应用Box-Behnken实验设计优化水飞蓟素固体脂质纳米粒处方研究

目的应用Box-Behnken实验设计,优化水飞蓟素固体脂质纳米粒的最佳处方。方法采用三因素三水平Box-Behnken实验设计,以水飞蓟素为模型药物,采用乳化蒸发-低温固化法制备固体脂质纳米粒。利用效应曲面法对影响固体脂质纳米粒包封率、载药量和粒径的主要因素进行考察,以包封率、载药量和粒径为响应值,建立相应的二项式数学模型优化处方。结果最优处方为固体脂质纳米粒中脂质单硬脂酸甘油酯量为5.05%,7.25%Poloxmer 188作为乳化剂,药物的量为15%。结论采用Box-Behnken实验设计可用于水飞蓟素固体脂质纳米粒的处方优化筛选。     

蟾酥固体脂质纳米粒处方的Box-Behnken响应面法优化

目的采用响应面法优化蟾酥固体脂质纳米粒(CS-SLN)制备工艺。方法采用乳化蒸发-低温固化法制备CSSLN,以包封率、载药量、粒径及综合值为指标,考察载体(GME)用量、大豆磷脂用量及泊洛沙姆188(P188)用量对制备工艺的影响。同时运用Box-Behnken响应面法优化制剂处方,并对结果进行方程拟合,预测最佳工艺条件。结果制备60m L蟾酥固体脂质纳米粒混悬液的最优处方构成为单硬脂酸甘油酯0. 56 g,大豆磷脂量2. 24 g,泊洛沙姆188 0. 5 g,根据优化方案制备的蟾酥固体脂质纳米粒包封率为86. 4%,载药量为1. 88%,平均粒径为116. 3 nm。结论该处方可用于蟾酥固体脂质纳米粒的制备,工艺简单,Box-Behnken响应面法可用于蟾酥固体脂质纳米粒的工艺优化,建立的模型具有良好预测性。     

水蜈蚣总黄酮固体脂质纳米粒处方的优化

目的优化水蜈蚣Kyllinga brevifolia Rottb.总黄酮固体脂质纳米粒处方。方法乳化蒸发-低温固化法制备固体脂质纳米粒。以总黄酮含有量、泊洛沙姆188用量、单硬脂酸甘油酯用量为影响因素,包封率和平均粒径为评价指标,Box-Behnken效应面优化处方,并通过透析法考察其体外释药性。结果最佳处方为总黄酮含有量7%,泊洛沙姆188用量6.73%,单硬脂酸甘油酯用量3.49%,包封率99.30%,平均粒径76.5 nm。固体脂质纳米粒8 h时累积释放度为53.83%,24 h时达90.41%,与Ritger-Peppas模型拟合度最高,为药物扩散和脂质载体材料溶蚀的协同过程。结论该方法稳定可行,可为开发水蜈蚣新型制剂提供依据。     

桔皮素固体脂质纳米粒制备及其体内药动学研究

目的 制备桔皮素固体脂质纳米粒，并考察其体内药动学。方法 熔融-高压均质法制备固体脂质纳米粒。以脂(单硬脂酸甘油酯)药比、泊洛沙姆188用量、Labrasol用量、均质压力、均质次数为影响因素，包封率、载药量为评价指标，单因素试验优化处方。在透射电镜下观察形态，测定溶解度、体外释药、稳定性，进行晶型分析。30只大鼠随机分为5组，分别灌胃给予桔皮素、物理混合物、桔皮素固体脂质纳米粒(不含Labrasol)、Labrasol+桔皮素固体脂质纳米粒、桔皮素固体脂质纳米粒(含Labrasol)的0.5%CMC-Na混悬液(50 mg/kg),于0.5、1、2、3、4、5、6、8、12 h采血，HPLC法测定桔皮素血药浓度，计算主要药动学参数。结果 最佳处方为桔皮素用量30 mg,脂药比15∶1,泊洛沙姆188用量1.0%,Labrasol用量0.16%,均质压力80 MPa,均质次数6次，平均包封率为(90.16±1.67)%,载药量为(5.66±0.24)%,粒径为(189.76±8.92)nm, Zeta电位为-(36.08±1.72)mV。固体脂质纳米粒增加了桔皮素在模拟胃液、模拟肠液中...     

星点设计-效应面法优选白藜芦醇固体脂质纳米粒处方

目的:采用星点设计-效应面法优选白藜芦醇固体脂质纳米粒的处方。方法:采用星点设计-效应面优化法筛选处方,以白藜芦醇包封率及载药量作为评价指标,考察脂质用量、表面活性剂用量、药物量对评价的影响。采用热高压均质法制备白藜芦醇固体脂质纳米粒。结果:热高压均质工艺能有效制备固体脂质纳米粒,优选的最佳处方为单硬脂酸甘油酯用量为4.5%、泊洛沙姆用量为6%、白藜芦醇投药量为0.45%,OD值与理论值偏差-4.12%。结论:星点设计-效应面法能有效优选RES-SLN处方。     

吴茱萸碱固体脂质纳米粒的制备和抗肿瘤活性

目的制备吴茱萸碱固体脂质纳米粒,并评价其抗肿瘤活性。方法吴茱萸碱溶于混合溶剂(丙酮-无水乙醇)中,加入Precirol ATO 5并水浴加热,作为有机相,将其缓慢倒入泊洛沙姆188溶液(水相)中,冷冻干燥后制得纳米粒。分子模拟考察其处方组成。以Precirol ATO 5用量、药脂比、泊洛沙姆188用量为影响因素,在单因素试验基础上通过Box-Behnken设计优化制备工艺,再进行表征与体外抗肿瘤(人宫颈癌He La细胞)活性实验。结果最佳条件为30 mg Precirol ATO 5,药脂比1∶3,93 mg泊洛沙姆188,所得纳米粒圆整,分布均匀,平均粒径268.9 nm,平均载药量1.65%,对He La细胞有较好的抑制作用,并呈剂量依赖关系。结论固体脂质纳米粒可有效改善吴茱萸碱的分散性与透膜吸收。     

薄膜-超声法制备姜黄素固体脂质纳米粒的工艺研究

目的：优选薄膜-超声法制备姜黄素固体脂质纳米粒的工艺。方法：以包封率和载样量为指标,考察各影响因素如姜黄素用量,硬脂酸和卵磷脂的用量及吐温-80用量对包封率和载样量的影响,并通过均匀实验设计优化处方及制备工艺。结果：最佳工艺为姜黄素30 mg,硬脂酸60 mg,卵磷脂117 mg,吐温-80（1.0%）10 mL,所得姜黄素固体脂质纳米粒粒径分布均匀,包封率达95.98%,载样量为15.87%,平均粒径为58.0 nm。结论：用均匀设计优化后的制备处方制得的姜黄素固体脂质纳米粒,有较高的载样率和包封率,说明该工艺适合姜黄素固体脂质纳米粒制备。     

藤茶总黄酮固体脂质纳米粒处方的优化及其体外释药行为

目的优化藤茶总黄酮固体脂质纳米粒处方,并考察其体外释药行为。方法熔融-超声法制备固体脂质纳米粒后,以投药量、药脂比、乳化剂(泊洛沙姆188)用量为影响因素,粒径、包封率、载药量为评价指标,星点设计-响应面法优化处方。然后,透析法考察其体外释药行为。结果最佳处方为投药量0.48%,药脂比1∶5,乳化剂用量6.6%,所得固体脂质纳米粒混悬液均匀稳定,平均粒径、包封率、载药量分别为(148.2±7.1)nm、(87.27±0.96)%、(12.43±0.49)%,而且其24 h内累积释放率为98.81%,体外释药行为符合Weibull模型(R~2=0.999 5)。结论该方法稳定可行,可用于制备具有缓释特性的藤茶总黄酮固体脂质纳米粒。     

五味子醇甲纳米结构脂质载体的制备及体外评价

目的制备五味子醇甲纳米结构脂质载体(SCH-NLC)并对其进行体外评价。方法采用熔融乳化-超声法制备SCH-NLC,基于单因素考察结果采用Box-Behnken效应面法优化制剂处方及制备工艺。采用高效液相色谱法,建立SCH-NLC中五味子醇甲的含量测定方法,并通过测定SCH-NLC的形态、粒径、包封率、载药量、X-射线衍射、体外释放度等对其进行体外评价。结果最佳处方工艺为:中链甘油三酸酯/单硬脂酸甘油酯比7.65∶2.35,泊洛沙姆-188用量3.8%,脂质浓度4.0%,制得的纳米粒平均粒径为(94.11±4.09)nm,包封率为(89.13±0.38)%,载药量为(2.34±0.07)%,X-射线衍射分析表明药物以无定形状态分散于纳米粒中。体外释放实验结果表明,SCH-NLC具有缓释特性。结论该处方可用于SCH-NLC的制备,工艺操作简便,合理可行。     

正交实验法优选马钱子碱固体脂质纳米粒制备工艺

目的优化马钱子碱固体脂质纳米粒制备工艺,并考察其理化性质。方法采用乳化蒸发法制备马钱子碱固体脂质纳米粒,在制备工艺和处方因素上进行单因素考察,并在其基础上进行正交试验设计优化、筛选最佳处方。结果以优化处方制备的马钱子碱固体脂质纳米粒为类球形实体,粒径分布均匀,平均粒径为(195±4)nm,多分散系数(PI)值为(0.24±0.01),Zeta电位为(-36.2±2.1)mV,平均包封率为(68.15±1.53)%结论该方法制备的马钱子碱固体脂质纳米粒粒径符合要求,且稳定性和包封率较理想。     

基于电子鼻技术的国产血竭与进口血竭快速鉴别研究

目的：鉴别进口血竭与国产血竭。方法：通过电子鼻检测国产血竭和进口血竭气味在传感器上的响应值,并采用判别因子（Discriminant Factorial Analysis,DFA）进行分析。结果：进口血竭和国产血竭气味差异明显。结论：电子鼻技术对进口血竭和国产血竭气味的判别与传统经验鉴别一致,电子鼻技术结合数学模型可以作为中药质量快速鉴别的方法。     

两种不同提取工艺制备龙血竭的比较

目的：把碱提工艺制备的龙血竭与现行醇提工艺制备的龙血竭进行比较。方法：把碱提龙血竭(前者)和醇提龙血竭(后者)在薄层色谱、紫外光谱、龙血素B含量等方面进行比较。结果：前者的外观颜色与后者有显著差异；前者的得率比后者的高，但龙血素B含量比后者低；药材、前者和后者的薄层色谱和紫外光谱基本一致，但前者紫檀芪、龙血素B、剑叶龙血素A、B的含量比后者的低。结论：碱提工艺制备的龙血竭与醇提工艺制备的龙血竭相比，在外观和内在质量上、均存在较大的差距，如要替代醇提工艺．尚有待进一步改进。     

设计空间法研究龙血竭酚类提取物的精制工艺

运用质量源于设计(Qb D)理念,采用"设计空间"方法优化龙血竭酚类提取物的精制工艺。首先将龙血素B、7,4'-二羟基黄酮含量及其转移率、总干膏收率等5个指标做为关键质量属性(CQA),采用Plackett-Burman设计实验,发现关键工艺参数(CPP)为碱浓度、碱倍量和碱溶温度。再采用Box-Behnken设计建立CQA和CPP间的数学模型,方差分析显示模型P均小于0.05,失拟值均大于0.05,可以较好的描述CQA和CPP之间的关系。设定龙血素B、7,4'-二羟基黄酮含量及其转移率、总干膏收率5个指标的控制限度,通过Monte Carlo仿真法计算获得基于概率的设计空间并验证。结果表明,优化后的纯化方法能够保证龙血竭酚类提取物精制工艺稳定,有助于提高酚类提取物批次间质量均一性,为生产自动化控制提供数据支撑。     

龙血竭小鼠灌胃给药后血中移行成分的分析

目的 对龙血竭进行中药血清药物化学研究,为确定龙血竭的药效成分奠定基础.方法 在建立龙血竭高效液相色谱指纹图谱的基础上,通过比较龙血竭提取物、含药血清和空白血清的HPLC指纹图谱,结合LC-MS/MS检测技术确定龙血竭给药后的血中移行成分.结果 在龙血竭含药血清中发现6个人血成分,其中5个都属原型成分,分别为3,4'-二羟基-5-甲氧基二苯乙烯、剑叶龙血素B、4'-羟基-4,2'-二甲氧基一二氢查耳酮(新化合物)、剑叶龙血素A和龙血素B;1个可能为原型成分或代谢产物.结论 6个人血成分是龙血竭在体内主要直接作用物质,有助于阐明龙血竭的药效物质基础.     

龙血竭中黄酮类成分提取工艺研究

目的:确定龙血竭中黄酮类成分的提取工艺。方法:采用单因素考察及正交试验设计,以总黄酮的含量为考察指标优选提取工艺。结果:龙血竭中黄酮类成分提取的优选工艺为加药材8倍量的乙酸乙酯提取2次,每次1 h;碱溶精制用提取物30倍量的0.35%NaOH溶液。结论:采用优选工艺,龙血竭中总黄酮提取效率高且稳定。     

龙血竭提取物对正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的影响

目的研究了龙血竭提取物对正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的影响。方法采用正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠,用葡萄糖氧化酶法测定血糖,用放射免疫法测血清胰岛素,用高效液相色谱(HPLC)分析小鼠的血清。结果龙血竭提取物对正常小鼠空腹血糖无明显降低作用,能降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的空腹血糖水平,能改善小鼠对蔗糖的耐受力,增加正常小鼠的胰岛素分泌,血清样本中有药物成分检出。结论龙血竭提取物对糖尿病小鼠有较好的治疗作用,可升高血清胰岛素水平,其部分组分能够被动物体内吸收并进入血液发挥作用。     

生肌中药对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响

目的:探讨乳没生肌散、龙血竭对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响。方法:利用人成纤维细胞、角质形成细胞构建组织工程皮肤,并植入裸鼠皮肤缺损创面,实验动物随机分为乳没生肌散外敷组、龙血竭外敷组、龙血竭内服组、龙血竭外敷并内服组5组,并以不用药组为对照组。术后9d取材,冰冻切片,行HE染色,免疫荧光双标检测VEGF的表达。结果:术后9d,各组创面愈合,表皮层较厚,真皮层致密,生肌中药治疗后毛细血管增生明显,VEGF阳性表达增强,龙血竭外敷并内服组表达最强。结论:生肌中药能促进组织工程皮肤移植后VEGF的表达,有利于再血管化。     

比色法测定龙血竭总黄酮含量

目的:对龙血竭总黄酮的比色测定方法进行研究.方法:利用龙血竭总黄酮可与各种不同的显色试剂作用并产生颜色的特性,比较显色后的吸收曲线变化差异.结果:龙血竭用HCl-Mg粉显色后在475 nm处产生一个大的吸收峰,且此处的干扰较小,在6h内稳定性良好,在0.012 ～0.12 g·L-1呈良好的线性关系(r=0.9993);用其他显色剂显色后吸收峰均无太大变化.结论:总黄酮测定常用的AlCl3,NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法不适合龙血竭总黄酮的测定,HCl-Mg粉可作比色法测定龙血竭总黄酮的显色剂,但仍需寻找合适的对照品.     

外用血竭散剂治疗慢性宫颈炎60例

６０例慢性宫颈炎患者于月经干净后３天予血竭散剂隔宫颈上药，１４次一疗程；另５６例以常规药物加激光治疗。结果：血竭治疗宫颈炎具有疗程短，疗效显著，无排液，感染良反应等特点，且治愈后宫颈组织弹性好，无疤痕。     

龙血竭有效部位对胎鼠皮肤成纤维细胞生长的作用

目的:探讨龙血竭不同有效部位对体外培养的胎鼠皮肤成纤维细胞生长及分泌的影响。方法:孕龄12.5~14.5d昆明小鼠胚胎,无菌条件下将躯干部皮肤制成匀浆,接种于25cm2塑料培养瓶,体积分数10%FBS的高糖DMEM培养基培养传代,P3代细胞以8×106个/L接种于96孔板,细胞饥饿24h后进行实验。采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇等极性递增溶剂依次萃取龙血竭中的各种有效部位,均选用0.125g/L、0.25g/L、0.5g/L、1g/L、2g/L、4g/L五个浓度梯度作用于96孔板中的细胞(DMSO助溶),24h后MTT法检测不同条件下细胞的生长曲线,免疫组化检测细胞分泌Ln、Ⅰ型胶原的变化。10%FBS的高糖DMEM培养条件为空白对照,1%DMSO的高糖DMEM培养条件为实验对照。结果:龙血竭乙酸乙酯有效部位在低浓度对胎鼠成纤维细胞的生长有轻度抑制作用,随浓度增加促生长作用增强,1g/L龙血竭乙酸乙酯有效部位对胎鼠皮肤成纤维细胞的促生长作用最佳,并促进Ln、Ⅰ型胶原的分泌。龙血竭其它有效部位对胎鼠成纤维细胞均无刺激生长的作用。结论:龙血竭乙酸乙酯有效部位能促进胎鼠皮肤成纤维细胞的生长和分泌。