宫颈癌细胞的增殖和迁移能力有关。     

miR-181b靶向鼠双微体-2对宫颈癌Caski细胞侵袭、迁移的影响及机制

目的探讨miR-181b靶向鼠双微体-2 (MDM2)对宫颈癌Caski细胞侵袭、迁移的影响及机制。方法应用RTPCR检测宫颈癌组织miR-181b mRNA表达,RT-PCR及免疫组化法检测MDM2表达。用miRcramble、miR-181b mimics、阴性对照siRNA (NC组)及靶向抑制MDM2的si NRA (si-MDM2)转染人宫颈鳞癌Caski细胞,通过转染miR-181b mimics后MDM2表达及转染si-MDM2后miR-181b表达检测初步证实miR-181b与MDM2的靶向关系,miR-NC、Wt-MDM2+miR-181b mimics和Mut-MDM2+miR-181b mimics共转染后双荧光素酶活性检测确定MDM2是否为miR-181b的靶基因。应用Transwell小室检测过表达miR-181b或抑制MDM2表达后Caski细胞侵袭及迁移能力,应用Western blotting检测MDM2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、STAT3及p-STAT3的蛋白表达。结果 miR-181b在宫颈癌中的表达显著低于正常宫颈组织(P0. 05),MDM2在宫颈癌中的表达显著高于正常宫颈组织(P0. 05)。MDM2是miR-181b的靶基因。miR-181b mimics和si-MDM2均可抑制Caski细胞侵袭及迁移能力,下调MMP-2、MMP-9和p-STAT3的蛋白表达(P0. 05)。结论 miR-181b可靶向MDM2抑制宫颈癌Caski细胞侵袭及迁移能力,机制与下调STAT3信号有关。     

转染YAP蛋白对宫颈癌细胞株Hela、SiHa增殖、迁移能力的影响研究

目的探究转染YAP蛋白对宫颈癌细胞株Hela、SiHa增殖、迁移能力的影响。方法对宫颈癌Hela、SiHa细胞株进行培养,建立稳定转染的YAP-shRNA实验组及空载质粒组。采用Real Time-PCR法、Werstern Blot法、MTT实验、Transwell小室实验、流式细胞仪分别检测YAP基因表达、YAP蛋白表达、细胞增殖能力、细胞迁移能力以及细胞周期及凋亡情况。结果 Hela细胞及SiHa细胞中YAP转染组YAP蛋白及YAP mRNA表达水平均明显降低,与空载质粒组比较差异有统计学意义(P0. 05);细胞培养24 h、48 h、72 h后,YAP转染组较空白对照组及空载质粒组细胞吸光度(A)值明显降低,而空转组及未处理组生长曲线接近一致,且随着培养时间延长,其抑制作用越明显(P0. 05); YAP转染组穿孔细胞数较空载质粒组及对照组明显减少(P0. 05); YAP转染组与空载质粒组及对照组比较,G1期细胞比例增加,G2期细胞比例减少,细胞被阻滞于G1期,YAP转染组Hela、Siha细胞凋亡率显著高于空载质粒组及对照组(P0. 05)。结论 YAP蛋白转染可以有效降低宫颈癌细胞株Hela、SiHa中YAP蛋白及YAP mRNA表达水平,抑制宫颈癌细胞株Hela、SiHa增殖、迁移能力,提高Hela、Siha细胞凋亡率,对宫颈癌的治疗有重要的参考价值。     

黄芪多糖通过JAK-STAT信号通路对宫颈癌细胞增殖迁移及侵袭的调控机制

目的探讨分析黄芪多糖通过JAK-STAT信号通路对宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭调控机制研究。方法取对数生长的宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测不同浓度黄芪多糖(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0) mg/ml分别作用24 h、48 h、72 h对Hela细胞增殖抑制作用;采用划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验检测黄芪多糖对宫颈癌Hela细胞迁移、侵袭能力抑制作用;采用Western blot法检测黄芪多糖处理后宫颈癌Hela细胞SHP2、SOCS3、PIAS1蛋白表达含量。结果与对照组相比较,不同浓度黄芪黄多干预Hela细胞24 h、48 h、72 h均具有着显著的增殖抑制作用,并且抑制作用呈剂量和时间依赖性:同一药物浓度,作用时间越长,Hela细胞增殖抑制率越高;相同作用时间,药物浓度越高,Hela细胞增殖抑制率越高。黄芪多糖干预后,宫颈癌Hela细胞伤口愈合速度慢于对照组,48 h后对照组细胞基本完全愈合,而黄芪多糖组细胞伤口在48 h仍未愈合。黄芪多糖处理后Hela细胞迁移数明显降低(P0.05),且随着黄芪多糖浓度增加细胞迁移数明显降低(P0.05)。黄芪多糖处理后Hela细胞侵袭数明显降低(P0.05),且随着黄芪多糖浓度增加细胞侵袭数明显降低(P0.05)。不同浓度黄芪多糖作用Hela细胞随黄芪多糖浓度的增高SHP2、SOCS3蛋白相对表达量明显升高(P0.05),PIAS1蛋白相对表达量明显无明显变化(P0.05)。结论黄芪多糖对宫颈癌Hela细胞增殖具有明显的抑制作用,且其抑制作用呈显著的浓度-时间依赖性,同时黄芪多糖可有效抑制宫颈癌Hela细胞的迁移和侵袭,其作用机制可能与上调宫颈癌Hela细胞SHP2、SOC3蛋白表达,抑制JAK-STAT细胞信号通路过度活化有关。     

miR-145对宫颈癌HELA细胞侵袭转移作用的影响及分子机制

目的探讨miR-145对宫颈癌HELA细胞侵袭转移的机制,寻求宫颈癌治疗的新途径。方法构建载体验证miR-145与靶基因MUC1的互补作用,利用稳定表达miR-145的HELA细胞,揭示miR-145与MUC1及上皮间质转化(EMT)三者之间的关系,发现宫颈癌细胞可能的侵袭转移方式。结果 miR-145模拟物与报告载体共转染293T细胞后,荧光表达量明显下降,P<0.05;miR-145模拟物与突变载体共转染293T细胞后,荧光表达量无明显改变,P>0.05。E-cad蛋白表达在miR-145未处理的各组HELA细胞中均低表达;在miR-145-CMV-RFP-HELA细胞系中E-cad的表达显著增强。结论 miR-145在宫颈癌中起到抑癌基因的作用,miR-145对宫颈癌细胞的侵袭转移存在负性调控作用,miR-145通过MUC1作用于EMT。     

下调FoxM1 mRNA对子宫颈癌细胞的增殖及侵袭能力的影响

目的探讨宫颈癌细胞中叉头框转录因子(Fox M1) mRNA表达下调对其增殖、侵袭能力的影响。方法采用RNA干扰技术(si Fox M1)下调子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha中的Fox M1 mRNA表达为干扰处理组,未经si FoxM1处理的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha作为对照组,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Westren-blot)检测转染24 h后两组Fox M1 mRNA、蛋白的表达情况,采用四甲基偶氮唑蓝染色观察两组转然后的细胞增殖能力,采用Transwell方法检测转染48 h后细胞的侵袭能力。结果 si Fox M1转染处理24 h后,干扰处理组的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha中的Fox M1 mRNA及蛋白表达水平均低于对照组(P<0. 05); si Fox M1转染处理48 h后,干扰处理组的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha增殖能力均低于对照组(P<0. 05); si Fox M1转染处理48 h后,干扰处理组的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha中的穿透Transwell小室的细胞数均低于对照组(P<0. 05)。结论宫颈癌细胞中Fox M1 mRNA表达下调可以抑制肿瘤细胞的增殖及侵袭能力。     

miR-363对宫颈癌诊断及治疗的临床意义

目的探讨宫颈癌患者血浆中miR-363表达水平与宫颈癌临床病理特征之间的关系,为诊断宫颈癌提供新的方法。方法收集22例宫颈癌患者临床资料,采集患者血浆,以正常人血浆作为对照,运用RT-PCR方法检测miR-363的表达变化,并用ROC曲线分析方法评估血浆miR-363对宫颈癌的诊断效能。在宫颈癌细胞系Hela细胞中转染miR-363,MTT法检测miR-363对Hela细胞增殖的影响。结果宫颈癌患者血浆及正常人血浆中miR-363相对表达量差异有统计学意义(P0.05)。宫颈癌患者中miR-363相对表达量与患者年龄、肿瘤大小无显著相关性(P0.05),而与肿瘤的分化程度、临床分期有关(P0.05)。miR-363对宫颈癌患者和正常对照中诊断宫颈癌的AUC为0.769(95%CI:0.634~0.898),敏感度和特异度分别为71.43%和85.71%。体外转染miR-363可显著抑制Hela细胞的增殖。结论宫颈癌患者肿瘤组织中miR-363表达的显著下调可能参与了肿瘤的发生、发展过程,其有可能成为宫颈癌诊断和治疗的新靶点。     

lncRNA DDX11-AS1靶向miR-299-3p调控宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DDX11反义RNA1(DDX11 antisense 1,DDX11-AS1)靶向miR-299-3p对宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭的影响。 方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测宫颈癌组织、癌旁组织中DDX11-AS1和miR-299-3p表达水平。将小干扰RNA阴性对照(si-NC组)、DDX11-AS1小干扰RNA组(si-DDX11-AS1组)、miR-299-3p模拟物组(miR-299-3p组)、miRNA模拟物阴性对照组(miR-NC组)、si-DDX11-AS1+miRNA抑制物阴性对照组(si-DDX11-AS1+anti-miR-NC组)、si-DDX11-AS1+miR-299-3p抑制物组(si-DDX11-AS1+anti-miR-299-3p组)分别转染HeLa细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、transwell实验分别检测细胞活力、迁移侵袭能力。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证DDX11-AS1对miR-299-3p的靶向调控作用。 结果 与癌旁组织相比,宫颈癌组织中DDX11-AS1表达显著升高,miR-299-3p表达显著降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-DDX11-AS1组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-299-3p组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05)。与si-DDX11-AS1+anti-miR-NC组比较,si-DDX11-AS1+anti-miR-299-3p组HeLa细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著升高(P<0.05)。miR-299-3p是DDX11-AS1的靶基因,DDX11-AS1负调控miR-299-3p表达。 结论 宫颈癌中DDX11-AS1呈高表达。沉默DDX11-AS1通过上调miR-299-3p能够降低宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭能力。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

Correlates of stages of change of smoking among inhabitants of deprived neighbourhoods

BACKGROUND: This study examines the prevalence and correlates of stages of change of smoking, in terms of psychosocial, structural and sociodemographic factors, among inhabitants of deprived neighbourhoods. METHODS: Cross-sectional data were obtained from a survey on health related behaviour. Subjects were 2009 current and former smokers, aged 20-46, living in deprived neighbourhoods in Rotterdam, the second largest city in the Netherlands. Three groups of smokers were formed according to the stages of change-definitions of the Transtheoretical Model: smokers not planning to quit (precontemplators), smokers planning to quit (contemplators/preparators) and former smokers (actors/maintainers). Smokers planning to quit and smokers not planning to quit were compared regarding psychosocial factors (attitude, social norm, self-efficacy), structural factors (neighbourhood problems, material deprivation, financial problems, employment status) and sociodemographic factors (age, gender, marital status, cultural background, educational level). Former smokers were compared with smokers planning to quit regarding structural and sociodemographic factors. Logistic regression was used to assess correlates of stages of change. RESULTS: Smokers planning to quit (prevalence = 19%) reported a more positive attitude, stronger social norms and higher self-efficacy expectations in quitting smoking than smokers not planning to quit (prevalence = 57%). Smokers planning to quit less often were Dutch-born, more often had attended higher vocational schooling or university and more often reported experiencing two or more neighbourhood problems compared to smokers not planning to quit. Former smokers (prevalence = 24%) were older, more often Dutch-born, married, employed and higher educated, compared to smokers planning to quit. Furthermore, former smokers less often reported material deprivation and financial problems than smokers planning to quit. CONCLUSION: Among people living in deprived neighbourhoods, different factors correlate with different stages of change of smoking. Implications for health promotion are discussed.     

转基因食品产业化的风险防范及制度构建

风险防范机制的缺失是阻碍转基因食品产业发展的因素之一。基于转基因食品产业对人类健康、物种进化和生态环境的负面影响，及时有效地构建风险防范机制十分必要。我国既有的转基因食品产业风险防范机制存在诸多缺陷：未形成转基因食品全程跟踪制度及安全事故应急处理制度，在安全性评价制度及法律责任体系等方面也有待进一步完善。     

中医药干预治疗不同程度产后抑郁临床研究

目的 观察中药干预不同程度产后抑郁症患者的临床疗效.方法 选择90例产后抑郁症患者,随机平均分为干预组和对照组,每组中又平均各自分为轻度、中度、重度3组.干预组在基础治疗上加中药干预治疗,对照组只进行基础治疗.结果 两组轻度产后抑郁症患者均100％痊愈;中度产后抑郁症患者,痊愈率和有效率差异无统计学意义(P＞0.05);重度产后抑郁症患者中,干预组的痊愈率和有效率均显著高于对照组(P＜0.05).结论 中药干预重度产后抑郁症患者具有一定的疗效.