PCR 与 DIFA 检测沙眼衣原体的比较研究

用所建立的沙眼衣原体质粒引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测１１６例泌尿生殖道沙眼衣原体，并与直接免疫荧光法（ＤＩＦＡ）进行比较。结果ＰＣＲ阳性３８例，ＤＩＦＡ阳性的３２例中有３１例ＰＣＲ阳性。ＰＣＲ敏感性为９６．９％，特异性为９１．７％。ＰＣＲ阳性者于治疗结束１～２周后复诊２１例，其中４例ＰＣＲ仍然阳性。结果显示，ＰＣＲ可快速、敏感、特异地检测泌尿生殖道沙眼衣原体ＤＮＡ，然而对治疗后短期内复诊患者，似乎不宜仅以ＰＣＲ阳性结果作为重复治疗的依据。     

PCR与DIFA检测沙眼衣原体的比较研究

用所建立的沙眼衣原体质粒引物聚合酶链反应技术检测１１６例泌尿生殖道沙眼衣原体，并与直接免疫荧光法进行比较。结果ＰＣＲ阳性３８例，ＤＩＦＡ阳性的３２例中有３１例ＰＣＲ阳性。ＣＰＲ敏感性为９６．９％，特异性为９．１７％。ＰＣＲ阳性者于治疗结束１－２财后复诊２１例，其中４例ＰＣＲ仍然阳性。     

不同引物对PCR检测沙眼衣原体结果的影响

为了解不同引物对PCR检测泌尿生殖道沙眼衣原体（CT）感染的影响,作者以直接免疫荧光法（DIFA）为标准,选用引物不同的市售PCR试剂盒检测了209例泌尿生殖道可疑CT感染标本。结果引物1RCR阳性29例,引物2PCR阳性28例;在DIFA阳性25例中,引物1PCR阳性24例,引物2PCR阳性23例;引物1PCR敏感性为96．0％,特异性为97．8％;引物2PCR敏感性为92．0％,特异性为98．4％。与DIFA比较,两者在统计学上无显著差异（P＞0．05）,提示不同引物对PCR检测CT感染无明显影响。     

幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的为了探讨幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞动力学的影响。方法应用免疫组织化学和切口末端标记法（ＴＵＮＥＬ），检测了１６例正常胃粘膜者和３１例幽门螺杆菌（Ｈｐ）相关慢性胃炎患者治疗前后胃粘膜上皮细胞增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＬＩ％）、细胞凋亡指数（ＡＩ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的表达。结果Ｈｐ阳性患者的ＰＣＮＡＬＩ％为１３．９４±１．６４，正常对照组为６．７１±０．９２，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；ＥＧＦ－Ｒ表达与ＰＣＮＡＬＩ％呈正相关（ｒ＝０．４４８７，Ｐ＜０．０１）：Ｈｐ阳性患者组的ＡＩ为７．１±１．６，正常对照组为１．３±０．６，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；抗Ｈｐ治疗后，２１例Ｈｐ根除者的ＰＣＮＡＬＩ％和细胞ＡＩ分别降至８．２１±１．３２和１．２±０．６，与治疗前相比差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１），而１０例Ｈｐ持续阳性者则无明显降低（Ｐ＞０．０５）：ＰＣＮＡＬＩ％、ＥＧＦ－Ｒ表达及细胞ＡＩ与胃粘膜炎症程度无显著相关（Ｐ＞０．０５）。结论上述结果提示，Ｈｐ感Ｈ能引起胃粘膜上皮细胞过度增殖和凋亡。这为Ｈｐ感染胃癌发病中的作用机制提供了一些线索。     

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗Hp细胞毒素相关蛋白A抗体

目的建立快速检测抗幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）．方法将ＣａｇＡ抗原点于硝酸纤维素膜上，然后依次加入患者血清及用抗人ＩｇＧ抗体标记的胶体金颗粒，如血清中存在抗ＣａｇＡ的ＩｇＧ，在膜上便出现一个红色斑点．结果ＤＩＧＦＡ仅需几分种便可完成．当用ＤＩＧＦＡ及ＥＩＡ对１０８份血清进行检测时，两种方法之特异性及敏感性相当．当以聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测胃粘膜组织中ＨｐＣａｇＡ的结果作为参照时，ＤＩＧＦＡ的特异性及敏感性分别为９８％（５７／５８）和９４％（４５／４８）．结论ＤＩＧＦＡ特异性强，敏感度高，操作快速且简便，在ＣａｇＡ阳性Ｈｐ感染的检测方面有广泛应用前景     

免疫—PCR新技术在原发性肝癌血清学诊断中的应用

目的 建立免疫－聚合酶链反应（免疫－ＰＣＲ）技术，提高肝癌肝病相关抗原的检测敏感性。方法 ２９例原发性肝癌（１组）３４例肝硬化（ＩＩ组），１２例慢性活动性肝炎（Ⅲ组）患者血清中的肝癌相关抗原ＰＣＲ产物以２％琼脂凝胶电泳，溴化乙锭染色体观察记录，同时测定患者血清中的甲胎蛋白（ＡＦＰ）含量，结果 利用免疫－ＰＣＲ技术Ｉ组中有２３例呈阳性反应（７９．３％）而Ⅱ，Ⅲ组阳性分别为为３例和１例，Ｉ组ＡＦＰ升高     

应用PCR、BA－ELISA早期诊断结核性胸膜炎的临床意义

应用ＰＣＲ检测６４例胸水中结核菌基因组ＤＮＡ，并与ＢＡ－ＥＬＩＳＡ检测胸水中抗ＰＰＤ抗体及细菌学检查相比较。结果：三种方法的敏感性和特异性分别为５６．０％、１００％；６４．０％、８６．７％、１１．０％和１００％。若以ＰＣＲ、ＢＡ－ＥＬＩＳＡ任一阳性作为判断标准则敏感性明显提高至８９．０％。认为，ＰＣＲ与ＢＡ－ＥＬＩＳＡ诊断结核性胸膜炎具有较高的敏感性，但前者更具早期和特异性并对疾病的疗效和预后有判断意义。     

慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞内干扰素和白细胞介素的表达及意义

目的探讨慢性重型肝炎（ＣＳＨ）病人外用血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）及白细胞介素－４（ＩＬ－４）的表达及其临床意义。方法常规分离ＰＢＭＣ,在ＰＭＡ、Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、Ｍｏｎｅｎｓｉｎ的刺激下,采用流式细胞术（ＦＡＣＳ）,对１７例ＣＳＨ患者及１９例正常健康者ＣＤ４＋Ｔ细胞内ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的表达进行分析,并应用荧光定量聚合酶链反应检测ＨＢＶ ＤＮＡ含量。结果 ＣＤ４＋Ｔｈ１、 Ｔｈ２细胞在ＣＳＨ组分别为７．２％—２６．３％（平均１５％）和０、ｌ％—１０．９％（平均２．０％）,正常对照组则分别为２．２％—１１．９％（平均５．９％）和０．４％—３．９％（平均２．２％）;ＣＤ４＋Ｔｈ１细胞百分数两组间差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。荧光定量ＰＣＲ结果表明ＣＳＨ组中１３例ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性,其ＨＢＶ ＤＮＡ的含量与ＩＦＮ－γ表达细胞百分数呈负相关。结论 Ｔｈ１细胞与肝脏的炎症活动明显相关,ＩＦＮ－γ的表达对ＨＢＶ复制可能具有一定的影响。     

人类白细胞抗原与风湿热和风湿性心瓣膜病易感性研究

为探讨人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＱＡ１基因与风湿热（ＲＦ）和风湿性心脏病（ＲＨＤ）患者发病中宿主的遗传关联，选择无亲缘关系的广东籍汉族健康人１０６例和５４例ＲＦ／ＲＨＤ患者，应用聚合酶链反应－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＣＲ－ＰＡＧＥ）法，结合高灵敏的银染色作ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因分型。发现本方法检测的６种ＤＱＡ１等位基因中，ＲＦ／ＲＨＤ组ＤＱＡ１＊０１０１（３１．４８％，相对危险率ＲＲ＝２．８９，Ｐ＜０．００５，病因系数ＥＦ＝０．２０６）明显增高，而ＤＱＡ１＊０１０２（１．８５％，ＲＲ＝０．１０６，Ｐ＜０．００５，预防分数ＰＦ＝０．１３４）显著下降；ＤＱＡ１的两种基因型（＊０１０１／０３０１和＊０１０１／０４０１）在病人组显著增高，而ＤＱＡ１的＊０１０２／０３０１基因型比健康人组明显下降（Ｐ＜０．００５）。上述结果显示：ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１０１对ＲＦ／ＲＨＤ有遗传易感作用，而ＤＱＡ１＊０１０２有遗传抵抗作用；ＤＱＡ１基因型检测可能为预测ＲＦ／ＲＨＤ易感者提供理论依据。     

应用PCR,BA—ELISA早期诊断结核性胸膜炎的临床意义

应用ＰＣＲ检测６４例胸水中结核菌基因组ＤＮＡ，并与ＢＡ－ＥＬＩＳＡ检测胸水中抗ＰＰＤ抗体及细菌学检查相比较。结果：三种方法的敏感性和特异性分别为５６．０％，１００％；６４．０％，８６．７％，１１．０％和１００％。若以ＰＣＲ，ＢＡ－ＥＬＩＳＡ任一阳性作为判断标准则敏感明显提高至８９．０％。认为，ＰＣＲ与ＢＡ－ＥＬＩＳＡ诊断结核性胸膜炎具有较高的敏感性，但前者更具早期和特异性并对疾病的疗效和预后有判断     

免疫－PCR新技术在原发性肝癌血清学诊断中的应用

目的建立免疫－聚合酶链反应（免疫－ＰＣＲ）技术，提高肝癌肝病相关抗原的检测敏感性。方法２９例原发性肝癌（Ⅰ组），３４例肝硬化（Ⅱ组），１２例慢性活动性肝炎（Ⅲ组）患者血清中的肝瘤相关抗原，ＰＣＲ产物以２％琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色观察记录。同时测定患者血清中的甲胎蛋白（ＡＦＰ）含量。结果利用免疫－ＰＣＲ技术Ⅰ组中有２３例呈阳性反应（７９．３％），而Ⅱ、Ⅲ组阳性分别为３例和１例；Ⅰ组ＡＦＰ升高者１４例（４８．３％），而Ⅱ、Ⅲ组则分别为６例和２例；结论该技术可用于检测血清中肝癌相关抗原，具有高特异性、高敏感性，而且检测率明显高于ＡＦＰ测定。     

Alzheimer 病的脑诱发电位初步探讨

目的探讨Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）脑诱发电位变异及临床应用价值。方法记录３９例ＡＤ患者和４０例健康老年人的脑干听觉反应（ＡＢＲ）、听觉诱发电位（ＡＥＰ）、视觉诱发电位（Ｆ－ＶＥＰ）以及事件相关电位Ｐ３００。结果与健康对照组相比,ＡＤ组的脑诱发电位变异为：（１）波幅下降（ＡＢＲ－Ⅴ,ＡＥＰ－Ｐ２,Ｆ－ＶＥＰ－Ｐ２,靶Ｐ３００－Ｐ２、Ｐ３,非靶Ｐ３００－Ｐ２）;（２）潜伏期延长（ＡＢＲ－Ⅲ,ＡＥＰ－Ｐ１、Ｎ１、Ｐ２）;（３）部分潜伏期提前（靶和非靶Ｐ３００－Ｎ１）。相关分析提示：除靶Ｐ３００－Ｎ１潜伏期外,以上指标均与ＡＤ的认知功能评定（ＣＡＳＩ分）有显著线性相关,部分指标同时又与被试者的教育年限显著相关。Ｋ－Ｍｅａｎｓ聚类分析表明：与ＣＡＳＩ和教育年限皆相关的脑诱发电位指标（ＢＥＰｓ）区分两类被试者的特异性高（１００．０％）而敏感性低（５１．７％）;仅与ＣＡＳＩ评分相关的ＢＥＰｓ指标则敏感性高（９３．６％）而特异性低（５５．６％）。结论ＡＤ患者的脑诱发电位指标变异程度基本上与其认知功能受损程度相平行;根据不同临床应用目的可选择相应的ＢＥＰｓ指标     

原发性肝癌患者外周血中甲胎蛋白mRNA的意义

目的由于ＰＣＲ技术的应用,血循环中癌细胞的检测近有很大进展．本文用ＲＴＰＣＲ检测肝癌（ＨＣＣ）和其他慢性肝病患者外周血中ＡＦＰｍＲＮＡ,藉以反映ＨＣＣ细胞的存在,并与其他血清标记物比较．方法ＨＣＣ患者２２例,肝硬变和慢性乙型肝炎患者各１０例,健康成人受试者（对照）５例．取患者和对照的外周血,分离单核细胞,提取总ＲＮＡ并作电泳鉴定,用合成的两对引物进行巢式ＲＴＰＣＲ扩增ＡＦＰｍＲＮＡ,同时分析血清ＡＦＰ和乙肝标记物．结果ＡＦＰｍＲＮＡ在１３例ＨＣＣ（５９１％）,２例肝硬变（２００％）患者外周血中测到,其余标本均为阴性．ＡＦＰｍＲＮＡ阳性的１３例患者肿瘤均大于５ｃｍ,为晚期患者．在该１３例患者中仅有６例（４６１％）在血清中测到ＡＦＰ,但有１２例（９２３％）ＨＢｓＡｇ,抗ＨＢｅ,抗ＨＢｃ全阳性,而ＡＦＰｍＲＮＡ阴性的５例该３标记物全阴性．结论ＲＴＰＣＲ扩增ＡＦＰｍＲＮＡ是检测ＨＣＣ和肝硬变患者循环肝癌细胞的敏感方法．患者外周血中的ＡＦＰｍＲＮＡ有可能作为肿瘤转移和复发的标记对ＨＣＣ诊断、随访观察和疗效评定有较大临床意义．     

HLA—DR抗原β链的共同表位与类风湿关节炎相关性研究

目的 探讨人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＲ基因编码的共同表位（ＳＥ）与武汉籍汉族类风湿关节炎（ＲＡ）的相关性。方法 采用聚合酶链反应－序列特异性引物技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）,对武汉籍汉族人群７８例ＲＡ患者和１２６例健康者的ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０１、＊０４基因型进行检测。结果 ＲＡ患者中具有编码ＱＫＲＡＡ或ＱＲＲＡＡ的共同表位阳性率为４３．６％,明显高于正常对照组（１５．１％,ｐ〈０．０１）;ＳＥ阳怀的Ｒ     

扩张型心肌病HLA－DRB_1基因多态性的研究

借助聚合酶链反应（ＰＣＲ）／序列特异性引物（ＳＳＰ）技术对４２例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者和１６８例正常对照者进行人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＲＢ１基因型分析。结果发现ＤＣＭ组ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１１基因频率与对照组比较明显增高（２６．１９％对１３．１％，Ｐ＜０．０５），其ＲＲ＝２．３６。其他等位基因频率在ＤＣＭ组与对照组间差异无显著性。提示ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１１基因可能与ＤＣＭ有关联。     

HLA—DR基因与我国北方汉族肺结核的相关性研究

目的 探讨我国北方汉族ＨＬＡ－ＤＲ基因多态性与肺结核（ＰＴＢ）的遗传关联性及其与临床表现的关系。方法 本研究采用联合酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法,对７４例ＰＴＢ患者及９０例正常人的ＨＬＡ－ＤＲ等位基因进行分型。结果 与对照组相比,ＰＴＢ患者组的ＤＲＢ１＊１５等位基因频率显著增高（３４．３％比１７．０％,Ｐｃ〈０．０５,ＲＲ＝２．９１）,ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊１２基因频率增高（１５．４     

胃液中肿瘤相关抗原MG_7Ag的检测及临床意义

为探讨提高胃癌患者胃液中肿瘤相关抗原的检出率及早期胃癌检测的敏感性，应用以胃癌单克隆抗体的特异性和聚合酶链反应（ＰＣＲ）的高度敏感性相结合建立的免疫－ＰＣＲ检测胃液中肿瘤相关抗原ＭＧ７Ａｇ。结果胃癌３７例、慢性萎缩性胃炎８例、慢性浅表性胃炎４例及消化性溃疡８例，胃液中ＭＧ７Ａｇ阳性分别为３０例、２例、０例及１例，胃癌患者胃液中ＭＧ７Ａｇ的阳性检出率为８１．１％。结果提示该方法对诊断胃癌有较大的应用价值     

胃液中肿瘤相关抗原MG7Gg的检测及临床意义

为探讨提高胃癌患者胃液中肿瘤相关抗原的检出率及早期胃癌检测的敏感性，应用以胃癌单克隆抗体的特异性和聚合酶链反应（ＰＣＲ）的高度敏感性相结合建立的免疫－ＰＣＲ检测胃液中肿瘤相关抗原ＭＧ７Ａｇ。结果胃癌３７例、慢性萎缩性胃炎８例、慢性浅表性胃炎４例及消化性溃疡８例，胃液中ＭＧ７Ａｇ阳性分别为３０例、２例、０例及１例，胃癌患者胃液中ＭＧ７Ａｇ的阳性检出率为８１．１％。结果提示该方法对诊断胃癌有较大的应用     

结核分支杆菌DNA的单管巢式聚合酶链反应检测

目的探讨单管巢式聚合酶链反应（ＳＮＰＣＲ）检测石蜡包埋组织结核分支杆菌ＤＮＡ的特异性和敏感性。方法应用普通ＰＣＲ（ＧＰＣＲ）、双管巢式ＰＣＲ（ＤＮＰＣＲ）和ＳＮＰＣＲ对结核分支杆菌ＢＣＧ和３０例结核性淋巴结炎石蜡包埋组织进行结核分支杆菌复合群ＩＳ６１１０特异插入序列片段ＤＮＡ检测。结果ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测ＢＣＧＤＮＡ均于１５ｆｇ以上呈现阳性结果，其敏感性明显优于ＧＰＣＲ（４８０ｆｇ）。ＧＰＣＲ、ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ检测３０例结核性淋巴结炎阳性率分别为４３％、１００％和１００％，抗酸染色阳性率（１０％）与３种ＰＣＲ法相比差异有非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＧＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ和ＳＮＰＣＲ相比差异亦具非常显著意义（均Ｐ＜０．０１）。ＳＮＰＣＲ阳性率与ＤＮＰＣＲ相同。结论巢式ＰＣＲ检测淋巴结石蜡包埋组织结核分支杆菌的敏感性显著高于ＧＰＣＲ，其中ＳＮＰＣＲ具有与ＤＮＰＣＲ相同的特异性和敏感性，并具有更大的实用价值。     

巢式PCR检测猴免疫缺陷病毒基因

位于ＳＩＶ的ｇａｇ保守基因区内的特异巢式ＰＣＲ引物用于体外扩增ＳＩＶ病毒基因，其检出敏感性达到０．１ｆｇ水平，较常规ＰＣＲ敏感性高１００倍。巢式ＰＣＲ检测粗提ＳＩＶｍａｃ感染猴后期或经过药物治疗后的猴外周血淋巴细胞ＤＮＡ，证明９６．５％（２８／２９）的猴体内仍有ＳＩＶ病毒感染存在。巢式ＰＣＲ是一种敏感性极高，特异性强，操作简便易行的ＳＩＶ基因检测技术，它对确证ＳＩＶ病毒感染和正确评价药物和疫苗在猴艾滋病模型中的体内治疗效果提供了良好依据。