白细胞介素17在胶原性关节炎大鼠血清中的表达及其意义

背景：类风湿关节炎滑膜细胞及滑膜组织中浸润的单核/巨噬细胞、淋巴细胞等产生的炎性细胞因子在类风湿关节炎滑膜病变中起核心作用。白细胞介素17是近年来发现的一个炎症性细胞因子,与机体很多自身免疫性疾病有关。 目的：检测胶原性关节炎大鼠模型血清中白细胞介素17水平,并分析其与炎症指数、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶3的关系。 设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-03/08在大连大学医学院免疫实验室完成。 材料：雌性近交系Wistar大鼠50只,4~6周龄,体质量为(180±15) g。 方法：50只大鼠随机取40只,建立胶原性关节炎动物模型,另外10只作为正常对照。造模组大鼠每只尾根部皮内注射200 μL乳化的Ⅱ型胶原,1周后,每只大鼠接受加强免疫,尾根部皮内注射乳化Ⅱ型胶原100 μL,诱发胶原性关节炎。对照组大鼠以相同剂量相同部位注射生理盐水。 主要观察指标：于24 h后观察大鼠四肢的足肿胀度。ELISA法检测胶原性关节炎大鼠血清中白细胞介素17、白细胞介素 1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶3水平,并观察胶原性关节炎大鼠炎症指数。 结果：胶原性关节炎大鼠血清中白细胞介素17、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶3水平均高于对照组(P均< 0.05),并且白细胞介素17水平分别与白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α和基质金属蛋白酶3呈正相关;胶原性关节炎的大鼠血清白细胞介素17与关节炎炎症指数也有正相关关系。 结论：胶原性关节炎大鼠血清白细胞介素17水平升高,且可能与病情活动、关节炎症和骨质破坏有关。     

佐剂性关节炎模型关节液与血清白细胞介素17及肿瘤坏死因子α表达及青蒿琥酯的干预

背景：已证实青蒿琥酯具有抗风湿作用,但其具体作用机制尚不明确。 目的：探讨青蒿琥酯对佐剂性关节炎模型兔关节液及血清中白细胞介素17及肿瘤坏死因子α表达的影响。 方法：建立佐剂性关节炎实验兔模型,造模诱发第1天,青蒿琥酯组按20 mg/(kg•d)灌服青蒿琥酯7 d,羟氯喹组按5 mg/(kg•d)灌服羟氯喹7 d,模型对照组灌服生理盐水3 mL/d。另取10只未经干预的大耳白兔作为正常对照组。分别于造模结束时及给药5周后,应用酶联免疫吸附法检测各组关节液及血清中白细胞介素17及肿瘤坏死因子α的水平。 结果与结论：青蒿琥酯组、羟氯喹组关节炎症状得到明显改善,关节液及血清中的白细胞介素17、肿瘤坏死因子α质量浓度均明显降低(P < 0.05或P < 0.01),且青蒿琥酯组降低幅度明显大于羟氯喹组(P < 0.05)。提示青蒿琥酯可能通过抑制白细胞介素17及肿瘤坏死因子α的分泌而产生免疫调节作用,其抗炎疗效优于羟氯喹。     

兔膝骨性关节炎关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α表达与

背景：灸法具有操作简便、无痛苦、疗效明显的优点，在临床上治疗膝骨性关节炎有较好的疗效。但目前有关灸疗对膝骨性关节炎的早期防治作用的研究还不够深入。 目的：观察艾灸对兔膝骨性关节炎关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平的影响，探讨艾灸防治膝骨性关节炎的可能机制。 方法：采用改良伸直位固定法制备兔膝骨性关节炎模型，造模后立即干预。艾灸组艾灸关元、左后肢足三里、血海、内膝眼、犊鼻和阳陵泉等穴，每穴10 min，1次/d；几丁糖组关节内注射几丁糖，0.5 mL/关节，1次/周。造模8周，采用ELISA法检测各组关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的水平。 结果与结论：膝骨性关节炎后，兔的Mankin评分明显升高(P < 0.01)，艾灸和几丁糖治疗可降低Mankin评分(P < 0.01)，且两者比较差异无显著性意义(P > 0.05)。ELISA结果显示：模型组关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的水平明显增高(P < 0.01)，艾灸组和几丁糖组关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α水平均较模型组低(P < 0.01)，艾灸组和几丁糖组间差异无显著性意义(P > 0.05)。提示艾灸可通过降低关节液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的水平对兔膝骨性关节炎起防治作用。 关键词：艾灸；骨性关节炎；白细胞介素1β；肿瘤坏死因子α；几丁糖     

脐带间充质干细胞对CIA大鼠炎症因子的干预*

背景：脐带间充质干细胞可表达多种胚胎干细胞的特有分子标志,具有分化潜力大、增殖能力强、免疫原性低等特征。 目的：观察脐带间充质干细胞对类风湿性关节炎免疫炎性的病理过程的干预作用。 方法：实验分为3组,建立Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎模型大鼠,脐带间充质干细胞组于造模后第4周经大鼠尾静脉注射脐带间充质干细胞,模型组注射生理盐水。 结果与结论：治疗后第7天及第35天模型组大鼠血清白细胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素18、肿瘤坏死因子α、血管细胞黏附分子1和中性粒细胞表面CD11b的表达水平均高于正常组(P < 0.05)。脐带间充质干细胞治疗后各因子水平显著低于模型组(P < 0.05),治疗后第35天显著低于第7天(P < 0.05)。表明脐带间充质干细胞能明显抑制CIA大鼠的炎症因子释放和抑制内皮细胞的异常活化,有利于缓解类风湿性关节炎的免疫炎性关节症状。     

正常兔与骨性关节炎兔关节液的分析

背景：研究表明，在骨关节炎关节液中，关节液的成分发生了改变，与软骨损伤密切相关。 目的：测定骨性关节炎兔和正常兔关节液离子、细胞数及透明质酸水平，观察早期骨性关节炎关节液理化环境的变化并与关节软骨病理改变之间的关系；观察骨性关节炎中白细胞介素1、肿瘤坏死因子α在早期骨性关节炎中的变化及其意义。 方法：新西兰大白兔采用Hulth方法制备右膝关节骨性关节炎模型，左膝关节正常对照。分别在第4，6，8周双膝取材。进行病理切片观察和关节液常规生化定量，并采用ELISA方法对关节液中的透明质酸、白细胞介素1、肿瘤坏死因子α进行定量检测。 结果与结论：在早期骨性关节炎兔关节液中，离子浓度变化不大；透明质酸、白细胞介素1、肿瘤坏死因子α水平在第4周即发生变化：透明质酸水平在造模后4周明显升高，随软骨病变程度增加而下降趋势明显，至造模后8周时浓度已下降至正常水平；白细胞介素1水平在造模后4周明显升高，4，6，8周水平有波动，总体水平高表达；肿瘤坏死因子α水平在造模后4周明显升高，4，6，8周水平逐渐上升。     

补肾方对骨质疏松模型大鼠骨密度及胰岛素样生长因子Ⅰ和肿瘤坏死因子α的影响

背景：研究证实，胰岛素生长因子和肿瘤坏死因子α分别具有调节成骨细胞和破骨细胞功能。 目的：实验拟验证补肾复方中药对骨质疏松模型大鼠骨密度及胰岛素样生长因子Ⅰ、肿瘤坏死因子α的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-09/2007-03在广州中医药大学动物中心和广州中医药大学附属骨伤科共同完成。 材料：选择SPF级6 月龄健康雌性SD大鼠68只，体质量约260~280 g。随机分为空白组和手术组，分别为22只和46只。术后3个月后从两组随机各选出10只以确定造模成功。造模后大鼠随机分为3组，模型组、雌激素组、中药组各12 只。剩余12只为空白对照组。补肾中药主要由淫羊藿、补骨脂、丹参、黄芪等10味中药组成，含生药量为1 430 g/L，由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供。 方法：中药组给予补肾中药按4.8 g/kg灌胃，1次/d；雌激素组给予尼尔雌醇按1 mg/kg灌胃，1次/周；模型组和空白组给予蒸馏水按10 mL/kg灌胃，1次/d，连续治疗3个月。 主要观察指标：分别测量各组大鼠全身骨密度、腰椎骨密度、双髋部骨密度，以及外周血清中的胰岛素样生长因子Ⅰ、肿瘤坏死因子α及雌激素含量。 结果：最后进入结果分析64只。①造模组全身骨密度低于空白组（P < 0.05）。②治疗后，中药组和雌激素组的全身骨密度、腰椎骨密度高于模型组（P < 0.05），中药组和雌激素组比较，差异无显著性意义（P > 0.05）。③与模型组比较，中药组能显著降低肿瘤坏死因子α水平和提高雌激素水平(P均< 0.05)，与雌激素组比较差异无显著性意义；中药组还能提高胰岛素样生长因子Ⅰ的含量(P < 0.05)，雌激素组胰岛素样生长因子Ⅰ水平明显均低于其余3组。 结论：中药补肾复方在治疗骨质疏松的过程中类雌激素样作用可能是其主要作用机制，但其对胰岛素样生长因子Ⅰ的影响不同于雌激素。     

骨髓间充质干细胞下调类风湿性关节炎小鼠脾脏单个核细胞TLR8及TLR9的表达

背景：间充质干细胞能够缓解类风湿性关节炎小鼠的症状，但是其机制还不清楚。 目的：观察骨髓间充质干细胞对类风湿性关节炎小鼠脾脏单个核细胞表达TLR8及TLR9等的影响。 方法：DBA/1J小鼠随机分3组，非造模组不造模，阳性对照组和实验组制备Ⅱ型胶原诱导的小鼠类风湿性关节炎模型。实验组尾静脉注射移植大鼠骨髓间充质干细胞。 结果与结论：与阳性对照组比较，实验组小鼠关节直径明显减小，关节炎症细胞浸润程度明显降低，但比非造模组略高；小鼠脾脏单个核细胞表达TLR8、TLR9和白细胞介素1β的水平较阳性对照组明显降低(P < 0.01或P < 0.05)；阳性对照组与实验组中TLR8与TLR9的表达均无明显相关性(P > 0.05)。说明骨髓间充质干细胞下调了类风湿关节炎小鼠脾脏单个核细胞表达TLR8及TLR9的水平，但TLR8与TLR9的表达无相关性。     

心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌组织及血清肌钙蛋白Ⅰ表达和心肌肿瘤坏死因子α与重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白的干预**

背景：心肌缺血再灌注时生成大量的肿瘤坏死因子α直接造成心肌的收缩功能下降。 目的：观察药物重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对大鼠缺血再灌注心肌损伤的影响。 方法：成年雄性Wistar大鼠建立心肌缺血再灌注模型。药物干预组在再灌注前注射重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白,模型组给予生理盐水,并设立不造模的假手术组。再灌注后立即测量心肌梗死面积,ELISA检测再灌注后的心肌肿瘤坏死因子α及血清肌钙蛋白Ⅰ的含量,实时PCR检测心肌肿瘤坏死因子α mRNA的表达。 结果与结论：与假手术组相比,模型组与药物干预组大鼠心肌肿瘤坏死因子α及其mRNA和肌钙蛋白的水平明显升高 (P < 0.05);与模型组相比,药物干预组心肌肿瘤坏死因子α及血清肌钙蛋白Ⅰ水平明显升高(P < 0. 05),心肌梗死体积与肿瘤坏死因子α mRNA的表达减少(P < 0. 05)。提示重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白能够减轻心肌缺血/再灌注损伤作用,改善大鼠的心功能。     

金丝桃苷对大鼠颅脑损伤后炎性反应及血脑屏障通透性的影响

目的 探讨金丝桃苷对大鼠颅脑损伤（TBI）后炎性反应和血脑屏障损伤的影响及机制。方法 选取60只成年SPF级SD大鼠,按随机数字表法随机分为假手术组、模型组、低剂量金丝桃苷组、高剂量金丝桃苷组、脂多糖（LPS）组、高剂量金丝桃苷+LPS组,每组10只。采用改良Feeney自由落体法建立TBI大鼠模型。低剂量、高剂量金丝桃苷组大鼠造模后以金丝桃苷药液灌胃,剂量分别为60、120 mg/kg;LPS组大鼠造模后以LPS药液灌胃,剂量为0.4 mg/kg;金丝桃苷+LPS组大鼠造模后以高剂量金丝桃苷和LPS药液灌胃;每天灌胃1次,持续14 d。灌胃结束后24 h,采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估神经功能,采用跳台实验检测认知功能;采用伊文思蓝（EB）定量法检测大鼠血脑屏障通透性;透射电镜观察大鼠血脑屏障结构损伤;采用ELASA检测大鼠血清及脑组织炎性介质[肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-17(IL-17)、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）]水平;采用免疫印迹法检测脑组织TNF-α/NF-κB/caspase-3蛋白表达水平。结果 TBI后,大鼠mNSS评分、跳台潜伏期显著降低（...     

关节软骨及骨破坏模型大鼠经盐酸氨基葡萄糖干预的最佳剂量

背景：研究表明盐酸氨基葡萄糖可减轻骨关节炎的症状并能保护关节软骨,但该药的最佳剂量至今尚无共识。 目的：观察盐酸氨基葡萄糖对由白陶土与鹿角菜胶诱发大鼠关节炎的治疗最低有效剂量。 方法：将SD大鼠分别用蒸馏水,盐酸氨基葡萄糖溶液0.4,0.8及1.6 g/kg灌胃,采用白陶土与鹿角菜胶诱发大鼠单发关节炎模型。建模后1,3,5 d,用容积测量法测定各组大鼠的左右后肢足跖体积,计算足跖肿胀度。用游标卡尺测定其胫跗骨关节最大径;测定足跖伊文思蓝含量,右足跖制备组织切片,染色后镜下观察其病变程度并进行评分。 结果与结论：给予大鼠盐酸氨基葡萄糖1,3和5 d后,盐酸氨基葡萄糖0.8及1.6 g/kg组大鼠右后足跖肿胀度及胫跗骨关节径明显小于模型组(P < 0.05或P < 0.01),足跖肿胀度及胫跗骨关节径均有随给药剂量增大而减小。给药5 d后,盐酸氨基葡萄糖0.8及1.6 g/kg组大鼠右后足跖伊文思蓝含量及组织病理学评分明显小于模型组(P < 0.05或P < 0.01)。结果提示,盐酸氨基葡萄糖能够有效地预防骨关节炎关节软骨和骨的破坏,并可预防关节周围组织炎症,其最低有效剂量为0.8 g/kg。