高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升…

应用＾４５Ｃａ＾２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ＾２＋内流还是胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％，但对Ａ２３１８７引起的胞内（Ｃａ＾２＋）升高无显著抑制作用。结果表明，海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流的Ｃａ＾     

多巴胺对大鼠海马和新纹状体脑片Ca^2＋／CaM PKⅡ活性的影响

目的 研究多巴胺（ＤＡ）对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响。方法 采用大鼠海马、新纹状体脑片体外培养模型，以＾３２Ｐ掺入法测定Ｃａ＾２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性。结果（１）单纯外源性ＤＡ引起Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性显著下降；海马、新纹状体脑片引起最大抑制作用的ＤＡ浓度分别是５００、１０μｍｏｌ／Ｌ。（２）酶活性随ＤＡ作用时间的延长逐渐下降；海马脑片１００μｍｏｌ／Ｌ ＤＡ作用２０ｍｉｎ酶活性方     

胞内Ca^2＋,Na^＋和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用

目的;研究Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法：分别用Ｃａ＾２＋和Ｎａ＾＋敏感的染料Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＳＢＦＩ／ＡＭ测定胞内Ｃａ＾２＋和Ｂａ＾＋浓度「（Ｃａ＾２＋）ｉ,（Ｎａ＾＋）ｉ」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的含量。结果：（１）在ＮＭＤＡ预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ｃａ＾２＋反应高峰,两者无显著性差异。而后在ＮＭ     

异搏停对小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca—F／25／CL—16A3内某些钙稳…

Ｃａ＾２＋与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文报道了钙拮抗剂异搏停作用Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞后胞内某些钙稳态指标的改变。结果表明，用药后细胞有分化现象且生长速度减慢，同时胞液Ｃａ＾２＋浓度和微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性明显降低，而线粒体和微粒体贮钙水平显著升高，细胞核钙和细胞总钙明显下降。     

1,6—二磷酸果糖对心肌细胞胞质游离Ca^2＋和pH的影响

考察外源性的１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和ｐＨ值的影响，用荧光探针（Ｆｕｒａ－２，ＢＣＥＣＦ）技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度和ｐＨ值，并观察其在缺氧／复氧条件下的变化，结果：在缺氧／复氧过程中，胞质游离Ｃａ＾２＋胞质游离Ｃａ＾２＋浓度缓慢升高，从基础值１３０±２９．５ｎｍｏｌ／Ｌ上升至７４２±１５４ｎｍｏｌ／Ｌ，胞质ｐＨ值则从７．１２±０．０８降至６     

胃肠外营养与地塞米松协同调节肺癌细胞周期的初步探讨

采用胃肠外营养（ＰＮ）、地塞米松（ＤＭ）及ＰＮ＋ＤＭ对３６只人肺腺癌裸鼠模型ＬＡＸ－８３肿瘤细胞中中期细胞百分率（Ｓ％）的影响，ＰＮ组予１２．５４ｋＪ／ｋｇ＾－１．ｄ＾－１＋氮量０．２ｇ／ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，ＤＭ组予２０μｇ／ｄ，对照组予生理盐水，分２次早晚腹腔注射，用ＦＣＭ测定Ｓ％，结果，２４ｈ，ＰＮ＋ＤＭ组的Ｓ％增加最大，显著高于对照组，提示ＰＮ＋ＤＭ的联合作用。２４ｈ后对Ｓ％增加有协同作用     

蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度变化，蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ＾２＋浓度增加，悬液中加入ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ＾２＋继续增加，维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板Ｃａ＾２＋增加，但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ＾２＋的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ＾２＋的释放和细胞外Ｃａ＾２＋进入细胞内。     

血小板衍生生长因子刺激鼠成骨细胞内Ca^2＋浓度变化的实？…

观察血小板衍生长因子等生长因子对鼠成骨细胞内Ｃａ＾＋浓度变化的影响。方法酶消化法体外分离培养胎鼠成骨细胞,应用ＡＣＡＳ检测成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的变化。结果ＰＤＧＦ可促进成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的瞬时增加;ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ＴＧＦ－β联合应用对成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度升高有协同作用;ＡＣＡＳ能准确测量胞内Ｃａ＾２＋浓度的动态变化,结论ＰＤＧＦ可促进成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度的增加,且与ＢＭＰ,ＴＧＦ－     

神经元缺血坏死与细胞外液中不同Ca^＋浓度的关系

目的 探讨缺血时细胞外不同Ｃａ＾２＋浓度对神经细胞坏死程度的影响。方法 使用体外培养１２－１４天大鼠大脑皮神经细胞,随机分为正常对照组（８例）;单纯缺血组（８例）;较高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）。检测各组神经细胞内总钙（ＴＣＡ＾２＋）,游离钙（Ｃａ＾２＋ｉ）及细胞外液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）浓度变化。结果 单纯缺血组,较高Ｃａ＾２＋浓度组,高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液中ＬＤＨ均高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,同时高Ｃａ＾２＋浓度组,较高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液ＬＤＨ浓度均高于缺血组。结论 脑缺血时,随着细胞外液中Ｃａ＾２＋浓度增设,神经细胞内钙沉积增加,从而加速神经细胞死亡。     

黄连素片对钙离子通道的拮抗作用

本研究以药理学的方法检测了黄连素片对Ｃａ＾２＋通道的拮抗作用。结果表明黄连素片的水溶液能明显抑制Ｃａ＾２＋的内流，拮抗Ｌ型钙通道促进剂Ｂａｙ ｋ８６４４对钙通道的激活，从而降低ＳＤ大鼠胸主动脉的收缩性，４０μｇ／ｍｌ浓度的黄连素片对Ｃａ＾２＋通道的抑制作用与１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ浓度的尼群地平相似。同时用Ｂａｙ ｋ ８６４４使ＳＤ大鼠胸主动脉收缩后，黄连素片能以剂量依赖方式引发收缩动脉的自发性舒张。     

粉防己碱抑制心肌细胞[Ca^2＋]i的瞬间变化

用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ做荧光指示剂，测量粉防己碱对电刺激诱导的〔Ｃａ＾２＋〕ｉ瞬间变化的作用。粉防己碱３－１００μＭ浓度和时间依赖性地抑制电刺激诱导〔Ｃａ＾２＋〕ｉ的瞬间变化幅度，而没有影响静息〔Ｃａ＾２＋〕ｉ水平。该浓度的粉防己碱抑制ＫＣｌ除极化所致的细胞〔Ｃａ＾２＋〕ｉ增加。高浓度的粉防己碱（６０￣１００μＭ）明显延长〔Ｃａ＾２＋〕ｉ衰减的时间，也减少Ｃａｆｆｅｉｎｅ诱导〔Ｃａ＾２＋〕ｉ瞬间变化     

1，6－二磷酸果糖对心肌细胞胞质游离Ca~（2＋）和pH的影响

考察外源性的１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度和ｐＨ值的影响。用荧光探针（Ｆｕｒａ－２，ＢＣＥＣＦ）技术同时测定成年大鼠心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度和ｐＨ值，并观察其在缺氧／复氧条件下的变化。结果：在缺氧／复氧过程中，胞质游离Ｃａ２＋浓度缓慢升高，从基础值１３０±２９．５ｎｍｏｌ／Ｌ１升至７４２±１５４ｎｍｏｌ／Ｌ，胞质ｐＨ值则从７．１２±０．０８降至６．７１±０．１３。在含有５ｍｍｏｌ／ＬＦＤＰ的细胞悬液中，则胞质游离Ｃａ２＋上升幅度明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），在复氧结束时的最高值为５３８±１９３ｎｍｏｌ／Ｌ，但胞质ｐＨ值的变化与对照组比较无显著差别。结论：ＦＤＰ可以减轻由缺氧／复氧所造成的心肌细胞内游离Ｃａ２＋浓度增高的程度，而对胞质ｐＨ值的变化无明显影响。     

西洋参茎叶在醇组皂甙对离体工作心脏作用的初探

目的：探讨西洋参茎叶三醇组皂甙（ＰＱＴＳ）对大鼠离体工作心脏血流动力学的影响及其作用机理。方法：制备大鼠离本工作心脏，观察三种剂量（３０，１００和２００ｍｇ／Ｌ）ＰＱＴＳ的作用。提高细胞外液Ｃａ＾２＋浓度观察Ｃａ＾２＋对１００ｍｇ／ＬＰＱＴＳ作用的影响，另外向灌流液中加入异丙肾上腺素，观察Ｉｓｏｐ对１００ｍｇ／ＬＰＱＴＳ作用的影响。结果：ＰＱＴＳ具有负性脱力和负性频率作用，并呈现明显的量效关系。１     

降钙素基因相关肽对人主动脉平滑肌增殖的影响

以人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为模型，用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量测定法观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对细胞增殖的影响，并对细胞内Ｃａ＾２＋浓度进行了测定，结果表明，ＣＧＲＰ对人主动脉ＳＭＣ有明显抑制作用，呈浓度依赖性，最佳浓度为１０ｎｍｏｌ／Ｌ，抑制率达４７．４４％，胞浆内游离Ｃａ＾２＋浓度明显降低，提示ＣＧＲＰ降低细胞内Ｃａ＾２＋浓度可能是其抑制ＳＭＣ增殖的作用机制之一。     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升高的抑制作用

应用４５Ｃａ２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０、１００μｍｏｌ·Ｌ－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ２＋内流还是胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％；但对Ａ２３１８７引起的胞内［Ｃａ２＋］ｉ升高无显著抑制作用。结果表明：海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流和［Ｃａ２＋］ｉ的升高。     

白介素1对鼠甲状腺细胞钙离子的作用

目的：利用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）观察ＩＬ－１β及ＴＳＨ对鼠甲状腺ＦＲＴＬ－５细胞内Ｃａ２＋的影响，以进一步了解ＩＬ－１β对甲状腺细胞的作用及机制。方法：将待测ＦＲＴＬ－５细胞以Ｆｌｕｏ－３负载，以ＬＳＣＭ扫描测定细胞内Ｃａ２＋，分别加入不同浓度的ＴＳＨ或ＩＬ－１，观察细胞内Ｃａ２＋变化。结果：（１）ＴＳＨ可使细胞内Ｃａ２＋的水平上升，与ＴＳＨ浓度有关。（２）ＩＬ－１β可降低ＦＲＴＬ－５细胞内基础Ｃａ２＋和ＴＳＨ刺激的细胞内Ｃａ２＋的水平。结论：ＴＳＨ对甲状腺细胞磷酸肌醇／钙离子系统有刺激作用，Ｃａ２＋作为第二信使可介导ＴＳＨ的效应。Ｉ－１β可以通过抑制甲状腺细胞磷酸肌醇／钙离子系统而发挥其抑制效应     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca^2＋—Mg^2＋）…

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－Ａｒｐ酶的影响。采用改良的Ｈａｎａｈａｍ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ＾２＋浓度呈正相关，说明（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾     

LPS,PLA2及氧自由基对线粒体跨膜质子转运和H^＋—ATPase的 …

目的：研究细菌内毒素（ＬＰＳ）、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及自由基对质子跨膜转运及Ｈ＾２＋－ＡＴＰ酶的影响。方法：采用正常大鼠，制备线粒体、亚线粒体（ＳＭＰ），用ＳＭＰ与ＬＰＳ（１００μｇ／ｍｌ）、ＰＬＡ２（１０ｕ／ｍｌ）、ＦｅＳＯ４（ＶｉｔＣ（３０／９００μｍｏｌ／Ｌ）分别共同温育（３０℃，３０ｍｉｎ），用ＡＣＭＡ荧光淬灭法测定质子跨膜转运能力。线闰体与不同浓度ＬＰＳ、ＰＬＡ２和ＦｅＳＯ４／ＶｉｔＣ     

谷氨酸对培养的皮质神经元Ca~(2 )/CaMPKⅡ活性的影响

目的研究谷氨酸（Ｇｌｕ）对皮质神经元的损伤及对Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响。方法５００μｍｏｌ／ＬＧｌｕ作用１０ｍｉｎ，测Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性。结果Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性和正常对照相比下降４６．３％，１００μｍｏｌ／Ｌ氯胺酮几乎完全保护该酶活性；ＬＤＨ活性在１ｈ时无明显变化，２４ｈ时明显升高。结论（１）Ｇｌｕ对皮质神经元损伤致Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性下降早于ＬＤＨ变化；（２）Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性下降主要由ＮＭＤＡ受体介导，与非ＮＭＤＡ受体无关。