蛇床子素对新生大鼠颅骨成骨细胞中OPG、RANKLmRNA表达的影响

目的：研究蛇床子素对新生大鼠颅骨成骨细胞中OPG、RANKLmRNA表达的影响。方法：新生大鼠颅骨成骨细胞分离培养后，取第4代细胞，以5×10^4／mL接种于100cm^2培养瓶中，常规培养3d后，更换为无血清DMEM培养液，细胞饥饿过夜。然后每瓶分别加入含不同浓度蛇床子素的培养液，每浓度4瓶，连续给药48h和72h。每日通过相差显微镜观察细胞的形态、生长状况及治疗组和对照组之间的差别。提取和鉴定成骨细胞总RNA。结果：在培养液中加入不同浓度的蛇床子素培养48h后，1×10^-7mol／L组OPG、OPG／RANKL与对照组比较差异有统计学意义；培养72h后，1×10^-6mol／L组OPG／RANKL、1×10^-7mol／L组OPGmRNA的相对表达量以及OPG／RANKL与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．01，P〈0．05）。结论：蛇床子素能通过OPG—RANKL—RANK系统影响骨重建。     

肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的体外调节

目的观察近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的直接调节作用。方法体外分离培养大鼠近端肾小管上皮细胞与头盖骨成骨细胞;用甲状旁腺激素（PTH）、137^Cs-γ线及25（OH）D3预作用前者,再与后者分为4组共培养：①单培养组（成骨细胞单培养）、②共培养组（肾小管上皮细胞与成骨细胞共培养）、③刺激共培养组（肾小管上皮细胞经PTH＋25（OH）D3处理,再与成骨细胞共培养）、④抑制共培养组（肾小管上皮细胞经137^Cs-γ线照射＋25（OH）D3处理,再与成骨细胞共培养）;并用RT-PCR方法检测共培养体系中成骨细胞的BGP、ALP、ColI、RANKL与OPG mRNA表达。结果共培养组成骨细胞的骨形成相关基因BGP、ALP、Col I mRNA表达较单培养组显著降低（P〈0．001）;刺激共培养组各基因表达较共培养组显著上升（P〈0．05-P〈0．001）;抑制共培养组ALP表达水平较共培养组显著降低（P〈0．001）,BGP与Col I mRNA表达无显著变化。共培养组与单培养组比较,RANKL与OPC;mRNA表达显著降低（P〈0．001）,但RANKL／OPG比值显著高于后者（P〈0．01）;刺激共培养组与共培养组比较,OPG mRNA表达明显上调（P〈0．01）, RANKL mRNA表达变化无显著意义。RANKL／OPG比值显著降低（P〈0．05）;抑制共培养组与共培养组比较, OPG表达显著下降（P〈0．01）,RANKL/OPG比值则显著增高（P〈0．01）。结论培养的近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达具有直接的调节作用。建立的共培养体系可用于骨代谢相关药物筛选及作用机制研究。     

阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞护骨素及护骨素配体mRNA表达的影响

目的：研究阿胶强骨口服液含药血清对胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL表达的影响，探讨阿胶强骨胶囊治疗骨质疏松的分子机制。方法：3月龄wistar（雌雄各半）30只，随机分为阿胶强骨口服液，雌激素，及生理盐水对照组，灌胃7d后，制备实验组和对照组的含药血清。将新生SD大鼠分离的颅骨成骨细胞，制成单细胞悬液，消化传代，取二代培养的成骨细胞，制成细胞悬液。培养细胞分为5组，分别加同体积药液，对照组仅加培养液，继续培养。采用MTT比色分析法、3H-胸腺嘧啶核苷（3H—TdR）渗入法测定成骨细胞增殖，用放免法测定细胞内BGP含量，RT—PCR测定胎鼠成骨细胞中OPG、RANKL mRNA的表达。蛄果：阿胶强骨口服液含药血清以剂量依赖方式促进成骨细胞的增殖，与对照组相比，差异显著（P〈0．05）。成骨细胞OPG基因mRNA表达在阿胶强骨口服液含药血清1000ml／L时最强，与雌激素组比较无显著性差异（P〉0．05），且明显高于对照组（P〈0．05）。成骨细胞RANKL基因mRNA表达在1000ml／L阿胶强骨口服液含药血清与雌激素组比较无显著性差异（P〉005），且明显低于对照组（P〈0．05）。结论：阿胶强骨口服液可在细胞水平上促进骨的合成代谢及前成骨细胞的有丝分裂，分子水平上调节OPG／RANKL表达而治疗骨质疏松。     

1,25(OH)2D3对体外培养大鼠成骨细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的：观察1,25（OH）2D3对体外培养的大鼠成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响,探讨其促进骨吸收的作用机制。方法：体外分离培养大鼠成骨细胞,分别观察不同浓度1,25（OH）2D3及用1,25（OH）2D,处理不同时间对RANKL／OPG mRNA表达的影响,RANKL／OPG mRNA表达采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定。结果：1,25（OH）2D3呈时间和剂量依赖性地刺激大鼠成骨细胞RANKL mRNA的表达,而抑制OPG mRNA的表达,使RANKL／OPG值增高。结论：1,25（OH）2D3通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达,从而发挥促进破骨细胞介导的骨吸收作用。     

缺氧对人牙周膜细胞OPG和RANKL 基因表达的影响

目的：研究缺氧对人牙周膜细胞骨保护素（OPG）和核因子κb受体活化因子配体（RANKL）基因表达的影响,揭示缺氧在正畸牙移动压力侧骨吸收中的作用。方法采取酶消化法结合组织块法培养人牙周膜细胞。取3～5代细胞,分别在常氧（O2浓度为20％,对照组）和缺氧（O2浓度为2％）状态下培养3、6、12、24 h ,采用RT‐PCR检测OPG、RANKL mRNA的表达情况。采用SPSS15．0软件包,对RT‐PCR数据进行单因素方差分析。结果在培养3、6 h时,缺氧组和对照组OPG、RANKL mR‐NA的表达水平比较差异无统计学意义（P＞0．05）;在培养12、24 h时,缺氧组OPG mRNA 表达水平低于常氧组,而缺氧组RANKL mRNA的表达水平高于常氧组,缺氧组RANKL／OPG的比值较常氧组升高,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论缺氧可以影响人牙周膜细胞OPG、RANKL mRNA的表达,在正畸牙移动压力侧骨吸收中起促进作用。     

降钙素对小鼠成骨细胞增殖及OPG/RANKL表达的影响

目的探讨降钙素对小鼠成骨细胞增殖及骨保护素（OPG）／细胞核因子KB受体活化因子配体（RANKL）表达的影响。方法取出生24h内的小鼠30只,无菌的条件下取出颅骨,应用酶消化法进行成骨细胞的培养,在培养成骨细胞的培养液中加入不同浓度的降钙素,首先应用MTT法检测这种药物对成骨细胞增殖的影响,然后应用RT-PCR法检测其对OPG／RANKL mRNA的表达及ELISA法检测OPG蛋白分泌的影响。结果降钙素能促进成骨细胞的增殖。降钙素能增强成骨细胞中OPG mRNA的表达同时抑制成骨细胞中RANKL mRNA的表达,并能促进OPG蛋白的分泌。结论降钙素能促进成骨细胞的增殖及成骨细胞中OPG mRNA的表达,同时抑制RANKL的mRNA的表达。     

金雀异黄素通过雌激素受体β增加人成骨细胞护骨素与破骨细胞分化因子表达比值

目的 探讨植物雌激素——金雀异黄素（genistein）对人成骨细胞（HOB）作用的分子机制。方法 采用细胞培养结合Western blot方法，观察不同浓度金雀异黄素对HOB细胞的护骨素（OPG）、破骨细胞分化因子（RANKL）、雌激素受体（ER-α，ER-β）蛋白质的影响。结果 ①中、大剂量金雀异黄素明显上调HOB细胞OPG蛋白质的表达、下调RANKL蛋白质的表达；雌激素受体拮抗剂ICI 182．780（10^-8mol／L）拮抗金雀异黄素（10^-8mol／L）的上述作用。②大剂量金雀异黄素刺激HOB细胞ER-β蛋白质的表达；各组ER-α蛋白质的表达量与对照组比较，差异无显著性意义（均P〉0．05）。③OPG／RANKL比值与金雀异黄素剂量成正相关关系（r=0．694，P〈0．05）。结论 金雀异黄素通过ER-β上调HOB细胞OPG表达、下调RANKL表达，该雌激素样效应可能是其抗骨质疏松作用的分子机制之一。     

骨宝含药血清对成骨细胞碱性磷酸酶活性及护骨素mRNA表达的影响

目的：观察骨宝含药血清对SD大鼠成骨细胞（OB）中护骨素（OPG）mRNA表达的影响。方法：①将20只10月龄SD雌性大鼠随机分为2组,每组10只,分别为骨宝组和生理盐水对照组,制备含药血清和空白血清,MTT法确定最佳添加剂量;②取1d龄SD大鼠颅骨分离培养OB,分为骨宝含药血清组和对照组,磷酸对硝基苯酯法（PNPP法）检测OB碱性磷酸酶（ALP）活性,荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）检测OB中OPG mRNA的表达。结果：①15%浓度的骨宝含药血清对OB的增殖具有明显的促进作用（P〈0.05）;②骨宝含药血清组中OB的ALP活性2.527±0.185高于对照组1.839±0.040（P〈0.05）,骨宝含药血清组中OB的OPG mRNA表达量1.457±0.031高于对照组0.852±0.090（P〈0.05）。结论：骨宝含药血清能上调OB中OPGmRNA的表达,增强OB的ALP活性,可能是骨宝防治骨质疏松症的作用机制之一。     

姜黄素对脂多糖刺激成骨细胞骨吸收的影响

目的通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法探讨姜黄素对脂多糖(LPS)刺激成骨细胞后骨保护因子(OPG)和破骨细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)m RNA表达的影响。方法 1μg/m L LPS作用成骨细胞6、12、18、24、48 h,并用10μmol/L姜黄素预处理成骨细胞60 min后加入1μg/m L LPS继续作用6、12、18、24、48 h,RT-PCR检测成骨细胞OPG和RANKLm RNA的表达。结果当以1μg/m L LPS作用于成骨细胞,随着作用时间的增加成骨细胞表达RANKL m RNA的能力逐渐增强,到24 h达到最高峰,到48 h基本恢复至初始水平;用10μmol/L姜黄素预处理成骨细胞,然后再用1μg/m L LPS处理成骨细胞48h,发现成骨细胞表达RANKL m RNA的能力明显减弱,随着作用时间的增加成骨细胞表达RANKL m RNA的能力变化不明显。当以1μg/m L LPS作用于成骨细胞,成骨细胞表达OPG m RNA的能力无明显变化;用10μmol/L姜黄素预处理成骨细胞,然后再用1μg/m L LPS处理成骨细胞48 h,发现成骨细胞表达OPG m RNA的能力也无明显变化。结论姜黄素可以减少LPS刺激后成骨细胞RANKL m RNA的表达,对OPG m RNA表达无影响,进而使得RANKL/OPG的比值减小,抑制骨吸收。     

阿仑膦酸盐对成骨细胞相关基因RANKL、OPG表达的影响

目的研究阿仑膦酸盐（ALN）对体外培养小鼠成骨细胞相关基因OPG、RANKL表达的影响。方法体外培养小鼠成骨细
胞,应用碱性磷酸酶染色（ALP）检测成骨细胞ALP染色情况,免疫荧光化学检测成骨细胞RANKL、OPG表达。将第二代成骨
细胞分为A、B、C、D、E五组。A组(对照组),用DMEM培养基培养;B、C、D、E组除加入上述培养基外,加入不同浓度ALN,分别
为：B组,加入10-4mol/L ALN;C组,加入10-5mol/L ALN;D组,加入10-6mol/L ALN;E组,加入10-7mol/L ALN。培养48h后应
用Real time PCR、Western blot检测各组成骨细胞基因RANKL、OPG表达情况。结果成骨细胞ALP染色呈阳性,免疫荧光化
学检测RANKL、OPG表达阳性。Real time PCR、Western Blot检测各组OPG、RANKL mRNA及蛋白表达水平与ALN浓度密
切相关,10-4mol/L ALN时OPG、RANKL表达最低,10-7~10-5mol/L ALN时OPG、RANKL表达依次增高,10-5mol/L ALN时表达
量最高。结论ALN对小鼠成骨细胞RANKL、OPG的表达产生作用：10-4mol/L时明显抑制成骨细胞RANKL、OPG的表达;浓
度10-5、10-6、10-7mol/L ALN促进成骨细胞RANKL、OPG的表达,其中10-5mol/L ALN促进作用最强。
     

膀胱移行细胞癌中间隙连接蛋白Cx43mRNA、Bcl-2mRNA和Bax mRNA的表达及其相关性研究

目的 探讨间隙连接蛋白Cx43、Bcl-2及Bax在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其意义.方法 用半定量RT-PCR的方法检测Cx43、Bcl-2及Bax在35例BTCC和21例癌旁组织中的表达情况,并分析其与BTCC临床病理因素的关系.同时取正常膀胱组织15例做对照.结果 BTCC组织中Cx43 mRNA的表达比值[Cx43/人肌动蛋白(β-actin)]为(0.34±0.37),低于BTCC癌旁组织中的(0.79±0.70)和正常膀胱组织的(0.81±0.47),差异有统计学意义(P＜0.01);Bcl-2 mRNA表达比值为(0.35±0.43),高于癌旁组织中的(0.16±0.33)和正常膀胱组织的(0.15±0.23),差异有统计学意义(P＜0.01).癌旁组织与正常膀胱组织Cx43 mRNA及Bcl-2 mRNA的表达比值比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).Cx43 mRNA在BTCC病理分级G3的表达为(0.30±0.16),G2的表达为(0.54±0.22),G1的表达为(0.60±0.25),3个级别比较差异有统计学意义(P＜0.05).Bcl-2 mRNA在BTCC病理分级G3的表达为(0.47±0.15),G2的表达为(0.35±0.11),G1的表达为(0.24±0.10),3个级别间比较差异有统计学意义(P＜0.01).复发BTCC组织中Bcl-2 mRNA的表达水平(0.40±0.15)高于初发癌组织(0.28±0.11),差异有统计学意义(P＜0.05).Bax mRNA在BTCC组织、癌旁组织及正常膀胱组织中的表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).Bax mRNA的表达水平与BTCC患者的肿瘤分期、病理分级以及肿瘤有无复发比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 Cx43 表达下调与BTCC的发生、进展及其恶性特征有关,Cx43基因可能与凋亡相关基因Bcl-2(或Bcl-2/Bax)在BTCC的发展中起拮抗作用,与细胞的凋亡过程有关.     

不同载铁状态下HL-60细胞转铁蛋白受体和铁蛋白mRNA的表达

目的:探讨不同载铁情况下HL-60细胞中转铁蛋白受体(TfR)mRNA和铁蛋白(Fn)mRNA的表达情况.方法:取HL-60细胞分5组培养.FeCl3-20组和FeCl3-40组培养液中加入FeCl3,终浓度分别为20 μmol/L,40 μmol/L;DFO-50和DFO-100组培养液中分别加入去铁胺(DFO)50 μmol/L,100 μmol/L;对照组用单纯培养液,不加FeCl3或DFO.分别于细胞培养12 h、24 h和48 h收集细胞,采用RT-PCR半定量法测定TfR mRNA和Fn mRNA的相对表达量.结果:与对照组比较,DFO-50和DFO-100组TfR mRNA表达量随培养时间的延长而升高,Fn mRNA表达量变化不大(P＞0.05).FeCl3-20和FeCl3-40组TfR mRNA的表达随培养时间的延长,先增高后降低,Fn mRNA的表达则逐渐降低.结论:TfR 和Fn 不同程度地参与了HL-60细胞铁代谢过程.     

胃癌组织中基质金属蛋白酶-2和E-钙黏附素检测

目的:探讨胃癌组织中基质金属蛋白酶 -2(MMP- 2)和E 钙黏附素 (E- CD)的表达。方法:采用原位杂交法,检测 72例胃癌(其中复发 39例)组织中MMP- 2mRNA和E- CDmRNA的表达,并观察 2者与浸润深度和淋巴结转移之间的关系。结果:胃癌组织中MMP -2mRNA和E CDmRNA的阳性表达与浸润深度和淋巴结转移有关。复发患者的 2种胃癌组织 (复发前手术切除标本;本次胃镜活检标本)与非复发胃癌组织标本的MMP 2mRNA和E- CDmRNA的阳性表达率差异有统计学意义(MMP 2:P<0. 01;E CD:P<0. 05)。MMP- 2mRNA阳性表达的胃癌组织中E CDmRNA的阳性表达率低于MMP 2mRNA阴性表达的胃癌组织, 2者呈负相关 (r=-0. 273,P<0. 05)。结论:MMP- 2mRNA和E- CDmRNA的表达与胃癌的浸润、转移及复发有关。检测MMP- 2mRNA和E- CDmRNA在胃癌患者胃镜活检组织中的表达可能有助于判断预后及胃癌转移复发潜能。     

通过组织芯片分析snail、claudin-1 mRNA表达与胃癌的关系

目的 探讨snail mRNA和claudin-1 mRNA在胃癌中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法 制备组织芯片和cRNA探针,通过原位杂交检测snail和claudinl的mRNA在胃癌和正常胃粘膜组织中的表达。结果 胃癌和正常胃粘膜中snail和claudin-1的mRNA表达率差异明显。snail mRNA表达与胃癌的分化、TNM分期、脉管及淋巴结转移呈正相关;claudinl mRNA表达与TNM分期、浸润深度、脉管及淋巴结转移呈负相关。两者均有助于判断胃癌预后,claudin1 mRNA还可作为判断胃癌预后的独立风险因素。结论 snailmRNA与claudin-1 mRNA的表达影响胃癌发展,是指导临床治疗及估计预后的有意义指标。     

肺癌外周血中EGFR mRNA、SP-D mRNA、LUNX mRNA表达的临床意义

目的:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肺癌患者肿瘤组织和外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测40例非小细胞肺癌组织和15例肺良性病变组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达;检测40例肺癌患者外周血中靶基因的表达,并以15例良性肺疾病患者和10名健康人外周血作为对照。结果:40例肺癌患者病理组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达率为77.5%(31/40)、100%(40/40)、100%(40/40),外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达阳性率分别为55.0%(22/40)、52.5%(21/40)和57.5%(23/40);对照组中15例肺良性病变患者病理组织中EGFRmRNA表达率为13.3%(2/15),无SP-DmRNA和LUNXmRNA表达,15例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达。结论:EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA作为检测肺癌组织及肺癌外周血微转移的分子标志物具有良好的敏感度和特异性;三者表达与肺癌TNM分期、组织学类型和癌细胞分化程度关系密切。     

丹参对LDL受体及apoA－Ⅰ mRNA水平的影响

研究了丹参对高脂喂饲大鼠的血清脂质水平、肝低来度脂蛋白（ＬＤＬ）受体ｍＲＮＡ和载脂蛋白（ａｐｏ）Ａ－ＩｍＲＮＡ水平的影响，以及对培养的人成纤维细胞上述两种ｍＲＮＡ水平的影响。发现丹参能升高鼠肝及人成纤维细胞ＬＤＬ受体ｍＲＮＡ水平，但降血清总胆固醇及ＬＤＬ胆固醇作用不明显。提示ＬＤＬ受体可能存在翻译或翻译后水平的调节。丹参对鼠肝及人成纤维细胞ａｐｏＡ－１ｍＲＮＡ水平未见有影响。     

环氧化酶2和乙酰肝素酶mRNA在肾癌中的表达

目的探讨环氧化酶2（COX 2）和乙酰肝素酶（Hpa）mRNA在肾癌（RCC）组织中的表达,分析其与RCC发生发展及预后的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(半定量RT PCR)方法检测56例RCC组织标本及28例癌旁正常组织标本中COX 2 mRNA与Hpa mRNA的表达（β actin作为定量标准物）,观察其在RCC组织和癌旁组织中的表达差异以及与临床病理参数和预后的关系。结果56例RCC组织中COX 2 mRNA与Hpa mRNA阳性率分别为73.2％和67.9％,均高于癌旁正常组织（χ2＝17.719,χ2＝21.429,P均＜0.05）;COX 2 mRNA阳性表达率G1～G2高于G3～G4（χ2＝30.727,P＜0.05）,COX 2 mRNA表达与患者预后不相关（χ2＝0.890,P＞0.05）;Hpa mRNA阳性表达率与RCC病理分级、临床分期、淋巴转移密切相关（χ2＝7.718,χ2＝3.963,χ2＝3.852,P均＜0.05）,Hpa mRNA表达与患者预后相关（χ2＝12.72,P＜0.05）;COX 2 mRNA与Hpa mRNA的阳性表达不相关（r＝-0.244,P＞0.05）。结论COX 2 mRNA高表达是RCC发生的早期分子事件;Hpa mRNA高表达与RCC进展、转移、预后等密切相关。     

LIG4mRNA与XRCC4mRNA在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌组织中DNA连接酶4(LIG4)及X射线修复交叉互补基因4(XRCC4)的mRNA表达水平及临床意义。方法应用实时荧光定量RT-PCR技术检测61例宫颈癌和20例正常宫颈组织中LIG4和XRCC4的mRNA表达水平,分析两种基因的表达与宫颈癌分期、分化程度及盆腔淋巴结转移之间的关系。结果 LIG4 mRNA和XRCC4mRNA在宫颈癌组织及正常宫颈组织中的表达分别为(2.88±1.97)、(5.02±1.87)和(2.16±0.99)、(3.72±1.36),差异有统计学意义,P值分别为0.00和0.00;宫颈癌患者盆腔淋巴结有转移组和无转移组中的表达分别为(0.61±0.17)、(0.41±0.28)和(0.80±0.31)、(0.58±0.26),差异有统计学意义,P值分别为0.00和0.01;宫颈癌低分化组和中高分化组中的表达分别为(1.81±0.99)和(2.03±1.25)、(1.50±0.76)和(1.45±0.57),差异无统计学意义(P>0.05)。LIG4 mRNA在Ⅱ期和Ⅲ期宫颈癌组织中的表达分别为(0.71±0.34)和(0.96±0.36),差异有统计学意义,P=0.01。LIG4 mRNA与XRCC4mRNA在宫颈癌组织中表达呈正相关(r=0.38,P=0.00)。结论 LIG4 mRNA和XRCC4 mRNA在宫颈癌组织中的异常表达与宫颈癌的发展及盆腔淋巴结转移密切相关。     

卵巢恶性肿瘤VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达及其意义

应用原位分子杂交技术研究卵巢恶性肿瘤组织中VEGFmRNA和bFGFmRNA的表达及其意义。结果发现 :浆液性腺癌和内胚窦癌两者表达阳性率高于粘液性腺癌和颗粒细胞瘤 ;临床分期Ⅰ期和未转移病例两者表达阳性率低于临床分期Ⅲ～Ⅳ期和转移病例。结果提示VEGFmRNA和bFGFmRNA表达与卵巢恶性肿瘤病理类型、临床分期和转移发生关系密切 ,阳性表达者可能预后较差。     

大鼠急性肺损伤时iNOS mRNA和eNOS mRNA表达的时相变化

目的 :观察内毒素性急性肺损伤时肺组织中一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶mRNA的时相变化 ,并探讨其相互关系。方法 :用内毒素 (LPS)复制急性肺损伤模型 ,分别测定 0 .5 ,1,2 ,3,4h各组肺组织NO和丙二醛 (MDA)的含量 ;用原位杂交方法检测各组大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOSmRNA)和内皮型一氧化氮合酶mRNA(eNOSmRNA)的表达水平。结果 :大鼠给予LPS后 ,①肺组织MDA含量随时间延长而逐渐增加 ,不同时点的均值互有差异 (P <0 .0 5 ) ,并且均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;②各时点肺组织NO含量和iNOSmRNA表达量均显著大于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,并且均在 2h时达到高峰 ,以后呈下降趋势。二者的变化呈显著正相关 (P <0 .0 1) ;③ 2h前 (含 2h)肺组织MDA含量随iNOSmRNA表达增加所致的NO产量增多而增加 ,2h后二者变化趋势相反 ;④各时点肺组织eNOSmRNA表达量与正常对照组比差异均无显著性。结论 :内毒素性急性肺损伤时 ,肺组织iNOSmRNA大量表达 ,导致内源性NO爆发式产生 ,从而介导肺损伤。NO产量在静注内毒素后 2h达到高峰 ,以后呈下降趋势。