锌指蛋白A20对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用研究

目的 探讨锌指蛋白A20对小鼠实验性内毒素性肝损伤的保护作用.方法 以内毒素血症小鼠为动物模型,采用尾静脉注射A20表达质粒的方法 ,观察A20转基因处理对内毒素血症小鼠肝组织内TNF-α、IL-1β水平以及肝脏病理损伤的保护.结果 A20组LPS注射24h后肝组织匀浆TNF-α表达水平为(923.2±11.97)pg/ml、IL-1β为(996.43±15.32)pg/ml,与LPS对照组比较,t检验显示P值均＜0.05,A20组与LPS对照组之间TNF-α和IL-1β水平差异有统计学意义.病理分析提示A20组24h后小鼠肝脏病理损伤明显较LPS对照组轻.结论 A20能够明显抑制内毒素血症小鼠肝组织的炎症反应,减轻肝组织炎症损伤.     

锌指蛋白与胃癌的关系初探

<正>锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,广泛分布于微生物和动植物中,在基因复制、表达调控、细胞分化、肿瘤发生发展等方面具有重要的作用。锌指蛋白种类多、数量大、功能广,与多种人类肿瘤相关。最近研究发现,锌指蛋白在胃癌的发生发展中发     

锌指蛋白A20突变体转基因小鼠脓毒症肺损伤的研究

目的了解锌指蛋白A20突变体(A20△)转基因小鼠脓毒症肺损伤的特点,探讨A20△对小鼠脓毒症肺损伤的影响。方法以A20△转基因脓毒症小鼠为动物模型(A20△转基因组),采用流式细胞仪测定肺组织单核巨噬细胞浸润,ELISA测定肺组织A20△、TNF-α、IL-1β水平,结合肺体指数和病理检查对炎症及其损伤程度进行鉴定。实验同时设LPS对照组(LPS组)和生理盐水对照组(对照组)。结果给予LPS后6、12、24h,A20△转基因组小鼠肺体指数较LPS组明显下降(P<0.01,P<0.05);A20△转基因组小鼠肺组织浸润单核/巨噬细胞数较LPS组明显下降(P<0.01)。给予LPS后3、6h,A20△转基因组小鼠肺组织炎症细胞因子TNF-α水平较LPS组明显下降(P<0.01);IL-1β水平也较LPS组明显下降(P<0.05,P<0.01);给予LPS后12、24h,TNF-α和IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05)。病理学观察表明A20△转基因组小鼠肺组织充血程度、肺泡积液及肺间质增厚程度均较LPS组轻。结论A20△转基因小鼠在一定程度上具有抵御LPS诱导性肺损伤的能力,其机制可能是通过抑制单核细胞...     

锌指蛋白217表达与卵巢癌组织顺铂化疗敏感性的关系

目的 探讨锌指蛋白217(ZNF217)的表达与卵巢癌组织顺铂化疗敏感性的关系.方法 采集新鲜卵巢癌手术标本60例.将卵巢癌组织制成癌细胞悬液,ATP法检测顺铂化疗敏感性;将卵巢癌组织制成石蜡切片,用于ZNF217蛋白免疫组织化学染色.结果 ATP法检测顺铂化疗敏感性显示,在60例卵巢癌组织中,对顺铂耐药、部分敏感和高度敏感的例数分别为14、29和17例.耐药、部分敏感和高度敏感的卵巢癌组织均有不同程度的ZNF217蛋白的表达,三者的差异有统计学意义(χ2=9.211,P=0.010),而且ZNF217蛋白表达与卵巢癌的顺铂化疗敏感性呈负相关(r=-0.394,P=0.002).结论 卵巢癌组织ZNF217蛋白高表达可能是导致其顺铂化疗耐药的原因之一.     

喉癌组织CD44蛋白表达与放疗敏感性的关系探讨

目的 :探讨喉癌组织 CD44蛋白表达与放疗敏感性的关系。方法 :采用免疫组化 SP法测定 62例喉癌组织标本中 CD44蛋白表达情况。结果 :62例喉癌放疗患者中 ,术后生存 3年、5年和 8年患者喉癌组织中 CD44蛋白阳性检出率及表达强度有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ,即随着生存年限的提高 ,CD44蛋白表达明显减少。结论 :喉癌组织中 CD44蛋白表达与放疗的敏感性有关 ,可作为喉癌放疗预后判定的一个可靠指标     

小脑锌指蛋白5与肝细胞癌临床病理特征及预后的关系

目的:探讨小脑锌指蛋白5(ZIC5)与肝细胞癌(简称肝癌)临床病理特征及预后的关系.方法:选取我院2010年1月至2013年1月手术切除的94例肝癌组织标本及与其配对的癌旁组织标本.随机选取其中6例标本用蛋白免疫印迹法检测组织中ZIC5的表达.用免疫组化染色法检测所有组织中ZIC5的表达,根据染色结果将患者分为高表达组...     

抗新型锌指蛋白ZBTB45单克隆抗体的制备与应用

目的制备新型锌指蛋白ZBTB45的单克隆抗体,建立该分子的体内外免疫学检测方法,为研究其生物学功能提供技术手段。方法制备小鼠ZBTB45的多表位抗原融合蛋白,免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测、多次有限稀释亚克隆建立分泌ZBTB45单克隆抗体的杂交瘤细胞株,从荷瘤小鼠的腹水中通过蛋白A柱纯化单克隆抗体,鉴定分析所制备抗体在免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学中的应用效果。结果成功制备了6株抗ZBTB45的特异性单克隆抗体,其中3E5、2G4、4D2和1D4可成功用于免疫印迹和免疫沉淀分析,3E5、6D8和8E3可用于免疫组织化学检测内源性ZBTB45,具有较好的敏感性、特异性。结论首次成功制备了抗ZBTB45单克隆抗体,可应用于体外和体内的免疫学检测,为深入研究ZBTB45的生物学功能提供了技术支持。     

锌指蛋白804A基因多态性与精神分裂症及其药物疗效关系的Meta分析

目的 评价锌指蛋白804A( ZNF804A)基因rs1344706和rs4667001位点多态性与精神分裂症的关联性,rs1344706位点多态性与抗精神病药物疗效的相关性.方法 在Medline、CNKI等中英文数据库中检索,获取关于ZNF804A基因多态性与精神分裂症及其药物疗效的文献,筛选文献并对纳入文献进行质量评分和数据提取,使用RevMan 5.1软件进行Meta分析.结果 rs1344706的T等位基因频率在精神分裂症组中高于对照组[OR =1.13,95％CI(1.06 ～ 1.21),P=0.0003];rs4667001的G等位基因频率在精神分裂症组中高于对照组[OR=1.14,95％CI(1.04 ～ 1.26),P=0.005];rs1344706的不同等位基因携带者的第四周PANSS量表减分率差异无统计学意义.结论 ZNF804A基因的rs1344706 T等位基因和rs4667001 G等位基因与精神分裂症易感性相关,rs1344706位点多态性与抗精神分裂症药物疗效无关.     

大鼠锌指蛋白ZFP580的原核表达与分离纯化

【目的】构建ZFP580基因的原核表达质粒,转化大肠杆菌,诱导表达并分离纯化大鼠锌指蛋白ZFP580。【方法】根据ZFP580 cDNA序列的开放阅读框设计引物,利用PCR技术扩增ZFP580的开放阅读框cDNA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,Nco I、Xho I双酶切电泳筛选、鉴定并测序。将构建的重组质粒pET30a-ZFP580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。【结果】成功扩增ZFP580基因并构建了表达质粒pET30a-ZFP580,测序结果表明与GeneBank公布的序列一致。含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19 kDa。【结论】成功表达并纯化了大鼠ZFP580蛋白,为进一步研究锌指蛋白ZFP580的功能奠定了基础。     

Snail家族锌指蛋白2与雌激素受体α的关系在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,乳腺癌占所有恶性肿瘤的10.4％,仅次于肺癌.我国乳腺癌的发病率虽相对于西方欧美国家较低,但近年来随着人们生活水平的提高和生活方式的改变,其发病率呈上升趋势.在乳腺癌的发生发展过程中,有2条重要的信号通路,雌激素受体α（estrogen receptorα,ERα）介导的转录激活或抑制和snail家族锌指蛋白2-E-钙粘素-上皮间质转化（slug-E-cadherin-EMT）,且通过ERα与slug建立起交叉信号通路.本文简要综述ERα表达的调节机制、slug在肿瘤侵袭作用机制、ERα和slug的相互关系.     

高血压病人血清锌指蛋白A20、p53表达及与冠状动脉病变的关系

目的：分析高血压病人血清锌指蛋白A20、p53表达及与冠状动脉病变的关系。方法：选取住院行冠状动脉造影检查的高血压病人120例,根据冠状动脉造影结果分为冠状动脉病变组(病变组)70例和冠状动脉正常组(正常组)50例。根据Gensini评分,将病变组病人分为轻度组40例、中度组20例和重度组10例。采用酶联免疫吸附法检测各组血清p53表达水平,实时荧光定量PCR法检测血清锌指蛋白A20 mRNA表达,并分析二者相关性。采用ROC曲线分析血清锌指蛋白A20 mRNA、p53表达水平对高血压病人发生冠状动脉病变的诊断效能。结果：病变组病人血清A20 mRNA、p53表达和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于正常组(P<0.01)。病变组中,重度组病人A20 mRNA明显高于轻度组和中度组,中度组亦明显高于轻度组(P<0.01);重度组病人p53高于轻度组(P<0.05)。病变组血清A20 mRNA表达与p53表达水平呈正相关关系(r=0.702,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清A20 mRNA、p53表达水平联合诊断高血压病人发生冠状动脉病变的曲线下面积为0....     

髓样锌指蛋白1在卵巢癌中的表达及其与预后的关系

目的 探索髓样锌指蛋白1(myeloid zinc finger 1,MZF1)在卵巢癌中的表达及其与预后的关系.方法 利用基因表达数据库(Gene Expression Ominus,GEO)GSE10971和GSE12172和癌症基因组数据库(The Cancer Genome Altas,TCGA),分析MZF1...     

Ezrin及CD44蛋白在肝癌组织中的表达与意义

目的探讨Ezrin、CD44蛋白在肝癌组织中的表达与癌细胞转移的关系。方法采用Western blot法检测73例肝癌组织和23例肝硬化组织的Ezrin、CD44蛋白表达情况。结果 Ezrin、CD44蛋白在有转移肝癌组织中的表达水平明显高于无转移肝癌组织和肝硬化组织(P<0.01);Ezrin蛋白、CD44蛋白在肝癌组织中的表达与Edmondson分级不相关(P>0.05)。结论 Ezrin、CD44蛋白在肝癌组织中的表达与肝癌细胞的转移相关。     

含MYND结构域的锌指蛋白10的原核表达及其多克隆抗体的制备

目的表达纯化含MYND结构域的锌指蛋白10(ZMYND10)的重组蛋白并制备其大鼠多克隆抗体。方法全基因合成ZMYND10基因的开放阅读框,构建原核表达载体p ET-28m-ZMYND10。在大肠杆菌中诱导表达HisZMYND10,利用His标签镍柱纯化His-ZMYND10重组蛋白,并用泛素样蛋白酶1除去重组蛋白的His标签。用纯化蛋白免疫大鼠,蛋白A/G混合琼脂糖纯化血清得到抗体。通过Western blot和免疫沉淀方法鉴定抗体的特异性。结果成功构建原核表达载体p ET-28m-ZMYND10,并获得可溶性表达。利用His柱得到高纯度的重组ZMYND10抗原,免疫大鼠后纯化得到的ZMYND10多克隆抗体可以检测到B16F10细胞中过表达及内源性表达的ZMYND10蛋白,并可用于免疫沉淀实验。结论本实验成功制备了ZMYND10的多克隆抗体,为后续探索ZMYND10在肿瘤细胞中的功能奠定了基础。     

骨髓增生异常综合征患者外周血单个核细胞中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1的表达

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1(RIZ1)的表达及其临床意义。方法选取2012年7月至2015年7月于新乡医学院第一附属医院收治的MDS患者86例为研究对象(MDS组),并选取同期体检健康者90例作为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测PBMC中RIZ1蛋白及其mRNA表达水平,并分析RIZ1表达与MDS患者临床病理特征的关系。结果对照组和MDS组受试者PBMC中RIZ1 mRNA表达水平分别为1.73±0.41和0.47±0.18,MDS组患者PBMC中RIZ1 mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05)。对照组和MDS组受试者PBMC中RIZ1蛋白表达水平分别为1.32±0.36和0.35±0.22,MDS组患者PBMC中RIZ1蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。RIZ1蛋白表达与MDS患者的年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白水平及血小板计数无关(P>0.05),而与骨髓原始细胞比例、世界卫生组织(WHO)分型及染色体核型有关(P<0.05)。结论 RIZ1在MDS患者PBMC中呈低水平表达,并与患者的骨髓原始细胞比例、WHO分型及染色体核型显著相关,这为MDS的早期诊断和靶向治疗提供了新的思路。     

Cbl-b蛋白的功能及其与结构的关系

cbl-b是一个新基因,它编码的蛋白与信号转导蛋白相互作用,调节它们的作用或受它们的调节.近年来,有关Cbl蛋白的研究,无论结构和功能,还是两者之间的关系,都已引起了人们的关注.本文重点介绍Cbl-b蛋白的功能及其与结构的关系.     

肝癌患者锌指蛋白281的表达水平及其对肝癌细胞增殖凋亡的影响

目的探讨肝癌患者锌指蛋白281(ZNF 281)的表达水平,并分析其对人肝癌细胞Hep G2增殖和凋亡的影响。方法收集河南大学第一附属医院2014年1月至2017年1月经手术切除后病理切片证实的肝癌标本82例及癌旁正常组织标本50例,采用免疫组化法检测肝癌和癌旁正常肝组织标本中ZNF 281蛋白表达情况,并分析ZNF 281阳性表达与临床病理参数[性别、年龄、肿瘤直径、国际恶性肿瘤分期(TNM分期)、淋巴结转移、甲胎蛋白(AFP)]的关系;采用荧光定量PCR检测上述组织中ZNF 281mRNA的表达情况;采用沉默RNA(siRNA) ZNF 281转染人肝癌细胞Hep G2,根据转染情况分为空白对照组(正常培养的Hep G2)、阴性对照组[转染ZNF 281基因非特异性沉默RNA(siRNA)干扰组]、siRNA ZNF 281组[转染ZNF 281基因特异性siRNA干扰组],并用荧光定量PCR检测转染后Hep G2细胞中ZNF 281 mRNA的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染后细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果肝癌组织中ZNF 281 mRNA的相对表达量高于正常肝组织(P <0. 05);肝癌组织ZNF 281蛋白阳性表达率为74. 39%,高于癌旁正常肝组织的18. 0%(P <0. 05),且ZNF 281蛋白阳性表达患者肿瘤直径> 5 cm,TNM为Ⅲ～Ⅳ期,淋巴结转移比例分别为65. 57%、73. 77%、45. 90%,高于ZNF 281蛋白表达阴性的38. 10%、38. 10%、14. 29%(P <0. 05)。siRNA ZNF281组Hep G2细胞中ZNF 281 mRAN表达量低于空白对照组和阴性对照组(P <0. 05); siRNA ZNF 281组细胞生长抑制率和细胞凋亡率均高于空白对照组和阴性对照组(P <0. 05);空白对照组和阴性对照组Hep G2细胞中ZNF 281 mRAN表达量及细胞生长抑制率和细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论肝癌组织中ZNF 281蛋白及其RNA均呈高表达;沉默ZNF 281基因可抑制人肝癌细胞Hep G2增殖,诱导其凋亡。     

小鼠急性肝坏死模型锌指蛋白A20的变化及意义

目的探讨锌指蛋白A20在小鼠急性肝坏死模型中的表达变化规律及意义。方法用D-氨基半乳糖（D-GalN）＋内毒素（LPS）联合制备小鼠急性肝坏死模型。将BalB/C小鼠随机分为正常对照组和模型组,于不同时间点取肝组织,采用苏木素-伊红（HE）染色光镜下观察肝组织病理学变化,免疫组化SP法检测肝细胞A20的表达情况。结果A20在正常对照组小鼠肝细胞中无表达。模型组小鼠在注射D-GalN和LPS后1h肝细胞开始表达A20;2h时表达水平迅速上升达峰值,Constantine半定量评分为4.33分,A20染色阳性肝细胞达20%～45%,主要分布在小叶间静脉周围;3h时A20表达下降;7h时降至难以检测水平。在肝坏死期,A20染色阳性肝细胞仍部分存活,而A20染色阴性肝细胞则大片坏死。结论在小鼠急性肝坏死模型出现大量肝细胞坏死前,A20在肝细胞中表达水平快速上升至高峰;当肝细胞大量坏死时,A20表达水平降至极低。A20在控制炎症反应、保护肝细胞免受损伤方面发挥了作用。