自然周期体外受精结合未成熟卵母细胞体外成熟培养是治疗不孕的潜在方法

本文旨在描述在自然周期中,从主导卵泡中获取成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),同时对小卵泡中的未成熟卵母细胞进行体外成熟培养后行IV F,移植后患者获得妊娠并分娩活胎。病例报道:M cG ill大学皇家维多利亚医院生殖中心,3例接受不育治疗的正常卵巢或多囊卵巢患者,在自然月经周期中注射SC hCG(10000U)36h后取卵。吸出所有卵泡,对成熟卵母细胞立即进行IVF,而未成熟卵母细胞经体外成熟培养后行卵母细胞单精子显微注射(ICSI),然后进行移植胚胎。患者获得妊娠并分娩活胎。在自然周期IV F结合体外成熟培养(IV M)移植胚胎后,3例患者均获…     

核抑制剂(Roscovitine)对促排周期人未成熟卵母细胞体外成熟安全性的初步研究

目的 观察核抑制剂(Roscovitine)对人未成熟卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)安全性的影响.方法 获取促排周期的GV期未成熟卵随机分为两组,实验组(经二步法):未成熟卵母细胞先用含有200 vmol/LRoseovitine的培养液培养6 h,然后转入IVM成熟培养液培养24～36 h;对照组:直接用IVM成熟培养液培养24~36h.观察两组卵母细胞成熟情况并应用激光扫描共聚焦显微镜观察培养成熟后MⅡ期卵母细胞纺锤体和染色体的形态.结果 实验组共获未成熟卵母细胞61个,经体外成熟培养后50个卵成熟,其中39个卵可观察到纺锤体与染色体,纺锤体的形态异常者为15个,染色体异常者11个;对照组共获未成熟卵母细胞60个,经体外成熟培养后43个卵成熟,其中32个卵可观察到染色体与纺锤体,纺锤体形态异常者14个,染色体异常者11个.结论 Roscovitine能可逆性抑制体外培养的人卵母细胞的核成熟,但未对纺锤体及染色体形态产生不良影响.     

卵母细胞体外成熟与后继的延迟受精可使非整倍体胚胎增加

受精失败与出现不成熟的卵母细胞是体外受精(IV F)中的常见情况。挽救性的卵母细胞单精子显微(ICSI)注射在此方面可作为一种治疗手段。然而,本研究显示与对照(60.5%)相比,卵母细胞体外成熟与延迟的ICSI(79.7%)可使非整倍体胚胎增加。因此,当患者进行延迟的ICSI时应告知可能存在此种情况的风险。卵母细胞体外成熟与后继的延迟受精可使非整倍体胚胎增加@Emery B.R. @Wilcox A.L. @Aoki V.W.et @D.T. Carrell$Dr. Andrology and IVF Laboratories, Department of Urology, University of Utah School of Medicine, 6…     

男性染色体复杂平衡易位携带者助孕2例并文献复习

目的 探讨男性染色体复杂平衡易位(CCRs)携带者的适宜助孕手段。方法 2例男性CCRs携带者通过胚胎植入前染色体重排检测(PGT-SR)助孕,其中1例夫妇同时行携带者筛查。结果 2例CCRs携带者夫妇均获得可移植胚胎并生育健康子代。其中1例患者联合携带者筛查技术,移植1枚非携带型胚胎,确保生育携带正常核型的后代。2例携带者夫妇的胚胎整倍体率为8.82%(3/34)。结论 PGT-SR可有效帮助CCRs携带者筛选可移植胚胎。携带者筛查技术可进一步筛选非携带型整倍体胚胎,阻断亲代染色体异常向子代的传递。     

玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法保存人MⅠ期卵母细胞的效果比较

目的:探讨玻璃化冷冻与慢速程序冷冻法对人未成熟卵母细胞的存活及胚胎发育潜能的影响。方法:体外受精-胚胎移植中获得的251个MⅠ期卵母细胞随机分3组,第1组94个先玻璃化冷冻保存,第2组63个先慢速程序冷冻保存,两组冻融后的未成熟卵母细胞再进行IVM,用ICSI技术对成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养。第3组94个MⅠ期卵母细胞先进行IVM,再进行玻璃化冷冻保存,与第1组先玻璃化冷冻保存再IVM的顺序不同,冻融后同样用ICSI技术对获得的成熟卵母细胞完成授精,并进行体外胚胎培养。结果:玻璃化冻融组复苏存活率、体外成熟率、受精率、及卵裂率均高于慢速程序冻融组(P均<0.05);先玻璃化冷冻再IVM与先IVM再玻璃化冷冻的复苏存活率、体外成熟率、可用卵比率、受精率及卵裂率无统计学意义(P均>0.05)。结论:玻璃化冻融人未成熟卵母细胞能获得更好的冷冻保存效果;玻璃化冷冻与IVM的顺序不影响未成熟卵母细胞的利用。     

种植前人胚胎细胞荧光原位杂交检测染色体非整倍体

建立应用13/21染色体特异性探针荧光原位杂交技术(FISH)检测种植前人类胚胎13/21染色体非整倍体的方法。方法:应用FITC标记的13/21染色体着丝粒部位杂交的α卫星重复序列探针对27个未受精卵母细胞和36个多精受精胚胎的卵裂球进行原位杂交。结果:单倍体卵母细胞核呈现2个杂交信号,固定率80%,杂交效率67%;多精受精胚胎的卵裂球核呈现6个杂交信号,固定率72%,杂交效率65%。结论:应用荧光原位杂交技术在卵母细胞和胚胎细胞可检测13/21染色体非整倍体。     

时差成像系统在选择高发育潜能未成熟卵母细胞体外成熟受精胚胎中的应用

目的探讨时差成像系统（TLI）在选择高发育潜能未成熟卵母细胞体外成熟（IVM）受精胚胎中的应用价值。方法收集2016年2月至2019年5月于嘉兴市妇幼保健院接受体外受精-胚胎移植治疗患者的525枚未成熟卵母细胞进行IVM,同时收集周期中正常成熟卵细胞207枚。IVM后成熟卵母细胞及正常成熟卵母细胞均行卵细胞浆内单精子注射（ICSI）,受精后胚胎在TLI中观测培养。收集所有胚胎发育的时间参数,用四分位数法和logistic回归法分析前期收集的402枚未成熟卵母细胞IVM受精胚胎（IVM胚胎）的时间参数与囊胚形成的关系,得出TLI在选择高发育潜能IVM胚胎中的应用价值,并用后期收集的123枚未成熟卵母细胞形成的IVM胚胎时间参数与囊胚形成率的关系进行验证。结果IVM胚胎D3可利用胚胎率、D3优胚率、囊胚形成率均低于正常卵母细胞受精胚胎（正常胚胎）（均P＜0.05）,非二倍性卵裂率大于正常胚胎（P＜0.05）。经四分位数法和logistic回归分析发现IVM胚胎发育至5细胞的时间（t5）在时间段(37.50~52.68)h内对形成囊胚最有预测价值。用后期收集的123枚未成熟卵母细胞形成的IVM胚胎时间参数与囊胚形成率的关系验证t5的预测价值,发现t5优势时间段内囊胚形成率为60.0%,显著高于非t5优势时间段内的囊胚形成率（14.3%,P＜0.05）。结论TLI可以作为选择高发育潜能IVM胚胎的有效工具。     

补救卵母细胞单精子显微注射和植入前遗传学诊断联合获得妊娠

目的:报道1例补救卵母细胞单精子显微注射(ICSI)和植入前遗传学诊断(PGD)后1个受精卵的移植而出生的婴儿。设计:病例报道。机构:体外受精(IVF)中心。患者:1例42岁妇女,G2P0020,不明原因不孕。干预:补救ICSI继而PGD。主要观察指标:妊娠。结果:对7个未受精卵细胞进行补救ICSI,获得3个受精卵。PGD分析显示1个正常的受精卵。移植此受精卵,成功妊娠并分娩。结论:补救ICSI联合PGD成功妊娠。补救卵母细胞单精子显微注射和植入前遗传学诊断联合获得妊娠@DeUgarte C.M.$Henry Ford Hospital, Detroit, MI, United States Dr. @…     

胚胎植入前非整倍体筛查的研究进展

胚胎植入前非整倍体筛查是选择染色体数目正常的胚胎用于体外受精/单精子卵胞浆内显微注射周期的移植,目前采用荧光原位杂交方法可以分析5条或9条染色体。本文主要概述胚胎植入前非整倍体筛查在高龄待孕妇女、早期不明原因习惯性流产、反复植入失败者中应用,在这些情况中发生非整倍体的概率较高,正常胚胎鉴定和非整倍体的排除有利于提高体外受精-胚胎移植的胚胎植入率和妊娠率。其外简明介绍其他的新方法在胚胎植入前非整倍体筛查中研究进展。     

卵母细胞体外成熟评价标准的改良研究

目的探讨改良式人未成熟卵母细胞评分标准的可行性和颗粒细胞指标的合理性及其对卵子发育潜能的影响。方法体外培养卵丘-卵母细胞复合体,按改良式人未成熟卵母细胞评分标准,将未成熟卵母细胞分为优质卵和非优质卵,对成熟卵母细胞进行受精,并对胚胎进行评价;用琼脂糖凝胶电泳检测两类卵的颗粒细胞凋亡。结果优质卵的成熟率、卵裂率和优质胚胎率都优于非优质卵,优质卵成熟数和优质胚胎数与非优质卵比较差异有统计学意义（P<0.01）;非优质卵其卵丘细胞DNA凝胶电泳后形成明显DNA 梯带,凋亡程度高于优质卵的卵丘细胞。 结论改良式人未成熟卵母细胞评分标准在临床上具有可行性。     

胚胎植入前遗传学诊断在平衡易位携带者中的作用

目的:胚胎植入前遗传学诊断目前已是一项确定的技术,为那些可能将严重遗传病传递给后代的高风险患者提供了产前诊断的机会。胚胎植入前遗传学诊断已经用于诊断那些可能生育单基因遗传性疾病或X连锁染色体疾病患儿的高风险夫妇,筛查与年龄增长相关的非整倍体疾病及夫妇自身为携带平衡染色体重排的患者。目的:对经胚胎植入前遗传学诊断确定的病例做一概述,双亲为平衡易位患者,经胚胎植入前遗传学诊断筛查易位体及非整倍体后,确定适合移植的胚胎数目。设计:本文为回顾性研究,报道某一中心6对夫妇通过荧光原位杂交技术进行胚胎植入前遗传学诊断…     

自然流产绒毛染色体非整倍体探讨

目的:探讨自然流产绒毛染色体中非整倍体对流产的影响?方法:对100例自然流产绒毛用常规染色体核型分析联合多重连接依赖的探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)分析?结果:核型分析成功84例,异常核型48例,其中非整倍体34例;16例无核型的绒毛用MLPA分析,异常8例,非整倍体4例;非整倍体占异常核型的67.9%?结论:染色体发生非整倍体突变是胚胎早期自然流产的重要原因;常规染色体核型分析还是诊断非整倍体的主要方法,应用MLPA方法能对染色体核型分析失败和核型正常的标本作进一步检测 ?     

着床前遗传学筛查周期中不同受精来源囊胚发育速度与染色体整倍性分析

目的为了提高着床前遗传学筛查(PGT)周期患者体外授精-胚胎移植(IVF-ET)成功率和胚胎利用率,通过单核苷酸多态性-微阵列比较基因组杂交技术(array-SNP)分析PGT患者的2PN、0PN和1PN来源的胚胎染色体的整倍性,从而优化移植策略。方法回顾性分析2013—2018年在我中心行PGT助孕,其2PN、1PN和0PN来源的胚胎均有囊胚形成的患者,比较不同发育速度的2PN、0PN和1PN来源的活检囊胚的染色体整倍性。结果比较第5天不同受精来源的活检囊胚染色体整倍体率差异无统计学意义(P>0.05);第6天囊胚中,0PN来源的活检囊胚染色体整倍体率要低于2PN和1PN来源的活检囊胚整倍体率,差异有统计学意义(P<0.05);第5天和第6天的囊胚相比,不同受精来源的囊胚染色体整倍体率差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于PGT周期患者,0PN以及1PN来源的胚胎培养后形成囊胚,通过芯片技术检测其染色体正常的囊胚仍占一定比例,可作为移植胚胎。不同发育速度的囊胚,其染色体的整倍体率差异并无统计学意义。     

来源于体外成熟卵母细胞的胚胎的多核化及卵裂情况

对于多囊卵巢综合征(PCOS)患者,采用人绒毛膜促性腺激素(hCG)预处理后所得到的最佳胚胎卵裂球的数量与来源于体外成熟卵母细胞的碎片率的比例,同采用卵泡刺激素(FSH)预处理后的来源于体外成熟卵母细胞的最佳胚胎的比例相比,前者(43.3%)高于后者(11.1%)。采用hCG预处理后所得到来源于体外成熟卵母细胞的胚胎显示出较低的多核卵裂球的发生率。只对hCG预处理病例的妊娠情况进行了记录。来源于体外成熟卵母细胞的胚胎的多核化及卵裂情况@Vlaisavljevi V. @i ek-Sajko M.$Department of Reproductive Medicine and Gynecologic En…     

无创胚胎染色体筛查在染色体非整倍体检测中的应用效果

目的探讨无创胚胎染色体筛查技术(NICS)在染色体非整倍体检测中的应用效果。方法收集2017年5月至2019年5月在安徽省妇幼保健院生殖中心拟行体外受精-胚胎移植的364例患者的囊胚培养液,并行NICS筛查。对单囊胚移植且临床确认妊娠的46例患者,根据其妊娠结局不同行不同染色体检查方法:对12例流产的患者行流产组织染色体检查,并以该检查结果为金标准,计算NICS的灵敏度和特异度;对继续妊娠的34例患者行外周血无创产前遗传学筛查(NIPS),比较NICS结果与NIPS筛查结果的差异。结果 12例流产的患者样本中,流产组织染色体检查与NICS检查为染色体非整倍体者均为3例,NICS筛查的灵敏度为100%;在流产组织染色体检查为整倍体的9例样本中,对应的NICS检出2例为非整倍体,其特异度为77.78%,两种筛查方法的一致性分析Kappa值为0.64。继续妊娠的34例患者样本中,NIPS筛查均未检出13、18、21号染色体为非整倍体胚胎,NICS对这3条染色体的筛查结果与NIPS一致。结论 NICS筛查染色体非整倍体有较好的灵敏度,但假阳性率偏高,需进一步技术优化以提高特异性。     

促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养中的应用

目的 评价卵泡刺激素和人绒毛膜促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养过程中的应用价值。方法 收集控制性超促排卵周期行单精子显微注射(ICSI)过程中得到的未成熟卵母细胞(MⅠ期和GV期), 随机分为加促性腺激素培养组和不加促性腺激素培养组, 培养24~28 h后成熟卵母细胞进行ICSI授精, 并观察胚胎发育情况, 记录成熟率、受精率、卵裂率和优胚率。结果 对于MⅠ期卵母细胞, 是否使用促性腺激素不影响其24 h成熟率、受精率、分裂率和优胚率(P>0.05)。对于GV期卵母细胞, 培养液中加入促性腺激素能提高优质胚胎率(31.3% vs 4.2%, P<0.05), 但两组的成熟率、受精率和卵裂率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 控制性超促排卵中获得的未成熟卵母细胞进一步体外培养, 无论是否添加促性腺激素都可自然成熟, 在GV期卵母细胞的体外培养过程加入促性腺激素可获得更高的优胚率。     

植入前基因诊断(PGD):来自巴黎的报道(法)

目的:对本中心2000—2004年行植入前基因诊断(PGD)的胚胎转移周期结果进行报道。材料与方法:在此期间共171对夫妇加入PGD项目。收集的卵子通过卵母细胞单精子显微注射(ICSI)受精。对所获胚胎在发育的第3天进行活检及基因分析,第4天进行胚胎转移。结果:通过416个刺激周期,共取卵     

人体外受精失败的卵母细胞及发育异常的受精卵和胚胎染色体观察

本文对体外受精失败以及虽已受精,但无卵裂的人卵母细胞与卵裂不规则并有细胞质碎片的胚胎进行染色体研究。发现其中既有正常的二倍体胚胎,同时也发现了多种染色体异常,其中包括多核卵裂球、多倍体、单倍体、嵌合体、非整倍体等异常。     

基于Array-CGH技术的胚胎植入前遗传学诊断在XYY综合征患者中的应用

目的 评估基于Array-CGH技术的植入前遗传学诊断(PGD) 对超雄综合征(XYY综合征)患者胚胎染色体进行分析的应用效果.方法 研究选取行PGD助孕的5例XYY患者及15例染色体易位患者,对两组的女方年龄、精子浓度、前向运动精子比例、获卵数、第二次减数分裂中期(MII)卵子数、优质胚胎数、染色体异常率进行比较.结果 XYY组和染色体易位组在女方年龄、精子浓度、PR、获卵数、MII卵子数、优质胚胎数均差异无统计学意义,PGD检测结果中,两组的染色体异常率差异无统计学意义.XYY组活检21枚胚胎,其中10枚胚胎为常染色体异常,1枚为性染色体异常.非整倍体率为52.38%,常染色体异常为47.62%,性染色异常为4.80%.结论 XYY综合征患者行体外受精时有和男性染色体易位患者类似的胚胎染色体异常率,Array-CGH可同时检测XYY综合征患者全部染色体情况,避免大量异常胚胎植入女方体内,有利于降低子代出生缺陷,值得临床应用.     

人体外受精失败的卵母细胞及发育异常的受精卵和胚胎染色体观察

本文对体外受精失败以及虽已受精，但无卵裂的人卵母细胞与卵裂不规则并有细胞质碎片的胚胎进行染色体研究。发现其中既有正常的二倍体胚胎，同时也发现了多种染色体异常，其中包括多核卵裂球、多倍体、单倍体、嵌合体、非整倍体等异常。