肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶基因分型研究

目的调查广州地区下呼吸道感染肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的分离率及各种基因型的流行病学分布。方法收集广州地区13家医院2001-10～2002-12临床分离的肺炎克雷伯菌511株,采用美国临床实验室标准化委员会规定的ESBL表型筛选和确证试验确定ESBL的发生率、PCR扩增对产ESBL菌初步分型,然后对部分PCR扩增阳性产物测序,序列分析进一步确定基因型。结果肺炎克雷伯菌产ESBL分离率为40.1%。TEM型49株占21.9%,均为TEM-1型;CTX-M型59株占28.8%;SHV型96株占46.8%。结论SHV型是广州地区下呼吸道感染肺炎克雷伯菌产ESBL流行的常见基因型。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的研究产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物的耐药情况.方法对ESBLs(-)肺炎克雷伯菌73株和ESBLs( )肺炎克雷伯菌31株进行11种抗菌药物的药物敏感性试验.ESBLs采用双纸片协同法测得.结果肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率为29.8%.ESBLs( )菌株对多种抗菌药物敏感率显著低于ESBLs(-)菌.ESBLs( )菌株对亚胺培南、氨曲南的敏感率最高,阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦、环丙沙星次之;对头孢噻肟、头孢哌酮、头孢曲松及哌拉西林耐药性很强.结论 ESBLs( )肺炎克雷伯菌耐药性较强,亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦对其有很高的活性,这些数据对临床经验用药有较好的指导作用.     

3株含qnr基因肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的检测

目的了解临床分离含qnr基因,(质粒介导的喹酮类耐药基因)肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的基因型别。方法琼脂稀释法测定3株临床分离含qnr基因肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、喹诺酮类抗菌药物的耐药性,NCCLS表型确证试验进行产ESBLs菌株的表型鉴定、采用TEM、SHV、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-13组、OXA-1组、OXA-2组、OXA-10组、PER-1、VEB-1β-内酰胺酶通用引物以及TEM、CTX-M-13组、OXA-1组全编码基因引物、I类整合酶基因引物进行PCR检测和DNA序列分析;同时对这些菌株进行PFGE检测。结果3株临床分离含qnr基因肺炎克雷伯菌均为产ESBLs菌株,ESBLs基因型别为CTX-M-14,其中2株细菌同时产生TEM-1型广谱β-内酰胺酶、1株同时产生TEM-1和OXA-30型广谱β-内酰胺酶,I类整合酶基因均为阳性;这些菌株对青霉素类、一代、二代、三代头孢菌素(头孢噻肟)以及多种喹诺酮类均显示耐药。3株菌株中有2株的PFGE谱型相同。结论临床分离含qnr基因肺炎克雷伯菌可同时产生CTX-M-14超广谱β-内酰胺酶,引起多重耐药,并存在克隆传播,临床应加强检测。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌研究进展

感染性呼吸系统疾病不仅是临床上最常见的疾病之一,也是最常见的致死原因之一,导致了巨大的社会负担和经济负担,因此病原菌感染与抗感染治疗长期以来不仅是一个关系重大的社会问题,也是呼吸系统和其他相关临床及基础-临床领域密切关注的课题.产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌目前已在全世界范围内流行,且多重耐药菌株所占比例高,使临床治疗面临巨大挑战.因此,掌握产超广谱β-内酰胺酶菌株的流行病学特征、耐药的特点及相关检测方法,对有效地进行预防和控制至关重要.本篇文章就相关研究进展作一综述.     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的探讨我院肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因分布规律。方法对20株经双纸片试验确证为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌进行bla TEM-1、blaSHV-1、CTX—M-1组、TOHO-1组等4种基因PCR扩增，并对16株blaSHV-1基因PCR扩增阳性的菌株进行基因序列测定，在Internet网上与GenBank中的已知序列进行核苷酸相似性分析，并进行编码基因对位和氨基酸序列对比分析。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM-1，blaSHV-1，CTX—M-1组等3种基因扩增阳性率分别是50．0％、95．0％、20．0％。16株肺炎克雷伯菌中有4株序列与SHV—1a（序列号：X98101，74→934）氨基酸序列完全相同；有3株序列与SHV-2（序列号：AY570959，42→812）100％相同；有2株序列与SHV-11（序列号：AY293069，41→817）100％相同；有4株序列与SHV-27（序列号：AF293345，2→821）氨基酸序列完全相同；有1株序列与SHV-28（序列号：AF538324，12→823）100％相同；有2株序列在GenBank中未找到与之完全相同的序列。结论本地肺炎克雷伯菌中有SHV—1a、SHV-11、SHV-28广谱β-内酰胺酶基因和SHV-2、SHV-27 ESBLs基因存在。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯氏菌的耐药性监测

目的 对肺炎克雷伯氏菌进行超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性测定。为产ESBLs细菌的监控和治疗提供依据。方法 对临床分离的肺炎克雷伯氏菌采用K—B纸片扩散法．严格按照美国NCCLS制定的标准，进行ESBLs检测并对19种抗生素的耐药性测定。结果 在41株肺炎克雷伯氏菌中，检出16株产ESBLs阳性率为39．0％。ESBLs阳性株除对亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦高度敏感外，对其它抗生素的耐药性明显高于ESBLs阴性株。结论 产ESBLs的肺炎克雷伯氏菌在临床分离株中阳性率较高．且对多种抗生素耐药．应加强对ESBLs的检测和其感染者的治疗。     

TEM-1型β-内酰胺酶基因的克隆、表达及酶的纯化

开发专一性β-内酰胺酶抑制剂,对解决细菌耐药性问题具有重要意义.这项研究需要用到纯度较高的β-内酰胺酶.我们将TEM-1型β-内酰胺酶基因克隆到一个高表达载体中,研究了该酶在大肠杆菌中的高表达条件及分离纯化方法,最终获得的酶纯度大于90%.     

肺炎克雷伯菌临床分离株产广谱和超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的 了解产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及其基因型分布特征,指导临床进行抗感染治疗,更好地控制耐药菌株的播散.方法 对38株经双纸片试验确认为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感性试验;采用PCR法对ESBLs阳性株进行TEM型、SHV型、CTX-M型、VEB型和PER型ESBL基因检测,对PCR阳性产物进行测序确定基因型别;同时采用PCR法检测整合酶基因,对PCR产物进行测序确定整合酶类别.结果 38株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对青霉素类和头孢菌素类耐药性十分严重,对庆大霉素和复方磺胺甲嚼唑的耐药率也均＞90%,未检测到耐亚胺培南和美罗培南的菌株.38株ESBLs阳性菌株检测到3种ESBLs型,分别为TEM型、SHV型和CTX-M型,VEB型和PER型没有被检出.CTX-M型、TEM型和SHV型阳性率分别为92.1%(35/38)、84.2%(32/38)、76.3%(29/38).整合酶基因阳性率为94.7%(36/38).经测序,所有TEM型均为TEM-1广谱β内酰酶.29株SHV型阳性的PCR产物经测序证实,SHV-12有19株,SHV-11有4株,SHV-2有3株,SHV-28有2株及SHV-1有1株.35株CTX-M型中,CTX-M-14有22株,CTX-M-15有13株.同时检测到3种基因的有22株(57.9%),同时检测到2种基因的有14株(36.8%).整合酶基因PCR产物经测序为Ⅰ类整合子.结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及多重耐药性严重,Ⅰ类整合子是其多重耐药和耐药性传播的主要原因;CTX-M-14及SHV-12为肺炎克雷伯菌产ESBLs的主要基因型.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的调查产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药情况,并与非产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性进行对比。方法抽取该院2009年1月-2012年9月肺炎克雷伯菌耐药试验数据,进行抗生素耐药性统计分析。结果从2009年1月-2011年12月肺炎克雷伯菌总的ESBLs发生率为25.0%、34.3%、56.8%,呈上升趋势,而2012年1-9月,ESBLs发生率为31.0%。对13种常用抗菌药物的耐药率,除亚胺培南、美罗培南外,产ESBLs的肺炎克雷伯菌均显著高于非产ESBLs的肺炎克雷伯菌;产ESBLs肺炎克雷伯菌对青霉素类、第3代头孢菌素类、单环β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类等常用抗菌药物均不同程度的耐药,且表现为多重耐药。结论治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌引起的感染应选用亚胺培南、含β-内酰胺酶抑制剂复合物、青霉素类及其药敏试验显示敏感的药物。     

肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因研究

目的了解20株对亚胺培南敏感的肺炎克雷伯菌(Kpn)β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶、氯己定-磺胺耐药基因存在状况。方法对20株Kpn菌进行了16种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因、氯己定-磺胺耐药基因检测。结果20株Kpn菌检出blaTEM、blaSHV、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、blaOXA-1群和blaDHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为85%、25%、25%、20%、25%和70%。20株中有19株至少检出1种β-内酰胺酶基因,最多同时检出6种β-内酰胺酶基因;有19株检出氨基糖苷类修饰酶基因(95%);18株检出qacE△1-sul1基因(90%)。结论该20株Kpn菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶密切相关。     

头孢他啶对大鼠产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯氏菌肺炎的治疗作用

目的　评价体外试验敏感的头孢他啶对大鼠产超广谱 β-内酰胺酶 ( ESBL s)的肺炎克雷伯氏菌肺炎的体内治疗效果。方法　选取临床分离的产 ESBL s的肺炎克雷伯氏菌 2株 ,体外试验对头孢噻肟耐药 ,对哌拉西林 /三唑巴坦敏感 ,对头孢他啶分别为 :第 1组敏感 ;第 2组耐药 ,建立 2组大鼠肺炎模型。每组随机分为 5个亚组 ,分别注射生理盐水及上述三种抗生素 ,治疗 96 h后评价治疗效果。结果　第 1组 :哌拉西林 /三唑巴坦亚组、头孢他啶亚组死亡率、肺组织匀浆活菌计数 ( lg CFU/ g) ( 10 .79± 2 .80、11.14± 3.18) ,明显低于头孢噻肟、对照亚组 ( 15 .97± 5 .5 2、15 .70± 5 .5 7) ( P<0 .0 5 )。第 2组 :哌拉西林 /三唑巴坦亚组死亡率、肺组织匀浆活菌计数 ( 10 .38± 2 .4 2 )明显低于对照、头孢噻肟亚组 ( 14 .16± 5 .5 8、15 .32± 4 .91) ( P<0 .0 5 )。头孢他啶亚组死亡率、肺组织匀浆活菌计数 ( 11.5 3± 2 .75 )与对照、头孢噻肟亚组无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论　体外试验敏感的头孢他啶治疗大鼠产 ESBL s的肺炎克雷伯氏菌肺炎 ,可以降低死亡率、减少肺组织匀浆活菌计数 ,与哌拉西林 /三唑巴坦作用相当     

产生超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性动态观察

目的 :分析本院 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 2年 6月间产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌耐药性的变化 ,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法 :采用K B纸片扩散法和ESBLs确证试验进行ESBLs的检测 ,数据输入WHONET5软件及SPSS10 .0软件进行统计分析。结果 :2 0 0 0年 1月至 2 0 0 2年 6月 ,本院所分离的 2 48株肺炎克雷伯菌中 ,产ESBLs的有 111株 ,占44 7% ;产ESBLs的肺炎克雷伯菌对青霉素类、头孢菌素类、单环 β内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、以及加 β 内酰胺酶抑制剂复合剂 (如 :氨苄西林 舒巴坦、阿莫西林 克拉维酸、替卡西林 克拉维酸等抗菌药物 )呈多重耐药 ;显著高于非产ESBLs的肺炎克雷伯菌 (P <0 0 0 1) ;但对亚胺培南高度敏感。结论 :本院产ESBLs的肺炎克雷伯菌检出率高 ,临床治疗中应严格掌握抗菌药物应用指征 ,并动态监测其耐药性变迁 ,防止ESBLs肺炎克雷伯菌的局部流行     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠艾希氏菌的耐药性

目的 了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检测及耐药性的情况，以利于对ESBLs细菌的监控和治疗。方法 应用VITEK-32全自动细菌鉴定分析系统药敏测试卡GNS-506对166株肺炎克雷伯菌和大肠艾希氏菌ESBLs进行鉴定，并检测确证ESBLs阳性菌株的耐药情况。结果 在76株肺炎克雷伯菌、90株大肠艾希氏菌中，ESBLs的检出率分别为39．5％、26．7％。药敏测试结果表明，产ESBLs菌对亚胺培南敏感率为100％，对喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类等临床常用抗生素均有不同程度耐药。结论 治疗ESBLs菌引起的感染，应用亚胺培南及其药敏试验显示敏感的有效药物。     

363株肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶情况及敏感分析

<正>超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是由质粒介导的,能水解头孢噻肟(CTX)、头孢他啶(CAZ)等三代头孢菌素和单环酰胺类抗生素的BLA,可被ALA抑制剂抑制,ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生,肺炎克雷伯菌等为代表菌种。如确认为ESBLs菌株,不管体外药敏结果如何,对所有三代头孢和氨曲南均应报告耐药,因临床治疗效果不佳,甚至波及四代头孢菌素[1]。近年来,肺炎克雷伯菌已成为医院内感染     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性研究

为了解我院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物的耐药情况，收集2005年1～12月住院患者标本中分离出的大肠埃希菌282株，肺炎克雷伯菌422株；以双纸片协同法检测ESBLs，KB纸片法测定11种抗菌药物的药敏性。结果表明，产ESBLs菌357株，非产ESBLs菌347株，ESBLs总检出率为50、71％（357／704）；其中产ESBLs大肠埃希菌146株，检出率为51．77％（146／282）；产ESBLs肺炎克雷伯杆菌211株，检出率为50．0％（211／422）。除产ESBLs大肠埃希菌对哌拉西林／他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦耐药率与非产ESBLs菌无差异外，产ESBLs细菌对其他抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs细菌（P〈0．0236-P〈0．005之间）。所有的菌对亚胺培南100％敏感。结论：产ESBLs菌对常用抗菌药物耐药率较高，碳青霉烯类是目前治疗产ESBLs菌严重感染的最佳药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及其耐药性。方法采用酶抑制剂增强纸片法检测,并对比统计分析产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药性。结果产ESBLs的肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌总检出率为28.3%;产ESBLs菌株对多种抗菌药物耐药性显著高于非产ESBLs的菌株(P<0.05),但对亚胺培南高度敏感。结论临床治疗中应严格掌握抗菌药物应用指征,防止产ESBLs肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌的局部流行。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯氏菌的耐药性及脉冲场电泳分型

摘要：目的研究临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(EsBLs)肺炎克雷伯氏菌的耐药表型及其同源性。方法利用E试验测定菌株的MIC，脉冲场电泳(PFGE)技术进行基因分型。结果大部分菌株属于多重耐药株，但均对亚胺培南敏感，PFGE分型可分为26型。结论该院存在多克隆株的小型传播，PFGE是一种可靠的基因分型方法。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性研究

目的：了解我院临床分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及耐药性情况，为指导临床用药提供依据。方法：对我院1999—2005年分离的854株大肠埃希菌、300株克雷伯菌用标准纸片扩散确证法检测其ESBLs产生率；采用K-B法进行药敏检测。结果：1999年我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为26．4％和21．9％，2005年的两者检出率分别增长为48．6％和47．7oA。除亚胺培南的耐药率为0％、产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星、呋喃妥因的耐药率分别为17．9％和6．2％外，2005年我院产ESBLs菌株对其他抗菌药物耐药率均达74．4％以上，且产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株。结论：医院应重视对产ESBLs菌株的检测，合理选用抗菌药物治疗感染。对于产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的治疗，亚胺培南应作为首选药物。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性现状,为制订临床治疗方案提供依据。方法将从临床标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的药物敏感试验结果应用Whonet5.3软件进行统计学分析;产ESBLs菌株采用双纸片协同试验测定并经NCCLS确证试验确认。结果7年间产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为38.64%和37.33%,2005年的检出率分别为48.65%和47.73%。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌除对亚胺培南、阿米卡星、呋喃妥因敏感率高外,对所监测的其他抗菌药物耐药现象严重,且产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株。结论医院应重视对产ESBLs菌株的检测,按照药物敏感试验结果合理选用抗菌药物治疗感染;碳青霉烯类抗生素治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是首选药物。     

新生儿医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌感染分离株耐药性及基因类型检测

目的 了解新生儿医院感染产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌分离株的耐药状况及β-内酰胺酶编码基因TEM、SHV、OXA、PER、GES、VEB、CTX型存在状况。方法 将我院2004年7月新生儿病房感染的14株肺炎克雷伯菌用全自动微生物鉴定和药敏分析配套卡进行抗生素敏感性检测和ESBLs检测，并采用聚合酶链反应及序列分析方法分析菌株内的超广谱β-内酰胺酶基因型。结果 14株产ESBLs的肺炎克雷伯菌药敏结果一致，氨苄西林、头孢曲松、头孢唑林、头孢他啶均耐药对阿莫西林／克拉维酸、哌拉西林／三唑巴坦也耐药，对亚胺培南敏感。均检出blacTX-M和blaTEM基因，未检出blasm,、扰noxA、blaPER、扰nGES和blaVEB基因。对blarm和blacTX-M基因扩增产物测序，经BLAST程序分析基因为TEM-1和CTX-M-3型。结论 本院感染流行的ESBLs肺炎克雷伯菌耐第三代头孢菌素和耐酶抑制剂，基因类型为TEM-1和CTX-M-3。新生儿属于ESBLs的高危人群，新生儿病房产超广谱β-内酰胺酶菌感染应引起各方关注。