载脂蛋白E基因多态性PCR—RFLP方法的建立

目的；建立一种省时，省力的人载脂蛋白Ｅ基因多态性的检测方法。方法；采用聚合酶链一性片段长度多态性方法，先扩增出ａｐｏＥ基因第４外显子内的２７２ｂｐ片段，继以限制性内切酶ＣｆｏⅠ酶解消化，８％聚丙烯酰胺凝胶电泳，最后银染显带判定基因型。结果：电泳，染色结果清晰特异，分辨率高。结论：该方法快速，准确，适于临床实验室中广泛开展。     

人载脂蛋白E的PCR－RFLP基因分型

采用两对引物进行套式聚合酶链式反应（ＰＣＲ），扩增人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因第４号外显子的２３３ｂｐ特异性片段。用限制性核酸内切酶ｎｈａｌ酶解ＰＣＲ产物。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ基因分型。此方法简便、灵敏，结果可靠。分析了１００名正常人ａｐｏＥ的基因型，其等位基因ｅ２，ｅ３，ｅ４频率分别为０．０５，０．８８和０．０７。     

人载脂蛋白E的PCR—RFLP基因分型

采用两对引物进行套式聚合酶链式反应（ＰＣＲ），扩增人载脂蛋白Ｅ（ａｏｐＥ）基因第４号外显子的２３３ｂｐ特异性片段。用限制性核酸内切酶Ｈｈａｌ酶解ＰＣＲ产物。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ基因分型，此方法简便，灵敏，结果可靠，分析了１００名正常人ａｐｏＥ的基因型，其等位基因ε２，ε３，ε４频率分别为０．０５，０．８８和０．０７。     

聚合酶链反应——限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E基？…

目的：建立聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＥＬＰ）分析结合ＤＮＡ直接银染技术检测载脂蛋白Ｅ基因多态性。方法：选择江苏地区汉族健康人１６８例及冠心病６３例，ＰＣＲ扩增ＡｐｏＥ基因第４外显子包含编码第１１２位和第１５８位氨基酸残基的基因序列，ｃｆｏＩ限制性内切酶酶切后电泳，银染色后分析ＡｐｏＥ基因型。结果：汉族健康人群及冠心病人群ＡｐｏＥ基因型频率分别为ε２／２０．６％，０；ε２／３１１     

吉林地区正常汉族人群载脂蛋白E基因多态性分布状态的研究

目的：研究载脂蛋白（Ａｐｏ）Ｅ基因多态性在吉林地区正常汉族人群中的分布状态。方法：应用聚合酶链反应－－限制性片段和蔗多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法先扩增出ＡｐｏＥ基因第４外显子内的２２７ｂｐ片段，继以限制性切酶Ｃｆｏｌ酶解消化，８％聚丙烯酰胺凝胶电泳，最后银染显带判定基因型，度计算等位基因频率。结果；本实验共检测分析了２０６例吉林地区正常汉族人的ＡｐｏＥ基因型及等位基因频率。结果表明合子ε３／３基     

广西壮族健康人群载脂蛋白E表型分析

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因后，ＰＣＲ产物用限制性内切酶ＨｈａＩ酶解后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。共检测了１５８例广西壮族健康人群的ａｐｏＥ基因型，根据表型分布计算出等位基因频率分布，并与１２０例汉族健康人群对比。结果ＡｐｏＥ基因频率分布壮族为ε４０．０７９，ε３０．８１３，ε０．１０８，汉族为ε４０．０６３，ε３０．８３３，ε２０．１０４，两组人群ａｐｏＥ基因频率分布基本     

汉族人群载脂蛋白E基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病关系的研究

我们采用热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合限制性酶切分析建立了一种快速灵敏的载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型研究方法。应用此法，检测了９３例冠状动脉粥样硬化性心脏病（ＣＨＤ）患者与１１３例正常汉族人ａｐｏＥ基因型。分析ａｐｏＥ基因遗传变异是否与ＣＨＤ发生关...     

Hb Quong Sze（α125^Leu-Pro.CTG→CCG）的基因检测（附5例报告）

目的了解海南地区非缺失型HbH病的基因突变类型；方法基因扩增α基因片段，限制性内切酶酶解，酶解产物经琼脂凝胶电泳鉴定；结果5例均证实为非缺失型HbH病；结论海南地区的非缺失型HbH病可能以Hb Quong Sze为主。     

载脂蛋白E基因多态性与冠心病,脑血栓疾病的相关性探讨

目的：研究载脂蛋白（ａｐｏ）Ｅ基因与冠心病、脑血栓疾病间的相关程度。方法：应用聚合酶链－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法先扩增出ａｐｏＥ基因第４外显子内的２２７ｂｐ片段,继以限制性内切酶ＣｆｏⅠ酶解消化,８％聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后银染显带判定基因型,并计算等位基因频率。结果：该实验共检测了正常汉族１１３例、汉族５０例冠心病患者及４２例汉族脑血栓患者的ａｐｏＥ基因型及等位基因频率。结果表明脑血栓患者ａｐｏＥε４／３基因型和ε４等位基因频率显著高于正常对照（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。但ａｐｏＥ等位基因多态与冠心病间未发现关联。结论：该方法快速、准确、分辨率高。并认为ａｐｏＥ等位基因多态与脑血栓疾病间存在相关。     

聚合酶链反应检测载脂蛋白E表型及其临床应用的研究

用人工合成的寡核苷酸引物，进行聚合酶链反应，体外扩增合成载脂蛋白Ｅ基因的特异性ＤＮＡ片段，用此引物检测１０４例健康成成人和３５例冠心病人载脂蛋白Ｅ的表型，共检邮５种常见的ＡｐｏＥ表型，健康成人与ＣＨＤ患者的比较，ＣＨＤ患者的ＡｐｏＥ３／３型频率明显降低，而含Ｅ２或Ｅ４异构体的频度增加。     

用PCR-RFLP方法对ApoE基因进行分型

目的探索一种简便、经济而又准确的方法对人类载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因进行分型。方法从人血凝块中提取基因组ＤＮＡ，用聚合酶链反应扩增出ＡｐｏＥ基因片段，用限制性内切酶ＣｆｏⅠ消化，经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，使之分型。结果老年痴呆患者中Ｅ４等位基因的频率显著高于对照组，分别为３１．２５％、１０．７１％（Ｐ＜０．０５），ＯＲ值为３．６６，９５％，ＣＩ为１．５３～８．９１。结论本方法快速、准确、经济，特别适合于大样本人群的基因分型工作     

血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体基因多态位点1166在佳木斯正常群体中…

本文用ＰＣＲ反应，限制性内切酶酶切和电泳分型方法，检测了血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体基因多态位点在佳木斯正常人群中的分布。结果表明在佳木斯正常人群中Ａ＾１１６６基因频率为０．９７，Ｃ＾１１６６的基因频率为０．３３。     

载脂蛋白E基因多态性与冠心病的关系分析

目的：研究载脂蛋白E（ApoE)基因多态性与冠心病的关系。方法：选择63例冠心病患者,PCR扩增ApoE基因第4外显子包含编码第112位和第158位氨基酸残基的基因序列,cfoI限制性内切酶酶切后电泳,银染色后分析ApoE基因型。并与年龄、性别相匹配的90例正常对照组比较各基因型及等位基因频率分布。结果：冠心病组E4等位基因频率（12．70％）明显高于对照组（5．55％）（P＜0．05）。结论：E4等位基因可能是冠心病的遗传易患因子。     

冠心病患者载脂蛋白E增强子基因多态性及其与血清脂质的关系

目的 研究载脂蛋白Ｅ内含子１内增强子元件（ＩＥ１）基因多态性与人类冠心病（ＣＨＤ）及其血脂水平的关系。方法 采用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态方法,分析了１０８例健康人及８１例冠心病患者的ＩＥ１基因型。结果 ＣＨＤ组ａｐｏＥ ＩＥ１ Ｇ／Ｇ基因型频率（０．６０５０和Ｇ等位基因频率（０．７６５）分别显著高于对照组（０．３９８,０．６４４;Ｐ〈０．０５）;Ｇ／Ｇ基因型者血清总胆固醇高于Ｃ／Ｃ基因型     

载脂蛋白E基因多态性与早发冠心病遗传关系研究

目的探讨载脂蛋白E（apoE）基因多态性与早发冠心病（CHD）的关系。方法应用聚合酶链-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法先扩增出apoE基因第4外显子内的227bp片段，继以限制性内切酶CfoI酶解消化，8％聚丙烯酰胺凝胶电泳，最后银染显带判定基因型，并计算等住基因频率。共检测了52例早发冠心病患者和110例正常对照者的apoE基因型及等位基因频率。结果早发冠心病患者apoEε4／3基因型和ε4等位基因频率显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论apoE基因多态性与早发冠心病的发生有关。该检测方法快速、准确、分辨率高。     

丁基胆碱酯酶基因、载脂蛋白E基因与阿尔茨海默病的相关性

目的：探讨中国汉族人载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因、丁基胆碱酶基因（ＢＣＨＥ）基因多态性与阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ）的相关情况。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法,在３８例患者和４０例正常人中观察ＡｐｏＥ和ＢＣＨＥ基因多态性的分布,进行关联分析。结果：ＡＤ患者与ＡｐｏＥ基因的等位基因ε４正关联,ＢＣＨＥ基因多态性与ＡＤ无关联。结论：在中国人群中,ＡｐｏＥε４是ＡＤ发病的风     

载脂蛋白E基因多态性与冠心病的相关性

应用聚合酶链-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法先扩增出载脂蛋白（apo E）基因第4外显子内的292bp片段,继以限制性内切酶CfoI酶解消化,8％聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后银染显带判定基因型,并计算等位基因频率,共检测研究了正常汉族113例及45例汉族冠心病患者的Apo E基因型及等位基因频率。结果表明apo E基因多态与冠心病之间未发现关联,不支持apo E等位基因多态与冠心病之间的正相关性。     

聚合酶链反应检测载脂蛋白E表型及其临床应用的研究

用人工合成的寡核苷酸引物，进行聚合酶链反应（ＰＣＲ），体外扩增合成载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因的特异性ＤＮＡ片段，用此引物检测１０４例健康成人和３５例冠心病人（ＣＨＤ）载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）的表型，共检出５种常见的ＡｐｏＥ表型，健康成人与ＣＨＤ患者比较，ＣＨＤ患者的ＡｐｏＥ３／３型频率明显降低，而含Ｅ２或Ｅ４异构体的频率增加．等位基因频率分布，ＣＨＤ患考与健康成人比较，其ε明显减少，而ε２和ε４有升高趋势，故对人群进行ＡｐｏＥ表型普查，确定不同ＡｐｏＥ表型个体，并寻找其与脂类代谢之间的关系，在动脉粥样硬化（ＡＳ）和ＣＨＤ的防治中有重要意义．     

先天性骨-肾畸型综合征小鼠C57BL/6·KM-1d同源导入近交系的生化基因位点检测

利用经典遗传学的杂文－互交方法将昆明（ＫＭ）小鼠携带的先天性骨─肾畸形综合征致病基因１ｄ导入遗传背景已知的Ｃ５７ＢＬ／６近交品系小鼠中，建立Ｃ５７ＢＬ／６－１ｄ同源导入近交系。本实验随机挑选第六、七循环Ｃ５７ＢＬ／６－１ｄ动物共１２只，采用蛋白质和同工酶电泳方法对位于共九对染色体上的１４个生化标记基因位点进行检测，结果表明，第六循环的Ｃ５７ＢＬ／ｅ－１ｄ在Ｅｓ－１和ＧＰｄ－１位点的等位基因为杂合型，至第七循环，Ｃ５７ＢＬ／６－１ｄ动物的１４个位点全部为纯合子，与Ｃ５７ＢＬ／６基因型一致。     

含HSV—tk基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建

为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达，以达到靶向基因治疗的目的，首先构建以ＣＥＡ基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。将目的基因片段ＨＳＶ－ｔｋ定向克隆入ｐＵＣ１１８质粒载体中，以相应的内切酶取出原酶切片段后，与来自ｐＣＥＡ４２４／２ＣＡＴ质粒的ＣＥＡ５‘Ｌ志录调控充列相连接，克隆入逆转录病毒载体中。